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GUÍA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGÍA CELULAR - 2021 E.P.

FARMACIA Y BIOQUÍMICA

PRÁCTICA 9: RECONOCIMIENTO DE CLOROPLASTOS,


CROMOPLASTOS Y AMILOPLASTOS EN CÉLULAS
VEGETALES
➢ Introducción
➢ Objetivos
➢ Experimento 1: observación de cloroplastos de Elodea
➢ Experimento 2: observación de cromoplastos en tomate
➢ Experimento 3: observación de cromoplastos en pimiento
➢ Experimento 4: observación de amiloplastos en papa.
➢ Cuestionario

INTRODUCCIÓN
Los plastidios son organelos semiautónomos que se encuentra prácticamente en todas las
células de plantas y algas, también en algunos grupos de moluscos marinos y al menos en un
phylum de protistas parásitos. Los plastidios cumplen diversas funciones tales como: clave en la
fotosíntesis, síntesis de aminoácidos y lípidos, almacenamiento de grasas y almidón,
pigmentación de flores y frutos, detección de la gravedad y sensibilidad medioambiental. Se
postula que el origen de los plastidios fue a través de un evento endosimbiótico donde una célula
proto-eucariótica incluyó y retuvo en su interior a una bacteria con capacidad fotosintética
(cianobacteria)(1).

Dentro la diversidad de plastidios, los cloroplastos han sido los más estudiados a lo largo de los
años, sin embargo, son solo un tipo de estructura dentro del vasto grupo denominado plastidios.
Dependiendo de la etapa del desarrollo y tipo de tejido vegetal, los plastidios tienen una
composición y función específica lo cual les permite realizar una síntesis selectiva y la
importación de proteínas. Los cloroplastos están especializados para realizar la fotosíntesis en
los tejidos de los vegetales, pero difieren de manera considerable en su composición y fisiología
en el desarrollo y senescencia de los tejidos vegetales (2).

Fig. 1. Tipos de plastidios (3).

Los plastidios pueden ser también divididos en varios grupos (Fig. 1.), además se pueden
clasificar de acuerdo a sus características compartidas, tal como se muestra a continuación:

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A. Cromoplastos:
• Cloroplastos: Son plastidios de color verde que contienen clorofila la cual esta
relacionada con la fotosíntesis.

• Faeoplasto: Estos son plastidios que se encuentran en algas pardas, diatomeas


y dinoflagelados, presentando una coloración amarilla a castaño. Poseen un
pigmento fotosintético denominado Fucoxantina, el cual es un pigmento
carotenoide (del grupo de las xantófilas) que enmascara el color de la clorofila
a, que también está presente. Dicho pigmento, tiene la función de potenciar la
absorción de la luz solar y transferir la energía a la clorofila a.

• Rodoplastos: Plastidios de color rojo, se encuentran en algas y su color rojo se


debe a la presencia de la ficoeritrina, que también tiene la capacidad de absorber
la luz.

• Cromoplastos verde-azules (cromatóforos): Estos plastidios se encuentran en


las algas verdeazuladas (cianobacterias). El término cromatóforo es usado en
lugar de plastidio debido a que los pigmentos no están organizados dentro de un
cuerpo plastidial. Por el contrario, se encuentran organizados sobre estructuras
lamelares en anillos concéntricos o placas dentro de las células vegetales de las
algas. El color verde azulado de estas algas se debe a la presencia de la
ficocianina y la ficobilina. Estos pigmentos accesorios no participan en la
fotosíntesis.

• Bacterias purpura: Estas bacterias fotosintéticas tienen una clorofila denominada


bacterioclorofila, y su color purpura se debe a la presencia de un carotenoide
especial.

Figura 2. Distintos tipos de plastos y los caminos de diferenciación entre ellos

B. Cromoplastos no fotosintéticos: Engloba a una variedad de pigmentos accesorios los


cuales aparentemente no participan de manera directa en la fotosíntesis o la
transferencia de energía.
Los cromoplastos pueden originarse a partir de los cloroplastos por la acumulación de
pigmentos no fotosintéticos (p.e. carotenoides). Los genes involucrados en la síntesis de
estos pigmentos están ubicados en el núcleo. La clasificación de los carotenoides divide
a estos pigmentos en dos grandes grupos (Fig. 3).

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Fig. 3. Clasificación de los carotenoides.

• Carotenos (no contienen oxígeno en su estructura) y xantofilas (contienen


oxígeno en su estructura): Los pigmentos carotenoides protegen a la planta
contra la foto-oxidación, además de tener propiedades antioxidantes. Son de
color rojo – amarillo o castaños. Están encargados de proporcionar el color a
flores y frutos.

