Practica Bioquimica #11 Transaminacion

UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA – MEDICINA
HUMANA III
INTRODUCCION
La transaminación es la reacción más frecuente de los aminoácidos. Afecta
prácticamente a todos los mismos en alguna etapa de su degradación y es
utilizada también en la síntesis de los aminoácidos no esenciales. La
transaminación se conecta con la desaminación del glutamato a alfa-cetoglutarato
en la utilización catabólica de los aminoácidos. De manera inversa, la
transaminación puede acoplarse a la aminación del alfa-cetoglutarato a glutamato
en la biosíntesis de los aminoácidos no esenciales. La descarboxilación tiene otro
significado, ya que los productos que se originan suelen tener una gran actividad
biológica (aminas biógenas).
En el catabolismo de algunos aminoácidos, especialmente de los

aminoácidos ramificados, se produce la descarboxilación oxidativa de los
cetoácidos originados previamente por transaminación. La reacción es análoga a
la que interviene en el metabolismo de otros cetoácidos como el piruvato y el alfa-
cetoglutarato, y se necesita el concurso de varias coenzimas (pirofosfato de
tiamina, coenzima A, FAD Y NAD).
El interés clínico está centrado en: TGO (transaminasa glutámico

oxalacética) y TGP (transaminasa glutámico pirúvica).
Estas enzimas tienen acción eminentemente intracelular, por lo que la

actividad sérica en condiciones normales es baja o nula. Un aumento de la
actividad será evidencia de un deterioro de los tejidos en que se encuentran, de
los cuales resultan particularmente importantes corazón e hígado.
Se ha observado que luego de un infarto de miocardio se produce en suero

un marcado aumento de la actividad de la TGO, debido a la liberación al torrente
sanguíneo de esta enzima, tan abundante en músculo cardíaco.
En este caso no existirá aumento en la actividad sérica de TGP ò será

mínimo.
BIOQUIMICA Y NUTRICION . . . 1
HUMANA III
En hepatitis virales y otras formas de enfermedad hepática que involucren

necrosis de tejido, habrá un incremento considerable de la actividad sérica de
transaminasas, incluso antes de la aparición de síntomas clínicos como ictericia.
En este caso, la TGP será la enzima predominante debida a su gran

concentración en el tejido hepático.
Una elevada actividad de transaminasas puede detectarse también en

traumas accidentales o quirúrgicos y en distrofias musculares y miosis.
HUMANA III
OBJETIVOS
 OBJETIVO GENERAL
- Determinar los valores de transaminasas TGO Y TGP en suero.
 OBJETIVOS ESPECIFICOS
- Comprender las reacciones bioquímicas de transaminasas.
- Identificar enfermedades causadas por los niveles altos de
transaminasas.
- Analizar la importancia clínica de las transaminasas en el organismo.
HUMANA III
I. MARCO TEORICO
I.1. TRANSAMINACIÓN
La reacción de transaminación consiste en la transferencia de un grupo amino
desde un aminoácido a un alfa-cetoácido. Como resultado de ello, el aminoácido
original queda convertido en cetoácido, y el cetoácido original, en aminoácido. En
casi todos los casos interviene el sistema glutamato/alfa-cetoglutarato. La enzimas
se denominan aminotransferasas o transaminasas y requieren el concurso del
piridoxal-fosfato (PLP), coenzima derivado de la piridoxina.
La conversión de aminoácidos en cetoácidos permite en muchos casos su

utilización energética, ya que la mayoría de estos cetoácidos se integran en las
vías catabólicas de la glucosa ( glucólisis y ciclo de krebs). En el caso de los
aminoácidos glucogénicos, su transformación en cetoácidos permite igualmente la
HUMANA III
síntesis de glucosa. A la inversa, las reacciones de transaminación permiten la

síntesis de los aminoácidos no esenciales a partir de los cetoácidos
correspondientes.
Casi todos los aminoácidos sufren reacciones de transaminaqción en su

