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UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA EDUCACIÓN


PROGRAMA LICENCIATURA EN CIENCIAS NATURALES Y EDUCACIÓN AMBIENTAL
GENÉTICA
2021-II

Actividad práctica N°2: extracción de DNA por métodos


caseros
Profesora: Marleny Salazar Salazar

Auxiliar:

Objetivos
 Indaga métodos caseros de extracción de DNA
 Propone situaciones problema que propenden al desarrollo de
experimentos
 Crea modelos que permitan dar explicación a fenómenos biológicos
 Resuelve problemas con la ayuda de experimentos propuestos y modelos
planteados
 Valorar la importancia de conocer la estructura y función del material
genético.

Introducción
La vida depende de la capacidad de las células para almacenar, recuperar y traducir las
instrucciones genéticas necesarias para generar y mantener un organismo vivo. Esta
información hereditaria se pasa de una célula a sus hijas durante la división celular y, en
los organismos multicelulares, de generación en generación a través de las células
germinales. Las instrucciones se almacenan dentro de toda célula viva en sus genes, los
elementos portadores de información que determinan las características de una especie
en conjunto y de los individuos dentro de ella (Alberts et al, 2011).

El DNA es un doble helicoide de unos 2,5 nm de ancho, tal como demostraron Watson y
Crick utilizando difracción de rayos X. Cada cadena consiste en la repetición de un grupo
formado por tres elementos: bases, pentosa y radical PO4. Las bases son cuatro: dos
bases púricas, adenina (A) y guanina (G), y dos bases pirimídinicas: timina (T) y citosina
(C). La pentosa es la desoxirribosa. Ambas cadenas se disponen en sentido contrario,
esto es, son antiparalelas. En el doble helicoide las bases se disponen enfrentadas: A con
T y C con G (Paniagua et al, 2007).

Cada región del DNA que produce una molécula de RNA funcional se denomina gen.
Cada gen puede tener unos 100 000 pares de bases (pb), aunque hay genes de hasta

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dos millones de pb. La totalidad de la información génica contenida en la cromatina se


denomina genoma. El genoma humano es de unos 6 x pares de bases (Paniagua et
al, 2007).

Actividades a desarrollar
Actividad de indagación

La siguiente actividad es individual. Consiste en proponer un método de extracción de


DNA casero que puede ser de frutas o de tejido animal. Compare su método de
extracción con el de sus compañeros de grupo (que debe tener como máximo 4
integrantes). Establezca la importancia de cada uno de los reactivos que necesita para el
proceso de extracción de DNA.

Tenga en cuenta, que debe proponer lo siguiente en torno a la enseñanza de la genética:

1. Pregunta problema
2. Objetivos
3. Justificación
4. Procedimiento
5. Resultados y su interpretación (anexe una fotografía de sus resultados (el
recipiente que contiene la extracción debe estar rotulado con la fecha de su
realización)).

Estos cinco puntos deben estar resueltos en una hoja de Word.

Actividad de análisis

Esta actividad es grupal.

1. Establezca una relación entre lo que obtuvo en la extracción de DNA y el modelo


de condensación. Determine en qué estado de condensación se podría encontrar
la cromatina extraída.

2. Responda:
a. ¿Qué aspectos de su estructura contribuyen a la estabilidad de la molécula de
DNA?
b. ¿Por qué el RNA es menos estable que el DNA? Explique.

3. Suponga que cada una de las bases del DNA fueran capaces de aparearse con
cualquier otra base. ¿Qué efecto tendría esta capacidad sobre la aptitud del DNA
para servir como fuente de información genética? Explique su respuesta.

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4. Un virus contiene 10% de adenina, 24% de timina, 30% de guanina y 36% de


citosina. ¿Cómo es el material genético de este virus: DNA de cadena doble, DNA
de cadena simple, RNA de cadena doble o RNA de cadena simple? Justifique su
respuesta.

