Toma de muestra microbiológica

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SANTO DOMINGO
Primada de América
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
Cátedra de Microbiología
UNIDAD V
1
ASIGNATURA
Microbiología Especial.
CLAVE: MIP - 2120
CARRERAS
Bioanálisis
CREDITOS: 04
HORAS TEÓRICAS: 2 HT
HORAS PRÁCTICAS: 4 HP
PREREQUISITOS: MIP -1110
2
TOMA DE MUESTRA CLÍNICA
Contenidos
• Definir concepto de Muestra clínica
• Precauciones Universales para el personal de salud en la manipulación de las muestras

(Bioseguridad)
• Directrices generales para recoger y manipular las muestras clínicas
• Consideraciones fundamentales en la toma de muestra, transporte y recepción de muestras

clínicas y su conservaciones
• Materiales y métodos en las diferentes tomas de muestra
• Criterios para el rechazo de muestras clínicas
• Examenes microscopicos de la muestra para su identificacion preliminar

Objetivo de la Unidad
Dar a conocer las instrucciones básicas para la recolección, transporte y

conservación de las muestras enviadas al laboratorio de microbiología para
su procesamiento.
5
Muestras Microbiológicas
Parte o cantidad pequeña de

un fluido que se considera
representativa del total y que
se toma con ciertos métodos
para someterla a estudios
microbiológicos como: examen
directo, tinción o cultivo.
Precauciones universales para el personal de salud en la
manipulación de la muestra
Informar al paciente del procedimiento y solicitar su cooperación.
La toma de muestra debe realizarse en condiciones de máxima asepsia,

evitando la contaminación de la muestra, del personal, y del propio
enfermo.
Obtener una suficiente cantidad de muestra para asegurar el

aislamiento del microorganismo relacionado con el proceso infeccioso
en estudio y evitar los resultados falsos negativos.
El personal que toma la muestra siempre debe utilizar los elementos
de protección personal (guantes y mascarillas), dado el potencial
contacto con fluidos de riesgo.
Obtener la muestra antes del inicio de la terapia antimicrobiana. Si el

paciente ya hubiera recibido alguna dosis del antimicrobiano al
momento de obtener la muestra, el Laboratorio debe ser informado al
respecto.
El material destinado a cultivo no debe estar en contacto con

sustancias desinfectantes o antisépticas, siempre que sea posible.
La muestra debe etiquetarse con el nombre del paciente, el servicio
solicitante, el tipo de muestra y la fecha y hora de recolección.
Enviar las muestras al laboratorio inmediatamente después de haber

sido obtenidas para su procesamiento, con el objeto de incrementar
la probabilidad de recuperación de los microorganismos
involucrados en el proceso infeccioso.
Las muestras deben colocarse en un recipiente secundario

apropiado para su transporte al laboratorio para evitar cualquier
derrame y por lo tanto los riesgos que de ello se derivan.
Directrices generales para recoger y manipular las
muestras clínicas
Para el éxito de la atención del paciente es esencial la
comunicación entre todo el equipo de salud. El médico solicitará
un estudio microbiológico con una orientación clara de acuerdo
con la situación clínica del paciente.
El personal de enfermería y laboratorio microbiológico requiere

conocimientos e información precisa para realizar el
procedimiento en condiciones óptimas; y el personal encargado
del transporte debe estar capacitado adecuadamente para
mantener la muestra en términos de tiempo y características
hasta su entrega al área de análisis.
Todo el personal debe ser consciente de la importancia de sus

actividades, para contribuir a los objetivos de calidad.
Consideraciones fundamentales en la toma de muestra,
transporte, recepción de muestras clínicas y su conservación
Transporte de muestras clínicas
Este es uno de los aspectos más importantes dentro de los criterios

de bioseguridad, ya que el transporte de la muestra implica una
potencial fuente de contaminación y riesgo para todas las personas
durante el proceso. Para el transporte de muestras con riesgo
biológico debe seguir las siguientes indicaciones:
1. Asegurar que el recipiente que contiene la muestra o cultivo

