LABORATORIO DE ANÁLISIS QUÍMICO INSTRUMENTAL
Determinación espectrofotométrica de hierro en una muestra
comercial a partir de la técnica de adición estándar en UV-Visible
N. D. Velásquez Sánchez1, N.M. Castro Junca2
1
Laboratorio Análisis Químico Instrumental, Facultad de Ingeniería, Universidad de la Sabana, Chía.
2
Laboratorio Análisis Químico Instrumental, Facultad de Ingeniería, Universidad de la Sabana, Chía.
12 de marzo de 2020
RESUMEN
La siguiente práctica de laboratorio tuvo como
objetivo determinar la cantidad de hierro en un
pastilla denominada muestra comercial, a partir
de la formación de un complejo de coloración
rojo-naranja con la o-fenantrolina. De manera que
este último es capaz de absorber en la región el
UV-Visible, de manera que fuese posible elaborar
una curva de adición estándar, tomando en cuenta
los factores de dilución para que el propósito de
encontrar la concentración experimental de
sulfato ferroso en el comprimido fuese posible,
comparando el resultado con el esperado
teóricamente y evaluar si la metodología para la
técnica es exacta y/o precisa.
OBJETIVOS
GENERAL
1. Determinar cuantitativamente la cantidad de
hierro presente como sulfato ferroso en una
muestra comercial, mediante la técnica de
espectrofotometría ultravioleta-visible y curva de
adición estándar.
ESPECÍFICOS
1.1 Evaluar la exactitud de la técnica utilizada
mediante un análisis estadístico.
1.2 Identificar si el valor reportado para la
cantidad de hierro en la muestra comercial
por el proveedor es correcto o no.
1.3 Plantear y realizar una curva de adición
estándar con el fin de cuantificar la cantidad
de hierro en la muestra problema.
1.4 Identificar longitudes de onda óptimas para
lectura y absorción por ultravioleta-visible
mediante espectrofotometría.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Para el análisis objetivo de esta sesión de
laboratorio se preparó una solución problema
diluyendo 68,3±0,1 mg de una pastilla de sulfato
ferroso de la línea ECAR 100±0.1ml de agua.
Posteriormente se procedió a realizar una
dilución de la solución anterior, tomando así una
alícuota de 2±0,006 mL de esta y se llevó a un
volumen de 50±0,06 mL. A partir de esta última,
se prepararon 10 diferentes soluciones dentro de
los balones aforados y dos blancos (para que
fuese posible la eliminación por completo de
todas las interferencias posibles que pudiesen
existir en la matriz y en el proceso de lectura de
la señal analítica); a las cuales se les añadió un
volumen que se mantuvo constante de solución
problema diluida, mientras que se agregaron
diferentes volúmenes de solución patrón de Fe+2
cuya concentración era de 50 ppm, aunque para
la solución de buffer, o-fenantrolina e
hidroxilamina el vertido fue siempre constante
para todos los balones.
A partir del barrido por las bandas de absorción
espectroscópica fue posible corroborar que la
longitud de onda para el experimento de
acomplejamiento se encontraba sobre los 510 nm,
tal como lo indicaban varias fuentes teóricas
(Universidad Santiago de Compostela, s.f.).
La concentración experimental de la solución
stock problema preparada en el laboratorio fue
posible calcularla teniendo en cuenta el peso
molecular del hierro, asimismo el peso molecular
de la sal de Mohr y de la misma manera el
volumen final al cual se aforó el balón.
351,33 × 55,845 × 1000
𝐶= = 50 𝑝𝑝𝑚
1000 × 392,14
 LABORATORIO DE ANÁLISIS QUÍMICO INSTRUMENTAL

Para la elaboración de la curva de adición Lambert-Beer se cumple, por lo que es pertinente

estándar se tuvo en cuenta cada curva
independiente que se realizó con cada blanco, de
manera que fuese posible promediar sus
absorbancias para que toda interferencia quede
fuera del análisis experimental. De la misma
manera, en el eje de las abscisas se ubicaron los
valores de concentración del analito, calculados
por medio de la concentración del estándar
utilizar la ecuación de la curva para poder encontrar la
concentración del analito de interés en la muestra
problema y así, la cantidad de sulfato ferroso presente
en el comprimido.
Para poder determinar la concentración de hierro por
el método gráfico para solución en cuestión se debe
extrapolar la recta hasta encontrar su intercepto con el
eje x, el cual es igual a 𝑥 − 𝑖𝑛𝑡𝑒𝑟𝑐𝑒𝑝𝑡𝑜 = 𝑉𝑎 𝑜
−𝐶 ×𝑉
𝑓

