DISCUSIÓN DE GRUPO No.

“APLICACIÓN DE LA ENZIMOLOGIA EN LA PRÁCTICA CLÍNICA:

PANCREATITIS AGUDA E INTOXICACIÓN CON PLOMO”.

CASO CLINICO:

CASO No. 1.

Una mujer de 22 años fue admitida en un Hospital porque presentaba náuseas,

vómitos, fiebre y dolores abdominales severos. Este cuadro se había iniciado tres
días antes de su hospitalización.

Además, la paciente manifestó que últimamente consumía grandes cantidades de

alcohol y que lo había hecho con mucha mayor frecuencia durante las dos últimas
semanas. Además ella reportó que un hombre con quien ella “salió” varios meses
atrás, había sido hospitalizado recientemente por hepatitis. Con tal historia, se hizo
en la paciente un diagnóstico tentativo de hepatitis infecciosa aguda. Sin embargo,
en el examen físico la paciente no presentó ictericia y la orina tenía un color normal.

El estudio en el laboratorio reveló los datos siguientes:

Concentración de bilirrubina del plasma 0.8 mg/dl

AST, del suero, 35 UI/L AST = Asparto aminotransferasa

ALT, del suero, 30 UI/L ALT = Alanina aminotransferasa

Deshidrogenasa Láctica, 110 UI/L

Actividad de la amilasa del suero 900 UI/L

Lipasa del suero, 400 UI/L valor normal de 12-70

Valores normales

AST 5-40 UI/L

ALT 0-35 UI/L

LDH 88-230 UI/L

Amilasa 0-137 UI/L

Lipasa 12-70 UI/L

Bilirrubina total 0.1-1 mm/DL

Bilirrubina directa 0.1-0.4 1 mm/DL

Bilirrubina indirecta 0.1-0.7 1 mm/DL

EXTRA: La pancreatitis aguda se caracteriza por un dolor abdominal de inicio súbito

asociado con el aumento de los niveles de las enzimas pancreáticas digestivas en sangre
u orina y la alteración en la estructura pancreática secundaria a un proceso inflamatorio.
Esta estructura se restablece completamente una vez que ha pasado el ataque agudo. 1

Con respecto al sexo, la relación es de 1:2 (masculinofemenino) y la edad más frecuente

de presentación es la escolar (9.2 ± 2.4 años); sin embargo, se han reportado casos en
niños desde un mes de edad. En general, en niños menores de 4 años debe de
investigarse de manera exhaustiva la causa de la pancreatitis, ya que generalmente se
asocia con una enfermedad sistémica.1-4

Con la historia de la enfermedad, examen físico y pruebas de laboratorio a mano,

podemos formularnos algunas preguntas:

1. ¿Por qué los valores obtenidos para la actividad de las enzimas en el suero
no apoyan el diagnóstico original de hepatitis aguda?

R/ . A pesar de que los aumentos en el suero de la Lactato deshidrogenasa, SGOT

y SGPT están asociados con la hepatitis, no nos indican un diagnóstico
determinante de hepatitis. La ausencia de elevaciones apreciables de estas tres
enzimas séricas es una evidencia fuerte en contra del diagnóstico de la Hepatitis
aguda.

2. ¿Cuál sería su diagnóstico, después de analizar los exámenes de Laboratorio?,

¿Por qué?

R/ Pancreatitis aguda. Porque el cuadro clínico es compatible con esta enfermedad

especialmente en vista de la historia de ingesta excesiva de alcohol.

3. ¿Cuál es el mecanismo que explica la elevación de los niveles de enzimas en

el suero en enfermedades tales como hepatitis y pancreatitis?

Los niveles elevados de las enzimas hepáticas en suero (ALT, fosfatasa alcalina y
gammaglutamil transpeptidasa) son la expresión de alteraciones a nivel de las células
hepáticas o los conductos biliares. Un predominio en la elevación de las aminotransferasas
indica comúnmente daño hepatocelular, sin embargo un aumento de los niveles de
fosfatasa alcalina (FA) y gammaglutamil transpeptidasa (GGT) orientan hacia un daño de
tipo colestásico. La elevación conjunta de la FA y las aminotransferasas pueden orientar un
patrón de daño mixto.

La fosfatasa alcalina (FA) proviene fundamentalmente del hígado y del tejido óseo. Algunas
afecciones como la enfermedad de Paget, sarcomas, metástasis óseas, hiperparatiroidismo
y ricketsiosis pueden elevar ligeramente los niveles de fosfatasa alcalina en suero. Cuando
la FA y la GGT están elevadas al mismo tiempo debe pensarse en daño hepatocelular.
Después de excluir una enfermedad ósea toda elevación de la FA sugiere obstrucción de
las vías biliares, rara vez puede ser originado por un proceso familiar benigno. Los rangos
normales de FA sérica en adultos son de 20 a 120 ul. Las causas hepatobiliares de
elevación de de la FA pueden dividirse en cuatro categorías:

a) Inflamación crónica de los conductos biliares (cirrosis biliar primaria y colangitis

esclerozante primaria).

b) Procesos infiltrativos (tuberculosis, sarcoidosis, neoplasias).

c) Desórdenes colestasicos (hepatotoxicidad por drogas).

d) Obstrucción biliar (colelitiasis, neoplasias).

La ultrosonografia es muy útil para iniciar los estudios de imagenología debido a que puede
excluir obstrucción biliar y puede sugerir un proceso neoplásico. Cuando se sospecha que
la elevación de la FA es causada por la ingestión de fármacos o tóxicos, debe retirarse la
exposición a dicha sustancia y entonces repetir la determinación de FA ocho semanas
después de la exposición.