• Leucoplastos:, Plastidios no fotosintéticos, incoloros y se encuentran en células


de plantas que no han sido expuestas a la luz solar. Estos poseen láminas
membranosas que no forman tilacoides. Son denominados También organelos
de almacenamiento y pueden diferenciarse en tres tipos:

i. Amiloplastos: Encargados de almacenar almidón, se encuentran en las


raíces subterráneas (p.e. papa), cereales (p.e. arroz, trigo), etc.

ii. Elaioplastos: (Lipidoplastos u oleoplastos). Almacenan aceites y se


encuentran en semillas nuez, mostaza, coco, etc.

iii. Proteinoplastos (aleuroplastos – proteoplastos). Encargados de


almacenar proteínas, se encuentran en semillas como el maíz.

OBJETIVOS:
Observar cloroplastos de Elodea, cromoplastos de tomate y pimiento, y amiloplastos de papa.

EXPERIMENTO 1: OBSERVACIÓN DE CLOROPLASTOS EN Elodea


Los cloroplastos son organelos fotosintéticos que se encuentran en células vegetales y algas
eucarióticas. Ellos absorben la luz solar tomando los fotones que activan su sistema utilizando
además moléculas de agua y CO2 para elaborar carbohidratos (almidón). Los cloroplastos no
solo son organelos fotosintéticos, sino también, realizan la síntesis de otros pigmentos, ácidos
grasos y aminoácidos (4).

Todas las células vegetales contienen una gran cantidad de cloroplastos, los cuales incluso están
distribuidos a lo largo de todo el citoplasma. Generalmente, ellos se encuentran concentrados
cerca de la pared celular o el núcleo. Generalmente, en plantas superiores los cloroplastos son
de forma esférica o discoidal. Algunas algas presentan cloroplastos en forma de placas estriadas
o bandas helicoidales. El diámetro de los cloroplastos varia de 4µm - 6µm con un grosor de 1
µm-3 µm. El número de cloroplastos varia de célula a célula. El grupo de las Chlamydomonas
(algas) a menudo contienen un cloroplasto grande y simple, mientras que, las plantas superiores
contienen generalmente de 30 – 40 (variable por tejido) cloroplastos por célula (5).

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Objetivo: Observar los cloroplastos de Elodea

Materiales:
➢ Hoja de Elodea o musgo.
➢ Portaobjetos
➢ Cubreobjetos
➢ Microscopio óptico compuesto
➢ Aceite de inmersión

Procedimiento
1. Tomar una hoja de la planta con la pinza y colocarla sobre un portaobjeto.
2. Agregar una gota de agua.
3. Realizar el montaje al microscopio al mayor aumento.
4. Agregar aceite de inmersión.
5. Anotar y dibujar sus observaciones y conclusiones.

Nota: Aquí se visualizará un video similar al experimento denominado “Observación de


cloroplastos en Elodea” disponible en:
https://drive.google.com/file/d/1ZuoJfd5EwI3HCXZIFGHkK4vQQ4EcDpA9/view?usp=sharing

EXPERIMENTO 2: OBSERVACIÓN DE CROMOPLASTOS EN TOMATE


Los cromoplastos son plastidios, fotosintéticamente inactivos. Estas estructuras están
encargadas de sintetizar y almacenar pigmentos de las plantas. Se encuentran en flores, frutos
y hojas senescentes. Generalmente, los cloroplastos se convierten en cromoplastos. Los
pigmentos carotenoides almacenados en los cromoplastos les permiten a las plantas desarrollar
una diversidad de colores en frutos. Una de las principales razones del color en estas estructuras
vegetales es para generar una atracción a polinizadores (1).

Objetivo: Reconocer los cromoplastos en células de tomate.

Los cromoplastos de tomate se observan como puntitos coloreados rojizos dispersos por todo el
citoplasma. Las células de tomate son redondeadas.

Materiales:
➢ Tomate
➢ Cuchilla
➢ Portaobjetos
➢ Cubreobjetos
➢ Microscopio

Procedimiento:
1. Tomar un tomate maduro y cortar por el plano medio (corte transversal).
2. Tomar una porción de la pulpa interna del tomate.
3. Colocar la muestra en un portaobjeto.
4. Agregar una gota de agua y cubrir con el cubreobjetos.
5. Observar al microscopio la disposición general de las estructuras con el objetivo de 10X y
40X.
6. Anotar y dibujar sus observaciones y conclusiones

Nota: Aquí se visualizará un video similar al experimento denominado “observación de


Cromoplastos en tomate” disponible en:
https://drive.google.com/file/d/1GiyI0bGRwgUZ5sYoZSmPqcFMsvwdwD_7/view?usp=sharing

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EXPERIMENTO 3: OBSERVACIÓN DE CROMOPLASTOS EN PIMIENTO


Objetivo: Observar cromoplastos en pimiento.

Los cromoplastos se observarán a manera de fibrillas rojas dispersos por el citoplasma. Estos
son los que le dan el color rojo a la piel del pimiento.

