UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTIN

FACULTAD DE INGENIERIA DE PROCESOS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA DE INSDUSTRIAS
ALIMENTARIAS

PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

GENERAL
INFORME 05

Asignatura: Microbiología general

Docente: Doc. Yemina Karen Díaz Valencia

Alumna: Miriam Sarely Orccoapaza Mamani

Arequipa-Perú
 PRÁCTICA N° 5

ESTERILIZACIÓN POR EL METODO FISICO: Rayos Ultravioleta

I. OBJETIVO

Estudiar el efecto de la luz ultravioleta sobre las bacterias y saber aplicar esta
radiación como forma de control del crecimiento bacteriano.

II. REVISIÓN BIBLIOGRAFICA

Algunas radiaciones electromagnéticas son capaces de producir un efecto letal

sobre las células por lo que pueden ser utilizadas como medidas de control
microbiológico. Entre otras se incluyen aquellas con una longitud de onda por
debajo de 300 nm como son: la luz ultravioleta, los rayos gamma y los rayos X.
Las radiaciones con una longitud de onda mayor no tienen suficiente energía
para destruir las células.

La luz ultravioleta es capaz de producir un efecto letal cuando se irradian las

células con un rango comprendido entre 210-300_nm. Los componentes
celulares capaces de absorber la luz UV son los ácidos nucleicos con el DNA
como diana más importante. Dentro de sus componentes son las pirimidinas las
que absorben especialmente la luz UV, resultando como efecto a esta acción, la
formación de dímeros de tintina (unión covalente de dos moléculas adyacentes
de timina). La formación de estos dímeros distorsiona la configuración de la
molécula de DNA y esto interfiere con la replicación y transcripción del DNA
durante la síntesis de las proteínas.

El efecto bactericida puede verse influido por:

• Densidad de la suspensión bacteriana (+ densidad, menor efecto).
• Naturaleza del medio donde se encuentra (soluciones acuosas son mas
penetrables frente a medios más complejos).
• Tipo y estado fisiológico de la célula (Cepa, especie y fase de crecimiento).

Algunos microorganismos poseen sistemas enzimáticos de reparación del daño

inducido por radiaciones. Existen dos mecanismos de acción:
• la reparación a oscuras o en ausencia de luz (Respuesta SOS).
• la reparación con luz: que se induce al iluminar las células, irradiadas con
luz visible a una longitud de onda entre 420 y 540 nm.
La radiación UV debido a su baja penetrabilidad no puede ser usada como un
medio de esterilización .por lo que su aplicación se limita a su uso en superficies
 y para la desinfección del aire, fundamentalmente en centros sanitarios e
industrias alimentarías.

III. MATERIALES Y EQUIPOS.

• Cultivo de 24 horas en caldo nutritivo de Serratia marcescens

• Placas de Agar nutritivo
• Torunda de algodón estéril o asa de platino.
• Lámpara de luz UV

IV. METODOLOGIA

1. Tomar el tubo que contiene el cultivo de 24 horas del microorganismo.

2. Inocular completamente y de modo uniforme sobre la superficie del agar de
cada una de las placas Petri usando la torunda de algodón humedecida con el
cultivo líquido o la espátula de drigalsky.
3. Rotular una de las placas como control. No recibirá ningún tratamiento.
4. Exponer las placas restantes a la luz UV, durante 10 seg, 30 seg, 1 minuto y
2 minutos.
5. Incubar todas las placas a 28°C durante 24-48 horas.

RECORDARLES QUE RETIREN LA TAPA DE LA PLACA PETRI

DURANTE LA EXPOSICIÓN

V. RESULTADOS

Anotar las variaciones que se producen en el crecimiento de los cultivos, según

el tiempo de exposición a la fuente de luz UV.
Recuento de coliformes totales en UFC/100ml
UFC: Unidades Formadoras de Colonias
Fuente: Datos experimentales obtenidos en el
Laboratorio de Control de Calidad – PTAP
Coliformes totales:
La cantidad de coliformes totales
encontrados en el agua sin tratamiento fue
mayor a 200 UFC/100 ml, comparado a
las muestras sometidas a la radiación UV-
C, teniendo a los 2 segundos (s) de
exposición un resultado que se encontraba
entre mayor a 200 UFC/100 ml y como
mínimo 80 UFC/100 ml, para un tiempo
de exposición de 3 s se obtuvo un máximo
de 98 UFC/100 ml y un mínimo de 37
UFC/100 ml, y para la muestra expuesta
durante 4 s se obtuvo 0 UFC/100 ml.
 Coliformes termo tolerantes:
Los coliformes termo tolerantes (fecales)
encontradas en el agua sin ningún tipo de
tratamiento se contaron con un máximo de
21 UFC/100 ml y un mínimo de 5 UFC/100
ml, con 1 s de exposición se redujo la
cantidad con un máximo de 7 UFC/100 ml y
un mínimo de 3 UFC/100 ml. Cuando fue
sometido a 2 s y 3 s aún se tuvo presencia de
coliformes termo tolerantes, pero con una
clara disminución, teniendo un máximo de 5
UFC/100 ml y un mínimo de 0 UFC/100 ml.
Cuando las muestras fueron sometidas a 4 s
de exposición, el resultado fue de 0
UFC/100 ml. Siendo 4 s el tiempo de
exposición adecuado para la eliminación
total de coliformes totales.

