TEJIDO MUSCULAR – MIOFIBRAS

- El tejido muscular es un tipo de tejido altamente especializado, constituido por células

que tienen como propiedades fundamentales la excitabilidad (capacidad de percibir

estimulos y responder ante ellos), la elasticidad, extensibilidad y contractibilidad

(capacidad de contraerse con fuerza ante un estimulo).

Las células que forman el músculo esquelético se denominan fibras musculares/miofibras y

estan rodeadas por una membrana plasmática llamada sarcolema. Dentro de dichas células se

encuentran, además de las miofibrillas, múltiples núcleos y mitocondrias que se conocen como

sarcosomas, así como un prominente retículo endoplásmico conocido como retículo

sarcoplásmico.

El movimiento muscular se atribuye a la habilidad de las fibras musculares de utilizar la energía

química generada en procesos metabólicos. A su vez, la contractibilidad se debe a la presencia

de miofibrillas en el citoplasma de las fibras musular, como ensambles celulares de gran

tamaño. Ademas, las miofibras son responsables de la fuerza que genera el musculo.

COMPONENTES

Se componen de miofibrillas, membranas y redes de citoesqueleto que anclan las fibrillas

contráctiles al sarcolema.

MIOFIBRILLAS

Musculo-> Fibra muscular-> Miofibrilla-> Filamentos (Miosina y actina)

Son las unidades estructurales de las células musculares, también conocidas como fibras

musculares. Son muy abundantes, se arreglan paralelamente y están embebidas por el citosol

de estas células. Las células o fibras musculares estriadas son células muy largas. Su membrana

plasmática se conoce como sarcolema y su citosol como sarcoplasma.

Es una estructura contráctil que atraviesa las células del tejido muscular y les da la propiedad de

contracción y de elasticidad, la cual, permite realizar los movimientos característicos del

músculo.

- Dos tipos de filamentos contráctiles (conocidos también como los miofilamentos), que a

su vez se componen de las proteínas filamentosas miosina y actina

vida media de proteínas contráctiles de las miofibrillas = 5 días - 2 semanas -> músculo es un
tejido altamente dinámico, no sólo desde el punto de vista contráctil, sino de la síntesis y la

renovación de sus elementos estructurales.

- La unidad funcional de cada miofibrilla en las células o fibras musculares se denomina

sarcómero y se encuentra delimitada por una región conocida como “banda o línea Z”,

desde donde se extienden los miofilamentos de actina paralelamente ordenados.

- las miofibrillas están compuestas por unos miofilamentos de proteínas contráctiles: la

actina y la miosina, que también se conocen como miofilamentos delgados y gruesos,

respectivamente.

– Miofilamentos delgados

Los filamentos delgados de las miofibrillas están conformados por la proteína actina en su

forma filamentosa (actina F), que es un polímero de la forma globular (actina G)

Las hebras filamentosas de actina G (actina F) forman una doble hebra que se enrolla en forma

de hélice. Cada monómero de estas es capaz de unirse a la miosina en sitios particulares.

Estos filamentos se extienden entre dos zonas conocidas como la banda I y la banda A. En la

banda A, estos filamentos se ubican alrededor de los filamentos gruesos formando un arreglo

hexagonal secundario.

Concretamente, cada filamento delgado se encuentra simétricamente separado de tres

filamentos gruesos, y cada filamento grueso está rodeado por seis filamentos delgados.

Los filamentos de actina y otras proteínas asociadas se extienden sobresaliendo de los “bordes”

de las líneas Z y se solapan con los filamentos de miosina hacia el centro de cada sarcómero.

Los filamentos delgados y los gruesos interactúan entre sí a través de “puentes cruzados” que

sobresalen de los filamentos gruesos y que aparecen en la estructura de la miofibrilla en

intervalos regulares de distancias cercanas a los 14 nm.

– Miofilamentos gruesos

Los filamentos gruesos son polímeros de la proteína miosina y están delimitados por las

regiones conocidas como “bandas A”.

Los miofilamentos de miosina tienen aproximadamente se encuentran distribuidos en arreglos

hexagonales (si se observa una sección transversal de una miofibrilla).

Cada filamento de miosina II está conformado por muchas moléculas de miosina

empaquetadas, cada una de las cuales consiste en dos cadenas polipeptídicas que poseen una

región o “cabeza” en forma de maza y que se acomodan en “manojos” para formar los

filamentos. Ambos manojos están sostenidos a través de sus extremos en el centro de cada

sarcómero, de forma que las “cabezas” de cada miosina están dirigidas hacia la línea Z, donde se

fijan los filamentos delgados.