La positividad para marcadores serológicos específicos (para hepatitis viral, cirrosis biliar
primaria) orienta el diagnóstico. Cuando estos marcadores serológicos son negativos y los
niveles de FA no regresan a la normalidad deben considerarse otros estudios como la
biopsia hepática y la colangiopancreatografíaretrogada endoscópica o una
colangiopancreatografia magnética (colangioresonancia magnética). Estos procedimientos
deben ser indicados e interpretados por médicos expertos en hepatología.

Gammaglutamil transpeptidasa (GGT) elevada

La GGT es una enzima de membrana, siendo el marcador más sensible de enfermedad

hepatobiliar. Los rangos normales son de 0 ul a 50 ul en hombres y 0 ul a 35 ul en mujeres.
En la práctica habitual los niveles de GGT son determinados para monitorear la abstinencia
o no en pacientes con enfermedad hepática alcohólica (11,12). Este artículo ofrece una
orientación escueta que permite al médico general orientar la investigación de estos casos y
referir estas personas a médicos gastroenterólogos, internistas, pediatras dedicados al
manejo de las enfermedades hepáticas.

Las células del hígado inflamadas o lesionadas pierden cantidades superiores a las
habituales de ciertas sustancias químicas, incluidas las enzimas hepáticas, que se
depositan en el torrente sanguíneo, lo que eleva el nivel de enzimas hepáticas en los
análisis de sangre.

Enzimas hepáticas: Fosfatasa alcalina (FA), alanina aminotransferasa (ALT), aspartato

aminotransferasa (AST). Estas enzimas ayudan al hígado a transformar el alimento en
energía. Cuando sus concentraciones son altas, puede ser un signo de que el hígado está
lesionado o irritado.

Bilirrubina. La bilirrubina es un derivado de la descomposición de los glóbulos rojos. El

hígado modifica la bilirrubina para que el cuerpo la pueda expulsar al exterior. Una cantidad
alta de bilirrubina en sangre puede indicar un problema en el hígado. Esto puede hacer que
la piel se vea amarillenta, una afección conocida como ictericia.

4. ¿Por qué los ensayos para medir actividad enzimática se hacen en un medio
que contiene exceso de sustrato?

Todos los ensayos enzimáticos miden el sustrato consumido o el producto generado en la

reacción durante un tiempo.

Medida de la velocidad inicial. Cuando una enzima se mezcla con un gran exceso de sustrato
(a concentración saturante), el complejo intermedio enzima-sustrato se genera en una rápida
fase inicial transitoria. Después, la reacción llega a una cinética constante durante la cual el
complejo enzima-sustrato se mantiene prácticamente en cantidades invariables en el tiempo y la
velocidad de reacción es constante. La velocidad se mide en un corto periodo después de lograr
un estado cuasi-constante, que se detecta típicamente monitorizando la acumulación de
producto durante el tiempo. Como las mediciones se efectúan en un periodo muy corto y por la
concentración saturante de sustrato, puede considerarse que el sustrato libre es igual al sustrato
inicial y que la velocidad medida es la máxima que la enzima puede alcanzar en las condiciones
de reacción dadas, porque no se están dando reacciones inversas o degradación enzimática.
Estas mediciones son las más simples de realizar y analizar al estar relativamente libres de
complicaciones, y por tanto este el tipo de ensayo más usado en cinética enzimática.

5. ¿Podría explicar el principio del método de la determinación de amilasa en

suero? La prueba de amilasa en la sangre se usa para diagnosticar o vigilar
problemas del páncreas como pancreatitis (inflamación del páncreas). Los
resultados de amilasa en la orina pueden ayudar a diagnosticar trastornos del
páncreas y de las glándulas salivales.

DISCUSION DEL CASO No. 1

Hepatitis infecciosa, Pancreatitis aguda y enzimas séricas.

La hepatitis infecciosa es una inflamación aguda del hígado. Las enzimas que están
elevadas en el suero en esta enfermedad son de origen hepatocelular. La lactato
deshidrogenasa y las transaminasas, particularmente la SGPT están presentes en
grandes cantidades en el hepatocito. A pesar de que los aumentos en el suero de la
Lactato deshidrogenasa, SGOT y SGPT están asociados con la hepatitis, no nos
indican un diagnóstico determinante de hepatitis. La ausencia de elevaciones
apreciables de estas tres enzimas séricas es una evidencia fuerte en contra del
diagnóstico de la Hepatitis aguda.

Alternativamente, el hallazgo de un gran aumento en la actividad de la amilasa es

producida en el páncreas y en las glándulas salivales. La amilasa salival cataliza la
degradación del almidón ingerido en la dieta a dextrinas, maltosa y glucosa.

La digestión del almidón se completa en el intestino delgado por la amilasa y

pancreática, la cual convierte el almidón remanente y las dextrinas a glucosa y
maltosa. La amilasa es una de las principales enzimas digestivas sintetizadas por el
páncreas y el tejido exocrino pancreático es particularmente rico en esta enzima.