VI. CUESTIONARIO

1. ¿Qué otras aplicaciones tienen los Rayos U.V. en la Industria de Alimentos?

En la industria de alimentos se utiliza para desinfectar por ejemplo cintas
transportadoras, láminas y tapas de cierre, y envases. También las superficies
de algunos alimentos sólidos entre los que se pueden mencionar frutas,
verduras, pescados y líquidos como jugos y agua. En acuicultura, por
ejemplo, se emplea para proteger el flujo y la recirculación en acuarios de
agua dulce o salada.
 En los alimentos líquidos:
La radiación UV se utiliza para desinfectar agua, ya sea para ser
comercializada como tal o en la industria de bebidas. También para
desinfectar aguas de proceso, por ejemplo, en el transporte de peces a
criaderos y en la desinfección del agua resultante de la depuración de
moluscos: como no deja residuos químicos que puedan afectar la vida de los
animales, asegura una elevada reducción de microorganismos, sin alterar olor,
color o pH. Otra aplicación la utiliza para desinfectar y aumentar la vida útil
de jugos de frutas y verduras.
 En los alimentos sólidos:
Al aplicar radiación UV en frutas y vegetales, adicionalmente a la reducción
de la carga microbiana inicial en la superficie, se produce un fenómeno
denominado “efecto hermético” (Stevens et al., 1997, 1999). Dicho efecto
puede mejorar la resistencia al ataque de ciertos microorganismos tales como
mohos y levaduras, dado que puede estimular la producción de fenilalanina
amonia-liasa, que induce la formación de compuestos fenólicos (fitoalexinas),
tóxicos para ellos.
2. ¿Cuáles son las ventajas, desventajas y riesgos de las radiaciones U.V.?
1. Ventajas:
-Aumenta los niveles de vitamina D:
La exposición al sol y a los rayos UVA estimula la producción de vitamina D
en nuestro cuerpo, una vitamina vital para poder metabolizar el calcio, que
favorece la salud de nuestra piel y que tiene efectos sobre diferentes órganos
de nuestro cuerpo.
-Bronceado:
Para las que son amantes del bronceado, uno de los efectos de los rayos UVA
 que consideramos positivos es que nos broncean, y es por esto
fundamentalmente que acudimos a ellos.
-Nos mejora el ánimo:
Las personas somos como las plantas y los animales, y necesitamos del sol
para ser más felices. No es sólo casualidad que los días de verano te sientas
con más ánimo, en realidad los rayos UVA y en general, los rayos solares son
estimulantes y mejoran considerablemente nuestro estado de ánimo.
2. Desventajas:
-Nos envejecen
Uno de los efectos de los rayos UVA es que alcanzan a afectar la fibra
elástica de la piel y a deteriorarla, lo que hace que tengamos un
envejecimiento prematuro de las células de nuestra piel que no sólo nos hará
ver mayores, sino que favorecerá la aparición de arrugas y manchas en
nuestra piel.
- Aumentan el riesgo de cáncer considerablemente:
Uno de los efectos de los rayos UVA que más preocupa a médicos,
dermatólogos y que te debería preocupar a ti, es que los rayos UVA aumentan
considerablemente el riesgo de desarrollar cáncer de piel.
3. ¿Qué tipos de radiaciones se emplean en la Industria de Alimentos además
de los rayos U.V.?
 Los tipos de radiación utilizados para procesar alimentos son la radiación
gamma, los rayos X y los electrones acelerados. Los radioisótopos
emisores de radiación gamma normalmente utilizados para el procesado
de alimentos son el cobalto 60 (60Co) y el cesio 137 (137Cs).

Referencias:

 Luz ultravioleta en la conservación de alimentos. (2019, 14 diciembre).

Ministerio de agricultura. Recuperado 28 de noviembre de 2021, de
http://www.alimentosargentinos.gob.ar/HomeAlimentos/Publicaciones/revist
as/nota.php?id=513
 Efectos de los rayos UVA sobre la piel: 6 ventajas y desventajas. (2018, 11
enero). Estilonext. Recuperado 25 de noviembre de 2021, de
https://estilonext.com/salud-y-bienestar/efectos-rayos-uva
 Radiaciones ionizantes en alimentos. (2019, 9 septiembre). Consumer.
Recuperado 28 de noviembre de 2021, de
https://www.consumer.es/seguridad-alimentaria/radiaciones-ionizantes-en-
alimentos.html