Las cabezas de miosina cumplen funciones muy importantes, dado que poseen sitios de unión

para moléculas de ATP y, además, durante la contracción muscular, son capaces de formar los

puentes cruzados para interactuar con los filamentos delgados de actina.

Los filamentos de actina se “anclan” o se “fijan” a la membrana plasmática de las fibras

musculares (sarcolema) gracias a su interacción con otra proteína conocida como distrofina.

Además, existen dos proteínas importantes de unión a actina conocidas como troponina y

tropomiosina que, en conjunto con los filamentos de actina, forman un complejo proteico.

Ambas proteínas son esenciales para la regulación de las interacciones que tienen lugar entre

filamentos delgados y gruesos.

Banda I: Actina, troponina y tropomiosina

Banda H: Zona donde sólo hay miosina visible

Banda A: Miosina. No se une diresctamente a discos Z, se anclan gracias a tinina

Discos Z: Sector donde se encuentran unidas las actinas

Linea M: Unión de las miosinas adyacentes.

DISTROFINA

- La distrofina es una proteína subsarcolémica de gran tamaño,

427 kDa.

- proteína estructural en el músculo que está codificada por el gen DMD y es la más

grande del genoma humano.

- Según su secuencia de aminoácidos (3865 aa), la distrofina consta

de cuatro dominios:

Proteínas asociadas

o Un dominio aminoterminal por el que se une a la f-actina: homología (mismo origen

evolutivo) con las regiones de unión al extremo aminoterminal de la a-actinina y de la bespectrina.

o Un largo dominio central o ‘rod domain’: 24 repeticiones de 109 aminoácidos, las cuales

forman una estructura helicoidal triple; estas repeticiones están interrumpidas por

regiones ricas en prolina que le añaden flexibilidad a la molécula, actuando como

bisagras moleculares.

o Un dominio rico en cisteína

o Un dominio carboxiterminal (estos dos últimos responsables de la unión al sarcolema.)

COMPLEJO DGC

• Principalmente formado por distroglicano, sarcoglicanos, distrofina y sarcospan.

- Aunque la función exacta del complejo no está completamente determinada, las

evidencias indican que este confiere estabilidad estructural al sarcolema durante la

contracción. Las mutaciones en este complejo, conllevan a las fibras musculares a ser

más susceptibles al daño y permiten varios tipos de desórdenes tales como la distrofia

muscular de Duchenne y distrofias musculares

v DISTROGLICANO: receptor celular que organiza la unión entre la laminina de la matriz

extracelular y la distrofina. forman el verdadero enlace entre la distrofina y la laminina.

Está conformado por dos subunidades denominadas α-distroglicano y β-distroglicano.

El α-distroglicano esta glucosilado en la membrana e interacciona con laminina-2 (grupo de

glucoproteínas de elevada masa que forman parte de la lámina basal asociada a otras proteínas

como el colágeno, entactina, proteoglucanos y fibronectinas.)

El β-distroglicano es una glucoproteína de membrana que puede unirse a distrofina o su

homólogo utrofina (proteína de unión a actina F, ancla el citoesqueleto a la membrana)

coordinada mediante su extremo carboxilo terminal.

v DISTROFINA: componente critico, anclaje de las proteínas musculares citoplásmicas a la

membrana celular. se enlaza con citoesqueleto. presente en las membrana plasmática

de las miofibrillas.

v SARCOGLICANOS: estabilizar la interacción entre la matriz extracelular y el citoesqueleto

mediada por el complejo distroglicano

(α-, β-, γ- y δ-SG) -> complejo.

v SARCOSPAN: forma complejos adhesivos con receptores de integrinas.

No se han relacionado mutaciones que tengan que ver con la ausencia de sarcospan con

distrofias musculares de ningún tipo. Sin embargo, el sarcospan no se encuentra en pacientes

que sufren de mutaciones en los sarcoglicanos; por esto, podemos decir que el complejo

sarcoglicano tetramerico es esencial para la localización normal en membrana de la proteína

sarcospan.

SARCOGLICANO Y SARCOSPAN

Estabilizar la interacción entre la matriz extracelular y el citoesqueleto mediada por el

complejo distroglicano y proteger a la fibra del daño mecánico durante el proceso de

contracción.

DISTROFINA

Estabiliza celulas a traves de la union de filamentos de actina, filamentos intermedios y

microtubulos al complejo transmembrano.

La distrofina estabiliza las células musculares al unir la F-actina, los filamentos

intermedios y los microtúbulos con el DGC transmembrana DGC y la ECM.

