CALIBRACIÓN DE MICROPIPETAS DE VOLUMEN FIJO Y VARIABLE CON PUNTAS

DESECHABLES

El proceso de calibración se realiza de acuerdo a la norma ISO 8655-6:2002, correspondiente al

método de referencia para los ensayos de conformidad de equipos volumétricos accionados por
pistón, incluidas las piezas consumibles esenciales.

ESPECIFICACIONES DE EQUIPOS Y CONDICIONES DE OPERACIÓN

De acuerdo a la normativa, se consideran los aspectos:
1. EQUIPOS
1.1. Balanza analítica de precisión.
De acuerdo a los volúmenes a medir, la balanza a utilizar debe cumplir los siguientes
parámetros:
Resolución Repetibilidad y Incertidumbre estándar
Volumen del equipo
(mg) linealidad (mg) de medición (mg)
1 µl ≤ V ≤ 10 µl 0,001 0,002 0,002
10 µl < V ≤ 100 µl 0,01 0,02 0,02
100 µl < V ≤ 1 000 µl 0,1 0,2 0,2
1 ml < V ≤ 10 ml 0,1 0,2 0,2
10 ml < V ≤ 200 ml 1 2 2

1.2. Recipiente con líquido suficiente para todas las mediciones a realizar y otro recipiente
de pesaje adecuado al procedimiento.
1.3. Dispositivos de medición de:
1.3.1. Temperatura, con incertidumbre estándar ≤ 0,2 °C
1.3.2. Humedad, con incertidumbre estándar ≤ 10%
1.3.3. Presión, con incertidumbre estándar ≤ 0.5 kPa
En el proceso, se utiliza un termo-higrómetro para las mediciones de temperatura y
humedad; debido a que la presión no posee variación notable, se toma el dato meteorológico.

2. LÍQUIDO DE ENSAYO
Se utiliza agua destilada a temperatura ambiente.

CONDICIONES PARA ENSAYO

1. Previo al ensayo de calibración, se realiza el desmontaje y montaje del equipo como se
indica en el manual de operaciones, para realizar el correspondiente mantenimiento y
limpieza.
2. El proceso se realiza en un área con condiciones estables que cumpla los requisitos de:
- Humedad relativa mayor al 50%
- Temperatura constante entre 15°C y 30°C con variación de ± 0,5°C

1
 - Previo a la calibración, el líquido a utilizar y las pipetas deben tener un tiempo de
almacenamiento de al menos 2 horas, para que se encuentren en equilibrio con las
condiciones del área de trabajo.
3. Se utiliza una balanza con cámara aislante de corrientes de aire, para evitar errores debido a
evaporación del líquido.
4. El tiempo de pesaje que se utiliza es de 20 s por ciclo ensayo.

PROCEDIMIENTO DE CALIBRACIÓN
1. VOLUMEN DE ENSAYO
1.1. Para las micropipetas de volumen fijo se utiliza el mismo volumen para su calibración.
1.2. Para las de volumen variable se consideran tres valores:
o El volumen nominal (máximo)
o El 50% del volumen nominal
o El límite inferior del intervalo de volumen.
2. NÚMERO DE MEDICIONES
2.1. Para calcular el error sistemático y aleatorio de medición se deben realizar 10
mediciones por volumen.
2.2. Para el re-establecimiento de la conformidad, se deben realizar 10 mediciones de cada
volumen indicado en (1.2)
El número de mediciones por volumen puede cambiarse a un número apropiado, siendo el
caso, se utilizan 5 mediciones por volumen para el ensayo.
3. PROCEDIMIENTO DE PESAJE.
3.1. Se coloca la punta desechable correspondiente a la pipeta.
3.2. Para cada volumen se toma el líquido del recipiente contenedor y se vacía en el
recipiente de pesaje colocado previamente en la balanza de precisión y configurada en
0.000 mg. Es importante recordar que el volumen de ensayo no debe variar durante el
proceso de las 5 mediciones.
3.3. El líquido se expulsa 5 veces a una profundidad de al menos 3mm.
3.4. Se realiza el ciclo de pesaje y se almacena el dato de medición para la cantidad de
ensayos correspondientes a cada volumen.

EVALUACIÓN DE CALIBRACIÓN
1. CONVERSIÓN DE LA MASA A VOLUMEN
Cada masa mi obtenida en las mediciones se transforma a volumen utilizando los factores de
corrección mediante la ecuación:
V i=mi × Z

El volumen promedio medido, para n=5 será:

n
1
V= ∑ Vi
10 i=1

2
 2. CÁLCULO DE ERROR
2.1. El error sistemático corresponde a la ecuación:
e s=V −V s

2.2. El error porcentual corresponde a la ecuación:

V −V s
e s=100×
Vs
2.3. El error de conformidad para micropipetas de volumen variable, está dado por:
V −V s
e s=100×
V0
3. CÁLCULO DE ERROR ALEATORIO
3.1. Este error correspondiente a la repetibilidad se calcula con la desviación estándar:

√
n

∑ (V ¿¿ i−V )2
i=1
sr = ¿
n−1
De manera porcentual, se presenta como:
sr
CV =100 ×
V
3.2. Si se utiliza el error aleatorio relativo para la evaluación de conformidad, se utiliza:
sr V s
CV =100 × ×
V V0

4. INCERTIDUMBRE
Se calcula con el anexo B de la normativa ISO 8655-6.

RESULTADOS
En el reporte de informe de procedimiento y resultados, se coloca la siguiente información:
1. Fecha del ensayo.
2. Datos del responsable del ensayo.
3. Identificación técnica del equipo (nombre, marca, modelo, serie).
4. Condiciones bajo las cuales se realiza el ensayo.
5. Procedimiento del mantenimiento realizado.
6. Tabla de mediciones obtenidas antes y luego de la calibración.
7. Cálculo del error para los volúmenes de ensayo.