UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MEXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES

CUAUTITLÁN

INGENIERÍA AGRÍCOLA
GRUPO: 1301
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA VEGETAL
REPORTE DE PRACTICA 1

NOMBRE DEL ALUMNO:

MARTINEZ MATEO RICARDO
MATA SANCHEZ ARIANA
PRIMERO QUINTERO KARLA

NOMBRE DEL PROFESOR:

ING. PRISCILA ANAHID RIVERA CRUZ
DRA. MARÍA ELENA QUINTANA SIERRA

SEMESTRE 2022-1

FECHA DE ENTREGA: 08/10/2021

 Introducción

La cuantificación de proteínas en una muestra biológica es saber el contenido de

proteínas existentes, lo que tiene varias finalidades, nutricional, “para saber la actividad
concreta de una preparación enzimática, etc., hay distintos métodos como son (Reyes y
Aurora Galván Cejudo, E. F. s/f):

• La propiedad de las proteínas para absorber la luz Ultra violeta.

• Formación de derivados químicos.
• La capacidad que tienen las proteínas para unirse a determinados colorantes.

Para la cuantificación de proteínas una de las técnicas es utilizar el espectrofotómetro

para un análisis cuantitativo, cualitativo, de moléculas, como son proteínas,
carbohidratos, lípidos, ácidos nucleicos. Las sustancias absorben longitud de onda en
distinta longitud de onda y la función de espectrofotómetro emitir radiaciones de luz de
diferentes longitudes de onda en ultravioleta y al momento de penetrar la sustancia
refleja la cantidad de onda que son absorbidos y para cada sustancia hay una longitud
de onda, lo que nos da los valores de la molécula que se busca en cada muestra
analizada (UNAM,MANULAPOYOANTECEDENTES).

El método Bradford de cuantificación de proteínas tiene su fundamento con la unión de

un colorante denominado Comassie Blue G-250, a la solución con proteína las cuales
se unen a este colorante formando un complejo de –proteína colorante-, lo cual es
detectado y registrado por el
espectrofotómetro(UNAM,MANULAPOYOANTECEDENTES).

El espectrofotómetro debe estar calibrado para leer las observancias por eso es por lo
que en primer momento se hacen disoluciones para obtener la ecuación de la recta y
curva patrón, después por medio de lecturas teniendo el valor de la concentración o la
absorbancia se puede obtener una u otra con cualquiera de sus datos porque sigue la
ley de Lambert Beer, que es “La absorbancia de una solución es directamente
proporcional a su concentración”.

Objetivos

• Determinar la concentración de proteínas en una determinada muestra problema.

• Determinar una curva patrón de los valores obtenidos
• Identificar la importancia de la cuantificación de proteínas en la práctica agrícola
esto aplicarlo en la práctica agrícola.

Si la muestra de análisis demuestra una alta absorbencia, esto se podría traducir como
una baja concentración de proteínas
Inhibir semillas
previamente en agua
por 24 horas
Pesar 1gr. semilla,
macerar con mortero y
agregar 5 mil. agua
destilada
Decantar el macerado
y colocar en una
probeta de 10 mil.
Hipótesis
Metodología
Ajustar el
Llevar la muestra a un espectrofotometro a
volumen final de 6 mil cero con agua
destilada a una longitut
de 595 nm
Verter la muestra en
tubos de centrifuga.
Centrifugar a 3000 rpm,
por 8 minutos y
decantar el Tomar la absorbancia
sobrenadante en un de la lectura obtenida
tubo de ensaye.
Realizar una
Agrear 2 gotas de extrapolación en la
ecuacion de la curva
reactivo bradford y
agitar en forma de patrón.
vaiven durante 60 s.
 Resultados

Tabla 1. Datos para calcular la Curva Patrón

Concentración proteína
Absorbancia (nm)
(%proteína/gr peso)
0.05 0.279

0.1 0.579

0.15 0.916

0.2 1.259

0.25 1.341

0.3 1.557

0.35 1.696

0.4 1.768

0.45 1.839

0.5 1.879

Gráfica 1. Curva patrón de la proteína Albumina de huevo.

