TOMA DE MUESTRAS

MICROBIOLOGIA

Claudia L. Colorado S.
Bacterióloga
Coordinadora Grupo de Apoyo Diagnóstico
 INTRODUCCION

Cuando la impresión diagnóstica del paciente es una patología producida

por microorganismos, se hace necesario tomar diferentes tipos de
muestras, con el fin de buscar:

Hongos Bacterias Leishmaniasis Hansen

 INTRODUCCION

ENFOQUE CENTRADO EN LA
SEGURIDAD DEL PACIENTE
 INTRODUCCION

• Antes de iniciar el procedimiento de toma de muestra es importante asegurarse de

seguir las recomendaciones para reducir las probables fuentes de error y tener en
cuenta:
– Normas de bioseguridad
– Orden y facturación correcta
– Preparación adecuada del paciente, según la muestra que se va a procesar.
– Aplicación de consentimiento informado.
– Encuesta pretest, para verificar estado actual del paciente y cumplimiento de
las condiciones
– Adecuada identificación del paciente y el material que se va a emplear
– Tomar la muestra adecuada
– Tomar muestra suficiente según la cantidad de exámenes a procesar
– Adecuado tiempo de separación y transporte interno
 PROCEDIMIENTO PARA TOMA DE
MUESTRA PARA MICROBIOLOGÍA

1. Saludo al paciente y
6. Alistamiento del
Revisión de la orden,
material que se requiere 7. Lavado de manos
factura frente al ingreso
según la solicitud medica
en el sistema

2. Confirmación de los
datos con el paciente 8. Selección de la lesión
5. Elaboración de la
(Nombre completo y adecuada, y obtención de
encuesta pre test.
documento de identidad las muestras
correcto)

9. Notificación de
4. Explicación del oportunidad de
3. Impresión de etiqueta
consentimiento resultados
de códigos de barra
informado
Despedida del paciente
 OBTENCION DE LA MUESTRA
ASPECTOS IMPORTANTES
• Se debe realizar un adecuado lavado de manos, en
los momentos recomendados por OMS/OPS:
OBTENCION DE LA MUESTRA
ASPECTOS IMPORTANTES
OBTENCION DE LA MUESTRA
ASPECTOS IMPORTANTES

MUESTRAS PARA ANALISIS DE

LEISHMANIASIS
MUESTRAS PARA ANALISIS DE
LEISHMANIASIS

El examen directo de para el diagnóstico de la

leishmaniasis busca identificar
microscópicamente los amastigotes de
Leishmania sp.

Las muestras para el análisis proceden de un

raspado de los bordes activos e infiltrados y
fondo de la lesión. El raspado puede obtenerse
mediante lancetas, cuchillas de bisturí y limas
de endodoncia
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
LEISHMANIASIS
Material básico para la recolección de muestras: Examen directo

Los materiales que se describen a continuación deben estar disponibles para la

recolección de muestras:

• Guantes
• Alcohol antiséptico 70%
• Gasa estéril
• Láminas porta objetos nuevas y limpias.
• Lancetas o agujas de endodoncia 45/80 de 25mm estériles
• Micropore

Todo el material será estéril, nuevo o desechable, abierto en presencia del paciente
MUESTRAS PARA ANALISIS DE
LEISHMANIASIS
Procedimiento Toma de muestra con lanceta

• Identificar las lesiones que presenta el paciente y

seleccionar la lesión que presente menor tiempo de
evolución para la toma de la muestra o en caso de
existir infección segundaria (las cuales se caracterizan
por presentar fondos sucios, dolor y calor local)
seleccione la menos infectada.
• Realizar la limpieza del sitio de la lesión, utilizando gasa
estéril impregnada en alcohol antiséptico al 70%
• Si la lesión presenta costra la debe retirar
cuidadosamente, o en caso de no ser posible remover
solo el borde de la costra. Evitar el sangrado excesivo
de la lesión durante la remoción de la costra.
• Limpiar nuevamente utilizando gasa estéril impregnada
en alcohol antiséptico, y realizar presión constante con
una gasa seca para evitar al máximo el sangrado.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
LEISHMANIASIS
Procedimiento Toma de muestra con lanceta

• Rotular tres láminas en las cuales se colocará el tejido extraído.

• Seleccionar el borde que presenta menor sangrado y realizar el raspado de tal manera que
no sangre mucho, con el lado romo de una lanceta. El raspado también puede realizarse
del centro de la ulcera.
• Extender el material obtenido de forma suave sobre una lámina portaobjetos.
• Realizar tres extendidos por lámina. Si el material no es suficiente, se toma otro raspado
del borde o fondo de la lesión hasta completar tres preparaciones por lámina en tres
portaobjetos; es decir, 9 muestras en total.
• Una vez terminada la toma de la muestra, cubrir la lesión con una gasa estéril y
esparadrapo micropore.
MUESTRAS PARA ANALISIS DE
LEISHMANIASIS
Procedimiento Toma de muestra con lima de endodoncia

En caso de observar lesiones cerradas, nódulos linfáticos,

abundante sangrado donde se dificulte la toma de muestra con
lanceta o lesiones superiores a 6 meses de evolución, debe tomar
la muestra con una aguja de endodoncia estéril, con la cual se
obtendrá tejido del borde de la lesión.

• Ubicar las lesiones que presenta el paciente,

seleccionando la lesión que presente menor tiempo de
evolución para la toma de la muestra.
• Realizar la limpieza del sitio de la lesión, utilizando gasa
estéril impregnada en alcohol antiséptico al 70%
• Introducir la aguja o lima de endodoncia en ángulo de 45°
por el borde infiltrado de la lesión hacia el centro de la
misma, con rotación continua de la aguja. Después de
varias rotaciones de la aguja dentro de la lesión, debe
retirar la aguja sin rotarla en la misma inclinación (ángulo
45°C) con que la introdujo.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
LEISHMANIASIS
Procedimiento Toma de muestra con lima o aguja de endodoncia

• Rotular tres láminas en las cuales se colocará el tejido extraído.

• Extender el material obtenido suavemente, sobre un extremo de una lámina portaobjetos
limpia y nueva; para ello, hacer rotación de la aguja sobre la lámina.
• Realizar tres extendidos por lámina. Si el material no es suficiente, se toma otro muestra
de la lesión hasta completar tres preparaciones por lámina en tres portaobjetos; es decir, 9
muestras en total.
• Una vez terminada la toma de la muestra, cubrir la lesión con una gasa estéril y
esparadrapo micropore.
MUESTRAS PARA ANALISIS DE
LEISHMANIASIS

Cultivo: El objetivo de este examen es

detectar la presencia de formas de
promastigotes de Leishmania sp. para el
diagnóstico de la Leishmaniasis, mediante la
observación microscópica directa del cultivo.

Éste procedimiento se realiza al obtener

tejido y linfa del borde de la lesión a través
de punción aspirativa de ulceras y/o biopsias
sembrados en medios de cultivo Seneca.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
LEISHMANIASIS
Material básico para la recolección de muestras: Cultivo

Los materiales que se describen a continuación deben estar disponibles para la

recolección de muestras:

• Guantes
• Alcohol antiséptico
• Gasa estéril
• Medios de cultivo séneca.
• Jeringas de insulina
• Gentamicina 100 ug/ml
• Micropore

Todo el material será estéril, nuevo o desechable, abierto en presencia del paciente
MUESTRAS PARA ANALISIS DE
LEISHMANIASIS
Procedimiento para toma de cultivo

• Alistar dos jeringas de insulina con 0.1 ml de Gentamicina

100 ug/ml (reactivo suministrado por el área de
parasitología y Leishmaniasis).
• Observar las lesiones que presenta el paciente escogiendo
la que tenga menor tiempo de evolución o en caso de
existir infección segundaria tomar la muestra de la menos
infectada.
• Con manos enguantadas desinfectar los bordes de la lesión
utilizando gasa estéril impregnada en alcohol antiséptico
70%.
• En el borde más indurado de la lesión, insertar la aguja de
una de las dos jeringa de insulina, sin empujar el embolo,
evitando que penetre la Gentamicina en la piel.
• Girar la aguja dentro de la piel de manera circular con el fin
de macerar el tejido.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
LEISHMANIASIS

Procedimiento para toma de cultivo

• Retire lentamente la aguja, al tiempo que succiona con

mucho cuidado con el fin de tomar el tejido y linfa. Trate
de no aspirar mucha sangre, en caso que la muestra
obtenida sea muy sanguinolenta, descartar la jeringa de
insulina con el material aspirado y tomar nuevamente la
muestra.

• Utilizando el mechero y una rigurosa técnica aséptica,

sembrar la muestra obtenida por aspirado en la superficie
del tubo que contiene el medio séneca.
MUESTRAS PARA ANALISIS DE
LEISHMANIASIS

Procedimiento para toma de cultivo

• Con la jeringa restante repetir el proceso, insertar la aguja

de la jeringa de insulina, sin empujar el embolo, evitando
que penetre la Gentamicina en la piel.

• Girar la aguja dentro de la piel de manera circular con el fin

de macerar el tejido.

• Retire lentamente la aguja, al tiempo que succiona con

mucho cuidado con el fin de tomar el tejido y linfa. Trate de
no aspirar mucha sangre, en caso que la muestra obtenida
sea muy sanguinolenta, descartar la jeringa de insulina con
el material aspirado y tomar nuevamente la muestra.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
LEISHMANIASIS

Procedimiento para toma de cultivo

• Utilizando el mechero y una rigurosa técnica aséptica,

sembrar la muestra obtenida por aspirado en la
superficie del tubo que contiene el medio séneca.
• Los tubos de cultivo ya sembrados deben protegerse
de temperaturas por encima de 28°C, pero no deben
guardarse en nevera, ya que los parásitos no crecen.
• Cubrir la lesión con una gasa estéril y esparadrapo
Micropore
MUESTRAS PARA ANALISIS DE
LEISHMANIASIS

Procedimiento para toma de muestras para directo y

cultivo

• https://www.youtube.com/watch?v=VWyJzNrECzY
• https://www.youtube.com/watch?v=499_OA_6pqc
 MUESTRAS PARA ANALISIS
MICOLÓGICOS

Eliminación de los elementos utilizados durante la toma de muestra

Cumplir con las medidas de bioseguridad de la institución

 OBTENCION DE LA MUESTRA
ASPECTOS IMPORTANTES

Muestras obtenidas cumpliendo

los criterios de calidad

Muestras preparadas
adecuadamente

Entrega de muestras a las áreas

para procesamiento

Inicia fase Analítica.

 BIBLIOGRAFIA

MANUAL DE TOMA DE MUESTRAS PARA ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO

SECRETARÍA DISTRITAL DE SALUD- FUNDACIÓN CIC SALUD.
BOGOTA, 2015.

PROTOCOLO TÉCNICO DE LABORATORIO FASE PRE-ANALÍTICA

LEISHMANIASIS Código: PC-4000-082
Título

Gracias
www.dermatologia.gov.co
Av. 1ª. N° 13A - 61