10

11

5. RESULTADOS

5.1 Ionización del ácido glutámico

Tabla 2. Ecuación de ionización del ácido glutámico

Ionización
del ácido
glutámico

Fuente: Martinez G., J. J. (s.f.). “Curvas de titulación de los aminoácidos”. [en línea]. Recuperado de:
https://libroelectronico.uaa.mx/capitulo-4-aminoacidos-y/curvas-de-titulacion-de-los.html

5.2 Curvas de titulación del glutamato monosódicos

Gráfica 1. Curva de titulación del ácido glutámico con ácido clorhídrico.

CURVA DE TITULACIÓN DEL GLU CON HCL

12
10
8
PH

6
4
2
0
5.8
6.2
0.4
0.8
1.2
1.6

2.4
2.8
3.2
3.6

4.4
4.8

5.4

6.6

7.4
7.8
8.2
8.6

9.2
9.6

16.15
10.4
10.8
11.2
11.6

12.4
12.8
13.2
13.6

14.4
14.8
15.2
15.3
15.4
15.8
10

12

14
2

VOLUMEN DE HCL AGREGADO (ML)

Fuente: Elaboración propia. Datos calculados, tabla 8.

La gráfica 1 simboliza la curva de titulación del glutamato monosódico con ácido

clorhídrico. En el eje vertical están los valores de pH obtenidos durante la práctica,
mientras que en el eje horizontal figuran los volúmenes a los cuales se obtuvieron los
potenciales de hidrógeno correspondientes.
 12

5.3 Determinación de las constantes de disociación del ácido glutámico

gráficamente a través del método de derivadas

Gráfica 2. Curva de titulación del ácido glutámico y constantes de disociación del ácido
glutámico.

CONSTANTES DE DISOCIACIÓN DEL ÁCIDO

GLUTÁMICO
Titulación GLU ∆pH/∆V ∆(∆pH/∆V)/∆V

12
11
10 pKa3 = 9,45
9
8
7
PH

6
5 pKa2 = 4,02
4 pKa1 = 2,78
3
2
1
0
2

10

12

14
10.4
10.8
11.2
11.6

12.4
12.8
13.2
13.6

14.4
14.8
15.2
15.3
15.4
15.8
2.8

5.8

16.15
0.4
0.8
1.2
1.6

2.4

3.2
3.6

4.4
4.8

5.4

6.2
6.6

7.4
7.8
8.2
8.6

9.2
9.6

VOLUMEN DE HCL AGREGADO (ML)

Fuente: Elaboración propia. Datos calculados, tabla 8.

La gráfica 2 contiene la curva de titulación del ácido glutámico y las curvas de la

primera y segunda derivada de la titulación. En la curva de “Titulación GLU” se marcan
tres puntos en color amarillo, los cuales representan las constantes de disociación
experimentales obtenidas en la práctica.
 13

Tabla 3. Constantes de disociación teóricas y experimentales; y análisis de error.

Valor teórico Valor experimental Error porcentual
pKa1 2,0100 2,7800 38,3085
pKa2 4,0700 4,0200 1,2285
pKa3 9,470 9,4500 0,2119

Fuente: Elaboración propia. Datos calculados, tabla 5.

5.4 Determinación gráfica del punto isoeléctrico a partir del método de derivada

Gráfica 3. Punto isoeléctrico de la curva de titulación del ácido glutámico con ácido
clorhídrico.

PUNTO ISOELÉCTRICO DEL ÁCIDO

GLUTÁMICO
Titulación GLU ∆pH/∆V ∆(∆pH/∆V)/∆V

4.5
4
pI = 3,39
3.5
3
2.5
PH

2
1.5
1
0.5
0
10 10.4 10.8 11.2 11.6 12 12.4 12.8 13.2 13.6 14
VOLUMEN DE HCL AGREGADO (ML)

Fuente: Elaboración propia. Datos calculados, tabla 8.

En la gráfica 3 se ubica el punto isoeléctrico obtenido experimentalmente a través de la

titulación. La curva de la primera y segunda derivada también están presentes en la
misma, puesto que definen la posición del punto isoeléctrico. La gráfica es un
acercamiento a los puntos situados en un rango delimitado por las primeras dos
constantes de disociación del ácido glutámico.
 14

Tabla 4. Punto isoeléctrico teórico y gráfico (experimental) y error porcentual.

