DETERMINACIÓN DE CLOROFILA

CASO:
Se plantea el análisis de Clorofila a y Clorofila b de muestras de pasto mediante espectrofotometría.
Para lo cual se realizaron curvas de calibración previas con patrones de Clorofila a y Clorofila b
diluidas en acetona 80% v/v.

Los espectros formados por los patrones de clorofila se muestran a continuación:

Clorofila a:

 Pico característico: 663 nm

 Ecuación: A663= 0.0014 + 81.91Ca + 10.33Cb

Clorofila b:

 Pico característico: 645 nm

 Ecuación: A663= -0.0143 + 17.11Ca + 45.60Cb

A partir de estas ecuaciones generadas por la curva de calibración desarrollada con los patrones de
clorofila a y b se analizaron las muestras de pasto.

TOMA Y TRATAMIENTO DE MUETSRAS:

Muestreo: Se tomaron muestras de tres locaciones distintas, tomando en cuenta un rango de una
hectárea para cada locación. Cada hectárea se dividió en cinco parcelas de las cuales se colectaron
las muestras

Tratamiento de muestra: Se cortaron las muestras en pequeñas piezas empleando tijeras.

Posteriormente se pesó 0.1 g de muestra, la cual se trasvasó a un mortero con acetona 80% v/v.
Una vez el líquido se tornó verde se filtró la mezcla. Este procedimiento se repitió hasta observar la
pérdida de color en la muestra. Finalmente, se realizaron disoluciones con el extracto y acetona 80%
v/v las cuales se analizaron por cuatriplicado con espectrofotometría UV-Vis.

DATOS OBTENIDOS
Una vez realizados los análisis de absorbancias a 645 nm y 663 nm, se emplearon las ecuaciones
resultantes de las curvas de calibrado para hallar la concentración de clorofila a y clorofila b, dichos
resultados se muestran a continuación:

LOCACIÓN 1

PARCELA Concentración Clorofila a (g/L) Concentración Clorofila b (g/L)

1 1.09 0.86 0.93 0.99 0.33 0.27 0.30 0.30

2 1.26 0.96 0.80 0.73 0.39 0.30 0.28 0.21
3 1.19 1.21 1.27 1.12 0.36 0.36 0.37 0.34
4 1.23 1.30 0.97 0.97 0.36 0.36 0.29 0.28
5 0.85 0.65 0.86 1.03 0.25 0.25 0.26 0.34
LOCACIÓN 2

PARCELA Concentración Clorofila a (g/L) Concentración Clorofila b (g/L)

1 1.02 0.93 0.98 1.06 0.27 0.31 0.30 0.25

2 1.48 1.57 1.59 1.51 0.51 0.55 0.48 0.56
3 0.99 0.94 1.06 1.08 0.33 0.30 0.26 0.28
4 1.01 0.88 0.95 0.97 0.26 0.33 0.31 0.25
5 1.08 1.02 1.03 0.96 0.37 0.34 0.28 0.30
LOCACIÓN 3

PARCELA Concentración Clorofila a (g/L) Concentración Clorofila b (g/L)

1 0.80 0.71 0.69 0.72 0.19 0.20 0.15 0.13

2 0.85 0.76 0.78 0.87 0.18 0.19 0.16 0.14
3 0.79 0.82 0.84 0.76 0.21 0.22 0.17 0.18
4 0.81 0.77 0.83 0.85 0.23 0.19 0.18 0.16
5 0.79 0.82 0.76 0.77 0.18 0.15 0.20 0.16

HIPÓTESIS

 La cantidad de Clorofila a y Clorofila b es la misma en todas las localidades

 ANÁLISIS DE COLORANTES ALIMENTICIOS
CASO:
Se analizaron los colorantes alimenticios FD&C Red #40 y FD&C Blue #1 mediante espectrometría
UV-Vis, existentes en dos productos comunes, Kool Aid (Red#40) y Powerade (Blue#1).

Se emplearon patrones apara una primera lectura de los colorantes, el resultado de este primer
barrido espectrofotométrico se muestra a continuación:

Red#40:

 Pico característico: 520 nm

Blue#1:

 Pico característico: 629.4 nm

 Coeficiente molar de extinción: 96.672 L mol-1 L-1
TOMA Y TRATAMIENTO DE MUESTRAS

Muestreo: Para el análisis de Red#40 se adquirió dos sobres de Kool-Aid sabor frutilla cada uno
proveniente de una tienda distinta. Para el análisis de Blue#1 se adquirió una botella de Powerade
de 990 ml.

Tratamiento de muestras:

 Kool-Aid: Se disolvió cada sobre en 2.00 L de agua, posteriormente, se midieron 276.5 ml

de esta solución concentrada para preparar 500 ml de disolución. Finalmente, se tomaron
20 alícuotas de esta dilución para ser analizadas en un espectrofotómetro UV-Vis.

