UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PLATA

FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS

CÁTEDRA DE MICROBIOLOGÍA

Curso: MICROBIOLOGÍA II

Guía de Estudio APO 8

Bacilos grampositivos

Listeria

Autor: Dra. Fabiana Moredo

2019
MICROBIOLOGÍA II - FCV - UNLP APO 8: BACILOS GRAM POSITIVOS 2019

ACTIVIDAD PRESENCIAL OBLIGATORIA 8

BACILOS GRAM POSITIVOS

Tipo de actividad: taller

Objetivos
 Reconocer la importancia del microorganismo perteneciente al género Listeria como agente causante
de enfermedad.
 Identificar a través de la morfología, tinción, requerimientos nutricionales, pruebas bioquímicas,
serológicas y patogenia, las características más importantes del microorganismo mencionado.
 Fomentar el trabajo colaborativo.
 Estimular la construcción de criterio microbiológico y profesionales reflexivos de sus prácticas.
 Promover el proceso de “elaboración”, como actividad cognitiva.

Contenidos
Se estudiará la clasificación taxonómica, historia, características morfológicas, culturales y metabólicas. Composición
antigénica, mecanismos de patogenicidad y diagnóstico de laboratorio del género Listeria.

Saberes previos

Microbiología I: Citología bacteriana. Antígenos bacterianos: somático (Ag O), cápsular (antígeno K), flagelar (antígeno H),
pilis (antígeno F). Observación de microorganismos. Metabolismo. Cultivo de bacterias. Pruebas de caracterización fenotípicas
y genotípicas. Actividad patógena de las bacterias: diferencia entre endotoxina y exotoxina.

Histología. Epitelios de revestimiento. Elementos constitutivos del tejido conjuntivo. Variedades del tejido conjuntivo. Tejidos
conjuntivos especializados. Componentes de la sangre. Hematopoyesis. Neuronas. Histofisiología del sistema nervioso. Tejido
muscular.

Autor: Dra. Fabiana Moredo Página 2

 Bacilos Gram positivos
Familia: Listeriaceae Género: Listeria

1.- Luego de observar la imagen (L), describa las características morfológicas y tintoriales del microorganismo
coloreado.

Imagen L

El microorganismo fue sometido a una tinción de Gram, siendo su resultado negativo, no ácido resistente. Las
características morfológicas observables son: bacilos cortos regulares.

2.- Con respecto a las estructuras accesorias presentes en el género, la expresión de los flagelos tiene características
particulares. Descríbalas.
Se movilizan por flagelos perítricos, (5 maximo) que se desarrollan mejor de 20° a 25° C, en medio semisólido
desarrolla 3 - 5 mm debajo de la superficie en forma de paraguas invertido. A 37° pierde la movilidad ya que no
puede desarrollar los flagelos.

3.- La imagen M, corresponden al cultivos de Listeria monocytogenes en agar sangre.

Imagen
M

a) Describir las características nutricionales de las especies pertenecientes al género Listeria.

El género Listeria necesita medios enriquecidos, como agar tripticasa de soya 5% de sangre de oveja,
caballo o conejo para evidenciar la presencia de hemolisis.
 b) Describir las características de las colonias de las especies pertenecientes al género Listeria.
En agar nutritivo las colonias son de 0,5-1,5 mm de diámetro, redondas, traslúcidas, de convexidad baja y
bordes netos. Son de color gris azulada y con un brillo azul verdoso por la luz trasmitida oblicuamente. Las
cepas recién aisladas muestran colonias circulares, lisas (forma “S”), blancas con superficie brillante.
c) Mencionar las condiciones de incubación que deben considerarse para el cultivo de las
especies pertenecientes al género Listeria.
- Tiempo 48 hs
- Temperatura 37°C
- Condición Atmosférica Atmósfera microaerófila que contenga un 5-10 % de CO2
4.-Debido a su amplia distribución en la naturaleza, son muy variadas las posibles muestras en las cuales se pueden
aislar microorganismos pertenecientes al género Listeria. Es por ello que se desarrollaron diversos medios de cultivo.
a) A continuación se enlistará una serie de medios de cultivo, indicar con que finalidad se utilizan en la
marcha bacteriológica para aislamiento de Listeria monocytogenes.