La pérdida de distrofina causa inestabilidad del sarcolema y aumenta la susceptibilidad

del sarcolema al estrés mecánico.

- Se expresa en el sarcolema en el músculo estriado esquelético, músculo liso y estriado

cardíaco; también, se encuentra en algunos tipos específicos de neuronas, incluyendo

las células de Purkinje y las neuronas de la corteza del cerebro.

- Estabiliza las membranas plasmáticas durante la contracción muscular a través de la

unión del dominio aminoterminal a la actina, mientras que el extremo carboxi-terminal

se una a las proteínas DGC y éstas, a su vez, se unirían a la laminina en el exterior de la

membrana del sarcolema

Actua como anclaje entre las proteínas citoesqueléticas y las proteínas integrales de la

membrana.

Previene el daño en la membrana de las células musculares (sarcolema) durante el proceso de

contracción del músculo

Actúa como un amortiguador, como un tipo de pegamento.

METALOPROTEINASAS
Las MMPs son proteínas integrantes de la matriz extracelular (MEC) las cuales son capaces, en

su medioambiente inmediato, de activar factores de crecimiento, receptores de superficie y

moléculas de adhesión.

Constituyen una importante familia de endopeptidasas zinc dependiente. Su actividad se

encuentra regulada por inhibidores específicos conocidos como inhibidores tisulares de

metaloproteinasas llamados TIMPs

Se clasifican en dependiendo de su función y estructura

• Colagenasas (MMP-1,-8 y -13)

• Gelatinasas (mmp-2 y -9): degradan colágeno IV (especificidad de sustrato) y una parte

integral de la membrana basal. Sin embargo también degradan otros tipos de colageno.

- Mmp-2: pequeña regulación a nivel transcripcional.

- Mmp-9: incrementan con señales de lesión en el tejido muscular, liberacion de

factores de crecimiento, modula la mec (migración celular). En contraste también

genera inflamación y destrucción de tejidos .

• Estromelisinas (MMP-3, -10 y 11).

• Metaloproteasas de membrana (MT-MMPS)

Las gelatinasas A (MMPs-2) y B (MMPs-9) son dos miembros que han demostrado degradar el

colágeno tipo IV de la membrana basal.

MMPs-2 MMPs-9

Peso molecular de 72kda Peso molecular de 92kda

También digiere colágenos I, II y III Casi ausente en tejidos normales

Expresada en condiciones normales por las

células del estroma de la mayoría de los

tejidos (macrófagos, mastocitos,

fibroblastos, células dendríticas,

endoteliales, hematopoyéticas.

Secretada por células dendríticas,

hematopoyéticas, neutrófilos, macrófagos,

mastocitos, fibroblastos y linfocitos.

Estas funciones son especialmente reguladas por los TIMPs

TIPOS DE TIMPS

TIMP-1

- Inhibe potencialmente la actividad de la mayoría de las MMPS, con excepción de MT1-MMPS y

MMPS-2

TIMP-2

- Inhibe la actividad de la mayoría de las MMPS, exceptuando MMPS9

TIMP-3

- Inhibe la actividad tanto de MMPS-1, -2, -3, -9, así como de MT1-MMPS

BIOMARCADORES

Un biomarcador es un evento que se produce en un sistema biológico y se interpreta como

indicador del estado de salud, de la esperanza de vida o del riesgo de enfermedad.

El término “biomarcador” se utiliza para medir una interacción entre un sistema biológico y un

agente de tipo químico, físico o biológico, la cual es evaluada como una respuesta funcional o

fisiológica, que ocurre a nivel celular o molecular y además está asociada con la probabilidad del

desarrollo de una enfermedad.

La interacción depende de las características heredadas y adquiridas del individuo (o del

sistema biológico), y de las circunstancias de la exposición, y como resultado es posible no

encontrar efecto o tener algún efecto adverso.

Las consideraciones que deben tenerse en cuenta para la evaluación son:

 La dosis

 La vía de contacto

 La duración

 Frecuencia de exposición con el agente.

La evaluación de una muestra biológica usando biomarcadores y su implicación en la aparición y

desarrollo de una enfermedad es compleja; sin embargo, es de gran importancia establecer la

relación entre la exposición y la enfermedad, para minimizar efectos adversos, ya que esta

información permite establecer:

 Un diagnóstico adecuado
 Una intervención preventiva efectiva

 Desarrollo y evaluación de tratamientos

 Identificación de individuos sensibles.

La selección de los biomarcadores a utilizar dependerá del conocimiento científico y la

influencia de factores sociales, éticos y económicos.