5. Luisa, Manuela y Alejandra son tres amigas y están en grado octavo. Un día,
estaban es clase de ciencias, trabajando el tema de los cromosomas. Intentaban
aclarar por qué los cromosomas se ven dobles cuando se observan en el
microscopio. El profesor les solicito que se organizaran en grupos de tres, para
que discutieran sobre esta situación. Luisa, Manuela y Alejandra se organizaron y
empezaron a dar sus puntos de vista:

-Alejandra: los cromosomas cuando la célula no se va a dividir están dobles, es


decir, cada cromosoma consta de dos cromátidas, si la célula decide dividirse,
cada cromátida se duplica, pero estas fibras son tan pequeñas que no se observan
en el microscopio, pero los cromosomas siempre van a estar dobles.

-Luisa: estoy de acuerdo contigo Aleja, en que los cromosomas siempre están
dobles en la célula, pero cuando la célula se va a dividir se separan las cromátidas
de cada cromosoma. Cuando ocurre esto en cada célula hija el cromosoma se
duplica quedando así con sus dos cromátidas.

-Manuela: no estoy de acuerdo con ustedes. Cuando una célula no se va a dividir


los cromosomas no están dobles. Si la célula decide dividirse, entonces el
cromosoma se duplica, quedando así con dos cromátidas, que luego se
distribuirán, una a cada lado de la célula.

-Luisa: qué barbaridad dices Manu. Si fuera como tú dices, las células tendrían
alteraciones, como un número desigual de cromosomas. Ellos en la célula,
siempre deben estar dobles.

-Alejandra: estoy de acuerdo con Luisa, Manuela. El modelo que tú propones no


es viable, pero como lo propones tú Luisa, tampoco es viable. Los cromosomas
deben duplicarse antes de la división celular, no después.

-Manuela: apoyo la idea de Alejandra de que los cromosomas deben duplicarse


antes de la división celular, pero lo que propones Aleja es inviable, porque eso
significaría que en cada cromosoma habrían cuatro moléculas de DNA y si eso
ocurre, las células hijas quedarían con más información genética que las células
madre.

Las tres estudiantes no lograron ponerse de acuerdo y cada una defendía su idea.

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¿Quién tiene la razón?

Ayude a las tres estudiantes a resolver este problema.

6. ¿Cuáles son algunas de las principales consecuencias genéticas de la estructura


del DNA?

7. Establezcan la relación que existe entre cromosoma, gen, alelo, locus,


heterocigoto, homocigoto, cromosoma homólogo y cromátida hermana.

8. Responda:

a. ¿Cuáles son las excepciones a la norma general de que el DNA es el material


genético de todos los organismos?
b. ¿Qué evidencias apoyan estas excepciones?

Bibliografía citada
- Alberts, B., Bray, D., Hopkin, K., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K y
Walter, P. (2011). Introducción a la biología celular. Tercera edición. Editorial
Médica Panamericana.
- Paniagua, R., Nistal, M., Sesma, P., Álvarez-Uría, M., Fraile, B., Anadón, R y J.
Sáez, F. (2007). Citología e histología vegetal y animal: Biología celular, volumen
1. Cuarta edición. McGRAW-HILL Interamericana.

Bibliografía básica
- Curtis, H., Barnes, N., Schnek, A y Massarini, A. (2008). Biología. Séptima edición.
Editorial Médica Panamericana.
- Griffiths, A., Miller, J., Suzuki, D., Lewontin, R y Gelbart, W. (2002). Genética.
Séptima edición. McGraw-Hill, interamericana.
- Klug, W., Cummings, M y Spencer, C. (2006). Conceptos de genética. Octava
edición. Pearson Educación. Madrid.
- Klug, W., Cummings, M., Spencer, C y Palladino, M. (2013). Conceptos de
genética. Décima edición. Pearson Educación. Madrid.

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Anexos
Protocolos de extracción de DNA de frutas y de tejido animal.