Punto isoeléctrico teórico Punto isoeléctrico experimental Error porcentual (%)
3,2200 3,3900 5,2795

Fuente: Elaboración propia. Datos calculados, tabla 6.

5.5 Regiones y formas iónicas del ácido glutámico presentes en el proceso de

titulación

Gráfica 4. Regiones y formas iónicas del ácido glutámico presentes en el proceso de

titulación con NaOH.

12

11

10

7
PH

0
0.4
0.8
1.2
1.6

2.4
2.8
3.2
3.6

4.4
4.8

5.4
5.8
6.2
6.6

7.4
7.8
8.2
8.6

9.2
9.6

15.8
16.15
10.4
10.8
11.2
11.6

12.4
12.8
13.2
13.6

14.4
14.8
15.2
15.3
15.4
2

10

12

14
4

VOLUMEN DE HCL AGREGADO (ML)

Fuente: Elaboración propia. Datos calculados, tabla 8.

 15

La gráfica 4 es una representación de las formas iónicas, dividas en regiones, del ácido
glutámico que se presentan durante la titulación. La gráfica también como puntos
marcados las constantes de disociación (en color amarillo) y el punto isoeléctrico (punto
rojo). Como agregado, también se demuestra la zona de tamponación cerca de cada
pKa.
20
 21

8. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

8.1 Ballestero, R. F., Guerra, L., Quintana, J. F., Ramírez, MSc. J., Vázquez, Y. G., &
Vázquez, Y. “Caracterización fisicoquímica y contenido de proteínas de extractos
fluidos del ostión de mangle (Crassostrea rizophorae)”. Revista Cubana de Química,
volumen XXVI, Nº1. Cuba, 2014. Recuperado el [31/07/2021] de
http://scielo.sld.cu/pdf/ind/v26n1/ind09114.pdf

8.2 Carey, F. A. “Química Orgánica”. Traducido del inglés. Sexta edición. Editorial
McGrill Hill. México, 2006. Págs.: 1130, 1132-1133

8.3 McCurry, J. “”Química Orgánica”. Traducido del inglés. Onctava edición. Editorial
Cengage Learning. México, 2012. Págs.: 1047, 1051.

8.4 McKee, J. R. & McKee, T. “Bioquímica: la base molecular de la vida”. Traducido del
inglés. Tercera edición. España, 2003. Págs.: 112-113, 118.

8.5 Rosero Bernal, A. M. “Obtención y purificación de ácido glutámico a partir de

hidrolizados de raquis de palma africana (Elaeis guineensis), por fermentación con
la bacteria Corynebacterium glutamicum ATTC 13032”. Universidad de Nariño,
Facultad de ciencias exactas y naturales. Colombia, 2017. Pág.: 24. Recuperado el
[29/07/2021] de https://core.ac.uk/download/pdf/147430544.pdf

8.6 Wade, L.G. Jr. “Química Orgánica. Volumen 2”. Traducido del inglés. Séptima
edición. Editorial Pearson Educación. México, 2011. Págs.: 1154-1155, 1159-1160
 22