(recipiente primario) esté bien cerrado y rotulado, con el nombre del
paciente o código asignado.
2. Envolver cada recipiente primario en material absorbente y

colocarlo verticalmente en un contenedor (recipiente secundario)
resistente, impermeable y con tapa de rosca.
3. Cerrar el contenedor secundario y colocarlo en una caja de

transporte (recipiente terciario). Este contenedor debe ser
identificado “infeccioso” e indicar el destinatario y el
remitente.
4. En caso de enviar varios contenedores secundarios puede

empacarlos en un mismo recipiente terciario, que puede ser
un termo, hielera u otro que lo proteja del calor excesivo.
5. Verificar y controlar la temperatura a que debe enviar las

muestras, para guardar la cadena de frio cuando lo amerite,
utilizando refrigerantes contenidos en la hielera.
6. Es importante asegurar la integridad de la muestra para obtener

un análisis exacto por parte del laboratorio destinatario, de igual
forma, al transportar las muestras de una institución a otra, sea Transporte de
larga o corta la distancia, deben utilizarse envases que no permita la muestras
clínicas
posibilidad de derrame y haciendo uso del triple embalaje.
7. Para lograr un transporte seguro de las muestras es necesario

establecer una relación entre los involucrados en el manejo y
transporte seguro de materiales peligrosos.
Materiales para la recolección de muestras
Hisopo estéril Hisopo flexible Depresor lingual Frascos estériles

de boca ancha
Jeringuilla Tubo de ensayo Frascos de hemocultivo 15

Toma de muestra para el diagnóstico microbiológico de las
infecciones del aparato circulatorio- Hemocultivo-
infecciones del aparato circulatorio -Hemocultivo -
El aparato circulatorio, es un sitio naturalmente esteril, por lo tanto, la
presencia de microorganismos o sus productos (Ej.: Toxinas) constituyen
un problema para todos organos y sistemas que son irrigados por el
mismo.
La detección e identificación de los diversos agentes microbianos es de

vital importancia desde el punto de vista clínico y epidemiológico.
Desde el punto de vista clínico, ofrece información necesaria para

instaurar una terapia antimicrobiana adecuada, así como para establecer
el pronóstico del paciente.
Desde el punto de vista epidemiológico, permite registrar la etiología,

frecuencia y el tipo de población afectada por estas infecciones a nivel
local, lográndose establecer e implementar medidas de prevención y
control específicas en las mismas.
infecciones del aparato circulatorio –Hemocultivo -
infecciones del tracto urinario
El termino ITU define la presencia de Microorganismos en el tracto
urinario, siendo las patologias más frecuentes: Cistitis (infección de la
Vejiga) y Pielonefritis (infección del Riñon y su Pelvis).
Las ITU son las enfermedades más frecuentes, en particular en

mujeres. Su prevalencia es dependiente de la edad y el género. Casi el
1% de los niños, muchos con anomalías funcionales o anatómicas del
aparato urinario, presenta infección durante el período neonatal.
La orina producida en el riñón y descargada a través de la Pelvis Renal y los uréteres hacia la vejiga,
es estéril en el individuo sano.
Se desarrolla infección cuando las bacterias logran ingresar a ese ambiente y pueden persistir en el,
sobre todo a través de una vía ascendente de bacterias residentes en la flora perineal, provenientes
de la flora del intestino grueso.
El diagnóstico de laboratorio de una ITU se realiza a través del urocultivo, el cual consiste en el
cultivo bacteriológico de la orina, para determinar la presencia y cuantificación de gérmenes
patógenos.
Toma de muestra para el diagnósticos microbiológico de las
Secreciones de Oídos y Faríngeas
La mayor parte de las infecciones del Oido afectan el conducto auditivo externo
(otitis externa) o la cavidad media (otitis media) que contiene los huecesillos y
esta rodeada por otras estructuras oseas y la membrana timpanica.
La otitis es una enfermedad del oido caracterizada por inflamación de la mucosa

