XXVIII Foro INIA de Colaboración Público-Privada

Año Internacional de las Legumbres

“Leguminosas: Producción y consumo.

Una revolución pendiente”

Co-evolución de leguminosas y microorganismos:

¿selección natural para la mejora vegetal?”

Eulogio J. Bedmar
Departamento de Microbiología del Suelo y Sistemas Simbióticos
Estación Experimental del Zaidín, CSIC, Granada

Madrid, 15 de marzo de 2016

 Ciclo del N

-3 -2 -1 0 +1 +2 +3 +4 +5

N2
Desnitrificación

Fijación de N2

Nitrificación
NH4+ NO3-
Mineralización
Asimilación de nitrato

Asimilación de amonio
Compuestos orgánicos nitrogenados:
aminoácidos, proteínas, etc
 LA FIJACIÓN DE N2 SE LLEVA A CABO
POR BACTERIAS DIAZOTRÓFICAS

Bacterias asociadas a las raíces/endofitos

Maíz
Bacterias en vida libre Caña de azúcar
Suelos Cebada
Aguas Trigo
Sedimentos etc.
Atmósfera

Azospirillum
Azotobacter

Azoarcus

Pseudomonas
Herbaspirillum
Gluconacetobacter
 BACTERIAS ENDOSIMBIÓTICAS

SIMBIOSIS
ACTINOBACTERIAS/PLANTAS SIMBIOSIS
NO LEGUMINIOSAS RIZOBIO/LEGUMINOSA

SE CARACTERIZAN POR LA FORMACIÓN DE NÓDULOS DONDE SE

LLEVA A CABO LA FIJACIÓN DEL NITRÓGENO ATMOSFÉRICO.

DESDE LOS NÓDULOS EL AMONIO FORMADO

SE TRANSFIERE A LA PLANTA
 ¿Por qué las

leguminosas y no

otras plantas?

Co-evolución leguminosa-rizobio desde

hace 50 millones de años
El primer rizobio

En 1888, Beijerinck fue el primero en

aislar un microorganismo responsable
de la formación de nódulos y de la
transformación del nitrógeno del aire
contenido en los poros del terreno.

“Bacillus radicicola ”

Rhizobium leguminosarum (1889) Frank

 La primera etapa

R. lupini (1931)

R. phaseoli (1926)
R. leguminosarum (1889) R. trifolii (1926)
R. meliloti (1926)

Rhizobium en Phaseolus Agrobacterium en Nicotiana

 Descubrimiento de nuevas especies
Phyllobacterium (1984)

P. myrsinacearum (1984)
P. rubiacearum (1984)

R. lupini (1931)
R. phaseoli (1926)
R. trifolii (1926)
Rhizobium (1889) R. meliloti (1926)
R. japonicum (1926)
R. loti (1982)
R. leguminosarum (1889)

B. japonicum
Bradyrhizobium (1982)
 Nuevas especies de rizobios

R. mediterraneum (1995)
Azorhizobium (1988) R. ciceri (1994)
R. tianshanense (1995)
R. huakuii (1991)
A. caulinodans (1988) R. etli (1993) Rhizobium (1889) R. lupini (1931)
R. galegae (1989)
R. loti (1982)
S. saheli (1994) R. leguminosarum (1889)
S. teranga (1994)
S. meliloti
Sinorhizobium (1988) S. fredii (1988)
S. xinjiangensis (1988)
S. medicae (1996) B. liaoningense (1995)

Bradyrhizobium (1982) B. japonicum

B. elkanii (1992)
 Más especies de
rizobios Allorhizobium (1998) A. undicola (1998)

Azorhizobium (1988) R. huautlense (1998) R. indigoferae (2002)

R. loessense (2003)
R. yanglingense (2001)
A. caulinodans (1988) R. mongolense (1998)
R. haiananense (1997)
R. etli (1993) Rhizobium (1889)
R. galegae (1989)
R. giardinii (1997)
S. saheli (1994) R.gallicum (1997)
R. leguminosarum (1889)
S. morelense (2002)
S. teranga (1994) R. sullae (2002)
M. plurifarium (1998)
S. meliloti
Sinorhizobium (1988) S. fredii (1988) M. septentrionale(2004)
S. arboris (1999) S. xinjiangensis (1988) M. chacoense (2001)
S. medicae (1996)
S. adhaerens (2003) M. temperatum (2004)
S. kostiense (1999)B. canariense (2005) M. amorphae (1999)
M. mediterraneum M. tianshanense
S. kummerowiae (2002) B. betae (2004)
B. yuanmingense (2003) M. ciceri
B. liaoningense (1995)
Bradyrhizobium (1982) B. japonicum M. loti Mesorhizobium (1997)
B. elkanii (1992) M. huakuii
 Incremento continuo en
el número de especies de rizobios

