24/10/2019

PROCESAMIENTO DE
MUESTRAS EN MICOLOGÍA:
EXAMEN DIRECTO
Dra. Andrea Goitia

Términos útiles para el examen de

hongos
◦ La unidad microscópica fundamental de un hongo
filamentoso es la estructura en forma de hebra
denominada hifa.
◦ Varias hifas se combinan para formar el micelio.
◦ Las hifas que se subdividen en células individuales
por paredes o tabiques se denominan tabicadas.
Las que no los tienen se denominan sin tabiques.
Las pseudohifas se forman a partir de un
alargamiento de las células levaduriformes que
emiten un brote (blastoconidio).
◦ La porción del micelio que se extiende en el
sustrato del medio de cultivo es el micelio
vegatativo; la porción que se proyecta sobre el
sustrato es el micelio aéreo, llamado también
micelio reproductor y de esta porción se originan
esporas.

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◦ Tres tipos de esporas o conidios pueden

formarse directamente del micelio
vegetativo: blastoconidios, clamidoconidios
y artroconidios.
◦ El termino blastoconidios son las formas
conocidas como brotes de las levaduras
◦ CLamidoconidios (clamidosporas): se forman
a partir de células preexistentes en la hifa.
Pueden encontrarse dentro de la hifa, junto a
uno de sus lados o en su extremo.
◦ Artroconidios: también se forman de células
preexistentes en las hifas. Cuando maduran,
estos conidios se liberan por la lisis de las
células adyacentes de las hifas.

Consideraciones sobre la identificación

de hongos
Para identificar hongos filamentosos se requiere una combinación de:
◦ La velocidad de crecimiento
◦ Las características morfológicas de las colonias
◦ Las características morfológicas microscópicas
En la mayoría de los casos el ultimo ítem proporciona los datos mas útiles para
la identificación.

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PROCESAMIENTO DE
LA MUESTRA

Toma de muestra
Piel, pelo y raspado de uñas:
Estas muestras se remiten para los cultivos de dermatofitos y están
contaminadas con bacterias, hongos de crecimiento rápido o ambos.
◦ Primero limpiar el área de la piel con alcohol al 70% para eliminar de la
superficie los contaminantes bacterianos.
◦ Las muestras de estas lesiones pueden obtenerse por rapado de la piel o uñas
con una hoja de bisturí o portaobjetos.
◦ Las muestras se toman del borde del crecimiento periférico de las lesiones
típicas de la tiña

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◦ los pelos infectados se extraen por tracción con una pinza.

◦ Las muestras de las uñas infectadas deben tomarse de la parte inferior de la

misma para obtener el material ablandado.

◦ Estas muestras deben colocarse en una placa Petri esteril, no deben

refrigerarse. Los cultivos deben incubarse de preferencia a dos temperaturas,
25 y 37 grados, como minimo por 30 días antes de emitir un resultado
negativo.

Pautas para el examen directo:

◦ Las escamas de piel, los raspados de uñas y los pelos deben examinarse
después del tratamiento con KOH. Esta preparación se realiza emulsionando
la muestra en una gota de KOH al 10% sobre un portaobjetos. Se aplica un
cubreobjetos y la muestra se examina para determinar la presencia de hifas
◦ EL propósito del KOH es eliminar cualquier resto de escamas o las membranas
celulares que pueden confundirse con hifas de hongos. El aclarado de la
muestra puede acelerarse calentando la mezcla suavemente sobre la llama
de un mechero

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◦ En el caso de los pelos, pueden observarse la disposición en mosaico de las

esporas sobre la superficie del tallo (infección ectotrix) o los fragmentos de
hifas y artroconidios en el interior (endotrix).

◦ Las escamas de piel, raspados de uñas o pelos pueden colocarse

directamente sobre la superficie del medio de cultivo, como agar infusión de
cerebro corazón o agar Sabouraud con cloranfenicol y cicloheximida. Con un
alambre recto de inoculación se sumerge uno de los fragmentos debajo de la
superficie del agar. Los cultivos deben incubarse un mínimo de 30 días.