del oido externo, medio o interno (mastoide), perforación de la membrana
timpánica y otorrea.
Esta patologÍa se puede clasificar sobre la base de consideraciones clínicas y según

su duración se pueden subdividir en fase aguda y crónica.
La fase aguda se refiere a la infiltración de polimorfonucleares y a los signos

clásicos de inicio brusco, su duración es breve. La fase crónica se refiere a procesos
prolongados y con menos signos de inflamación.
El diagnóstico de las infecciones oticas se establece con base a la
exploración clínica. En caso de sospecha de otitis media, se puede
hacer timpanometría para detectar la presencia de líquido en el
oido medio y valorar la función de la membrana timpánica.
La causa especifica de la Otitis externa puede determinarse por

cultivo de material obtenido del conducto auditivo afectado. Debe
tenerse en cuenta que la contaminación superficial y la flora
cutanea normal pueden originar cultivos mixtos que son de origen
de confusión. Por ello es recomendable tomar muestra del
material de ambos conductos auditivos.
En la Otitis media, el método diagnóstico más preciso es la

aspiración cuidadosa con una aguja esteril a traves de la
membrana timpánica, después de descontaminar el conducto
auditivo.
La faringitis aguda es un proceso inflamatorio caracterizado por dolor
faringeo, disfagia, enrojecimiento, presencia de exudado en las paredes
de la faringe y amigdalas que puede cursar con fiebre y malestar
general.
La etiología es diversa, tanto vírica como bacteriana, siendo

Micoplasma pneumoniae y Streptococcus pyogenes las bacterias más
comunes.
El diagnóstico etiológico para confirmar o excluir la infección se hace a

partir de exudado faringeo por medio del cultivo o pruebas de
detección rápida del antigeno estreptococico.
Su aislamiento justifica la administración de tratamiento

antimicrobiano para acortar la duración del cuadro clínico y evitar las
secuelas como la fiebre reumática.
Toma de muestra para el diagnóstico microbiológico de la
Enfermedad Diarreica Aguda (EDA)-Coprocultivo-
Las infecciones del tracto gastrointestinal representan un grave
problema de salud pública. La diarrea es la manifestación más comun
de esas infecciones, las cuales constituyen una de las causas más
importantes de morbilidad y mortalidad en lactantes y niños menores
de cinco años.
La terapia de rehidratación oral se ha identificado como la medida más

eficaz para la reducción de la mortalidad por diarrea.
La etiologia de la enfermedad diarreica es diversa y numerosos

esfuerzos se han realizado para tratar de explicarla, observandose que
el factor infeccioso continua siendo el más importante por su caracter
transmisible.
De los agentes infecciosos, los bacterianos se encuentran entre los más

frecuentes en todos los paises del mundo.
La utilidad del diagnóstico de la diarrea se enfoca fundamentalmente

desde dos puntos de vista:
1. Clínico, para la atención y seguimiento de pacientes cuando esta

indicado el tratamiento con antibioticoterapia, como por ejemplo
en la disentería.
2. Desde el punto de vista de salud pública: Control de brotes,

vigilancia epidemiológica y estudios sobre vacunas.
infecciones del tracto genital
• La mucosa genital es una región vulnerable a la infección producida
tanto por microorganismos constitutivos de la microbiota habitual como
por los adquiridos de forma exógena a traves del contacto sexual.
• La primera porción de la uretra en el hombre, la vulva y la vagina en la

mujer estan normalmente colonizados por diferentes microorganismos.
• Tanto en el hombre como en la mujer, las infecciones genitales más

relevantes desde el punto de vista clínico, epidemiológico y de salud
pública son las infecciones de transmisión sexual (ITS).
El éxito del diagnóstico de las infecciones genitales depende principalmente de que la muestra a
procesar sea representativa del proceso infeccioso, que la misma sea recolectada en condiciones
óptimas y transportada adecuada y rapidamente al laboratorio.
Es necesario el conocimiento de la microbiota habitual, los patogenos potenciales y de los