Cálculos Valores de las
variables
y = mx+b m=3.516
x= (y-b)/m b=0.3444

Tabla 2. Porcentaje de proteínas entre gramos de peso fresco

Concentración proteína
Muestra Absorbancia
(%proteína/gr peso)
Calabaza 2.0580 0.4874

Lechuga 2.0570 0.4871

Jitomate 2.0420 0.4828

Girasol 2.0370 0.4814

Rábano 2.0200 0.4766

Espinaca 2.0180 0.4760

Tomate 2.0040 0.4720

Calabaza 1.9850 0.4666

Naranja 1.9810 0.4655

Chía 1.8000 0.4140

Chícharo 1.6070 0.3591

Haba 1.6020 0.3577

Lenteja 1.5940 0.3554

Frijol 1.4510 0.3147

Maíz 0.6860 0.0972

 Análisis
En el experimento logramos concluir que la hipótesis presentada al inicio de este se cumplió
ya que observamos por ejemplo que en la calabaza el porcentaje de proteínas es de 0.4874
a comparación de la semilla de maíz la cual es la de menor porcentaje con un total de
0.0972. A partir de estos datos identificamos que la calabaza presenta una menor
absorbancia lo cual se traducirá a la verificación y comprobación de lo planteado
inicialmente, además en el caso del maíz también notamos una menor absorbancia lo cual
resulta contradictorio al valor de la concentración de proteínas. Y aquí logramos la
confirmación.

Ante los datos obtenidos logramos recabar datos que nos son de utilidad al momento de
determinar el beneficio de consumo de una determina especie vegetal.

Además de ello esta técnica de cuantificación resulta sencilla, por ejemplo respecto a los
reactivos y materiales empleados en la práctica resultan ser de fácil acceso y manejo ya que,
el método Bradford de cuantificación de proteínas tiene su fundamento con la unión de un
colorante denominado Comassie Blue G-250, a la solución con proteína las cuales se unen a
este colorante formando un complejo de –proteína colorante-, lo cual es detectado y
registrado por el espectrofotómetro(UNAM,MANULAPOYOANTECEDENTES).

Una vez obtenidos los resultados, estos pueden ser fácilmente interpretado con la ayuda de
tablas, en las cuales organizaremos los datos correspondientes a la muestra analizada, de
esta manera podemos realizar las ecuaciones correspondientes las cuales nos darán como
resultado la concentración de proteínas y al llevar estos datos a una gráfica, obtendremos lo
que se le llama una curva patrón la cual al momento de determinar su tendencia, veremos
muy marcada la característica esperada en la parte de la hipótesis

Conclusiones

➢ El espectrofotómetro lee por rayos ultravioleta por ello en primer momento para
calibrar u obtener la ecuación de la recta se tiene que saber el valor que le
corresponde a las proteínas para relacionarlos con las cantidades obtenidas de
observancia.
➢ Teniendo la curva patrón se hace una regresión de la recta, por lo que con los valores
de Y se puede saber la concentración de proteínas del material biológico analizado.
➢ En la absorbancia que realiza el espectrofotómetro prevalece la ley de Lambert Beer,
donde es directamente proporcional la concentración de proteínas a la absorbancia.
 BIBLIOGRAFIA:

1. Reyes y Aurora Galván Cejudo, E. F. (s/f). 27. Métodos para la cuantificación de

proteínas.Uam.mx. Recuperado el 3 de octubre de 2021, de
http://sgpwe.izt.uam.mx/files/users/uami/acym/27_METODOS_PARA_LA_CUANTIFICACION
_DE_PROTEINAS.pdf

2. Unam.mx. Recuperado el 3 de octubre de 2021, de

http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/MATERIALAPOYOANTECEDENTES_22427.pdf