multiplicados por la división del volumen del (Harvey, D., 2000). La manera para encontrar el
estándar entre el volumen final en el que se intercepto con el eje de las abscisas se realiza
igualando la ecuación a cero, y despejándola para los
aforaron los balones.
valores de x. Lo cual arrojó como siguiente el
resultado:
Muestra [M] Abs B1 Abs B2 Abs Prom
1 0,53 0,271 0,278 0,274
−0,1767
2 1,05 0,373 0,381 0,377 𝑥= = 8,00489𝑥10−5
3 1,58 0,473 0,480 0,476 11037
4 2,11 0,564 0,572 0,568
5 2,64 0,666 0,674 0,670 Con el valor obtenido anteriormente y teniendo en
6 3,16 0,774 0,772 0,773 cuenta que el volumen inicial de la solución en todos
7 3,69 0,869 0,866 0,868 los puntos era de 2±0,006 mL y el volumen final
8 4,22 0,968 0,966 0,967 correspondió a 10±0,025 mL, el cual es el volumen del
9 4,74 1,071 1,068 1,069 balón aforado al que se llevaron todas las soluciones.
10 5,27 1,256 1,253 1,254 A partir del análisis de soluciones fue posible
Tabla No. 1. Resultados espectrofotométricos de encontrar la concentración de sulfato ferroso, tomando
las muestras de analito. en cuenta su respectiva dilución de manera que quedó
como reporta lo siguiente:
Como es posible observar en el gráfico, el coeficiente
de correlación (R2) de la recta obtenida es de 0,9999 𝐶𝑎 × 𝑉1
𝑪𝟐 = = 0,002 𝑚𝑜𝑙/𝐿
por lo que la curva de adición estándar cumple con los 𝑉2
parámetros lineales para ser utilizada. Además, la
regresión lineal da cuenta de que su ecuación viene De la misma manera, para encontrar las moles
dada por y = 11037x+0,1767. presentes en la solución, bastaba con multiplicar la
concentración anterior por el volumen final, quedando
así:
Curva de adición estándar para la [Fe+2] 𝑚𝑜𝑙
𝒎𝒐𝒍 𝑭𝒆𝑺𝑶𝟒 = 0,002 ∗ 0,1 𝐿 = 0,0002 𝑚𝑜𝑙
1,2 𝐿
y = 11037x + 0,1767
1 R² = 0,9999
Finalmente, para encontrar los miligramos de sulfato
Absorbancia

0,8
ferroso en la pastilla, se utilizó un factor de correlación
0,6 inicialmente para encontrar los gramos de sulfato en
0,4 solución, que por consiguiente permitió implementar
0,2 un factor gravimétrico para encontrar los gramos de
0 este compuesto en la pastilla ECAR.
-0,00005 0 0,00005 0,0001
[Fe+2] 𝒎𝒈 𝑭𝒆𝑺𝑶𝟒 = 68,3 𝑚𝑔

A posteriori de haber obtenido el resultado final de

A partir del gráfico mostrado anteriormente y teniendo
en cuenta el coeficiente de correlación de la recta se
puede observar la tendencia lineal de los datos, lo cual
afirma que bajo esa longitud de onda y esos órdenes de
concentración del espectro UV-Visible la ley de
cantidad de materia presente en el comprimido, se
dispuso a calcular la propagación de su incertidumbre
a partir de la fórmula que implican los factores
multiplicativos y de división, pues fueron las únicas
operaciones presentes durante el método analítico.
 LABORATORIO DE ANÁLISIS QUÍMICO INSTRUMENTAL

del analito sea complicada de imitar a través de una

curva por adición estándar.