diferentes factores que conforman el ecosistema genital. Todos estos aspectos repercuten en la
validez del diagnóstico microbiológico.
infecciones de la piel y los tejidos blandos
Las infecciones cutaneas y de los tejidos blandos son un amplio grupo de cuadros
clínicos que afectan a la epidermis, dermis, tejido celular sub-cutaneo, fascia
profunda y músculo.
En su etiología se encuentran virus, bacterias, hongos y parasitos, siendo las

infecciones bacterianas las más frecuentes en nuestro medio.
Los microorganismos predominantes son: Staphylococcus aureus, Streptococcus

pyogenes, enterobacterias, Pseudomonas aeruginosa y los anaerobios de la flora
intestinal que en muchas ocasiones se asocian dando lugar a infecciones mixtas.
En el desarollo de la infección influyen el tamaño del inóculo, la sinergia

bacteriana entre aerobios y anaerobios, determinadas situaciones del paciente
como: reducción del flujo arterial, estasis venosa o linfática, inflamaciones locales,
cuerpos extraños, diabetes, inmunodepresión.
Para hacer el diagnóstico Microbiológico es conveniente tomar las
muestras de las lesiones antes de administrar antibioticos y siempre
que sea posible, se prefiere la aspiración a la toma con torunda.
El transporte rápido y correcto de las muestras es de gran importancia

en la recuperación de microorganismos, sobre todo los anaerobios.
El tratamiento antimicrobiano es en su incio empírico, considerando los

microorganismos que normalmente producen cada tipo de infección o
habitan el area afectada.
infecciones oculares
El organo de la visión en su conjunto cuenta con un sistema altamente
especializado para hacerle frente a las injurias del medio ambiente
externo, como una capa resistente de colageno que recubre las
estructuras intraoculares y membranas conjuntivales que tapizan los
parpados y se extienden sobre la superficie del globo ocular.
Las pestañas previenen la entrada de cuerpos extraños en el ojo

durante el parpadeo (aproximadamente de 5 a 20 veces por minuto).
Las secreciones de las glandulas lagrimales y de las células
caliciformes arrastran las bacterias y materiales extraños.
La lisozima y la IGA son secretadas localmente coadyuvando en la

defensa natural del ojo.
En el saco conjuntival existe una microbiota habitual relativamente

escasa.
Conjuntivitis
Es una de las causas más frecuentes de enfermedad ocular que se define

como un estado inflamatorio de la conjuntiva, con hiperemia conjuntival
(dilatacion de los vasos sanguineos) o con hemorragia subconjuntival.
La mayoría de las conjuntivitis son de etiología infecciosa (ocasionadas

principalmente por virus o bacterias) y en algunos casos por procesos
alergicos.
El diagnóstico etiológico de las infecciones oculares require de un

cuidado minucioso en el momento de la obtención de la muestra. Es
decir, que la muestra a seleccionar juega un papel muy importante para
la detección de algunos microorganismos fastidiosos y complejos para su
detección.
infecciones del Sistema Nervioso Central (SNC).
Líquido Cefalorraquideo (LCR).
• El estudio del Líquido cefalorraquideo (LCR) en

pacientes sospechosos de tener un proceso infeccioso
del Sistema Nervioso Central (SNC) representa uno de
los más importantes procedimientos de urgencia que
debe realizar el laboratorio de Microbiología clínica.
• Esto se debe a la urgente necesidad de instalar una
terapia antimicrobiana eficaz cuando se identifica el
agente infeccioso involucrado.
• Las infecciones del SNC pueden ser causadas por
bacterias, virus, hongos o parasitos que se hallan en el
medio ambiente o que forman parte de la flora normal
de las superficies corporales.
En las infecciones del SNC, los agentes causales son introducidos
previamente en los tejidos perifericos del hospedero y se dirigen al
SNC a traves de la circulación sistemica como es el caso de agentes
patogenos que colonizan el tracto respiratorio.
Otra forma de ingreso de los microorganismos en el SNC es por