Por otra parte, el páncreas no es particularmente rico en deshidrogenasa láctica o

transaminas. Por el cuadro clínico de una enfermedad abdominal aguda hay poca
razón para considerar cualquier anormalidad en las glándulas salivales que pudiera
producir una elevación en la amilasa sérica. Sin embargo el cuadro clínico es
compatible con una pancreatitis aguda especialmente en vista de la historia de
ingesta excesiva de alcohol. En muchos casos es difícil o imposible hacer un
diagnóstico definitivo basado solamente en los hallazgos clínicos; la información
adicional que proporciona el Laboratorio Clínico, como por ejemplo: la
determinación de enzimas, hechas en este caso, es una ayuda de gran valor para el
diagnóstico.

Las enzimas séricas y el Diagnóstico

La elevación de las enzimas séricas que acompaña a la inflamación aguda de los

tejidos como pancreatitis o hepatitis es producida por el escape de enzimas de las
células dañadas o muertas. Por consiguiente el trió de enzimas que está aumentado
usualmente señala el tejido que está dañado, por ejemplo: la amilasa y la lipasa en
la pancreatitis y la creatinina fosfoquinasa en el daño o inflamación del músculo.
Usualmente las enzimas que escapan a la sangre son solubles más bien que
proteínas unidas a la membrana. Las enzimas que escapan a la sangre de tejidos
dañados, no tienen función fisiológica en la circulación. En la mayoría de los casos
la elevación en la concentración de enzimas en la sangre no es dañina; por
ejemplo: como no hay almidón en la sangre, la amilasa no tiene sustrato que
degradar. Ninguno de los síntomas de pancreatitis se cree que resultan de la
actividad elevada de la amilasa en el plasma. En este caso la elevación enzimática
en el plasma es solamente un fenómeno asociado con el proceso de la enfermedad
y es afortunadamente útil como ayuda en el diagnóstico.

No obstante están presentes en la sangre una cantidad considerable de triglicéridos

estando ellos en una forma que no pueden ser hidrolizados por la lipasa que
escapa de los tejidos pancreáticos dañados. En este caso la enzima y su sustrato
están presentes al mismo tiempo, pero el estado físico del sustrato lo hace que no
esté disponible para la hidrólisis enzimática. De nuevo el aumento en la
concentración de la enzima es bastante útil como una ayuda en el diagnóstico.

Hay que notar que las enzimas séricas de ayuda diagnóstica en la pancreatitis no
tienen una elevación de actividad simultánea la elevación de la amilasa puede ser
usualmente detectada más tempranamente y el valor retorna a la normalidad más
pronto que los de la lipasa. Debido a esta diferencia, el análisis de la lipasa puede
ser útil para detectar aquellos casos de pancreatitis aguda que de otra manera no
serían evidentes hasta cierto tiempo después de iniciada la enfermedad.

La Bilirrubina y la enfermedad del hígado

El hallazgo de que la bilirrubina plasmática no estaba elevada, también ayuda a

excluir una enfermedad hepática como la hepatitis. La bilirrubina es conjugada en el
hígado para formar el diglucurónido de bilirrubina, una forma más soluble de
bilirrubina que puede ser más fácilmente excretada en la bilis. La hepatitis está
usualmente asociada con un aumento de ambas bilirrubinas plasmáticas directa e
indirecta que acompaña a la ictericia. La inflamación, una dilatación del hígado,
previene que la bilirrubina tenga acceso normal al hepatocito. Menos bilirrubina por
lo tanto conjugada.
El nivel de bilirrubina en el plasma se eleva, aún cuando la cantidad que está
pasando por el hígado no está aumentada. El hígado inflamado es incapaz de
metabolizar una carga normal de bilirrubina.

Por la dilatación e inflamación la velocidad a la cual está disminuido. Debido a la

estasis se escapan cantidades aumentados de bilirrubina conjugada a los
sinusoides hepáticos y por lo tanto a la sangre esto da por resultado aumento en
bilirrubina directa en hepatitis. Niveles normales de bilirrubina plasmática son
compatibles con pancreatitis, pero no en hepatitis

CASO No. 2.

Un niño de un año y medio de edad, hijo de trabajadores de una granja fue

hospitalizado por pérdida de peso, vómitos y dolores abdominales agudos.

Se notó que el niño presentaba descoordinación muscular leve, debilidad de los

músculos dorsoflexores del pie, hipertensión moderada y se sospechó edema
de las terminaciones nerviosas ópticas.

El examen microscópico de un frotis sanguíneo mostró un moderado aumento

en la cantidad de reticulocitos. El recuento de glóbulos rojos fue de 4 x 10 6 mm3
y el hematocrito de 37.

Una muestra de orina 24 horas, colectada en un frasco lavado con ácido,

contenía 840 mg de ácido aminolevulínico y 1.2 mg. de coproporfirina III. Se
inició inmediatamente terapia con penicilina y se pidió al laboratorio un análisis
cuantitativo de plomo en la orina. El reporte de esta prueba indicó una
concentración de 0.24 mg. De plomo en la muestra de 24 horas. Los rayos X de
los huesos largos del paciente mostraron depósitos densos de electrones en la
epífisis.
Con tales datos se hizo el diagnóstico de intoxicación plúmbica, por lo que sería
interesante discutir algo al respecto.

1. ¿Cómo se manifiesta el efecto tóxico del plomo sobre ciertas rutas

metabólicas? se manifiesta alterando su estructura o función, La exposición
al plomo también puede causar anemia, hipertensión, disfunción renal,
inmunotoxicidad y toxicidad reproductiva. Se cree que los efectos
neurológicos y conductuales asociados al plomo son irreversibles. No existe
un nivel de concentración de plomo en sangre que pueda considerase exento
de riesgo.

2. ¿La inhibición enzimática producida por el plomo es competitiva o no

competitiva? No competitiva, ya que la actividad enzimática se pierde.