metabolismo. En algunos casos(alanina, aspartto, gutamato, tirosina, serina y
aminoácidos ramificados), estas reacciones se realizan directamente sobre el
propio aminoácido.
TIPOS DE TRANSAMINASAS O AMINOTRANSFERASAS
Las transaminasas son unas enzimas presentes en el hígado pertenecientes al

grupo de las transferasas, lo que significa que transfieren grupos amino desde un
metabolito a otro (en general aminoácidos). Su función principal es la de
transformar sustancias, aunque también se encargan de la síntesis de los
aminoácidos no esenciales.
Es decir, cumplen fundamentalmente una función metabólica en el interior de

las células, de ahí que las encontremos presentes en el tejido de muchos órganos.
TIPOS DE TRANSAMINASAS
Precisamente con el objetivo de determinar el volumen de transaminasas que

hay en sangre, y sobretodo descubrir si pueden o no existir posibles patologías en
las funciones del hígado, se lleva a cabo un análisis sanguíneo que permite
conocer los niveles de transaminasas en sangre.
Transaminasa GOT o AST
HUMANA III
Se trata de una transaminasa conocida también con el nombre de

transaminasa glutamicooxalacética. Se encuentra presente en prácticamente la
mayoría de los órganos, aunque se encuentra sobretodo en el hígado, los glóbulos
rojos y los músculos estriados.
Dado que es común encontrarla en el interior de las células, cuando existen

niveles elevados de esta enzima significa que se ha producido destrucción celular.
Transaminasa GPT o ALT
Es una transaminasa que encontramos sobretodo en el hígado y en los

riñones. También es posible encontrar una pequeña cantidad de transaminasa
GPT o transaminasa glutamicopirúvica en los músculos estriados y los glóbulos
rojos. Su principal función es la de fabricar glucosa.
Transaminasa GGT
Es una transaminasa que existe en una gran cantidad de tejidos (riñones,

páncreas, bazo, corazón, cerebro y conducto biliar), aunque la encontramos
sobretodo a nivel de los hepatocitos (células hepáticas). Es conocida con el
nombre de gamma glutamil transpeptidasa.
Cuando se eleva en la sangre puede indicar la presencia de enfermedades del

hígado, del páncreas o de la vía biliar.
CÓMO BAJAR LAS TRANSAMINASAS ALTAS
HUMANA III
En el caso del hígado, una de las enfermedades que más tiende a afectarle a
día de hoy es el hígado graso , ya que tendemos a seguir una alimentación rica en
hidratos de carbono simples y abusamos del consumo de alcohol.
Aunque son varias las enfermedades que pueden afectar a la correcta salud
del hígado, generalmente el citado trastorno puede provocar niveles de
transaminasas altas (como sabes, las transaminasas son enzimas que
encontramos en el interior de las células hepáticas), las cuales pueden verse
aumentadas en casos de hepatitis víricas (ya sean agudas o crónicas), consumo
abusivo de alcohol, cáncer hepático, cirrosis, u obstrucciones graves de la vía
biliar.
Generalmente, los valores normales de la transaminasa GOT – ALT pasa

porque se sitúe entre 0 y 37 U/L, la transaminasa GPT – AST entre 0 y 41 U/L y la
transaminasa GGT entre 11 y 50 U/L.
No obstante, en caso de que te hayan aparecido altas en una analítica de

sangre, y no exista una enfermedad de base que pueda ser tratada, es posible
bajar las transaminasas altas a partir del seguimiento de una serie de consejos
básicos.
 ¿Cómo bajar las transaminasas?
Lo más adecuado siempre es realizar una depuración del hígado, al menos,