9. APÉNDICE

10.1 Hoja de datos originales

23
 24

10.2 Muestra de cálculo/preparación de reactivo

10.2.1 Preparación de 50 ml de glutamato sódico a 1M

1 𝑚𝑜𝑙 169,11 𝑔
0.050 𝐿 ( )( ) = 𝟖, 𝟒𝟓𝟓𝟓 𝒈 𝑪𝟓 𝑯𝟖 𝑵𝑵𝒂𝑶𝟒
1𝐿 1 𝑚𝑜𝑙

10.2.2 Preparación de 50 ml de hidróxido de sodio 1 M

1 𝑚𝑜𝑙 39,997 𝑔
0.050 𝐿 ( )( ) = 𝟏, 𝟗𝟗𝟗𝟗 𝒈 𝑵𝒂𝑶𝑯
1𝐿 1 𝑚𝑜𝑙

10.2.3 Preparación de 50 ml de ácido clorhídrico 1M.

1 𝑚𝑜𝑙 36,46 𝑔 1 𝑚𝑙
0.050 𝐿 ( )( )( ) = 𝟏, 𝟔𝟐𝟕𝟕 𝑯𝑪𝒍
1𝐿 1 𝑚𝑜𝑙 1,120 𝑔

10.2.4 Punto isoeléctrico teórico

𝑝𝐾𝑎1 + 𝑝𝐾𝑎2
𝑃𝐼 = [𝟏]
2
donde:
𝑃𝐼: Punto isoeléctrico
𝑝𝐾𝑎1: Primera constante de disociación ácida del compuesto
𝑝𝐾𝑎2: Segunda constante de disociación ácida del compuesto
 25

Para el ácido glutámico, donde pKa1 = 2,19 y pKa2 = 4,25 , el punto

isoeléctrico está determinado por:
𝑝𝐾𝑎1 + 𝑝𝐾𝑎2 2,19 + 4,25
𝑃𝐼 = = = 𝟑, 𝟐𝟐𝟎𝟎
2 2

10.2.5 Punto isoeléctrico a través del método de la primera y segunda derivada

10.2.5.1 Volumen promedio
𝑉1 + 𝑉0
𝑉̅ = [𝟐]
2
donde:
𝑉̅ : volumen promedio (ml)
𝑉1: volumen siguiente o final en una repetición (ml)
𝑉0: volumen anterior o inicial en una repetición (ml)

Para la hoja de datos originales, en la titulación del ácido glutámico con

NaOH donde V0 = 0.2 y V1 = 0.4, el volumen promedio está determinado por:
0,2 + 0,4
𝑉̅ = = 𝟎, 𝟑𝟎𝟎𝟎
2

10.2.5.2 Primera derivada para la curva de titulación (pH/V)

∆𝑝𝐻 𝑝𝐻1 − 𝑝𝐻0
= [𝟑]
∆𝑉 𝑉1 − 𝑉0
donde:
∆𝑝𝐻⁄
∆𝑉: primera derivada
𝑝𝐻1 : pH siguiente o final en una repetición
𝑝𝐻0 : pH anterior o inicial en una repetición
𝑉1: volumen siguiente o final en una repetición (ml)
𝑉0: volumen anterior o inicial en una repetición (ml)

Para la hoja de datos originales, en la titulación del ácido glutámico con

 26

NaOH donde V0 = 0,2 , V1 = 0,4 , pH0 = 8,25 , y pH1 = 8,61 , la primera

derivada (entre las primeras dos repeticiones) está determinada por:
∆𝑝𝐻 𝑝𝐻1 − 𝑝𝐻0 8,61 − 8,25
= = = 𝟏, 𝟖𝟎𝟎𝟎
∆𝑉 𝑉1 − 𝑉0 0,4 − 0,2

10.2.5.3 Segunda derivada para la curva de titulación (pH/V)

∆𝑝𝐻⁄ ∆𝑝𝐻⁄ ∆𝑝𝐻⁄
∆( ∆𝑉 ) = ( ∆𝑉 )1 − ( ∆𝑉 )0 [𝟒]
∆𝑉̅ 𝑉̅1 − 𝑉̅0
donde:
∆𝑝𝐻⁄ ̅
∆( ∆𝑉)⁄∆𝑉: segunda derivada
∆𝑝𝐻⁄
( ∆𝑉 )1: primera derivada siguiente o final en una repetición
∆𝑝𝐻⁄
( ∆𝑉 )0 : primera derivada anterior o inicial en una repetición
𝑉̅1: volumen promedio siguiente o final en una repetición (ml)
𝑉̅0: volumen promedio anterior o inicial en una repetición (ml)

Para la hoja de datos originales, en la titulación del ácido glutámico con

∆pH⁄ ∆pH⁄ ̅ ̅
NaOH donde ( ∆V)1 = 1,8 , ( ∆V)0 = 1,075 , V1 = 0,6 y V0 = 0,3 , la
segunda derivada (entra las primeras dos repeticiones) está determinada por:
∆𝑝𝐻⁄ ∆𝑝𝐻⁄ ∆𝑝𝐻⁄
∆( ∆𝑉) = ( ∆𝑉 )1 − ( ∆𝑉)0 = 1,075 − 1,8 = −𝟐, 𝟒𝟏𝟔𝟔
̅̅̅̅
∆𝑉̅ 𝑉̅1 − 𝑉̅0 0,6 − 0,3

