Prueba Fundamento
Catalasa La enzima catalasa descompone el H2O2 en H2O y O2. En un portaobjetos poner una colonia con un palillo. Agregar una gota
Coagulasa La coagulasa reacciona con la protombina en la sangre dando
origen a la estafilotrombina permitiendo que la proteasa
convierta el fibrinógeno en fibrina—coagulación de la sangre
A manitol salado Es selectivo por su concentración de sal inhibiendo bact gram-,
es diferencial por la presencia de manitol y del indicador de pH
(rojo de fenol). Las bact que fermentan manitol producen
ácidos (acidifica el medio-viraje).
Bacitracina Antibiótico que inhibe la síntesis de la pared celular y rompe la
membrana. Útil para diferenciar Streptococcus B hemolíticos(S)
de S. pyogenes(R) y a Staphylococcus (R) de Micrococcus (S)
DNAsa Presencia de la DNAsa. El ADN se encuentra altamente
polimerizado y es el sustrato de la enzima desoxirribonucleasas
(DNAsa), la cual lo hidroliza.
A.Bilis esculina Los MO hidrolizan la esculina liberando glucosa y esculetina. La
esculetina liberada se combina con los iones férricos del medio
formando un compuesto verde oliva-negro. La bilis de buey
inhibe la flora acompañante.
CAMP Los estreptococos del grupo B secretan el factor CAMP que
interactua con la β-hemolisina secretada por S. aureus y
produce esfingomielinasa C (se une a la memb de los eritroc)
que al unirse al factor CAMP provoca un sinergismo de la
hemólisis (punta de flecha)
NaCl 6.5% Capacidad de los enterococos de crecer en un medio de cultivo
líquido con NaCl al 6.5% y glucosa.
Agar Sangre Permite el crecimiento de MO exigentes y observar la hemólisis
Vogues Proskauer La glucosa puede ser metabolizada por los microorganismos, a
través de distintas vías metabólicas. Según la vía utilizada, se
Procedimiento/Resultados
de H2O2 al 3%. R: Burbujas +, Ausencia –
Lámina: preparar suspensión del MO, agregar una gota de plasma y
mezclar. Esperar 20s. R: Aglutinación: +, Ausencia – (hacer en tubo)
Tubo: Inocular un tubo de 0.5ml de plasma e incubar 37°C por 4 h
R: Coagulos +, Ausencia -
Sembrar por agotamiento e incubar a 37°C de 24 a 72 h.
Resultados:
Fermenta manitol: crecimiento y viraje amarillo.
No fermentador: crecimiento sin viraje.
Realizar una suspensión del MO a 0.5 McFarland, sembrar por
hisopado, colocar un disco impregnado con bacitracina 0.04U en el
centro, incubar con 5% de CO2 a 37°C por 24 h
R: Halo de inhibición (S), crecimiento ®
Sembrar densamente en agar DNAsa (centro), incubar 37°C por 24h.
Cubrir con HCl al 1N y observar. R: halo claro, transparente (+), No hay
halo (-).
Sembrar por agotamiento e incubar a 37°C por 24 h.
R: Ennegrecimiento (+), Ausencia ennegrecimiento (-)
Sembrar una estría de S. aureus y perpendicular hacer un estriado
(que no se toquen) del estreptococo. Incubar a 37°C por 24 horas en
5%CO2. R: La prueba positiva se evidencia por la presencia de una
zona de potenciación de la hemólisis en forma de puntas de flecha en
el lugar donde se contactan las dos estrías.
Inocular en caldo soya tripticasa con 6.5% NaCl con el MO. Incubar a
37°C por 24 h. R: Turbidez (+), Nada (-)
Inocular, incubar y observar la hemólisis.
Con un asa suspender una colonia en el medio. Incubar a 37°C por 24
h. Añadir 0.6ml de alfa-naftol al 5% en etanol absoluto y 0.2ml de KOH
 originarán productos finales ácidos (ácido láctico, ácido acético,
ácido fórmico), o productos finales neutros (acetil metil
carbinol). Esta diferencia en el metabolismo bacteriano, podría
ser reconocido al adicionar el indicador alfa-naftol e hidróxido
de potasio para evidenciar la presencia de productos finales
neutros, en el cual el medio se torna de color rojo indicando un
resultado positivo para la prueba.