Materiales
Biológicos:

 Una fruta por cada estudiante que puede ser: banano, manzana kiwi, o la
fruta de su preferencia (la fruta la deben llevar solo los estudiantes que van a
realizar la extracción con este material).
 Dos hígados de pollo (el hígado lo deben llevar solo los estudiantes que van
a realizar la extracción con este material y también deben llevar ablanda
carnes).

Equipos:

 Baño María
 Balanza

Reactivos:

 Etanol frio
 Sal de mesa
 Detergente líquido
 Hielo

Otros

 Probetas
 Pipetas
 Embudos
 Papel filtro
 Cuchillos
 Tubos de ensayo
 Beackers
 Bandejas
 Mortero
 Papel absorbente

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 Guantes (obligatorio) y tapabocas (opcional).

Procedimiento
Extracción de DNA en frutas

1. Preparar solución de extracción de DNA: disuelve 2g de sal en 90ml de agua en


un vaso de precipitados. Luego agrega 10ml del detergente líquido y agita muy
suavemente con el agitado
2. Pelar la fruta de su elección y picarla en pedazos pequeños.
3. En una balanza pesar 30g de la fruta, luego en un mortero triturar hasta obtener
un puré fino.
4. Colocar el puré de la fruta en un vaso de precipitados.
5. Verter la solución de extracción de DNA sobre el puré de la fruta, de forma que el
volumen total de fruta y líquido sea aproximadamente el doble del puré de fruta
solo.
6. Preparar un baño de agua caliente, colocando agua (aprox. a 80°C) hasta una
profundidad entre 5 y 8 cm. Revisar la temperatura con el termómetro y agregar
agua fría hasta que obtengas una temperatura de 60°C. Si cuenta con una parrilla
de calentamiento, colocar sobre ella el baño, de manera que pueda controlar una
temperatura constante de 60° C. Si no cuenta con la parrilla tendrá que ajustar con
agua caliente cada 5 minutos.
7. Colocar el vaso de precipitados con la fruta y la solución de extracción en el baño
de agua caliente y dejar que incube por 10 o 15 minutos. Agitar la solución
ocasionalmente para distribuir el calor.
8. Después de los 10 a 15 minutos transcurridos, transferir el vaso que contiene la
fruta al baño de hielo. Permitir que repose allí por 5 minutos, agitando
ocasionalmente a medida que se enfría.
9. Mientras se enfría la mezcla de extracción, montar el dispositivo de filtración. Este
consiste del embudo que se coloca sobre un vaso de precipitados de 500 ml, con
el papel filtro doblado y humedecido. Ayúdese de un soporte universal y de anillo
metálico.
10. Colocar la mezcla de extracción enfriada en el embudo. Permitir que el líquido se
filtre por unos 5 minutos.
11. Agregar unos 5 ml del filtrado en un tubo de ensayo.

Precipitación del DNA

1. Con mucho cuidado, dejar escurrir por las paredes del tubo 10 ml de etanol frío (lo
más frío que se pueda tener) sobre el filtrado. También puede agregarse el alcohol
por medio de un gotero, dejando resbalar las gotas con el gotero inclinado.

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2. Colocar el tubo de ensayo en la gradilla. Observar lo que sucede en el tubo de


ensayo en la interfase entre el alcohol y el filtrado. Anotar sus observaciones.
3. Permitir que la disolución repose por dos minutos, sin moverla. Se formará un
precipitado blanco en la interfase con el alcohol. Éste es el DNA, y aparece como
una sustancia resbalosa, como una especie de mucosa blanca.

Extracción de DNA hígado de pollo

1. Homogenizar el tejido animal: para esto deposite los hígados de pollo en el


mortero con agua destilada y el ablanda carnes.
2. Agregar la solución de extracción: volumen igual de NaCl al 10% y luego agregar
una cucharada de jabón.
3. Llevar a baño María por 10 minutos.
4. Luego llevar a baño con hielo por 5 minutos.
5. Filtrar en tubo de ensayo.
6. Agregar alcohol por las paredes del tubo para precipitar el DNA.

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