10.2.6 Análisis de error

10.2.6.1 Porcentaje de error

|𝑣𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑎𝑝𝑟𝑜𝑥. −𝑣𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑒𝑥𝑎𝑐𝑡𝑜|

%𝑒𝑟𝑟𝑜𝑟 = ∗ 100 [𝟓]
𝑣𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑒𝑥𝑎𝑐𝑡𝑜

donde:
%𝑒𝑟𝑟𝑜𝑟: error porcentual (%)
 27

𝑣𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑎𝑝𝑟𝑜𝑥.: valor aproximado o calculado

𝑣𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑒𝑥𝑎𝑐𝑡𝑜: valor exacto o teórico

Para la primera constante de disociación del ácido glutámico el valor teórico

es 2,01, mientras que el valor obtenido experimentalmente es 2,78. El error
porcentual está determinado por:
|𝑣𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑎𝑝𝑟𝑜𝑥. −𝑣𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑒𝑥𝑎𝑐𝑡𝑜| |2,78 − 2,01|
%𝐸 = ∗ 100% = ∗ 100% = 𝟑𝟖, 𝟑𝟎𝟖𝟓%
𝑣𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑒𝑥𝑎𝑐𝑡𝑜 2,01

10.2.7 Datos calculados

Tabla 5. Constantes de disociación del ácido glutámico teórico y experimental

(determinado gráficamente), y error porcentual.
Valor teórico Valor experimental Error porcentual (%)
pKa1 2,0100 2,7800 38,3085
pKa2 4,0700 4,0200 1,2285
pKa3 9,470 9,4500 0,2119

Fuente: Muestra de cálculo, ecuación 5.

Tabla 6. Punto isoeléctrico teórico y experimental (determinado gráficamente), y error

porcentual
Punto isoeléctrico
Punto isoeléctrico teórico Error porcentual (%)
experimental
3,2200 3,3900 5,2795

Fuente: Muestra de cálculo; ecuación 1 y 5, y hoja de datos originales.

Tabla 7. Primera y segunda derivada para los datos sobre titulación de la solución de
ácido glutámico y hidróxido de sodio, con ácido clorhídrico.
Volumen Primera derivada Segunda derivada
de NaOH Volumen Volumen
pH
agregado promedio ∆pH/∆V promedio ∆(∆pH/∆V)/∆V
(ml) (ml) (ml)
 28

0,2 8,25 - - - -
0,4 8,61 0,3 1,8 - -
0,8 9,04 0,6 1,075 0,45 -2,416666667
1,2 9,17 1 0,325 0,8 -1,875
1,6 9,39 1,4 0,55 1,2 0,5625
2 9,47 1,8 0,2 1,6 -0,875
2,4 9,61 2,2 0,35 2 0,375
2,8 9,71 2,6 0,25 2,4 -0,25
3,2 9,79 3 0,2 2,8 -0,125
3,6 9,86 3,4 0,175 3,2 -0,0625
4 9,95 3,8 0,225 3,6 0,125
4,4 10,01 4,2 0,15 4 -0,1875
4,8 10,1 4,6 0,225 4,4 0,1875
5,2 10,18 5 0,2 4,8 -0,0625
5,6 10,32 5,4 0,35 5,2 0,375
6 10,4 5,8 0,2 5,6 -0,375
6,4 10,49 6,2 0,225 6 0,0625
6,8 10,58 6,6 0,225 6,4 1,249E-15
7,2 10,71 7 0,325 6,8 0,25
7,6 10,83 7,4 0,3 7,2 -0,0625
8 11 7,8 0,425 7,6 0,3125
Fuente: Muestra de cálculo, ecuación 2, 3 y 4.