una vez al año, ya que de esta manera ayudamos a que este importantísimo
órgano de nuestro cuerpo se depure y funcione correctamente:
- Evita siempre los alimentos muy grasos o procesados.
HUMANA III
- Evita los alimentos muy azucarados, muy salados o asados.
- Evita el consumo de bebidas alcohólicas.
- Toma líquido en abundancia, sobretodo agua. Ayuda al hígado a
metabolizar mejor las grasas y eliminarlas.
- Consume frutas, pero evita aquellas con gran contenido de ácidos
orgánicos, como el melón, la sandía y las fresas.
- Algunas plantas medicinales, como es el caso del diente de león o el
cardo mariano resultan ideales para cuidar el hígado. La primera actúa
como depurativo, mientras que la segunda regenera las células
hepáticas. Tampoco debemos olvidarnos de los beneficios del boldo,
una planta comúnmente utilizada para ayudar al hígado a realizar mejor
sus funciones.
- El consumo de infusiones y tés pueden ser de gran utilidad.
- Entre los alimentos estrella para cuidar nuestro hígado, no podemos
olvidarnos de los importantísimos beneficios de la alcachofa.
II. PARTE EXPERIMENTAL
HUMANA III
EXPERIMENTO - DETERMINACIÓN DE TRANSAMINASAS (TGO Y TGP) EN

SUERO
REACTIVOS NECESARIOS:
- Sustrato TGO: Solución conteniendo 100 mmol/l de l-aspartato y 2 mmol-l

de alfa-cetoglutarato en buffer fosfatos 100 mmol/l, pH 7,4.
- Sustrato TGP: Solución conteniendo 200 mmol/l de l-alanina y 2 mmol/l de
alfa-Cetoglutarato en buffer fosfatos 100 mmol/l, pH 7,4.
- Reactivo 2,4-DNFH: Solución conteniendo 1 mmol/l de 2,4-
dinitrofenilhidrazina en ácido clorhídrico
1 mmol/l.
- Hidróxido de Sodio Diluyente para Enzimas concentrado:
Solución de hidróxido de sodio 4 mol/l
- Agua Destilada.
INSTRUCCIONES DE USO
- Hidróxido de Sodio: Antes de usarse, se deberá diluir el contenido de este

frasco a 1 litro de agua destilada para así alcanzar la concentración requerida de
NaOH 0.4mol/l.
Es importante notar que el hidróxido de sodio debe conservarse en frasco de
plástico y no de vidrio. Conservar el frasco lejos del reactivo de color pues los
vapores pueden contaminar ambos reactivos.
- Reactivo 2,4-DNFH: Esta solución es corrosiva y debe guardarse en frasco

oscuro.
PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR TGO ò TGP EN SUERO:

HUMANA III
Preparar los tubos:

Blanco; Muestra
Sustrato (TGO ò TGP)
 0.5 ml
 0.5 ml
Colocar en Baño María a 37ºC 50 segundos y luego agregar:

Muestra (suero)
 200 Ul y 50 ul
Agua destilada
 100 uL
Mezclar por agitación suave e incubar exactamente 3 min y agregar:

Reactivo 2,4-DNFH
 0.5 ml
 0.5 ml
Mezclar. Dejar 5 minutos a 37ºC. Luego agregar:

NaOH 0.4 mol/l
 5 ml
 5 ml
Mezclar por inversión y retirar del baño. Después de 2 minutos leer en el

espectrofotómetro a 340 nm, llevando el aparato a cero de absorbancia con
agua destilada.
 Leer 3 lecturas.
CALCULOS:
 Leer a 340 nm, combinando con agua destilada.

 Actividad ( u/l) Promedio , absorvancia x 1,746
VALORES DE REFERENCIA:
- GOT: <40 U/L

- GPT:
HUMANA III
HOMBRES: <45 (U/L)

MUJERES: < 34 (U/L)
1. 2.
HUMANA III
IV. CUESTIONARIO
1.- EXPLIQUE EN QUE CONSISTE EL FENÓMENO DE TRANSAMINACIÓN Y
DONDE SE REALIZA EN EL ORGANISMO?
La prueba más solicitada a los portadores de hepatitis C son las

transaminasas.
¿Qué son las Transaminasas?
Un paso inicial para detectar problemas en el hígado es una prueba de