 Powerade azul: Previamente se realizó una recta de calibrado con un patrón de Blue#1,
realizando diluciones en serie del patrón con agua y leyendo las mismas en un
espectrofotómetro UV-Vis. Posteriormente, mediante la Ley de Beer, se halló el coeficiente
molar de extinción (ɛ) para el colorante Blue#1.

Una vez realizada la curva de calibración, se tomaron cuatro alícuotas de Powerade las cuales se
analizaron en un espectrofotómetro UV-Vis para obtener la absorbancia y por medio de esta la
concentración de Blue#1. Una vez hallada la absorbancia se procedió a calcular el coeficiente molar
de extinción para cada medición.

DATOS OBTENIDOS
Kool-Aid:

Kool-Aid de frutilla

Alícuota Muestra 1 Muestra 2

1 1.606 1.599
2 1.600 1.598
3 1.601 1.597
4 1.598 1.598
5 1.600 1.597
6 1.600 1.597
7 1.599 1.598
8 1.598 1.601
9 1.598 1.596
10 1.598 1.597
11 1.598 1.596
12 1.598 1.596
13 1.597 1.596
14 1.598 1.596
15 1.597 1.596
16 1.598 1.596
17 1.596 1.596
18 1.597 1.597
19 1.597 1.595
20 1.597 1.595

Powerade Azul:

Longitud de Coeficiente molar

Absorbancia Concentración
Onda de extinción
(A) (M)
(nm) (L mol-1 L-1)

624 0.944 93.542 1.009E-05

626 0.966 95.281 1.014E-05
630 0.984 96.672 1.018E-05
632 0.978 94.586 1.034E-05

HIPÓTESIS

 Kool-Aid Frutilla: Las muestras tienen la misma cantidad de colorante Red#40

 Powerade Azul: La técnica empleada y el uso del coeficiente molar de extinción es adecuado
para medir la cantidad de Blue#1
 DETERMINACIÓN DE SODIO EN COMIDA
CHATARRA

CASO:
Se analizó el porcentaje de sodio en cuatro muestras de comida chatarra (Frituras) mediante
titulación y espectrometría de masas. Debido a que el estudio se realiza en base a muestras
heterogéneas se vio la necesidad de realizar réplicas de los análisis realizados. El diseño
experimental utilizado se muestra a continuación:

TOMA Y TRATAMIENTO DE MUESTRA

Muestreo: Se adquirieron cuatro bolsas de papas fritas provenientes del mismo restaurante.

Tratamiento de muestras: Se inició triturando y moliendo las papas fritas (S1-4), sin mezclar las
bolsas. Posteriormente se dividieron las muestras en dos para tener réplicas de cada bolsa, se
consideró la masa de cada réplica (SA1, SA2, SB1, etc.). Cada réplica se trasvaso a un vaso de
precipitados con agua y se llevaron a agitar en agitadores magnéticos, obteniendo las muestras VA1,
VA2, VB1, etc. Finalmente las muestras se llevaron a analizar por dos métodos, el primero, por
titulación con nitrato de plata, en el cual se dividieron las muestras VA1, VA2, VB1, etc. En dos para
tener réplicas y mayor exactitud en el proceso de titulación (A1a, A1b, A2a, A2b, etc), obteniendo
16 resultados. El segundo método fue por espectrometría de absorción atómica, en el cual
únicamente se utilizó una muestra para cada lectura (A1, A2, B1, etc)

DATOS OBTENIDOS

Titulación:
 Volumen
Muestra Masa (g) Sodio (%)
muestra (ml)

A1a 11.20 13.6 0.324

A1b 11.20 13.6 0.324
A2a 10.70 12.4 0.309
A2b 10.70 12.5 0.312
B1a 11.10 18.78 0.451
B1b 11.10 19.08 0.458
B2a 11.20 19.61 0.467
B2b 11.20 19.63 0.467
C1a 11.20 17.61 0.419
C1b 11.20 17.7 0.421
C2a 11.20 19.69 0.469
C2b 11.20 19.21 0.457
D1a 11.20 18.87 0.449
D1b 11.20 18.68 0.445
D2a 11.20 15.81 0.376
D2b 11.20 15.83 0.377

Espectrometría de absorción atómica:

Muestra Emisión Sodio (ppm) Sodio (%)

A1 162.00 4.608 0.411
A2 138.50 4.218 0.394
B1 202.00 5.357 0.485
B2 211.00 5.542 0.493
C1 186.50 5.054 0.450
C2 204.00 5.397 0.481
D1 199.50 5.307 0.474
D2 172.50 4.427 0.427

HIPÓTESIS

 Se obtienen resultados iguales con ambos métodos