Análisis Instrumental en Ingeniería II

Practica N° 5. Determinación Espectrofotométrica de Fósforo en

Bebidas Gaseosas
I.- OBJETIVOS.
 Determinar la Concentración de Fósforo en bebidas gaseosas,
expresado como ppm o mg/Lt en P2O5; P y H3PO4.
 Preparar la Curva de Calibración.
 Determinar la absortividad molar específica y determinar si cumple o no
con la Ley de Lambert y Beer.
 Con la absortividad molar específica determinar la concentración de
fósforo en las bebidas gaseosa, según primer objetivo.
 Realizar la curva de calibración e interpolar la absorbancia que
corresponde a la muestra para encontrar su concentración.
 Realizar el mismo cálculo por regresión lineal.

II.- FUNDAMENTO TEORICO.

La gaseosa (también llamada refresco, bebida carbonatada, soda o cola) es
una bebida saborizada, efervescente y sin alcohol. Estas bebidas suelen
consumirse frías para ser más refrescante y para evitar la pérdida de dióxido de
carbono, que le otorga la efervescencia. Se ofrecen diversos sabores de
gaseosas, entre otra cola, naranja, limón, uva, cereza, etc.
Las bebidas gaseosas son un factor de riesgo importante para la salud en
general, ya que contribuyen con el sobrepeso y la obesidad. A su vez,
aumentan el riesgo de osteoporosis, problemas dentales, renales y cardiacos
entre otras enfermedades.
Contienen agua, azúcar, edulcorantes artificiales, ácidos (fosfórico, cítrico,
málico, tartárico), cafeína, colorantes, saborizantes, dióxido de carbono,
conservantes y sodio.
El H3PO4 es una sustancia que contienen los refrescos de cola, es un aditivo
que se emplea como antioxidante. Cantidades elevadas de fósforo en la dieta,
tienen un efecto desmineralizante del hueso. El ácido fosfórico que se
encuentra muy diluido no es tóxico, es inodoro y se emplea para dar un sabor
ácido a muchos refrescos, como la Coca-Cola.
La determinación y cuantificación de fósforo contenidos en muestras de
consumo popular, como son los refrescos de cola se pueden obtener a través
de la técnica analítica de espectrometría UV-Visible.
Fósforo en la dieta:
El fósforo es un mineral que constituye el 1% del peso corporal total de una
persona. por lo que está considerado como un elemento químico esencial. Es
el segundo mineral más abundante en el cuerpo. Está presente en cada célula
del mismo. La mayor parte del fósforo en el organismo se encuentra en los
dientes y en los huesos.
Funciones:
• La principal función del fósforo es la formación de huesos y dientes.
• El fósforo trabaja con las vitaminas del complejo B. También ayuda con
lo siguiente:
 Funcionamiento de los riñones
 Contracción de músculos.
 Palpitaciones normales.
 Señales nerviosas.
El fósforo juega un papel crucial en el organismo siendo un componente
esencial en los huesos y dientes. Entre sus principales funciones debemos
destacar, que es fundamental para mantener el equilibrio del calcio, y el
almacenamiento de la energía en nuestro metabolismo, así mismo el fósforo
interviene en la utilización de los hidratos de carbono y las grasas en el
organismo, en el empleo correcto de la vitamina B, y ayuda al mejor
funcionamiento de la función nerviosa y muscular.
El fósforo en alimentos puede encontrarse como fósforo inorgánico o fósforo
asociado a materia orgánica, siendo el primero más fácilmente absorbido por el
organismo. En semillas, legumbres, cereales y frutos secos, el fósforo orgánico
se encuentra mayoritariamente en forma de fitatos. Sin embargo, a pesar del
elevado contenido en fósforo de estos alimentos, el intestino de los humanos
no posee la enzima fitasa capaz de degradar los fitatos, de ahí que el fósforo
orgánico presenta una baja biodisponibilidad comparada con el fósforo
inorgánico. En concreto, las nueces son un alimento rico en fósforo y una
buena fuente de minerales.
La hipofosfatemia puede describirse como la presencia de niveles bajos de
fosfato inorgánico en la sangre, pudiendo deberse a las siguientes causas:
• Mala absorción de fosfato: su cuerpo no está absorbiendo el fosfato.
• Después de someterse a una cirugía de estómago.
• Si tiene carencia de vitamina D (necesaria para la absorción de fosfato).
• La presencia de hidróxido de aluminio o bicarbonato (que se encuentran
en el laxante "leche de magnesia" y en antiácidos) evita la absorción de
fosfato.
• Problemas en los niveles de electrolitos en la sangre, como por ejemplo
un nivel bajo de magnesio en la sangre (necesario para absorber el
fósforo) o un nivel elevado de calcio en sangre (que se fija al fósforo, lo
que hace que su nivel descienda por debajo de lo normal).
• Determinados problemas de respiración pueden provocar
hipofosfatemia.
 • Los niveles bajos de fosfato en la sangre pueden ser el resultado de una
mayor pérdida de bicarbonato en la orina.
• Alcoholismo: Consumo excesivo de alcohol de manera regular.
• Raquitismo.
• Si recibe tratamiento para una diabetes (es decir, niveles elevados de
glucosa en la sangre) grave mal controlada: El fosfato tiende a seguir o
acompañar a la glucosa a las células; por consiguiente, después de un
tratamiento como éste, sus niveles de fósforo pueden bajar
significativamente.