sangre para determinar la presencia de ciertas enzimas en la sangre, comúnmente
llamadas transaminasas. Debajo de circunstancias normales, estas enzimas
residen dentro de las células del hígado. Pero cuando el hígado esta con
problemas, estas enzimas son derramadas en la corriente sanguínea.
Entre las más sensibles de estas enzimas y entre las más representativas
están las transaminasas. Ellas comprenden la aminotransferase de aspartate (AST
o SGOT o TGO o GOT) y la aminotransferase de alanine (ALT o SGPT o TGP o
GPT). Estas enzimas normalmente se encuentran dentro de las células del
hígado. Si el hígado esta con algún problema, las células derraman las enzimas
en la corriente sanguínea, elevando los niveles de estas enzimas en la sangre
siendo un indicador del problema que pueda existir.
Las transaminasas catalizan reacciones químicas en las células en las

cuales un grupo de amino es transferido de una molécula donadora a una
molécula recipiente. Por esto, es que es dado el nombre de "transaminasas".
HUMANA III
¿Donde son producidas las transaminasas?
TGO ( AST o SGOT o GOT) normalmente es encontrado en una diversidad

de tejidos inclusive el hígado, corazón, músculos, riñones, y cerebro. Es liberado
en la sangre cuando cualquiera de estos tejidos se encuentra con algún problema.
Por ejemplo, su nivel en la sangre sube con ataques de corazón y con desordenes
en los músculos. Por lo tanto no es un indicador altamente específico de daño en
el hígado.
TGP (ALT o SGPT o GPT) es encontrado en su mayor parte en el hígado. Este no

es producido exclusivamente por el hígado, pero es donde se encuentra más
concentrado. Es liberado en la circulación sanguínea como resultado de daño
hepático. Sirve entonces como un indicador bastante específico del estado del
hígado.
2.- ¿QUE RELACIÓN EXISTE ENTRE LAS TRANSAMINASAS Y LAS
ENFERMEDADES HEPÁTICAS?
La relación que existe es que las transaminasas son un tipo de enzima ,

estas enzimas residen dentro de las células del hígado. Pero cuando el hígado
esta con problemas, estas enzimas son derramadas en la corriente sanguínea.
Entre las más sensibles de estas enzimas y entre las más representativas están
las transaminasas. Ellas comprenden la aminotransferase de aspartate (AST o
SGOT o TGO o GOT) y la aminotransferase de alanine (ALT o SGPT o TGP o
GPT).
TGP (ALT o SGPT o GPT) es encontrado en su mayor parte en el hígado. Este no

es producido exclusivamente por el hígado, pero es donde se encuentra más
concentrado. Es liberado en la circulación sanguínea como resultado de daño
hepático. Sirve entonces como un indicador bastante específico del estado del
hígado. TGP y TGO son indicadores sensibles de daño hepático en diferentes
tipos de enfermedades.
HUMANA III
3.- COMO SE ENCUENTRAN LAS TRANSAMINASAS EN EL INFARTO AGUDO
DE MIOCARDIO?
Cuando se produce un infarto agudo de miocardio las transaminasas se

encuentran elevadas en el torrente sanguíneo sobre sus cifras normales,
expresando que existe una zona de necrosis muscular. El problema es que dicha
destrucción muscular no tiene por que ser necesariamente en el miocardio. Así, la
enzima CPK, es la que se altera mas precozmente (aumenta a las 4-6 horas del
infarto y se mantiene elevada hasta tres días después), aunque también aumenta
por simples traumatismos musculares (inyecciones, golpes, ejercicio intenso, etc.).
Para evitar errores se determina de forma seriada (repetida en el tiempo) y se
comprueba que, en caso de infarto, se eleva y persiste. En los laboratorios bien
preparados se puede medir una parte especial de esta enzima, la llamada fracción
CPK-MB que es casi exclusiva del corazón y resulta muy específica del infarto de
miocardio.
4.- SEÑALE CUÁLES SON LOS MÉTODOS DE ANÁLISIS CONOCIDOS PARA
DOSAJE DE TRANSAMINASAS?
 TRANSAMINASA GPT
Para qué se realiza este análisis
Se realiza en el contexto de otras pruebas hepáticas (GammaGT, GOT,

bilirrubina, fosfatasa alcalina) y se utiliza para evaluar problemas o alteraciones del
hígado. Su elevación es directamente proporcional al daño celular y puede servir
como indicativo de la evolución de la enfermedad.
 GammaGT
 GOT
 Bilirrubina
 fosfatasa alcalina
HUMANA III
5.- EXISTE VARIACIÓN DE TRANSAMINASAS CON LA EDAD?
Es muy importante nunca interpretar un resultado de transaminasas