3. ¿Cuál es el mecanismo por el que se aumenta el ácido aminolevulínico y

la coproporfirina III en la orina? El ALA y coproporfirina III urinario,
aumenta por la inhibición de metales pesados

ácido aminolevulínico

Es la enzima limitante de la biosíntesis de hemo tiene menor capacidad

catalítica de la vía. Se utiliza en diagnóstico de intoxicación por Pb o Hg.

4. ¿Por qué se deposita el plomo en los huesos? Porque la habilidad del

sistema esquelético para depositar plomo puede ser un mecanismo de
protección.

Porque los minerales en huesos generan un equilibrio dinámico.

Porque tiene una relación más directa con niveles de plomo plasmático que el
nivel de plomo en sangre.
 5. Además de depositarse en los huesos existen evidencias de que el Pb
puede depositarse en cualquier otro tejido.

R//también se encuentra depositado en menor grado en cerebro, riñones, hígado y

pulmones.

6. ¿Por qué se usa la penicilamina en el tratamiento de la intoxicación por

plomo?

R//se usa porque la penicilamina por ser un agente quelante que tiene como función
disminuir la toxicidad de metales pesados y además mantiene los iones metálicos
rodeados por una molécula inorgánica de esta manera forma complejos solubles
que fácilmente terminan siendo secretados por la orina.

DISCUSIÓN DEL CASO NO. 2

Siempre hay una pequeña cantidad de plomo presente en el cuerpo; normalmente

los tejidos contienen plomo en cantidades de 4 a 10 rpm. Individuos con trabajos
ocupacionales en los cuales están expuestos al plomo pueden presentar niveles
séricos mucho más altos en el contenido de plomo que los individuos normales. El
plomo es absorbido en el tracto gastrointestinal, pero puede absorberse también por
los pulmones como en una exposición crónica a altas concentraciones del humo de
los motores de automóviles. El plomo ingerido es captado más ávidamente por el
esternón y los huesos largos y en menor grado es depositado en cerebro, riñones,
hígado y pulmones. El resto del plomo absorbido es excretado en la orina; la cual
normalmente contiene 4 a 15 g/24 h. La intoxicación accidental por plomo resulta de
la ingestión de excesivas cantidades de plomo, usualmente por un período
considerable de tiempo. En este caso parece que el niño estaba comiendo o
masticando algo en su casa que contenía plomo, como escamas de pintura de
muebles de madera, juguetes y otros.

INHIBICION NO COMPETITIVA POR PLOMO

El plomo forma enlaces salinos de tipo sulfuro de plomo o mercapturo con los
grupos sulfhídrico de algunos aminoácidos. Muchas proteínas en el cuerpo,
incluyendo un gran número de enzimas, contienen residuos de cisteína que tiene
grupos sulfidrilos libres. Las proteínas son casi siempre inactivadas cuando el plomo
se combina con sus grupos sulfhídricos. La unión entre el plomo y los grupos
sulfhídricos de las proteínas es muy fuerte y los cambios producidos en las
proteínas son virtualmente irreversibles. Si sucede que la proteína es una enzima;
la actividad enzimática se pierde. Un análisis cinético de esa enzima en particular
revelaría una inhibición no competitiva. Este es el tipo de inhibición que no puede
revertirse simplemente aumentado la concentración del substrato. Esas moléculas
de enzimas que han formado un complejo con el plomo no tendrán más actividad
enzimática. Las moléculas de enzima remanentes que están libres de plomo
funcionan normalmente. El descenso en la concentración de enzimas funcionales da
por resultado una disminución en la V max., pero la Km., de la reacción permanece
sin cambio.

Las enzimas siendo catalizadores están usualmente presentes en pequeñas

cantidades. Así la presencia de aún un pequeño exceso de plomo puede ejercer
efectos metabólicos pronunciados. Todo lo que se requiere para que se manifiesten
efectos tóxicos es la inactivación de alguna fracción de una o más enzimas claves.

El Plomo y la Síntesis del Hemo:

Una vía metabólica que es extremadamente sensible a la presencia de un exceso

de plomo es la biosíntesis del Hemo; en particular, el plomo afecta la enzima
ferrocatalasa. La ferrocatalasa cataliza la inserción de hierro ferroso dentro de la
protoporfirina IX en la formación del Hemo.

En la intoxicación por plomo el aminolevulinato es excretado en cantidades

aumentadas, debido a lo cual los intermediarios no pueden ser convertidos en Hemo
lo suficientemente rápido cuando la actividad de la ferrocatalasa es inhibida.
Igualmente la protoporfirina IX que es formada no puede ser convertida a Hemo
debido a la inhibición de la ferroquelatasa. Las porfirinas se producen en los tejidos
y la fracción en exceso es excretado como coproporfirina III. La anemia ligera que
se observa en éste paciente se debe en parte a la inhibición de la biosíntesis del
Hemo por los efectos tóxicos del plomo.

El Plomo y otros procesos Bioquímicos

Hay buenas razones para creer que los efectos tóxicos de la intoxicación por el
plomo no están limitados a la síntesis de la hemoglobina; evidencias de esto son la
neuropatía y la debilidad muscular mencionada en el caso discutido. Estas
condiciones probablemente resultarían de la inhibición de enzimas y proteínas
esenciales del sistema nervioso y de los músculos. En los niños, especialmente, la
intoxicación por plomo produce edema cerebral severo, que algunas veces requiere
trepanación del cráneo para evitar daño cerebral permanente causado por el
aumento de la presión intracraneal. Lo más probable es que las proteínas afectadas
sean aquellas que se encuentran en pequeñas cantidades y es seguro de que
poseen grupos sulfidrilo. Además es bien sabido que las sales de metales de
metales pesados de los ácidos grasos y aminoácidos son relativamente insolubles;
esto implica que el transporte y conversión a otros productos o a energía podrían
ser adversamente afectados por las concentraciones elevadas de plomo en los
tejidos. Es posible, pero no está probado, que la pérdida de peso vista algunas
veces en la intoxicación por plomo puede ser causada por este factor. Similarmente
los depósitos grasos en el hígado de individuos con intoxicación por plomo pueden
presentar una inhabilidad para movilizar adecuadamente los triglicéridos del hígado.

Estudios experimentales en ratas intoxicadas con plomo han demostrado que las
células epiteliales del túbulo proximal del riñón son estructural y funcionalmente
anormales. La mitocondria basal de estas células están edematizadas y tienen
crestas pobremente definidas, como consecuencia hay una disminución en la
reabsorción de aminoácidos de los fluidos tubulares. Esto es una pérdida nutricional
significativa, Las membranas de la función de las mitocondrias aisladas son
inusualmente frágiles y el control respiratorio comparado con el normal, está
disminuido. La habilidad fosforilativa es solamente parcialmente restablecida por el
tratamiento con EDTA.
El Plomo y el Sistema Esquelético

El plomo (Grupo IV en la tabla periódica) tiene muchas propiedades similares a los

del calcio (Grupo II). El cuerpo no distingue claramente entre ellos; así el plomo es
depositado en las substancias minerales del hueso, especialmente en los niños en
crecimiento. Así como el calcio, la mayor cantidad de plomo, es depositada en los
sitios activos del metabolismo óseo. El plomo es más denso a los electrones que el
calcio y aparece en las radiografías como áreas de mayor densidad. La habilidad del
sistema esquelético para depositar plomo puede ser un mecanismo de protección,
ya que el plomo depositado no está disponible para reaccionar con los grupos
sulfhídricos de las proteínas. Sin embargo se ha hecho cada vez más claro que los
minerales en los huesos existen en un equilibrio dinámico con otros minerales del
cuerpo; tanto que cualquier necesidad de retirar calcio de las substancias óseas
también retirará el plomo depositado. Por consiguiente el tratamiento debe ser
diseñado a solubilizar el plomo depositado en una forma no iónica que puede ser
excretado sin dañar las proteínas.

Quelación del Plomo

El niño fue tratado con penicilamina, un compuesto no antibiótico derivado de la

penicilina el cual forma complejos muy estables con los iones de plomo, así como
los de otros metales pesados.

La penicilamina es un ejemplo de la clase de compuestos conocidos como agentes

quelantes. Estos compuestos tienen la capacidad de combinarse con ciertos
ligandos (en este caso el plomo) para producir compuestos que están solo
ligeramente disociados. Otros agentes en este grupo incluyen el ácido
etilendiaminotetra-acético (EDTA) y el 2-3 dimercaptopropanol (BAL). La estructura
de sus complejos con plomo son mostrados en la figura final.

El plomo es un complejo no iónico estable, no es tóxico, por lo tanto, los agentes

quelantes sirven primordialmente para disminuir la toxicidad del plomo circulante.
Segundo, la forma quelada del plomo es más soluble que la forma no quelada; el
plomo depositado en los huesos se disolverá lentamente, si está unido a un agente
quelante y será luego excretado por el riñón. Desafortunadamente la reacción entre
los agentes quelantes y los iones metálicos no es absolutamente específico y es
posible que varios iones esenciales, así como aquellos que son tóxicos, pueden
verse involucrados en la reacción.

La terapia con agentes quelantes requiere considerable habilidad clínica y un control

constante del paciente para no inducir deficiencias de cationes divalentes esenciales
como el calcio

OBJETIVOS:

Que el estudiante sea capaz de:

1. Recordar la naturaleza química de las enzimas y la función que desempeñan

en los sistemas biológicos.

R//las enzimas son moléculas de naturaleza proteica y estas son mediadoras de

las reacciones del organismo realizando una acción enzimática de catálisis que
aumenta la velocidad de las reacciones sin experimentar cambios en el proceso.

2. Recordar en que forma el ambiente acuoso afecta el estado iónico de una

enzima.

Los cambios de carga pueden afectar la actividad, ya sea

cambiando la estructura o la carga en un residuo que funcione para ligar el
sustrato o en la catálisis.

Ph extremos (típicamente por debajo de 4.0 y por encima de 10.0)

se desnaturaliza la enzima irreversiblemente perdiendo con esta su
actividad..Afectan las cadenas (-R), las cuales tienen grupos que se ven
afectados: -OH, -COOH, -NH2. ZWITTERION

3. Recordar otros factores que afectan el estado iónico de una enzima y cómo lo
hacen.

TEMPERATURA: las enzimas como proteínas que son se ven afectadas por la
temperatura.En una reacción no catalizada o incluso en las reacciones
catalizadas por enzimas, a mayor temperatura mayor velocidad de reacción,
 debido a que se incrementa el movimiento de las moléculas por un previo
incremento de la energía cinética de estas; es decir que es directamente
proporcional.
Las enzimas actúan a una temperatura óptima de 37º C, esta temperatura
depende de la temperatura normal de las células en la que reside la
enzima,generalmente las enzimas en el hombre son estables a temperaturas
de hasta 45 a 55º C, superior o igual a 55º C la enzima se
desnaturaliza, (existen excepciones: proteasa casi en punto de
ebullición), con una pérdida de la actividad catalítica. Las temperaturas
bajas no la desnaturalizan sino que se desactiva y hasta después se vuelven
activas en temperatura ambiente.
Q10: es un coeficiente de temperatura. Si se aumenta la temperatura 10º C, la
velocidad de un proceso biológico aumenta en la misma proporción.

pH: La velocidad de casi todas las reacciones catalizadas por

enzimas dependen de la concentración de iones hidrógenos. La mayoría de
las enzimas tienen un pH entre 5 y 9 (existen excepciones: pepsina pH 1.5).

El pH al que las enzimas llevan a cabo su actividad catalítica es el pH óptimo, si

este pH es alterado de manera drástica, la enzima se desnaturaliza y por
tanto pierde su actividad catalítica. Por lo tanto, cambios mínimos de pH
dentro de los límites fisiológicos, ayudan a regular las reacciones
enzimáticas.

CONCENTRACIÓN DE ENZIMAS: es directamente proporcional, a

mayorcantidad de enzima, mayor velocidad de la reacción, pero esto solo se
cumple cuando la velocidad inicial depende de la concentración.

CONCENTRACIÓN DE SUSTRATO: Cuando se incrementa la concentración de

sustrato, la velocidad inicial aumenta hasta que alcanza un valor
máximo(Vmax). Cuando se llega al punto en que aumentar más la
concentración de sustrato no incrementa la velocidad inicial, se dice que la
enzima está saturada con el sustrato, y aunque se le agregara mas sustrato,
este ya no influiría en la velocidad de la reacción, se vuelve constante.Con
pequeñas cantidades de sustrato, la velocidad es directamente
proporcional a la concentración de este; y con grandes cantidades de
sustrato,la velocidad se vuelve constante.

4. Recordar por qué razón el pH del ambiente intracelular de una enzima no es

precisamente su pH óptimo.
 Esto es debido a que hay enzimas que tienen una actividad tan grande, que
son capaces de transformar bastantes moléculas de sustratos por
segundo, y una forma de controlar su actividad en el organismo es
mantenerlas a un pH diferente de su pH óptimo. Si No hubiera un
metabolismo activado.
Además se debe a que las enzimas manifiestan propiedades diferentes
in Vitro Que in vivo, donde la interacción con los componentes
celulares pueden modificar la dependencia frente al pH.

5. Describir la composición de una holoenzima.

Holoenzimas, enzimas formadas por la asociación de una parte polipeptídica o apoenzima

y de una parte no polipeptídica o cofactor, que puede ser un ion o una molécula orgánica
compleja unida (grupo prostético) o no (una coenzima). En resumidas cuentas, es una
enzima completa y activada catalíticamente.

6. Definir y ejemplificar:
a) enzimas funcionales del plasma
Las enzimas funcionales tienen una función definida y específica en este medio (en la
sangre), por lo que el plasma constituye su sitio normal de acción, y su concentración
plasmática es equivalente o mayor que la del tejido donde se producen. son fabricadas por
lo general en el hígado y en menor proporción en el tejido adiposo.

b) enzimas no funcionales del plasma

no cumplen funciones en la sangre debido a que su sustrato no esta presente en ella.Están
en la sangre como fruto de la muerte celular normal. Su presencia está dada porque las
células al destruirse desechan sus elementos constitutivos en la sangre y por tanto están en
tránsito hacia su eliminación. Su presencia en plasma en niveles más altos de lo normal
sugiere un aumento en la velocidad de destrucción celular y tisular.

c) enzimas orientadoras de órgano

son enzimas que están presentes en concentración apreciables sólo en un órgano. Estas al
incrementar su concentración en la sangre, orientan al médico para conocer en qué órgano
o tejido está la enfermedad.

d) enzimas secreción.

son aquellas que van a ser secretadas por un órgano o glándula (secreciones exocrinas)
en forma pasiva y van a ejercer su acción a otro sitio.
 7. Explicar la relación que existe entre el daño celular y la actividad de las
enzimas en el plasma.

Los valores de enzimas plasmáticas no funcionales se interpretan como prueba de

unanecrosis celular o bien de enfermedades en tejidos y órganos. Normalmente los
nivelesplasmáticos son muy bajos o nulos. Una agresión en forma de cualquier
procesopatológico, pueden provocar cambios en la permeabilidad de la membrana celular
oincrementar la muerte celular, dando lugar a la liberación de enzimas intracelulares en
elplasma. En casos de cambios de permeabilidad las primeras enzimas que aparecerán en
elplasma, serán las de menor peso molecular y cuanto mas grande sea el gradiente
deconcentración entre los niveles Nitra y extracelular, más rápidamente difundirá la enzima.
Las enzimas no funcionales del plasma se incrementaran cuanto mayor sea la cantidad
detejido dañado. Y luego desaparecerán a velocidades diferentes, de acuerdo con
laestabilidad de la enzima y su susceptibilidad al sistema retículo endotelial.

8. Recordar las muestras biológicas adecuadas para efectuar las

determinaciones enzimáticas.

De la sangre y la orina.

Sangre: examen para ver enzimas cardiacas- Por obstrucción o algún estado que altere la
circulación normal de la sangre a través de las arterias coronarias, se produce un corte de esta
circulación, produciendo así lo que se llama Isquemia y posteriormente se produce necrosis
haciendo que el musculo cardiaco se contraiga bruscamente y liberando al torrente sanguíneo
una serie de proteínas y enzimas.