Materiales:
➢ Pimiento
➢ Portaobjetos
➢ Cubreobjetos
➢ Navaja
➢ Microscopio

Procedimiento
1. Se coge un pimiento maduro y se corta un fragmento utilizando una cuchilla.
2. Extender el fragmento sobre un portaobjetos y agregar una gota de agua.
3. Extender correctamente el material apoyándose con agujas.
4. Colocar el cubreobjetos evitando la formación de burbujas.
5. Etiquetar el preparado.
6. Realizar el montaje al microscopio.
7. Observar a los objetivos de 10X y 40X.
8. Anotar sus observaciones y conclusiones.

Nota: Aquí se visualizará un video similar al experimento denominado “Observación de


Cromoplastos en pimiento” disponible en:
https://drive.google.com/file/d/1mPCYc2dz1CWFr4F6FkRnZtGygvA7RxBE/view?usp=sharing

EXPERIMENTO 4: OBSERVACIÓN DE AMILOPLASTOS EN PATATA


Los amiloplastos son organelos que pertenecen al grupo de los leucoplastos más característicos,
presentan una doble membrana, pueden desarrollar varias rutas biológicas. Sintetizan y
almacenan almidón a través de la polimerización de glucosa en el endospermo, tubérculos y
cotiledones. Algunas veces los amiloplastos pueden convertirse en cloroplastos. La forma y
tamaño es variable: redondeada, ovoide o piriforme. A medida que se desarrollan generan y
forman un conjunto de capas concéntricas que inicia en un punto denominado Hilio (1).
Los tubérculos de papa presentan gran cantidad de amiloplastos, también los plátanos y semillas
de legumbres y cereales. El plátano presenta los amiloplastos más deformes.
.
Objetivo: observar los amiloplastos en papa.

Materiales:

➢ Tubérculo de papa.
➢ Portaobjetos
➢ Cubreobjetos
➢ Solución de Lugol
➢ Cubreobjetos
➢ Portaobjetos

Procedimiento
1. Tomar un tubérculo de papa y realizar un raspado con la lanceta para obtener una pequeña
porción
2. Colocar el raspado sobre un portaobjetos.
3. Añadir una gota de agua y realizar el montaje al microscopio.
4. Observar al microscopio con el objetivo de 10X y 40 X.
5. Agregar una gota de Lugol por capilaridad a la muestra preparada anteriormente.
6. Observar al microscopio con objetivo de 10 X y 40X.

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7. Anotar sus observaciones y conclusiones.

Nota: Aquí se visualizará un video similar al experimento denominado “Observación de


amiloplastos en papa” disponible en:
https://drive.google.com/file/d/1DaHw1xUwZNqbhlmnojOHXogfSevkt1XN/view?usp=sharing

CUESTIONARIO

1. ¿Qué función cumplen los cloroplastos en los vegetales inferiores?


2. De ejemplos de vegetales inferiores
3. ¿Qué importancia tienen los cromoplastos de la zanahoria y el tomate?
4. ¿Qué diferencias ha observado entre las células de espinaca y tomate?
5. ¿Qué ocurre entre el almidón de los amiloplastos con la solución de lugol?
6. ¿Cómo podríamos observar oleoplastos y proteinoplastos en el laboratorio?

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Wise RR. The Diversity of Plastid Form and Function. In: Wise RR, Hoober JK, editors.
The Structure and Function of Plastids [Internet]. Dordrecht: Springer Netherlands; 2006.
[cited 2021 Jun 7]. p. 3–26. Available from: https://doi.org/10.1007/978-1-4020-4061-0_1
2. Pollard TD, Earnshaw WC, Lippincott-Schwartz J, Johnson G. Cell Biology E-Book
[Internet]. Elsevier Health Sciences; 2016. [cited 2021 Jun 7] Available from:
https://books.google.com.pe/books?id=Th1uDQAAQBAJ
3. Kaundal R, Sahu SS, Verma R, Weirick T. Identification and characterization of plastid-
type proteins from sequence-attributed features using machine learning. BMC
Bioinformatics. 2013 [cited 2021 Jun 7].14(SUPPL.14).
4. Kawano S. Chloroplasts. In: Noguchi T, Kawano S, Tsukaya H, Matsunaga S, Sakai A,
Karahara I, et al., editors. Atlas of Plant Cell Structure [Internet]. Tokyo: Springer Japan;
2014. [cited 2021 Jun 7]. p. 45–70. Available from: https://doi.org/10.1007/978-4-431-
54941-3_3
5. Wildman SG, Hirsch AM, Kirchanski SJ, Spencer D. Chloroplasts in living cells and the
string-of-grana concept of chloroplast structure revisited. In: Photosynthesis Research
[Internet]. Springer; 2004 [cited 2021 Jun 9]. p. 345–52. Available from:
https://link.springer.com/article/10.1023/B:PRES.0000030423.84134.3c

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