Código:

Centro Nacional de Asistencia Técnica a la Industria – ASTIN 9230-FP-F-322

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ESTUDIO DE CASO: TECNICAS INSTRUMENTALES

1. IDENTIFICACIÓN DEL INSTRUMENTO:

Programa de Formación: Ficha de caracterización:
Química Aplicada a la Industria
Nombre de la Guía: Código de la Guía: 9230-FP-O-323-V4
Nombre del Instructor: Jorge Andrés Ríos Flórez
Nombre del aprendiz:
Ciudad y fecha: Cali,

2. PRESENTACIÓN E INSTRUCCIONES PARA EL DILIGENCIAMIENTO:

Señor/a Aprendiz:
 Resuelva los problemas o casos planteados.
 Sustente las respuestas a su instructor.

3. CUERPO DEL INSTRUMENTO:

Basado en el método ICUMSA GS7/4/8-23 (2011) Responda:

1. Explique como se da la afinidad entre la fase estacionaria y los analitos.

2. ¿Cómo está conformada la fase móvil y por qué tiene tales componentes?

Fase móvil para resina de base sódica. Disolver

700 mg/L (aproximadamente 0,005 mol)'de sulfato de
sodio y filtrar a través de una rnembrana de 0,45 pm.

Fase móvil para resina de base cálcica. Disolver

50 mg/L de la sa1 cálcica del ácido etilendiamino-tetra-acético y filtrar a través de una mernbrana de 0,45
pm.

Estas resinas presentan propiedades tanto de intercambio de ligando como de exclusión por tamaño.

3. Busque la información técnica de los estándares y escríbala en la siguiente tabla

Estándar Metales Pérdida en
No.
pesados secado a 105 Solubilidad % Pureza
CAS o
(como Pb) C
Sacarosa grado
reactivo 57-50-1 ≤ 0.0005 % 203,9 g/0.1 l
analítico
Glucosa grado
reactivo 50-99-7 ≤ 5 ppm 470 g/l 97.5
analítico
Fructosa grado
reactivo 57-48-7 0.0001 % 790 g/l 98
analitico

-
4. En la técnica se emplea una bomba Isocratica.
a. ¿Que es elución Isocratica?
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 Se habla de elución Isocratica cuando la composición de la fase móvil permanece

constante durante la separación, es decir cuando ese portador de la mezcla que pasa
a través de la columna cromatográfica permanece en una dirección determinada.

b. De una breve descripción de la bomba Isocratica Agilent Series 1200.

 La bomba Isocratica Agilent Series 1200 tiene un dispositivo de bomba y una unidad de
amortiguación se encuentra disponible un desgasificador de vacío como producto
independiente para aplicaciones que necesitan una estabilidad de flujo óptima,
especialmente a velocidades de flujo reducidas o cuando la sensibilidad del detector es
alta.

5. En técnica se emplea una balanza analítica de 0,1 mg. Suponga que dicho instrumento es marca
Sartorius serie 5034. Complete el siguiente cuadro:

KBF006 Nahita Adaptador

60 195x400x275 0.0001 CA 220 V
mm

Referenci Fabricante Imagen Capacidad Dimensiones Sensibilida Alimentacion

a max(g) (largo, ancho, d (Voltaje)
profundo) (mm)

6. En técnica se emplea una columna “Sugar peak 300 x 6,5 mm”. Escriba la información técnica del
accesorio en el siguiente cuadro:

Waters

La columna
Sugar Pak I
separa los
monosacáridos
y los alcoholes
de azúcar
mediante un
fuerte
mecanismo de Tamaño
intercambio Diámetro Longitud de 6000
catiónico. La interno 6.5 300 mm partícula psi (415
resina se basa mm 10 µm Bar)
en un polímero
de estireno-
divinilbenceno
sulfonado que
proporciona
estabilidad al
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pH mediante
un contraión
calcio.

Descripción del Fabricante Imagen Diámetro Longitud Tamaño de Presion

producto interno (mm) (mm) particula máxima
(µm) (Bar)

7. La presión máxima del método es 4 Mpa. ¿La columna Waters “Sugar Peak” se puede someter a
esta presión? Explique.

No se puede someter a esta presión debido a que la columna Waters “Sugar Peak” tiene una
presión máxima hasta 41.5 Mpa, por lo cual no cumpliría con la presión que necesita el método.

8. El cromatógrafo HPLC cuenta con un detector de índice de refracción “1260 Infinity” de la marca
Agilent. Indique si este detector cumple con la especificación de temperatura descrita en el
método. Explique.

El detector si cumple con la especificación dada debido a que el método posee un control de
temperatura que varía desde los 5 °C a 55 °C, por tanto, si cumple con la especificación que son
los 35 °C.

9. ¿Por qué un refractómetro acoplado al cromatógrafo es un medio adecuado para detectar

azucares?

Un refractómetro se acopla a un cromatógrafo debido a que cuando el cromatógrafo separa las

fases de las muestras a utilizar, el refractómetro puede medir a partir de la luz que proyecta, se
puedan identificar las sustancias y su concentración, por lo cual se utiliza mejor la modalidad de
altura de picos.

10. ¿Por qué se opta por medir la respuesta del equipo en términos de altura de pico en lugar del
área bajo la curva?

No se puede optar a medir el área bajo la curva ya que pueden llegar a generar algunas
sustancias interferentes, polisacáridos y sales ya que estas hacen difícil lograr una buena
definición y separación en la línea de base de azucares en muestras de melaza.
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11. Basado en el fundamento del método, específicamente en la afinidad de los azucares por la
columna, indique el orden de elución. Indique el nombre del azúcar que corresponda a los picos
1, 2 y 3.

Fructosa Glucosa Sacarosa

12. A partir de los resultados expuestos en el método, el % de glucosa, fructosa y sacarosa en

melaza cumplen con la precisión requerida, expresada como RSD? Explique.

Si cumplen la precisión requerida debido a que el RSD resultante de los valores de glucosa, fructosa
y sacarosa no pasan de 1.5 y se mantienen en margen cerca del cero por lo cual no están alejados y no
se mueven en un margen mayor.

13. Por qué cree usted que el porcentaje de sacarosa en la muestra es tan elevado comparado con
los monosacáridos también presentes.

RESPUESTAS
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4. PRODUCTO (S):
1. Taller resuelto
Observaciones y/o recomendaciones: