Trabajo practico Nº3 - Eventos pregastrulares y Gastrulación

Ei: Epiblasto pregastrular Ef: Embrión trilaminar.

Ti: mediados de la 2da SD TF: Fines de la 3ra SD
(2da parte del periodo presomítico)
Descripción a nivel de microscopía óptica y electrónica de embriones de etapa gastrular - 2da y 3er semana de la gestación-. Evolución del epiblasto: formación de la línea primitiva y el nódulo. Concepto de organizador y línea primitiva. Movilización de células durante la formación de la línea primitiva y luego del ingreso en ella. Desplazamientos celulares en el epiblasto, ingreso en el blastocele y migración. Análisis del experimento de Waddington. Gemelación. Conclus iones que se pueden obtener del mismo. Derivados celulares del nódulo. Funciones del nódulo y de sus estructuras derivadas en el embrión. Dinámica de la formación y evolución de la línea primitiva. Polaridad embriona ria. Concepto de información posicional y simetría bilateral visceral. Desarrollo ontogénico del mesodermo. Determinación y diferenciación de la placa neural.

Objetivos mínimos
 Anatomía del embrión en la segunda y tercera semanas del desarrollo.
- Concepto de nodo.
- Concepto línea primitiva. Formación y derivados.
- Organización de la hoja mesodérmica: formación del mesodermo y su regionalización (axil, paraaxil, intermedio y lateral).
- Determinación y diferenciación de la placa neural.
Preguntas claves
 Descripción del embrión desde blastocis to hasta néurula
- Describir en cortes de MO y ME embriones gastrulares
- ¿Cómo se forman la línea primitiva y el nódulo?
- ¿De qué manera se movilizan las células durante la formación de la línea primitiva y luego de ingresar por ella?
- ¿Qué conclusiones puede obtener del experimento de Waddington?
- ¿Cuáles son los derivados celulares del nódulo? ¿Qué funciones cumplen?
- Describa la dinámica de la LP (elongación/ regresión)
- ¿Qué entiende por polaridad embrionaria ? (ejes)
- ¿Cuál es el concepto de información posicional?
- ¿Cómo se quiebra la simetría bilateral visceral?
- ¿Qué entiende por mapas de destino?
- ¿Cómo es el desarrollo ontogénico del mesodermo?
- ¿Qué entiende por inducción neural?

¿Qué es la gastrulación?
Proceso por el cual se forman, un embrión pasa de ser bilaminar a trilaminar  3 capas germinativas,
ectodermo, mesodermo y endodermo.
Durante este proceso el desarrollo más característico es la migración celular, las células migran
siguiendo un gradiente de sustancias presentes en la MEC, proceso llamado haptotaxis
- Los eventos gastrulares ocurren más anticipadamente en el extremo cefálico del embrión, por ende,
algunos eventos finalizados en dicho extremo todavía seguirán desarrollándose en el extremo caudal

Migración celular: No solo implica movimientos sino cambios morfológicos y de organización

-Pierden uniones intercelulares de tipo epitelial (E-Cadherinas)
-Adquieren una morfología particular (células en botella)
-migran como células mesenquimáticas (células inmaduras de tejido conectivo)
Estos cambios ocurren a medida que pasan por el surco/fosa primtiva (ver mas adelante)

Eventos pregastrulares.
Al principio de la 2da SD, en el inicio de la implantación, el embrioblasto
(por su zona central) se separa del trofoblasto y se genera una cavidad
denominada hendidura amniótica. Simultáneamente, el embrioblasto
sufre procesos de determinación y diferenciación generando tres
poblaciones celulares: El amnioblasto (epitelio plano simple que
recubre dorsalmente la cavidad amniótica), el epiblasto (capa dorsal
formada por en epitelio cilíndrico alto) y el hipoblasto (capa ventral
formada por un epitelio cilíndrico bajo).
Dichas poblaciones se encuentran en el MCI de manera azarosa y luego
tienden a organizarse.

Durante la implantación las células derivadas del hipoblasto migran adosadas al

citotrofoblasto formando una membrana conocida como membrana de Heuser,
que delimita una cavidad, el saco vitelino primitivo. En este momento, el
epibalsto e hipoblasto conforman el disco germinal bilaminar, ubicado entre la
hendidura amniótica (dorsalmente) y el saco vitelino primitivo (ventralmente).
En días siguientes el espacio entre el saco vitelino y el citotrofoblasto comienza
a aumentar y a ser ocupado por células de la membrana de Heuser,
denominadas mesodermo extraembrionario “primitivo” las cuales hacen
transición epitelio-mesenquimatica.
Ya finalizando la 2SD, el hipoblasto es desplazado por un endodermo
extraembrionario y pasara a formar la membrana que delimita el saco vitelino
primitivo. El endodermo extraembrionario conforma temporalmente la hoja
ventral del embrión, también delimita una segunda cavidad, la del saco vitelino definitivo que se
continúa con el primitivo

Mapas de destino
Los mapas de destino permiten observar diferentes regiones del embrión y las estructuras que se
derivaran de estas posteriormente. La construcción de los mapas de destino se realiza mediante un
proceso de marcación celular (con algún colorante fluorescente o radiación) el cual permite conocer la
ubicación inicial y final de una célula, este proceso se realiza consecutivamente en diferentes regiones
del embrión para construir un “mapa” propiamente dicho. La razón por la que se puede predecir la
ubicación final de una célula y por ende, crear estos mapas, es el patrón específico de desplazamiento
que siguen las células, el cual depende de la región del embrión en la que estas se ubiquen
Gastrulación: Ya con el inicio de esta etapa se puede observar desplazamientos de células
epiblasticas con efectos morfogenéticos. El primer cambio es la aparición de la línea primitiva (Info de
esta más adelante) de la cual se surgirá un surco, el surco primitivo, por donde migraran ventralmente
diferentes poblaciones celulares.
Con la aparición de la línea primitiva ya se pueden manifestar los 3 ejes embrionarios: el anteroposterior
(ya que la línea primitiva surge en la región caudal del epiblasto) y el medio-lateral. El eje dorso ventral
aparece con la diferenciación del embrioblasto en epiblasto e hipoblasto.
En el extremo cefálico de la línea primitiva también convergen células formando una prominencia
denominada nodo o nódulo de Hensen, y luego se invaginan formando la fosa primitiva.
Sobre el nodo y sus derivados (lo que ingresa por la fosa) hablaremos más adelante.

Simultáneamente a la formación del saco vitelino definitivo, y ya con la

formación de la línea primitiva, las células del mesodermo
extraembrionario definitivo abandonan al epiblasto ingresando por el
surco primitivo, para posteriormente migrar hacia sentidos ventral y
dorsal. En este mesodermo extraembrionario comienzan a aparecer
lagunas que luego al juntarse forman una cavidad, el celoma
extraembrionario. La presencia de esta cavidad genera que el
mesodermo extraembrionario definitivo se delamine en un mesodermo
extraembrionario visceral (reviste al saco vitelino definitivo) y un
mesodermo extraembrionario somatico (recubre la cavidad amniótica
y reviste la cara interna citotrofoblasto. Ambos son epitelios planos
simples.

El disco embrionario y los sacos vitelino y amniótico quedan dentro del

celoma pero unidos al citotrofobalsto por una banda de mesodermo
somático extraembrionario, el pedículo de fijación.
Eventualmente el saco y tejidos primitivos se separan del saco y tejidos
definitivos mediante un proceso de estrangulación. Las estructuras
primitivas forman un quiste exocelomico que terminara degradándose.

El disco embrionario cambia de forma aumentando su longitud. Este aumento se debe

a la proliferación y elongación celular (hacia cefálico). Células del epiblasto que
ocupaban la mitad caudal del embrión pasan a ocupar la región cefálica (epibolia) y se
produce un crecimiento diferencial: La región cefálica del nodo aumenta en longitud y
grosor en tanto que la región caudal a él se acorta y adelgaza (tiene forma de pera).
¿Por qué se lleva a cabo la epibolia? Por la migración de los TP

También se forma la placa neural (epitelio cilíndrico simple): un engrosamiento del

epiblasto ubicado cefálicamente al nodo. Este proceso está acompañado de la
migración del TP precursor del mesodermo precordal, seguido del TP precursor de la
notocorda primitiva.

Organización y complejidad del epibalsto gastrular

Información posicional: Alude al destino que tendrá una célula según su ubicación espacial. Las células
del epiblasto migran a diferentes regiones siguiendo un gradiente de señalización formado por
moléculas señalizadoras conocidas como morfógenos. Este gradiente es secretado por células con
propiedad informativa, los morfógenos se unen a receptores de membrana e inducen en las células una
respuesta dependiendo de su concentración.
Territorios Presuntivos: Son sectores del epiblasto y cada uno responde de diferente manera al gradiente de
señalización. Cada sector está formado por células con misma potencia evolutiva y capacidades migratorias, sin
embargo, dependiendo de la ubicación del TP las células migraran a diferentes lugares, interactuaran con diferentes
medios y terminaran determinándose/diferenciándose en diferentes poblaciones celulares.
- Entonces: Un morfógeno permite establecer un patrón de desarrollo que lleve a cabo la formación de las
estructuras de un organismo de manera ordenada. Uno de los mecanismos por el cual el morfógeno se
transporta es por difusión simple a través de los espacios extracelulares
Los TP pueden categorizarse de lo general a lo particular en:
TP de tejidos extraembrionarios
-TP del mesodermo extraembrionario definitivo
-TP del endodermo extraembrionario definitivo (del saco vitelino definitivo)

TP de tejidos embrionarios
-TP de poblaciones celulares con función organizadora: forman estructuras axiales que
especifican la posición de la línea media, estas son:
a) El TP del mesodermo precordal: originara una barra de mesodermo axial cefálicamente a
la notocorda
b) El TP del mesodermo cordal: ubicado en la zona ventral del disco y en la línea media;
originara la notocorda

-TP de poblaciones celulares con función estructural (origina tres capas germinativas
primordiales):
TP del ectodermo: ocupado por células que no abandonan el epiblasto:
- TP ectodérmico neural: Formara la Placa Neural
- TP ectodermo epidérmico: Formara el epitelio de revestimiento externo del
embrión
TP del endodermo: ocupado por células que abandonan el epiblasto, ingresan a través del
surco primitivo y pasan a ocupar la hoja ventral del embrión. Es un epitelio plano y simple
ubicado dorsal al endodermo extraembrionario definitivo.
TP del mesodermo: Ocupado por diversa poblaciones celulares que abandonan el epiblasto,
ingresan en la interfaz de las hojas dorsal y ventral del embrión. Estas son:
- TP del mesodermo paraxial: ocupara zonas adyacentes a la notocorda
- TP del mesodermo intermedio: ocupara zonas laterales del mesodermo
paraxial
- TP del mesodermo lateral: Ocupara la zona borde del embrión

Movimientos de los TP
-Convergencia: Reunión de células en un mismo punto mediante desplazamiento
(generalmente en la línea media)
-Invaginación: Migración celular hacia la región ventral del embrión
-Divergencia: (solo algunos TP lo hacen) desplazamiento lateral desde la línea
media del disco
-Reconvergencia: Convergencia de células que realizaron previamente una
divergencia
-Epibolia: Migración celular dentro del epiblasto. Las células que no migran
ventralmente, se reorganizan y proliferan dentro del plano del epiblasto
rellenando los espacios que dejan las células que si migran. Estas células que
permanecen en la hoja dorsal conformaran el ectodermo, además se encuentran
ubicadas cefálicamente a la línea primitiva.

Desplazamientos en la gastrulación
En azul marcare las cosas ya repetidas
Desplazamiento de los TP extraembrionarios
-Inicio de la formación del saco vitelino definitivo (2da semana)
Las células del TP del endodermo extraembrionario dejan el epiblasto ingresando a través del surco
primitivo y pasan a la hoja ventral del embrión reemplazando al hipoblasto y formando una segunda
cavidad, el saco vitelino definitivo que se continúa con el primitivo, ahora formado por el hipoblasto.
-Formación de las hojas somática y visceral no embrionarias (mediados de la 2da semana)
Simultáneamente con la formación del saco vitelino definitivo, las células del TP del mesodermo
extraembrionario definitivo, abandonan el epiblasto y algunas células se dirigen en sentido ventral
mientras que otras en sentido dorsal

Desplazamientos de los TP embrionarios

Formación del embrión bilaminar y del saco vitelino definitivo
Las células del TP del endodermo abandonan el epiblasto ingresando a través del surco primitivo y
ocupan la hoja ventral del embrión desplazando directamente al endodermo extraembrionario (quien
ahora formara solo las paredes del saco vitelino definitivo) e indirectamente al hipoblasto fuera del
disco embrionario
Formación de la placa precordal: Flores determina como placa precordal al endodermo que se
encuentra rostral al mesodermo precordal y que forma la membrana bucofaríngea. Su formación se da
gracias al Nodo.
Desplazamiento de los TP mesodérmicos
Migración del TP del mesodermo axil
Formación del mesodermo precordal (notocorda anterior). Este se continúa caudalmente con la placa precordal. Las
células primero convergen formando el nodo de Hansen, luego se invaginan formando la fosa primitiva e ingresan a
través de ella (las células que conforman al nodo van desde dorsal a ventral, atravesando todo el espesor
embrionario. Es una buena forma de acordarse de los derivados).
A continuación se enlongan entre las 2 hojas del embrión a lo largo de la línea media formando el mesodermo
precordal
Formación de la notocorda: Se origina como derivado tardío del nodo de Hensen, cuando este se encuentra en
regresión. La notocorda se extiende desde el extremo caudal del mesodermo precordal hasta el extremo caudal del
embrión.
Debido a su rol se comporta como un centro organizador (secundario): Induce la formación del ectodermo neural
(mediante secreción de nogina); transforma la célula de los somitas en cuerpos vertebrales; estimula el desarrollo
inicial del páncreas dorsal; estimula el desarrollo del cerebro posterior y refuerza el eje longitudinal
La notocrda se degrada conforme se crean las vértebras, quedando solo como el núcleo pulposo de los discos
intervertebrales
Aclaro de organizadores secundarios ya que el primario es el Nodo en sí.

Formación de la notocorda definitiva

En su inicio, la notocorda es hueca y su cavidad comunica con la
fosa primitiva denominándose conducto notocordal. Luego las
células del piso contactan con el endodermo y como resultado
la zona se disgrega formando así un canal notocordal. Luego la
disgregación se transmite a su techo, donde el canal contacta
con el ectodermo y de manera temporal el saco vitelino y la
cavidad amniótica se encuentran en contacto mediante este
conducto neurentérico.
Por último el conducto termina cerrándose y la notocorda pasa
a ser un cordón macizo
Desplazamientos del TP del mesodermo no axil
Formación del embrión trilaminar
Las células del TP del mesodermo no axil convergen, se invaginan e ingresan a través del
surco primitivo. Una vez que se encuentren en medio de las hojas dorsal (ectodermo) y
ventral (endodermo), divergen hasta los bordes del disco embrionario para luego
elongarse en sentido cefálico a ambos lados del mesodermo axil formando 2
prolongaciones alares. Estas migran lateralmente a la membrana bucofaríngea y una
vez que el sobrepasan reconvergen y se unen entre si formando la placa cardiogénica.
En su región cefálica se encuentra mesodermo sin delaminar conocido como septo
transverso
El ectodermo y el endodermo, quedan unidos entonces en 2 regiones donde carece
mesodermo: En la membrana bucofaríngea cefálicamente, y en la palca cloacal
caudalmente. En la zona de la membrana bucofaríngea, el ectodermo va a derivar la
cavidad oral, y el endodermo él tuvo digestivo que inicia en la faringe, de ahí su
nombre. En la cavidad cloacal, su nombre deriva de la porción más caudal del tubo
digestivo, el recto

El mesodermo no axil de divide en 3 regiones

Mesodermo paraxil: ubicado a ambos lados de la notocorda, este se fragmentara creaneocaudalmente
formando los somitas
Mesodermo intermedio: está constituido por unos cordones macizos ubicados entre medio del
mesodermo paraxial y el mesodermo lateral. Son precursores de las gónadas y el riñón
Mesodermo lateral: Este se encuentra a los laterales del mesodermo intermedio y se continúa con las
hojas del mesodermo extraembrionario definitivo, posee dos hojas delaminadas. Una hoja parietal o
somática pegada al amnioblasto y una visceral o esplacnica pegada al endodermo. Entre ambas hojas
existe se forma una cavidad denominada celoma intraembrionario
La regionalización del mesodermo está profundamente relacionada con el sitio de ingreso de las células,
cuanto más cefálicamente ingresen a la línea primitiva, más mediales serán en la hoja mesodérmica
Asimetría izquierda-derecha del embrión (Quiebre de la simetría bilateral visceral)
La región ventral del nodo posee células con cilios móviles que generan un flujo cuya dirección permite
la expresión de 2 genes solo en el lado izquierdo del embrión (Una de ellas es Nodal que también induce
la formación de la línea primitiva).
Debido a esta activación asimétrica de moléculas se quiebra la asimetría de expresión molecular, dando
como resultado una asimetría bilateral visceral

