PRÁCTICA 10

DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS

INTRODUCCION

Las proteínas son polímeros compuestos por varios monómeros llamados

aminoácidos. Estos aminoácidos, a su vez se clasifican dependiendo a
si se requiere su ingesta o si son fabricados por el mismo
organismo, en esenciales y no esenciales respectivamente.
En su estructura un aminoácido tiene un grupo amino y otro carboxilo, de
ahí, su nombre

Los aminoácidos se unen entre si mediante enlaces peptídicos.

Las proteínas forman parte integral de las estructuras celulares y son los
componentes más importantes gracias a las propiedades fisicoquímicas y
biológicas que permiten que se lleve a cabo numerosas transformaciones
metabólicas de procesos vitales.
Las proteínas cumplen varias funciones importantes en nuestro organismo
como:
Se han descrito cuatro niveles de organización de las proteínas:

La función principal de una proteína depende de su configuración

estructural y cuando esta se ve alterada por agentes químicos o físicos,
pierde su funcionalidad biológica y a este proceso se le conoce con el
nombre de desnaturalización.
 Proceso de desnaturalización de una proteína
Fuente (https://propiedadesde.site/propiedades-de-las-proteinas/)

OBJETIVOS

♦ Aprender el principio básico de la prueba de Biuret para

determinar cualitativamente la presencia de proteínas en una
muestra biológica.

♦ Evaluar los posibles resultados para el test de Biuret en

diferentes muestras biológicas a partir de su principio
básico.

♦ Demostrar que las proteínas pueden desnaturalizarse.

MATERIALES (Por grupo):

 Clara de huevo  Pipetas de Pasteur

(ovoalbúmina)*
 Marcador permanente*
 Leche *
 Servilletas de papel de cocina*
 Frascos o vasos vacíos de
 Papel de filtro
vidrio transparente. *
 Baño María
 Semillas de papaya
 Olla *
 Jamón
 Jeringa de 10 ml o
medidores de jarabes infantiles*

 Vinagre Ácido acético *

 Recativo de Biuret

* Materiales que deben tener los estudiantes en casa

1) REACCIÓN DE BIURET
PROCEDIMIENTO
1. Rotular 2 tubos de ensayo como leche y huevo.

2. Colocar 1 mL de muestra en cada tubo.

3. Añadir 1 mL de hidróxido de sodio al 20%.

4. Agitar suavemente

5. Añadir 4 o 5 gotas de sulfato de cobre al 1%

6. Observar el cambio de coloración.

Análisis de resultados

Para analizar los resultados anteriores TOMA UN PANTALLAZO DE LOS

RESULTADOS y analiza las siguientes preguntas:
1. ¿Hay diferencias de coloración entre la leche y la clara de huevo?

2. ¿Cuál de las dos presenta una mayor concentración de proteínas?

2) DESNATURALIZACIÓN PROTEICA
PROCEDIMIENTO

1. Añadir 2 ml de clara de huevo al tubo de ensayo

2. Añadir 5 gotas de ácido acético y agitar.

3. Observar y tomar nota de los cambios

4. Llevar al Baño María por 5 minutos a 90ºC

5. Observar y tomar nota de los cambios

Análisis de resultados

Para analizar los resultados anteriores TOMA UN PANTALLAZO DE LOS

RESULTADOS y analiza las siguientes preguntas:
1. ¿Cómo afecta el ácido acético a las proteínas?

2. ¿Crees que si el ácido acético rompe el enlace peptídico la reacción

de Biuret dará positiva?

3) EFECTO DE LAS ENZIMAS SOBRE LAS PROTEÍNAS

PROCEDIMIENTO

1. Coloca en un mortero 10 semillas de papaya con un poco de agua,

macéralas y filtra con ayuda de una gasa.

2. En otro mortero macera una loncha de jamón con un poco de agua

y filtra con ayuda de una gasa, descarta el sólido y reserva el líquido
decantado

3. Coloca en un tubo de ensayo 2 mL del líquido del decantado del

jamón, y realiza la prueba de Biuret. Agite. Anote el color

4. En otro tubo coloca 2 mL del líquido del decantado del jamón y 2

mL del líquido del decantado de la papaya, agítala y déjela reposar por
25 minutos, transcurrido este tiempo realizamos prueba de Biuret a este
tubo.

5. Observar y tomar nota de los cambios

Análisis de resultados

Para analizar los resultados anteriores TOMA UN PANTALLAZO DE LOS

RESULTADOS y analiza las siguientes preguntas:
1. ¿Qué tipo de enzima se encuentra en las semillas de papaya cuál
es su sustrato?
2. Luego de someter el jamón a esta enzima …… ¿Por qué la prueba
de Biuret da negativa?

4) DESNATURALIZACIÓN PROTEICA CASERA

PROCEDIMIENTO

1. Colocar en un frasco 10mL de clara de huevo y en otro 10mL de

leche.

2. Añadir 20 gotas de vinagre blanco a ambas muestras.

3. Observar y anotar los cambios

 Fuente: los autores

4. A continuación, calentar las dos muestras al baño maría durante 5

minutos. Observar y anotar los cambios

Fuente: los autores

Análisis de resultados

1. ¿Existen diferencias entre los resultados obtenidos en el laboratorio

y los obtenidos en casa? Explica tu respuesta.

2. ¿En qué consiste el proceso de desnaturalización de las proteínas?

3. ¿Qué es la renaturalización de las proteínas?

5).DESNATURALIZACIÓN PROTEICA CASERA DEL
HUEVO
PROCEDIMIENTO

1. Coloca una pequeña cantidad de agua en una sartén u olla

2. Toma un huevo, rompe la cáscara y deposita su contenido

completo en una olla o sartén.

3. Observa los resultados y toma fotos.

Análisis de resultados

1. ¿Será posible que nazca un pollito a partir de este? Si o No. ¿Por qué?

CUESTIONARIO

1. Indique las principales características estructurales y funcionales

de las proteínas

2. Señale la importancia de la estructura primaria, secundaria,

terciaria y cuaternaria, en la determinación de las propiedades
funcionales de las proteínas.

3. ¿Cuál es el fundamento de la reacción de Biuret

4. ¿Cuáles son las patologías relacionadas con el aumento o

disminución de las proteínas?

Link:

https://youtu.be/k6-dknvzYpE