La hiperfosfatemia puede describirse como la presencia de un nivel elevado de

fosfato inorgánico en la sangre. El rango normal de fósforo es de 2.5 - 4.5
mg/dL.
Los riñones eliminan fosfato. Por lo tanto, la causa más común de la presencia
de niveles elevados de fosfato (o hiperfosfatemia) es la incapacidad de los
riñones para eliminar el fosfato. También se observa hiperfosfatemia en los
siguientes casos:
• Consumo diario excesivo de fosfato (también debido al uso de laxantes y
enemas).
• El cuerpo puede tener una deficiencia de calcio o de magnesio, o puede
tener demasiada vitamina D, lo que provoca hiperfosfatemia.
• Las infecciones graves pueden provocar un aumento en los niveles de
fosfato y causar hiperfosfatemia.
• Destrucción celular a causa de la quimioterapia, cuando las células
tumorales mueren a una velocidad rápida. Esto puede provocar el
síndrome de lisis tumoral.
• Problemas de respiración (acidosis respiratoria).
• Puede tener niveles elevados de fosfato debido al ejercicio prolongado,
lo que produce daños musculares. Determinados atletas y corredores de
fondo pueden padecer esta afección, llamada rabdomiólisis.
• Puede tener problemas de tiroides, paratiroides u otras glándulas, que
causen un aumento de los niveles de fosfato en la sangre y, por ende,
hiperfosfatemia.
• La insuficiencia renal puede provocar hiperfosfatemia.

El exceso de fósforo en la dieta duplica el riesgo de sufrir un fallo

cardiovascular, según expertos.
Madrid, 30 Sep. (EUROPA PRESS) - Una dieta rica en fósforo (con mayor
presencia de carne, embutidos, salchichas y lácteos, fundamentalmente)
aumenta la mortalidad y duplica el riesgo de sufrir un fallo cardiovascular
debido a la calcificación de las arterias y al fallo en la función renal provocado
por este exceso, según ha afirmado a Europa Press el jefe del Servicio de
Metabolismo Óseo y Mineral del Hospital Universitario Central de Asturias
(Oviedo), el doctor Jorge Cannata.
Leer más: https://www.infosalus.com/salud-investigacion/noticia-exceso-
fosforo-dieta-duplica-riesgo-sufrir-fallo-cardiovascular-expertos-
20100930142722.html
EL FÓSFORO EN LA INDUSTRIA; USOS:
Los compuestos comerciales más importantes de fósforo son el ácido fosfórico
y sus sales, llamadas fosfatos. La mayoría de los compuestos fosforados se
usan como fertilizantes.
Los compuestos fosforados se usan también para aclarar las soluciones de
azúcar de remolacha y en aleaciones especiales como bronces al fósforo.
El fósforo blanco se usa en la elaboración de veneno para las ratas,
insecticidas y en la industria pirotécnica y el fósforo rojo se usa para fabricar
cerillas.
En los fósforos ordinarios la cabeza se compone de una mezcla combustible de
azufre y clorato de potasio bañada en sulfuro de fósforo que se inflama por el
calor producido en la fricción y produce a su vez la inflamación de la mezcla
combustible.
También se ha convertido en esencial para la industria, siendo su principal uso
como fertilizante: cerca de tres cuartas partes del fósforo total (en todas sus
formas químicas) se emplean en Estados Unidos como fertilizantes.
El fósforo, el potasio y el nitrógeno son los nutrientes esenciales para el
crecimiento de las plantas. De ellos el fósforo es el más crítico en términos de
su disponibilidad en la naturaleza.
Una de las aplicaciones más importantes del fósforo es como nutriente en
alimentos, y se usa también como agente de limpieza para ablandar el agua o
en revestimientos para superficies metálicas. También lo encontramos en
productos tan variados como detergentes, fósforos de seguridad, pasta de
dientes, pesticidas, plásticos, pirotecnia, cerillas o lámparas. “Se ha convertido
en un imprescindible para la industria mundial y es difícilmente substituible,
sobre todo como fertilizante”, explica Laura Mosquera, Product Manager del
Grupo Barcelonesa.
Además de su empleo como fertilizantes, los fosfatos se utilizan en alimentos
balanceados, bebidas, cerámicas, ablandadores de aguas, productos
limpiadores, jabones, detergentes e insecticidas, entre muchos otros usos.
Determinaciones analíticas de fósforo:
La determinación de fósforo se puede realizar por técnicas espectroscópicas
como Espectrofotometría de absorción atómica, espectrofotometría de emisión
atómica; pero el método por excelencia en agua, alimentos fertilizantes, suelos
y otros es por espectrofotometría de absorción molecular en el visible. En el
método de espectrofotometría del visible se pueden encontrar variantes en
función al agente reductor utilizado y a la especie química generadora del color
lo que lleva a diferentes longitudes de onda en la medición. Se pueden
encontrar diferencias también en el tratamiento de la muestra y en la forma
química del fosforo en la que es cuantificado.