Línea primitiva (aparece a los 15 días)

La línea media es una condensación celular ubicada en la región caudal del epiblasto, esta resulta de un
movimiento de desplazamiento celular conocido como polonesa  Las células de las mitades derecha
e izquierda del epiblasto convergen hacia la región caudal de la línea media, se intercalan unas con
otras, y posteriormente se extienden en sentido cefálico dando origen a la línea primitiva (elongación de
la línea primitiva)]
Al mismo tiempo que se forma la línea primitiva también se forma una depresión dentro de la misma
(surco primitivo) por donde migraran las células de ubicación ventral. Estas realizan transición E- M al
ingresar por la línea y siguen un gradiente presente en la MCE (morfógenos)
- La línea primitiva no se forma si no concluye el desplazamiento del hipoblasto ya que este
induce señales inhibitorias, por lo tanto, mientras las células epiblasticas realizan ese
movimiento de polonesa el hipoblasto es desplazado por el endodermo permitiendo así la
formación de la línea primitiva.

Regresión de la línea primitiva

Cuando la línea primitiva llega a su máxima extensión (dia 18) se forma el nodo mediante una
convergencia celular en el extremo cefálico de la línea. En este punto la línea primitiva comienza un
periodo de regresión caudal, tirando de la notocorda durante dicho proceso extendiéndola hasta el
extremo caudal. (La regresión de la línea primitiva se acompaña del establecimiento del mesodermo
paraaxil).
Cuando el periodo de regresión termina, la parte más caudal de la línea se caracteriza por una masa de
células mesenquimáticas denominadas, mesénquima caudal el cual cumple un papel importante en la
formación de diferentes estructuras (ver en periodo somítico)
Para la cuarta semana la línea primitiva desaparece sin dejar rastros. Si lo hace deja teratomas

Organizador y Nodo
El nodo se considera un organizador ya que al ser trasplantado en un lugar diferente de un embrión
similar este es capaz de inducir la formación de un sistema nervioso secundario (secundario se refiere a
uno extra, el primario es el del huésped) a partir de células huésped que no estaban destinadas a formar
la placa neural. El sistema nervioso inducido (el secundario) está organizado apropiadamente en sus ejes
dorso-ventral y céfalo-caudal, también puede dorsalisar el mesodermo huésped vecino, lo que lleva a la
formación de un eje axial secundario, es decir, una segunda línea media.
En resumen, un organizador es un conjunto de células con la capacidad de reprogramar las células
adyacentes para la formación de los ejes corporales.

El nodo mantiene la capacidad de “Organizador” por un tiempo limitado, una vez que empieza a dar sus
derivados, ya no es capaz de inducir la formación de un sistema nervioso completo si este es
trasplantado
Derivados tempranos: Mesodermo precordal (axil) y endodermo faríngeo (endodermo axil).
Migración simultanea
Derivados tardíos (ocupan la región medial de las 3 capas germinativas): Se dan durante el
proceso de regresión y son  la placa del piso (piso del tubo neural), notocorda y
endodermo dorsal (continua al endodermo de la placa precordal).
Derivado alude a las células que se invaginan por el nodo y no por la fosa primitiva

Gemelación: resumen necrótica

Formación del ectodermo neural y epitelial (general)
En el ectodermo, la presencia de una molécula (BMP4) hace que este se diferencie en ectodermo
general (epidérmico), sin embargo existen inhibidores de BMP4 ubicados en la línea media y generados
por la presencia del organizador  Esto puede explicar el como el nodo modifica el destino de una
célula cuando este es trasplantado a otro embrión similar.
El nodo modifica el gradiente de concentración local de MBP4 y lo disminuye de modo tal que las células
de ese sector se encuentren ahora destinadas a originar ectodermo neural.

Además de los inhibidores de BMP4 también existen factores de crecimientos que estimulan a las
células ectodérmicas a diferenciarse en ectodermo neural. Estos factores de crecimiento son emitidos
por el hipoblasto e inducen los primeros genes preneurales, por lo tanto, una de las funciones del
hipoblasto es básicamente darle la capacidad (darle competencia) al epiblasto para formar el ectodermo
neural para que luego el nodo lo “transforme” en placa neural