inoculación directa, ocasionado por los traumatismos
craneoencefálicos.
El cultivo de LCR es la forma clásica de establecer de manera

definitiva la etiología y es útil para hacer la evaluación de la
susceptibilidad a los diferentes agentes antimicrobianos.
Existen otras técnicas para detectar la presencia del microorganismo

en el LCR, como la detección de antigenos especificos (busqueda
inmunológica) o la detección de celulas bacterianas no viables
(técnicas moleculares).
infecciones respiratorias
El aparato respiratorio esta formado por una serie de

conductos llamados bronquios, por los cuales circula el aire y
los alveolos, donde se realiza el intercambio gaseoso entre la
sangre capilar y el aire.
Las infecciones del tracto respiratorio son las más frecuentes

de la comunidad y el primer motivo de consulta médica,
incidiendo más en los meses frios.
Comprenden numerosos cuadros clínicos, que por su
localización se clasifican en dos grandes grupos:
1. Infecciones del tracto respiratorio superior.

2. Infecciones del tracto respiratorio inferior.
Los agentes causales son multiples y varian de una entidad a

otra. Entre las bacterias hay tres grandes protagonistas:
1. Streptococcus pyogenes.
2. Streptococcus pneumoniae.
3. Haemophilus influenzae.
Muestras de líquidos esteriles
Criterios para el rechazo de muestra clínica
Muestras mal identificadas:

• Falta de identificación del paciente.
• Discrepancia entre identificación de orden médica y rotulación de la
muestra.
• Falta de identificación del tipo de muestra.
• Falta de identificación en la orden médica del tipo de estudio solicitado.
Muestras no adecuadas para procesamiento:

• Muestra enviada en medio de transporte no adecuado.
• Muestra que requiere medio de transporte enviada sin el medio de
transporte necesario.
53
Criterios para el rechazo de muestra clínica
Muestra enviada en envase no adecuado.

• Muestras derramadas.
• Muestras inadecuadas para el tipo de estudio solicitado.
Muestras repetidas en el día del mismo paciente, con la excepción de los

hemocultivos.
• Muestras contaminadas o en descomposición visible.
54
Exámenes microscópicos de la muestra para su identificación
preliminar
El estudio microscópico en fresco y la tinción de Gram revelan la forma,
manera de agruparse, estructura de las células y su tamaño. Las tinciones
son el primer paso, ocasionalmente el único, para la identificación
bacteriana.
La tinción de Gram es la primera y única herramienta de la que nos servimos

para hacer un diagnostico provisional en el proceso de identificación de la
mayoría de las bacterias teniendo en cuenta también el tipo de muestra y el
diagnostico presuntivo del proceso infeccioso.
En algunos casos, la información derivada de las tinciones puede

comunicarse inmediatamente al clínico, siendo de gran relevancia y utilidad
como en tinciones del LCR en el diagnóstico de meningitis; tinciones de frotis
uretrales en las infecciones de transmisión sexual.
55
Bibliografía
• Koneman, E.; Allen, S.; Willian M. J. (2001) Diagnostico microbiológico, texto y

atlas a color. 5ta. Edicion. España: Editora Medica Panamericana S.A.
• De la Rosa M. Prieto P. J. (2011), Microbiologia en Ciencias de la Salud, Conceptos

y Aplicaciones. España 3ra Edicion
• Cortes A. Infecciones del sistema nervioso central. En: Gomez A, Alvarez CA, Leon
A. Enfermedades infecciosas en UCI. 1ª ed. Bogota: Distribuna Editorial Medica:
2004. p. 370-386
• Drew L. Infecciones de transmisión sexual. En: Ryan KJ, Ray CG. Sherris
Microbiologia medica. 4ª ed. Mexico: McGraw-Hill Interamericana; 2004 56
UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SANTO DOMINGO
Primada de América
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
Cátedra de Microbiología
UNIDAD V
57

Toma de muestra microbiológica

Cargado por

Información del documento

Descripción original:

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Toma de muestra microbiológica

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SANTO DOMINGO

CLAVE: MIP - 2120

PREREQUISITOS: MIP -1110

• Definir concepto de Muestra clínica

• Precauciones Universales para el personal de salud en la manipulación de las muestras

• Directrices generales para recoger y manipular las muestras clínicas

• Consideraciones fundamentales en la toma de muestra, transporte y recepción de muestras

• Materiales y métodos en las diferentes tomas de muestra

• Criterios para el rechazo de muestras clínicas

• Examenes microscopicos de la muestra para su identificacion preliminar

Dar a conocer las instrucciones básicas para la recolección, transporte y

Parte o cantidad pequeña de

La toma de muestra debe realizarse en condiciones de máxima asepsia,

Obtener una suficiente cantidad de muestra para asegurar el

Obtener la muestra antes del inicio de la terapia antimicrobiana. Si el

El material destinado a cultivo no debe estar en contacto con

Enviar las muestras al laboratorio inmediatamente después de haber

Las muestras deben colocarse en un recipiente secundario

El personal de enfermería y laboratorio microbiológico requiere

Todo el personal debe ser consciente de la importancia de sus

Este es uno de los aspectos más importantes dentro de los criterios

1. Asegurar que el recipiente que contiene la muestra o cultivo

2. Envolver cada recipiente primario en material absorbente y

3. Cerrar el contenedor secundario y colocarlo en una caja de

4. En caso de enviar varios contenedores secundarios puede

5. Verificar y controlar la temperatura a que debe enviar las

6. Es importante asegurar la integridad de la muestra para obtener

7. Para lograr un transporte seguro de las muestras es necesario

Hisopo estéril Hisopo flexible Depresor lingual Frascos estériles

Jeringuilla Tubo de ensayo Frascos de hemocultivo 15

La detección e identificación de los diversos agentes microbianos es de

Desde el punto de vista clínico, ofrece información necesaria para

Desde el punto de vista epidemiológico, permite registrar la etiología,

Las ITU son las enfermedades más frecuentes, en particular en

La otitis es una enfermedad del oido caracterizada por inflamación de la mucosa

Esta patologÍa se puede clasificar sobre la base de consideraciones clínicas y según

La fase aguda se refiere a la infiltración de polimorfonucleares y a los signos

La causa especifica de la Otitis externa puede determinarse por

En la Otitis media, el método diagnóstico más preciso es la

La etiología es diversa, tanto vírica como bacteriana, siendo

El diagnóstico etiológico para confirmar o excluir la infección se hace a

Su aislamiento justifica la administración de tratamiento

La terapia de rehidratación oral se ha identificado como la medida más

La etiologia de la enfermedad diarreica es diversa y numerosos

De los agentes infecciosos, los bacterianos se encuentran entre los más

La utilidad del diagnóstico de la diarrea se enfoca fundamentalmente

1. Clínico, para la atención y seguimiento de pacientes cuando esta

2. Desde el punto de vista de salud pública: Control de brotes,

• La primera porción de la uretra en el hombre, la vulva y la vagina en la

• Tanto en el hombre como en la mujer, las infecciones genitales más

Es necesario el conocimiento de la microbiota habitual, los patogenos potenciales y de los

En su etiología se encuentran virus, bacterias, hongos y parasitos, siendo las

Los microorganismos predominantes son: Staphylococcus aureus, Streptococcus

En el desarollo de la infección influyen el tamaño del inóculo, la sinergia

El transporte rápido y correcto de las muestras es de gran importancia

El tratamiento antimicrobiano es en su incio empírico, considerando los

Las pestañas previenen la entrada de cuerpos extraños en el ojo

La lisozima y la IGA son secretadas localmente coadyuvando en la

En el saco conjuntival existe una microbiota habitual relativamente

Es una de las causas más frecuentes de enfermedad ocular que se define

La mayoría de las conjuntivitis son de etiología infecciosa (ocasionadas

El diagnóstico etiológico de las infecciones oculares require de un