Hay tres tipos de biomarcadores :

– Biomarcadores con valor diagnóstico (diagnóstico de pacientes con una patología).

– Biomarcadores con utilidad pronóstica (pronóstico de la enfermedad o predicción del

desarrollo de la patología así como la gravedad).

– Biomarcadores de respuesta (predicción y monitorización de la respuesta clínica del paciente

a una intervención o un tratamiento farmacológico, pueden predecir si una terapia funcionará o

no).

BIOMARCADORES EN DUCHENNE

El biomarcador más utilizado en la DMD, es la medición de los niveles de creatin quinasa en

sangre (CK) y se utiliza como biomarcador de diagnóstico.

La CK es una enzima muscular, que se filtra al torrente sanguíneo tras una lesión muscular, un

nivel elevado de CK en sangre, es un indicador de daño muscular. No es específica de la DMD o

de la distrofia muscular en general, ya que puede estar presente en la sangre incluso en

personas sanas después de haber sufrido daño muscular por una lesión o ejercicio intenso.

En la práctica clínica, cuando los pacientes presentan debilidad muscular, puede deberse a

varias causas (por ejemplo, problemas en el sistema nervioso o musculares), en estos casos,

detectar niveles altos de CK, descarta que se trate de un problema del sistema nervioso y se

diagnostica daño muscular.

Entre otros biomarcadores encontrados para la DMD, tenemos… (mirar tabla)

NOTA: autofagia es un proceso esencial en el que los componentes de una célula, tales como las

mitocondrias que utilizan la glucosa para obtener energía, se rompen y reciclan con el fin de

reparar el daño y eliminar las partes disfuncionales de las células.

Importancia de la asociación de proteínas citoplasmáticas en las células

musculares con la MEC

La pérdida de asociación entre proteínas citoplasmáticas y la MEC de las células

musculares se entiende principalmente como la ausencia de distrofina.

v Ruptura del complejo DGC

v Inestabilidad de membrana

El daño de la membrana celular es un problema mayor, pues permite que sustancias fluyan a
través de la

membrana, algunas escapan del interior de las células hacia el sistema circulatorio, mientras que
otras, a

la inversa, pasan del torrente sanguíneo al interior de las células.

Este proceso ocasiona daño al músculo, particularmente cuando se permite la entrada de iones
Ca++ los

cuáles activan enzimas, dentro de la célula o fibra muscular, que a su vez destruyen otras
proteínas,

provocando la apoptosis o muerte de las fibras musculares. Las células musculares destruidas son

reemplazadas por tejido conectivo (fibrótico) y adiposo, con la consecuente pérdida de función
muscular.

Los espacios dejados por la destrucción del tejido muscular se convierten en secciones con fibrosis
que

restringen el proceso de contracción, ocasionando contracturas y rigidez muscular con la

consecuente

pérdida de función muscular y rango de movimiento.

Entre las sustancias que se escapan del interior de la célula muscular hacia el torrente sanguíneo,
la de

mayor relevancia es la enzima denominada CK o CPK , creatina quinasa o creatina fosfo quinasa, la
cuál

participa en el proceso de producción de energía, la energía que requiere el músculo para su buen

funcionamiento. Al verse disminuida la cantidad de CPK, el músculo pierde capacidad de

funcionamiento

ocasionando debilidad muscular.

Esto resulta en un doble daño, un doble efecto negativo; por un lado se reduce la cantidad de
células

musculares y por el otro, las existentes progresivamente van perdiendo su capacidad de

funcionamiento,
y así el músculo se debilita de manera continua y progresiva.

La liberación de CPK de las células, eleva su valor en sangre de 10 a 100 veces el valor normal que
es de 0

a 200. Esta cantidad excesiva de CK en la sangre no causa ningún daño adicional sino que nos da
una

manera de detectar problemas del músculo.

v Aumento de susceptibilidad ante el estrés mecánico

Como bien sabemos, en el cuerpo humano se llevan a cabo una variedad de procesos de alta

complejidad, como el desarrollo embrionario, la curación de heridas, la homeostasis de los

órganos, el almacenamiento de lípidos y la actividad muscular.

Todos estos implican la exposición a fuerzas mecánicas como la gravedad, impacto, flujo

sanguíneo, estiramiento muscular, entre otros, que pueden resultar potencialmente dañinas si

no se cuentan con mecanismos para sobrellevarlas = estrés mecánico

v Degeneración de miofibras.

v Necrosis muscular como sucede en las distrofias musculares que resultan de los defectos

ó alteraciones de alguno de los componentes del complejo DGC