Fosfatos versus fósforo

La cantidad de fosfato se puede expresar de dos maneras diferentes:

Fosfato (PO4³-) también conocido como ortofosfato, o como

Fósforo (P) también conocido como Ortofosfato como el fósforo (PO4-P)

El ortofosfato es una molécula con un átomo de fósforo rodeado por cuatro

átomos de oxígeno y tiene una carga negativa de tres

Entonces, el fosfato u ortofosfato, es una medida de la cantidad de moléculas

de ortofosfato (PO4 -3) en una muestra. Mientras que el fósforo u ortofosfato
como fósforo (PO4-P), es una medida de la cantidad de iones de fósforo (P) en
una muestra. Esto significa que cuando se mide el fosfato, los cuatro átomos
de oxígeno unidos al átomo de fósforo se incluyen en la medición, mientras que
al medir el fósforo no se incluyen.

La mayoría de las pruebas de fosfato o fósforo son en realidad una medición

del ortofosfato, también conocido como fósforo reactivo.

Sin embargo, es posible convertir fácilmente entre las dos medidas con una
simple multiplicación o división. Para convertir un resultado de fósforo (P) a
fosfato (PO4³-) simplemente necesita multiplicar por 3.06. Por el contrario, para
convertir de fosfato a fósforo, solo necesita dividir por 3.06. La razón por la que
esto funciona es porque la molécula de ortofosfato (PO4) es aproximadamente
3.06 veces más pesada que el átomo de fósforo (P).
Para los fines de medir el fosfato, se puede dividir en tres categorías:
ortofosfatos, fosfatos condensados y fosfatos orgánicos. Sin embargo, la única
forma de fosfato que realmente se mide colorimétricamente es el ortofosfato.
Todas las demás formas deben convertirse en ortofosfato para que se produzca
la reacción colorimétrica.

Para medir los fosfatos condensados o los fosfatos orgánicos, deben

convertirse en ortofosfatos. Esto se realiza mediante digestión con un ácido y/u
oxidante a una temperatura muy alta usando un digestor de bloques
ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN MOLECULAR EN EL VISIBE
Fundamento de método e importancia de la Solución Reductora:
Importancia de la Solución Reguladora:
Los ácidos molíbdicos formados cuando un exceso de molibdato reacciona en
solución ácida con fosfato, silicato, germanato y otros oxo-aniones, son la base
de otros métodos sensibles utilizados para la determinación del elemento
correspondiente. Para la determinación de Fósforo la reacción es la siguiente:
7H3PO4+12((NH4)6Mo7O24H2O) ----------→7(NH4)3(PO4(MoO3)12)+51OH-
+33H2O+51NH4+

El complejo de Fosfomolibdato tiene una mezcla de Mo+5 y Mo+6, su

composición es indefinida. Este complejo es reducido a un compuesto azul
soluble cuya absorbancia es medida espectrofotométricamente a una longitud
de onda de 830nm y es proporcional a la cantidad de Fósforo presente en la
muestra. Varios agentes reductores se han utilizado para este fin, entre ellos el
Cloruro Estañoso, agentes orgánicos como el ácido 1-amino-2-naftol-4-
sulfónico más Sulfito de Hidroquinona. Recientemente se ha utilizado el Ácido
Ascórbico con buenos resultados.
En la presente práctica se utilizará un método espectrofotométrico basado en la
reacción del Fósforo, presente en la muestra, con Molibdato de Amonio para
producir el complejo de color azul de fosfomolibdato; como agente reductor se
utilizará el Ácido Ascórbico.

III.- MATERIALES Y MÉTODOS.