Los marcadores cardiacos (proteínas y enzimas ) que se miden en un examen de sangre para
descartar un infarto de miocardio o un síndrome coronario son:

-Mioglobina: SU VALOR NORMAL ES DE 19 - 92 en el hombre y 12 - 76 en la mujer,

estos valores aumentan a las 2 horas después de haber iniciado el infarto, alcanza su máxima
concentración a las 3 horas y declina a las 4 horas, lo malo de esta proteína es que aumenta en
otras enfermedades o lesiones musculares, por eso no es de muy buen uso.

CK y CK-MB estas dos enzimas aumentan en este tipo de lesión, pero la CK-MB Es
especifica en el infarto, CK aumenta: 4 a 8 horas, Máxima concentración 12 horas, declina a
las 24 a 72 horas valor normal, la CK es menos especifica

La TGO o también llamada AST aumenta no solo en la necrosis del miocardio, también
aumenta en enfermedades del hígado y aumenta a las 8 a 12 horas por eso es mala en caso de
una emergencia al igual que la llamada LDH que tarda en aumentar (a las 12 horas).
La troponina es buena para el diagnóstico, aumenta tan rápido o antes que la CK-MB. Más o
menos a las 2 a 4 horas y su aumento se debe por destrucción de la fibra del miocardio y tarda
días en disminuir.

Análisis de la enzima alanina aminotransferasa:

El análisis de la enzima alanina aminotransferasa suele formar parte de los análisis iniciales
para detectar enfermedades hepáticas.

Las proteínas denominadas "enzimas" ayudan al hígado a crear y descomponer las proteínas.
La enzima alanina aminotransferasa es una de esas enzimas. Está presente en cantidades
particularmente altas en el hígado y desempeña un papel importante en el metabolismo,

En general, la enzima alanina aminotransferasa se encuentra dentro de las células del hígado.
Pero si el hígado presenta una inflamación o una lesión, libera la enzima en el torrente
sanguíneo. La medición de los niveles de ALT (siglas en ingles) en la sangre les brinda a los
médicos información importante acerca del funcionaomiento del hígado y les permite saber si
está siendo afectado por una enfermedad, una droga u otro problema.

Orina.

La acidaría metilmalonil.

La acidaría metilmalónica es una enfermedad que se debe a defectos en el fermento

metilmalonil -Coenzima A- mutasa

normalmente diagnosticado en la infancia, que ocasiona la acumulación de ácido

metilmalónico en el cuerpo y que puede conducir a problemas metabólicos graves.

La detección de aproximadamente 155 compuestos orgánicos, permite definir el diagnóstico

de todas las acidurias orgánicas que presentan perfiles acídicos característicos.

En la aciduria metilmalónica se detecta ácido metilmalónico en la orina, ácido cuya presencia

es anormal en cualquier cuantía con los métodos habituales de determinación.

Amilasa en orina

Es un examen que mide la cantidad de amilasa en la orina. La amilasa es una enzima que
ayuda a digerir carbohidratos, y es producida principalmente en el páncreas y en las glándulas
que producen la saliva.

La amilasa también se puede medir con un examen de sangre.

Razones por las que se realiza el examen

Este examen se hace para diagnosticar pancreatitis y otras enfermedades que afectan el
páncreas.
Valores normales

El rango normal es de 2.6 a 21.2 unidades internacionales por hora (UI/h).

Un incremento en la cantidad de amilasa en la orina se denomina amilasuria y puede ser un

signo de:

● Pancreatitis aguda
● Consumo de alcohol
● Cáncer de páncreas, ovarios o pulmones
● Colecistitis
● Embarazo tubárico ectópico o con ruptura
● Colecistopatía
● Infección de las glándulas salivales (denominada sialoadenitis; puede ser causada por
paperas o una obstrucción)
● Oclusión intestinal
● Obstrucción del conducto pancreático
● Enfermedad inflamatoria pélvica
● Úlcera péptica

9. Explicar cómo se puede medir la actividad de las enzimas en las muestras

biológicas.

10. Recordar las unidades en que se expresa la actividad de las enzimas.

Se expresa como (U) como la cantidad de enzima que cataliza la conversión de
1umol de sustrato en un minuto. La actividad específica es el número de
unidades de enzima por miligramo de proteína (U/MG prot) o por mililitro de
disolución (U/ml).

11. Explicar que son los zimógenos, su proceso de activación y su

importancia médica ejemplificando su hidrólisis selectiva o parcial.
es un precursor enzimático inactivo, es decir, no cataliza ninguna reacción como
lo hacen las enzimas. para activarse, necesita de un cambio bioquímico en su
estructura que le lleve a conformar un centro activo donde pueda realizar la
catálisis. en ese momento, el zimógeno pasa a hacer una enzima activa. El
cambio bioquímico suele ocurrir en un lisosoma, donde una parte específica
de la enzima precursora se escinde del resto para activarla.
los zimógenos se pueden ocupar para la digestión o en coagulación sanguínea
pj. en la digestión, las enzimas digestivas pancreáticas se sintetizan como
 zimógenos que son activados por enzimas proteolíticas así se hidrolizan los
enlaces peptídicos.