La metodología empleada en estos experimentos tiene

Las incertidumbres que se tuvieron cuenta para
como uno de sus objetivos la formación de un
realizar los cálculos precedentes fueron la masa de la
complejo, esto se debe por diferentes razones. La
pastilla usada (68,3±0,1 mg) , la masa de la pastilla
primera se debe a que el hierro como especie más
total (445,2±0,1 mg), las incertidumbres de los balones
oxidada no absorbe dentro de los intervalos del
aforados utilizados (100,0±0,1 mL, 50,00±0,06 mL y
ultravioleta-visible, por lo que primero se debe reducir
10,000±0,025 mL) y las incertidumbres de ambas
a Fe+2 por un agente reductor como lo es la
pipetas empleadas para tomar las alícuotas, las cuales
hidroxilamina y muy especialmente en medio ácido,
ambas correspondían a un valor de 2±0,006mL. Es
con el hierro ya reducido se procede a obtener la
muy importante recordar que, para efectos del cálculo,
reacción con la o-fenantrolina para acomplejar la
las anteriores incertidumbres al ser absolutas se
sustancia de color rojo-naranja característico
transformaron en relativas para que fuese posible la
(ferroína), la cual por su coloración es capaz de
relación matemática. La incertidumbre relativa
absorber en la región del visible especialmente y hace
obtenida correspondió a un valor de 0.54, la cual
que sea más fácil el método de absorción. (Bocanegra,
después se convirtió a incertidumbre absoluta al
J. y Sánchez, D., s.f.).
multiplicar por el valor de mg de sulfato de hierro
calculados experimentales y posteriormente ser
También se debe tener en cuenta que al formar un
dividirlo entre 100. A partir de lo evaluado
complejo se crea una especie que tienen electrones de
anteriormente de manera aritmética, fue posible
transferencia de carga, los cuales tienen absortividades
afirmar que en el comprimido analizado están
molares grandes y son perfectos para fines analíticos
presentes 68,3±0,369 mg de sulfato ferroso.
debido a que a concentraciones muy pequeños el
Posteriormente, se procedió a calcular el error relativo coeficiente de absortividad ayuda a que estos se
y absoluto de la cantidad obtenida con anterioridad, de puedan absorber. (Martínez, A., s.f.).
manera que fuese posible establecer un análisis
estadístico del mismo: CONCLUSIONES
• Se logró obtener una curva por adición
𝑬𝒂𝒃𝒔 = |200 𝑚𝑔 − 68,3 𝑚𝑔| = 131,7 𝑚𝑔 estándar y con esta fue posible efectuar los
métodos necesarios para poder conocer la
131,7 𝑚𝑔 concentración del analito de interés, debido a
𝑬𝒓𝒆𝒍 = × 100% = 65,86% que presentó correctamente un coeficiente de
200 𝑚𝑔
correlación de 0,9999 y su comportamiento
cumple con la Ley de Lambert-Beer; además
A partir de lo anterior es posible identificar el hecho
de correlacionar los factores de dilución
de que la técnica no es exacta, debido a que el
como elemento importante dentro de la parte
porcentaje obtenido de error relativo es bastante alto.
experimental para verse evidenciado en el
Ni si quiera comprende márgenes pequeños de error,
análisis numérico.
por lo que se tienen en cuenta varias consideraciones
• A partir de la práctica se pudo determinar la
para la razón por la cual el experimentó no dio de la
cantidad de sulfato ferroso en una pastilla
manera acertada, una de ellas podría ser el error
ECAR a partir de una espectrometría
procedimental para encontrar el intercepto con el eje x
Ultravioleta-Visible del ion de hierro y una
en la curva de adición estándar por parte de los
curva de adición estándar, lo cual arrojó
experimentadores, asimismo puede que existan otras
como resultado un valor de 68,3 mg presentes
especies absorbentes que sean capaces de
en el comprimido.
acomplejarse de la misma manera que el hierro, es
• Se realizó un barrido de los espectros de
decir, aquellas que presentan elementos que contengan
absorción frente a los analitos para poder
electrones d y f, lo anterior quizá suponiendo la
determinar la longitud óptima a trabajar por
presencia de suplementos en el comprimido cuyo
la metodología de espectrometría por adición
principio activo contenga alguna de estas sustancias.
estándar, usando las celdas con mayor
La premisa anterior supone que probablemente esta
concentración de sulfato ferroso a usar para
técnica no es la más apropiada para obtener el
poder tener un resultado más cercano al
resultado esperado, muy seguramente porque la matriz
teórico.
 LABORATORIO DE ANÁLISIS QUÍMICO INSTRUMENTAL

• Fue posible concluir que la técnica no es la

más exacta debido a que presenta un
porcentaje de error bastante alto, con respecto
al reportado por el fabricante.

BIBLIOGRAFÍA
• (Harvey D., 2000) Modern Analytical
Chemistry. Editorial McGraw-Hill. Primera
Edición pp. 110- 115.
• (Bocanegra J. y Sánchez D, s.f.)
Determinación de Nitrógeno en una muestra
de hígado con orto-fenantrolina.
Universidad Pedagógica Nacional. p2.
Recuperado de:
https://www.slideshare.net/mouthblack09/d
eterminacion-de-hierro-con-ortofenantrolina
• Martínez, A. (s.f.) MÉTODOS
FOTOELECTRICOS Y CURVAS
ESPECTRALES. Recuperado de:
https://www.academia.edu/18047060/MET
ODOS_FOTOELECTRICOS_Y_CURVAS
_ESPECT RALES
• (Abril Díaz N., Bárcena Ruiz A., Fernández
Reyes E., Galván Cejudo A., Jorrín Novo J.,
Peinado Peinado J., Meléndez-Valdés F.T.,
Túnez Fiñana I., 2005) Espectrofometría:
Espectros de absorción y cuantificación
colorimétrica de biomoléculas. Recuperado
de https://bit.ly/3ce9KAT

FIRMAS

NICOLÁS MAURICIO CASTRO JUNCA

NICOLÁS DAVID VELÁSQUEZ SÁNCHEZ