Tabla 8. Primera y segunda derivada para los datos sobre titulación del ácido glutámico
con ácido clorhídrico.
Volumen Primera derivada Segunda derivada
de HCl Volumen Volumen
pH
agregado promedio ∆pH/∆V promedio ∆(∆pH/∆V)/∆V
(ml) (ml) (ml)
0,4 10,85
0,8 10,68 0,6 -0,425 ∆(∆pH/∆V)/∆V
1,2 10,55 1 -0,325 0,8 0,25
1,6 10,42 1,4 -0,325 1,2 -1,15186E-14
2 10,26 1,8 -0,4 1,6 -0,1875
2,4 10,14 2,2 -0,3 2 0,25
2,8 10,05 2,6 -0,225 2,4 0,1875
3,2 9,97 3 -0,2 2,8 0,0625
3,6 9,86 3,4 -0,275 3,2 -0,1875
4 9,77 3,8 -0,225 3,6 0,125
4,4 9,67 4,2 -0,25 4 -0,0625
4,8 9,56 4,6 -0,275 4,4 -0,0625
 29

5 9,51 4,9 -0,25 4,75 0,083333333

5,4 9,45 5,2 -0,15 5,05 0,333333333
5,8 9,24 5,6 -0,525 5,4 -0,9375
6,2 9,08 6 -0,4 5,8 0,3125
6,6 8,78 6,4 -0,75 6,2 -0,875
7 8,07 6,8 -1,775 6,6 -2,5625
7,4 5,89 7,2 -5,45 7 -9,1875
7,8 5,2 7,6 -1,725 7,4 9,3125
8,2 4,87 8 -0,825 7,8 2,25
8,6 4,53 8,4 -0,85 8,2 -0,0625
9 4,35 8,8 -0,45 8,6 1
9,2 4,24 9,1 -0,55 8,95 -0,333333333
9,6 4,15 9,4 -0,225 9,25 1,083333333
10 4,02 9,8 -0,325 9,6 -0,25
10,4 3,85 10,2 -0,425 10 -0,25
10,8 3,71 10,6 -0,35 10,4 0,1875
11,2 3,6 11 -0,275 10,8 0,1875
11,6 3,42 11,4 -0,45 11,2 -0,4375
12 3,39 11,8 -0,075 11,6 0,9375
12,4 3,19 12,2 -0,5 12 -1,0625
12,8 3,14 12,6 -0,125 12,4 0,9375
13,2 3,02 13 -0,3 12,8 -0,4375
13,6 2,94 13,4 -0,2 13,2 0,25
14 2,78 13,8 -0,4 13,6 -0,5
14,4 2,57 14,2 -0,525 14 -0,3125
14,8 2,41 14,6 -0,4 14,4 0,3125
15,2 2,28 15 -0,325 14,8 0,1875
15,3 2,17 15,25 -1,1 15,125 -3,1
15,4 2,15 15,35 -0,2 15,3 9
15,8 2,06 15,6 -0,225 15,475 -0,1
16,15 1,78 15,975 -0,8 15,7875 -1,533333333
Fuente: Muestra de cálculo, ecuación 2, 3 y 4.
 30

10.3 Fotografías
Fotografía 1. Equipo armado para la titulación.

Fuente: (s.f.). Laboratorio de Química Orgánica 1 y 2 y Bioquímica, Edificio T-5. Área de Química de la
Escuela de Ingeniería Química, Facultad de ingeniería, Universidad de San Carlos de Guatemala.

Fotografía 2. Equipo armado para la titulación.

Fuente: (s.f.). Laboratorio de Química Orgánica 1 y 2 y Bioquímica, Edificio T-5. Área de Química de la
Escuela de Ingeniería Química, Facultad de ingeniería, Universidad de San Carlos de Guatemala.
 31

Fotografía 3. Titulación del ácido glutámico.

Fuente: (s.f.). Laboratorio de Química Orgánica 1 y 2 y Bioquímica, Edificio T-5. Área de Química de la
Escuela de Ingeniería Química, Facultad de ingeniería, Universidad de San Carlos de Guatemala.

Fotografía 4. Medición del pH durante la titulación del ácido glutámico.

Fuente: (s.f.). Laboratorio de Química Orgánica 1 y 2 y Bioquímica, Edificio T-5. Área de Química de la
Escuela de Ingeniería Química, Facultad de ingeniería, Universidad de San Carlos de Guatemala.