Urea Algunas bacterias hidrolizan la urea por medio de la enzima
ureasa liberando amoníaco y dióxido de carbono. Las bacterias
capaces de hidrolizar la urea liberan amoniaco y producen un
cambio de color rosado en el medio. (Rojo de fenol)
Arginina Hidrólisis de la arginina por descarboxilación formando citrulina
por acción de la dihidrolasa. Anaeróbica (capa de aceite) El
proceso ocurre en dos etapas: por fermentación de la glucosa
se produce una acidificación del medio (pH < 6,0), apareciendo
color amarillo. La acidificación es necesaria para que ocurra la
decarboxilación. Este último proceso da lugar a la formación de
las aminas que elevan el pH con el consiguiente viraje del
indicador al color violeta.
Agar TSI El Tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la
producción de ácido sulfhídrico, el sulfato de hierro y amonio,
es la fuente de iones Fe3+, los cuales se combinan con el ácido
sulfhídrico y produce sulfuro de hierro, de color negro. El rojo
de fenol es el indicador de pH.
LIA (Lisina Hierro) La lisina es el sustrato utilizado para detectar la presencia de la
enzima descarboxilasa y desaminasa, el citrato de hierro y
amonio y el tiosulfato de sodio son los indicadores de la
producción de ácido sulfhídrico el púrpura de bromocresol
actúa como indicador de PH. El ambiente ácido favorece la
actividad enzimática descarboxilasa y se metaboliza la lisina a
al 40% a 2.5ml del cultivo. Agitar y dejar a temp ambiente de 10 a 15
min.
R: si vira a rojo (+), si no hay viraje (-)
Sembrar por estría en el bisel, incubar a 37°C por 24h.
R: si hay viraje a rosado (+), si no (-)
Suspender el MO en el medio. Incubar a 37°C por 24h.
R: Viraje a rosado (+), no hay (-)
Inocular el tubo con el MO, incubar a 37°C por 24 h y leer a las 2, 4, 6 y
18 h. Resultados: Amarillo: ácido, rojo: alcalino
Amarillo/amarillo: fermenta glucosa y lactosa
Rojo/amarillo: sólo fermenta glucosa
Rojo/rojo: no fermentador
Fondo negro: producción H2S
Burbujas o roturas: producción de gas
Inocular por punción y estría en el bisel. Incubar 24 h 37°C
R: (+) alcalinización (K) viraje morado en todo el tubo
Alcalino. Da como resultado alcalino/alcalino: pico púrpura y fondo
púrpura es decir que es capaz de descarbolixar la lisina, pero es
negativo para la producción de H2S.
(-): se observa acidificación (A) con viraje hacia el amarillo en la
 cadaverina y elevando el pH del medio tornando la violeta. ( columna del tubo, y alcalinización (color púrpura) en la zona inclinada.
RM (Rojo metilo) capacidad del MO de utilizar la vía butanodiólica de la glucosa,al Inocular el caldo RM e incubar a 37°C por 24-48h. Agregar 5 gotas de
agregar el reactivo revelador se forma una coloración rojiza por RM. R: (+) sigue rojo, (-) vira amarillo/naranja
la oxidación del acetilmetilcarbinol el cual reacciona con la
glucosa produciendo ácidos.
Simmons citrato A Medio utilizado para la diferenciación de enterobacterias en Inocular en superficie con estría. Incubar 24h 37°C
base a la capacidad de usar el citrato como única fuente de R: (+): azul y crecimiento (-) no hay cambio de color
carbono y energía
SIM Verificamos movilidad, producción de indol y de H2S. Sembrar por punción e incubar 37°C 24 h.
Ennegrecimiento del medio: producción de H2S.  Turbidez fuera del
área de siembra: el microorganismo es móvil.  Se le añade reactivo
de Kovacs para detectar presencia de Indol, dando un color rojo
A chocolate La hemólisis de los glóbulos rojos proporciona al medio el factor Observar morfología.
X (hemina) y el V (NAD) necesarios para el crecimiento de
algunos MO.
Gelatina Determinar la capacidad de un microorganismo de producir
enzimas de tipo proteolítico (gelatinasa) que hidrolizan la
gelatina o muestran cambios característicos debido a los
productos de degradación.