Buscar fuera de
los nódulos

Bradyrhizobium betae (2004)

Ampliar los hábitats en los

que se han estudiado las leguminosas Prosopis alba forma nódulos con
Mesorhizobium chacoense en el
Chaco (Argentina )
Rhizobium tubonense se ha
aislado de nódulos de Oxytropis
glabra crecida en el Tíbet

Evolución de las técnicas de Biología Molecular

 Los rizobios (orden Rhizobiales)
Clase Alphaproteobacteria

1888 Bacillus radicicola (Beijerinck)

1889 Rhizobium leguminosarum (Frank)

2001

Familias

Rhizobiaceae Bradyrhizobiaceae Phyllobacteriaceae Hyphomicrobiaceae

Rhizobium Bradyrhizobium Phyllobacterium Azorhizobium

Ensifer Mesorhizobium

Shinella
 AÑO 2001. Bacterias no rizobios que nodulan leguminosas
Clase Género Epecie Leguminosa

Blastobacter B. desnitrificans Aeschynomene indica

Devosia D. neptuniae Neptunia natans

Alphaproteobacteria Methylobacterium M. nodulans Carolaria glaucoides

C. perrottetii,
C. podocarpa
Ochrobacterium O. lupini Lupinus spp.
O. cytisi Cytisus
Burkholderia B. mimosarum Mimosa spp.
B. nodosa M. bimucronata y M.
scabella
Betaproteobacteria
B. phymatum Mimosa spp. y P. vulgaris
B. sabiae M. caesalpinifolia
B. tuberum Cyclopia spp.
Cupriavidus (Ralstonia) C. taiwanensis Mimosa

Neptunia natans Lupinus sp.

Hasta la fecha no ha demotrado nodulación

de las leguminosas por Gammaprotobacteria
La planta selecciona

las bacterias más

efectivas
 Efecto de la inoculación con rizobios
de la misma clase (Alphaprotobacteria)

Phaseolus
Rhizobium etli
Rhizobium phaseoli
 Efecto de la inoculación con rizobios
de distinta clase filogenética

A B

Phaseolus inoculada con

A: Burkholderia phymatum
A B
B: Rhizobium etli
Número de nódulos, peso seco, contenido en N y concentración de
leghemogolobina de plantas de Phaseolus vulgaris inoculadas con B.
phymatum GR01N o Rhizobium tropici CIAT899R.

NN NDW PDW [N] Lb

Strain NaCl (mM)
(per plant) (g/ plant) (g/ plant) (mg/ plant) (mg / g NFW)

0 166 ± 18a 0.135 ± 0.05a 1.75 ± 0.1a 68 ± 2a 7.20 ± 0.8a

R. tropici
CIAT988
25 150 ± 14a 0.124 ± 0.02a 1.31 ± 0.2b 39 ± 3c 6.13 ± 0.5b

35 110 ± 12b 0.08 ± 0.01b 1.04 ± 0.2c 25 ± 2d 5.73 ± 0.3b

0 96 ± 14b 0.128 ± 0.05a 1.73 ± 0.1a 68 ± 3a 7.13 ± 0.5a

B. phymatum
GR01N
25 98 ± 12b 0.122 ± 0.02a 1.63 ± 0.2a 58 ± 5a 6.84 ± 0.2a

35 93 ± 12b 0.117 ± 0.04a 1.51 ± 0.1b 50 ± 3b 6.54 ± 0.8a

¿19.400 especies de leguminosas
vs
80 especies de rhizobios?
 Conclusión
La co-evolución natural de
las leguminosas con
bacterias endosimbióticas
fijadoras de nitrógeno
atmosférico permite la
selección de los mejores
pares planta-bacteria para
aumentar el rendimiento de
los cultivos
GRACIAS POR SU
ATENCIÓN
Situación actual de los rizobios

Bradyrhizobium

Azorhizobium

Mesorhizobium

Rhizobium (Allorhizobium
Y Agrobacterium)

Sinorhizobium (Ensifer)