Medio de Cultivo Clasificación según su utilidad

Caldo Fraser Para detección en productos alimenticios
Agar PALCAM Detección de Listeria en muestras lácteas y ambientales

Agar ALOA Alimentos y pruebas químicas

Agar Tripticasa Soya Enriquecimiento

Agar Sangre Enriquecimiento

5.- Listeria spp. posee antígenos somáticos (O) y flagelares (H), los cuales permiten su clasificación en serotipos;
se reconocen 16 serovariedades cuya identificación es importante para la determinación del primer nivel
discriminatorio de diagnóstico y vigilancia.
a) Explicar el concepto de antígeno somático (O) y antígeno flagelar (H)
Los antígenos somáticos son lipopolisacáridos componentes de
la pared celular y se han identificado 60 antígenos diferentes. Los antígenos
flagelares son proteínas localizadas en el flagelo móvil.

6.- Mencionar los factores de virulencia descriptos para L. monocytogenes.

Sus factores de virulencia son: las internalinas, la listeriolisina O (LLO, codificada por el gen hly), la proteína Act A,
dos fosfolipasas, una metaloproteasa, la proteína Vip, un sistema de exclusión de la bilis (BilE) y una hidrolasa de
sales biliares. El ciclo incluye la fagocitosis inducida por el propio pató- geno, la lisis de la vacuola fagocítica, el
movimiento en el citoplasma y la diseminación a las células vecinas.

7.- Esquematizar un modelo de patogenia de L. monocytogenes.

11.- Analizar los tres géneros bacterianos abordados en la APO y citar las especies pertenecientes a ellos que son
consideradas como ZOONÓTICAS.

Listeria monocytogenes y Clostridium

12.- Analizar los tres géneros bacterianos abordados en la APO y citar las especies pertenecientes a ellos que
ocasionan ENFERMEDADES TRANSMITIDAS POR ALIMENTOS.

Listeria monocytogenes,Clostridium Botulinum, bacillus antrasis.

Bibliografía
Microbiología Veterinaria. Editor Néstor O. Stanchi. 2007. Editorial Panamericana

Links
http://www.anmat.gov.ar/Cuida_Tus_Alimentos/eta.htm#stap
 A.- El Código Alimentario Argentino exige en quesos de mediana, alta y muy alta humedad,

ausencia de Listeria monocytogenes en 25 g de muestra. Así mismo, el Servicio Nacional de

Sanidad y Calidad Agroalimentaria –SENASA- establece la investigación de L. monocytogenes en

salchichas tipo viena y/o chacinados y/o salazones cocidos feteados y otros productos cocidos

(Ausencia del microorganismo en 5 muestras de 25 g). Las determinaciones deben ser realizadas

bajo alguna de las siguientes normas ISO 11290-1:1996, Amd 2004; BAM-FDA:2011; USDA-

FSIS:2009.
1. Indicar y describir las condiciones de toma y envío de las muestras.
Las muestras deben ser extraidas en forma asceptica y deben ser refrigeradas y enviadas rápidamente para su
estudio. Es de rigor el uso de guantes y ropa protectora cuando se manipulan estos materiales, dado el peligro que
implica el microorganismo como patógeno en humanos.
Las muestras obtenidas de sitios normalmente estériles pueden sembrarse directamente en placas de agar
tripticasa soya 5% de sangre ovina o equina. Si las muestras proceden de localizaciones clínicas con microbiota
propia de los alimentos o el ambiente, deben ser sometidas previamente a un proceso de enriquecimiento
selectivo antes de cultivarlas en medios sólidos para aislamiento.
2. Analizar e interpretar el flujograma precedente, el cual pertenece a una marcha bacteriológica según
norma ISO 11290-1:1996, para aislamiento de L. monocytogenes, e indicar género y especie del
microorganismo encontrado en la muestra.

Datos complementarios: se realizó coloración de Gram y prueba de catalasa.

Coloración de Gram Catalasa

Identificación del microorganismo aislado: Listeria monocytogenes