3.1.- Equipos y Materiales.
 Balanza
 Espectrofotómetro
 Incubadora
 Matraces Aforados
 Vasos de Precipitados
 Pipetas de 2; 5 y 10ml
 Matraces
 Picetas
3.2. Reactivos:
 Fosfato diácido de Potasio (KH2PO4)
 Molibdato de Amonio (12(NH4)6Mo7O24H2O)
  Ácido Ascórbico
 Ácido Sulfúrico
 Agua Destilada

3.3.- Método – Procedimiento Experimental:

I. Preparación de Soluciones:
1. Preparación de 1Lt de la solución Stock de 100ppm de P2O5 a partir
de Fosfato Acido de Potasio (KH2PO4)
En un vaso de precipitados de 50ml pesar 0,1917g de Fosfato acido de
Potasio, disolverlos con agua destilada y trasvasar a un matraz aforado
de 1000ml, llevando a volumen con agua destilada.
2. Preparación de la solución de trabajo:
Preparar 100ml de una solución cuya concentración sea de 4ppm de
P2O5 a partir de la Solución Stock. Aplicando la ecuación de dilución.
C1V1=C2V2
3. Preparación de la Solución Reductora:
La Solución Reductora se compone de 3 reactivos:
a. 0.7800gr de Molibdato de Amonio en 39ml de agua destilada.
b. 1.0560gr de ácido Ascórbico en 60ml de agua destilada.
c. 11ml de H2SO4 concentrado en 125ml de agua destilada.
Mezclar a, b, c y aforar a 250ml con agua destilada.
4. Preparación de la Curva de Calibración:

a. Preparar 5 estándares, correspondientes a 0.4, 0.8, 1.2, 1.6 y 2ppm de

P2O5 a partir de la solución de Trabajo (4ppm), para un volumen final de
10ml de acuerdo a lo siguiente:
• Al volumen calculado agregar 4ml de la Solución Reductora y
aforar a 10ml con agua destilada.
b. Llevar a temperatura de 50°C durante 45minutos.
c. Medir las Absorbancias a 830nm, previa calibración con el blanco (agua
destilada).
 Cálculos:
Preparación de la solución Stock de 100ppm de P2O5 a partir de Fosfato
Acido de Potasio (1000ml)
Preparación de la solución de trabajo:
Preparar 100ml de una solución cuya concentración final sea de 4ppm a partir
de la Solución Stock. Aplicando la ecuación de dilución. C 1V1=C2V2
Preparación de la Curva de Calibración:
Preparar 5 estándares, correspondientes a 0.4, 0.8, 1.2, 1.6 y 2ppm a partir de
la solución de Trabajo (4ppm)
II. Tratamiento de la Muestra:

a. Considerar como muestra refrescos de Coca Cola, Pepsi, Black

desgasificados.
b. En un vaso de precipitados calentar aproximadamente 100ml de
refresco sin llegar al punto de ebullición.
c. Enfriar y extraer 1ml de refresco desgasificado y colocarlo a una fiola de
50ml, aforar con agua destilada. (solución de refresco diluído).
d. Medir 1ml de la solución diluida y añadir 4ml de Solución Reductora y
aforar a 10ml con agua destilada.
e. Llevar a temperatura de 50°C durante 45 minutos.
f. Medir la Absorbancia de la muestra a 830nm.
g. Realizar los Cálculos Analíticos.

V. TABLA DE PRESENTACIÓN DE RESULTADOS

Estanda Concentración Concentración Absorbancia A
r P2O5 (ppm) P2O5 (mol/Lt) λ = 830nm
ℰ¿ bC
Lmol-1cm-1

1 0.4 0.362
2 0.8 0.723
3 1.2 1.043
4 1.6 1.342
5 2 1.622
b = 2.54cm Muestra 1.438
Determinar la Concentración de la muestra con la ecuación de Lamber y Beer:

A
C=
E b

Expresión de resultados:
Mediante ley de Lamber y Beer y mediante Curva de calibración.
Realizar los cálculos para expresarlos en ppm o mg/Lt de gaseosa como P 2O5;
P y H3PO4

VI. ANÁLISIS DE RESULTADOS

VII. OBSERVACIONES

VII. CONCLUSIONES

VIII. RECOMENDACIONES

CUESTIONARIO
1. En la determinación de fósforo – fosfato se encuentra el método
molibdovanadato, método de aminoácidos y método del ácido ascórbico.
Describir los métodos e indicar las diferencias y aplicaciones.
2. Las referencias para la determinación de fósforo lo pueden llevar a las
determinaciones de ortofosfatos, fosfatos condensados y fosfatos
orgânicos ¿Cuáles serían las diferencias en la metodologia analítica?
3. ¿Cuáles son las diferencias entre el método fosfo molibovanadato y el
método seguido en laboratorio N°5?