12. Describir la clasificación de las enzimas de acuerdo a la reacción que

catalizan y ubicar a la amilasa dentro de ella.
cada enzima cataliza un solo tipo de reacción y casi siempre actúa sobre un
único sustrato o sobre un grupo muy reducido de ellos, en la amilasa
reacción de hidrólisis de los enlaces 1-4 entre las unidades de glucosa al
digerir el glucógeno y el almidón para formar fragmento de glucosa y glucosa
libre.

13. Señalar las razones que en el caso estudiado condujeron a descartar el

diagnóstico de hepatitis.

A pesar de los aumentos en el suero de lactato deshidrogenasa, SGOT y SGPT

están asociados con la hepatitis, no nos indican un diagnóstico de terminante de
hepatitis.

La ausencia de elevaciones apreciables de estas 3 enzimas sericas es una

evidencia fuerte en contra del diagnóstico de la hepatitis aguda.

14. Explicar la importancia de las determinaciones enzimáticas para el

diagnóstico diferencial y evolución de los estados patológicos.

Las enzimas llevan a cabo funciones vitales relacionadas con la salud y

enfermedad, es decir, el clínico necesita conocer su funcionamiento y la
actividad de las enzimas para el diagnóstico estados patológicos.

Los organismos responden a cambios internos y externos mediante

modificaciones en las velocidades de reacciones metabólicas.

15. Explicar las causas de la alteración de las actividades en suero de la amilasa

y la lipasa pancreáticas en la pancreatitis aguda.
R/ Sí estas enzimas están sumamente alteradas nos pueden confirmar el
diagnóstico que se puede sospechar por clínicas, estas enzimas pueden
desaparecer totalmente y ser imperceptibles pero esto ya nos da aviso
de que el páncreas murió por así decirlo o ya no está secretando
ninguna enzima.

16. Explicar por qué en la pancreatitis aguda la actividad en suero de las

transaminasas y de la LDH están normales.
R/ Los niveles de transaminasas y de LDH pueden mantenerse a un
nivel normal debido a que estas se elevan al existir una lesión o daño a
 nivel del tejido lo cual no ocurre en una pancreatitis ya que una
pancreatitis aguda lo que produce es una inflamación del órgano.

17. Clasificar cada una de las enzimas: lipasa, amilasa, transaminasas y

deshidrogenasas lácticas, según la clasificación general de las enzimas.

Clase Tipo de reacción Ejemplo

que catalizan
Hidrolasa Hidrólisis, con
transferencia de grupos Lipasa y Amilasa
funcionales del agua.

Transferasas Transferencia de Transaminasas

grupos C, N o P.

Oxidoreductasas De óxido reducción Deshidrogenasas

(transferencia de e-)

18. Explicar en qué consiste inhibir una enzima y señalar los diferentes tipos de
inhibidores enzimáticos, diferenciando con el proceso de desnaturalización.

Consiste en que cualquier sustancia pueda reducir la velocidad de una reacción

catalizada por enzimas.
Las enzimas se pueden inhibir por modificación irreversible de un grupo
funcional esencial para la actividad catalítica. También se pueden inhibir por
moléculas que se fijan reversiblemente.
Los inhibidores competitivos compiten reversiblemente con el sustrato para fijarse
en el sitio activo pero no son transformados por el enzima.
Los inhibidores no competitivos se fijan al complejo enzima-sustrato en un sitio
diferente del centro activo.
En la inhibición mixta, un inhibidor se fija a la enzima o al complejo enzima-sustrato,
también en un sitio distinto del que une el sustrato.La actividad enzimática puede
ser disminuida o eliminada por la acción de ciertas sustancias a las cuales se les
conoce con el nombre de inhibidores enzimáticos.
Mediante el uso de inhibidores enzimáticos se ha obtenido información muy valiosa
sobre la conformación del centro activo de algunas enzimas. Irreversibles

19. Señalar el tipo de inhibición enzimática que produce el plomo.

 El plomo es un ejemplo de inhibidor no competitivo. Forma enlaces covalente
con los grupos sulfhidrilos de la cisteína en las proteínas. El plomo inhibe de
manera irreversible a la ferroquelatasa, enzima que incorpora hierro a la síntesis
del grupo hemo de la hemoglobina y otras hemoproteínas.

20. Mencionar las fuentes que ocasionan intoxicación de plomo.

Las personas pueden verse expuestas al plomo en su puesto de trabajo o en su

entorno, principalmente a través de:

● la inhalación de partículas de plomo generadas por la combustión de

materiales que contienen este metal (por ejemplo, durante actividades de
fundición, reciclaje en condiciones no seguras o decapado de pintura con
plomo, o al utilizar gasolina con plomo);
● la ingestión de polvo, agua o alimentos contaminados (por ejemplo, agua
canalizada a través de tuberías de plomo o alimentos envasados en
recipientes con esmalte de plomo o soldados con este metal).

Otra posible fuente de exposición al plomo es el uso de determinados productos

cosméticos y medicamentos no regulados.

21. Explicar los efectos tóxicos del plomo en los diferentes órganos.

la intoxicación por plomo puede causar deficiencias enzimáticas, anemias, y

principalmente efectos neurológicos irreversibles, afectando la mayoría de órganos
como los riñones y el sistema nervioso.

22. Describir la ruta metabólica más afectada por el plomo.

la ruta metabólica más afectada es la hemoglobina ya que el plomo posee gran

afinidad con los glóbulos rojos.

23. Recordar los medicamentos indicados para el tratamiento de intoxicación con

plomo discutido en el caso.
-Penicilamina
-EDTA (ácido etilendiaminotetra-acetico)
-BAL (2-3 dimereapropropanol)