aisladamente, pues las variaciones de estas enzimas son grandes. Así, lo correcto
siempre será se considerar la medía de los últimos cuatro resultados.
Existen en el hígado más de 60 reacciones que producen transaminasas, pero,

las únicas con valor clínico son la TGO (también conocida por las siglas GOT o
ASAT o AST o SGOT) y la TGP (también conocida por las siglas GPT o ALAT o
ALT o SGPT), siendo que éstas no son producidas exclusivamente en el hígado y
se encuentran extensamente distribuidas por el organismo.
La TGO es encontrada principalmente en el corazón, hígado, músculos y

riñones y la TGP se encuentra principalmente en el hígado y en los riñones. Así,
como la TGP se encuentra en mayor nivel en el hígado es ésta que los médicos
llevan en mayor consideración ya que las enfermedades hepáticas presentan en
general un aumento de la TGP pudiendo estar acompañada de aumentos también
en la TGO. En la mayoría de las enfermedades del hígado la TGP es siempre
superior a la TGO, excepto en la hepatitis alcohólica.
Los niveles normales de transaminasas son significativamente menores en las

mujeres que en los hombres e incluso la edad también altera los valores, razón
por la cual es necesario atentar a varios factores antes de realizarse una
interpretación equivocada. También, dependiendo del laboratorio los resultados
pueden presentar variaciones, de lo que ante un resultado anormal, en general
dos veces el valor máximo de referencia para la prueba utilizada, lo más prudente
será realizar un nuevo examen.
HUMANA III
Existen factores que pueden alterar los resultados. La realización de ejercicios

físicos extenuantes hasta 24 horas antes de la realización del examen puede
doblar el resultado, la masa corporal (peso arriba del ideal) puede aumentar en
hasta 40% el resultado del examen, una anemia hemolítica puede aumentar,
principalmente la TGO y, finalmente, hasta el momento del día en el que es
retirada la muestra de sangre estará influyendo en el resultado.
Con relación a los resultados:
1 - Si la retirada de la sangre fue realizada en la parte de la tarde la TGO

puede tener una variación del 45% en comparación con sangre retirada por la
mañana;
2 - La diferencia de resultados en días seguidos llega a 10% en la TGO y hasta

30% en la TGP;
3 - En los hombres afro-descendentes los niveles son 15% superiores a

personas de piel blanca;
4 - Personas con Índice de Masa Corporal elevada (arriba del peso) pueden
tener resultados entre 40 y 50% superiores en ambas las transaminasas;
5 - La práctica de ejercicios físicos extenuantes eleva en hasta tres veces la

TGO;
HUMANA III
6 - La práctica de ejercicios aerobicos de forma rutinaria reduce en hasta 20%

la TGP;
7 - La existencia de daño muscular incrementa de modo significativo la TGO y

moderadamente la TGP.
HUMANA III
VI. BIBLIOGRAFIA
 Guías de trabajos prácticos BIOQUIMICA, Tecnología Médica 2013
 Murray, Mayes, Granner, Rodwell. Bioquímica de Harper, Editorial
Manual Moderno, 15ava. Edición, 2001.Páginas consultadas: 243 a 254,
700 a 715.
 Laguna José, Piña Enrique. Bioquímica, JGH Editores, 4ta. Edición,
1990. Páginas Consultadas: 218 a 223.
 DOUGLAS, A. Química analítica, capitulo 23 (pág. 614 – 620) 3ra
edición, México, 2005, international Thompson editores S.A
 Anómino. Perioperative total parenteral nutrition in surgical patients.
The Veterans Affairs Total Parenteral Nutrition Cooperative Study
Group. N Engl J Med 1991;325:525-32.
 http://hepato.com/p_transaminases/011_transamin_esp.php#sthash.bAiW2r0H
.dpuf
 http://www.saludalia.com/analisis-clinicos/transaminasas

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En el catabolismo de algunos aminoácidos, especialmente de los

El interés clínico está centrado en: TGO (transaminasa glutámico

Estas enzimas tienen acción eminentemente intracelular, por lo que la

Se ha observado que luego de un infarto de miocardio se produce en suero

En este caso no existirá aumento en la actividad sérica de TGP ò será

En hepatitis virales y otras formas de enfermedad hepática que involucren

En este caso, la TGP será la enzima predominante debida a su gran

Una elevada actividad de transaminasas puede detectarse también en

- Determinar los valores de transaminasas TGO Y TGP en suero.

- Comprender las reacciones bioquímicas de transaminasas.

- Identificar enfermedades causadas por los niveles altos de

- Analizar la importancia clínica de las transaminasas en el organismo.

La conversión de aminoácidos en cetoácidos permite en muchos casos su

síntesis de glucosa. A la inversa, las reacciones de transaminación permiten la

Casi todos los aminoácidos sufren reacciones de transaminaqción en su

TIPOS DE TRANSAMINASAS O AMINOTRANSFERASAS

Las transaminasas son unas enzimas presentes en el hígado pertenecientes al

Es decir, cumplen fundamentalmente una función metabólica en el interior de

Precisamente con el objetivo de determinar el volumen de transaminasas que

Transaminasa GOT o AST

Se trata de una transaminasa conocida también con el nombre de

Dado que es común encontrarla en el interior de las células, cuando existen

Transaminasa GPT o ALT

Es una transaminasa que encontramos sobretodo en el hígado y en los

Es una transaminasa que existe en una gran cantidad de tejidos (riñones,

Cuando se eleva en la sangre puede indicar la presencia de enfermedades del

CÓMO BAJAR LAS TRANSAMINASAS ALTAS

Generalmente, los valores normales de la transaminasa GOT – ALT pasa

No obstante, en caso de que te hayan aparecido altas en una analítica de

 ¿Cómo bajar las transaminasas?

Lo más adecuado siempre es realizar una depuración del hígado, al menos,

- Evita siempre los alimentos muy grasos o procesados.

- Evita los alimentos muy azucarados, muy salados o asados.

- Evita el consumo de bebidas alcohólicas.

- Toma líquido en abundancia, sobretodo agua. Ayuda al hígado a

metabolizar mejor las grasas y eliminarlas.

- Consume frutas, pero evita aquellas con gran contenido de ácidos

orgánicos, como el melón, la sandía y las fresas.

- Algunas plantas medicinales, como es el caso del diente de león o el

cardo mariano resultan ideales para cuidar el hígado. La primera actúa

como depurativo, mientras que la segunda regenera las células

hepáticas. Tampoco debemos olvidarnos de los beneficios del boldo,

una planta comúnmente utilizada para ayudar al hígado a realizar mejor

- El consumo de infusiones y tés pueden ser de gran utilidad.

- Entre los alimentos estrella para cuidar nuestro hígado, no podemos

olvidarnos de los importantísimos beneficios de la alcachofa.

II. PARTE EXPERIMENTAL

EXPERIMENTO - DETERMINACIÓN DE TRANSAMINASAS (TGO Y TGP) EN

- Sustrato TGO: Solución conteniendo 100 mmol/l de l-aspartato y 2 mmol-l

- Hidróxido de Sodio: Antes de usarse, se deberá diluir el contenido de este

- Reactivo 2,4-DNFH: Esta solución es corrosiva y debe guardarse en frasco

PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR TGO ò TGP EN SUERO:

Preparar los tubos:

Colocar en Baño María a 37ºC 50 segundos y luego agregar:

Mezclar por agitación suave e incubar exactamente 3 min y agregar:

Mezclar. Dejar 5 minutos a 37ºC. Luego agregar:

Mezclar por inversión y retirar del baño. Después de 2 minutos leer en el

 Leer a 340 nm, combinando con agua destilada.

- GOT: <40 U/L

HOMBRES: <45 (U/L)

DONDE SE REALIZA EN EL ORGANISMO?

La prueba más solicitada a los portadores de hepatitis C son las