CUANTIFICACIÓN POR COMPARACIÓN CON UN ESTÁNDAR- DETERMINACIÓN

DE FRAMICETINA EN UNA SOLUCIÓN OTO-OFTÁLMICA

Conde J,1 Meza A,1 Nestares E, 1 Solis A1

1
Cátedra de Química Analítica Instrumental, Facultad de Farmacia y Bioquímica,
Universidad Nacional Mayor de San Marcos.

RESUMEN

Dentro de las metodologías analíticas, las determinaciones cuantitativas tienen una

especial relevancia en diversas actividades, pero poseen una mayor relevancia en
campos de investigación, tales como la industria farmacéutica, industrial, etc. Dentro de
todos estos campos, la información será utilizada con el fin de potenciar
exponencialmente cada una de estas industrias. La obtención de una curva de
calibración, nos permite cuantificar la concentración de muestras problema con cierto
grado de incertidumbre, es ahí donde la estadística y la química interaccionan para
brindar a la rama de la química analítica, las herramientas necesarias para asegurar
la calidad de los resultados generados en el proceso. El uso adecuado de
técnicas como las que se describen y utilizan para el desarrollo del presente informe,
requieren de parámetros de calidad, los cuales enumeran los criterios cuantitativos de
funcionamiento de los instrumentos, criterios que se pueden utilizar para decidir
su un determinado método instrumental es o no adecuado para resolver un problema
analítico. Estas características se expresan en términos numéricos. Para un
problema analítico dado, los parámetros de calidad permiten reducir la elección de los
instrumentos a tan solo unos pocos y entonces la selección entre ellos ya se hace con
los criterios cualitativos de funcionamiento. Es por ello que, en el presente informe, se
ahondará mucho más sobre todos aquellos beneficios que se pueden derivar de este tipo
de metodología (concretamente, la cuantificación por comparación a un estándar), los
cuales permitirán una mejor comprensión sobre el estudio de las muestras, así también
como variación a los diversos tipos de enfoques que se pueden aplicar al desarrollo de
éstas.

Palabras clave: Curva de calibración, cuantificación, estándar, determinantes

cuantitativas.

INTRODUCCIÓN

Los avances tecnológicos han permitido el desarrollo de la realización de procedimientos

analíticos para diversas sustancias. Sin embargo, aún es necesario que existan métodos
comparativos utilizando estándares de acuerdo al método a utilizar, para determinar con
certeza la presencia y cuantificación de las sustancias químicas. Para ello, es necesario
conocer el comportamiento químico en los compuestos de coordinación, así como los
métodos complejométricos de análisis; de esta forma se realizará las determinaciones
con exactitud, seguridad y sencillez1.

En este experimento de cuantificación por comparación con un estándar, se utiliza la

framicetina. La framicetina es un antibiótico aminoglucósido bactericida del grupo de la
neomicina producida por ciertas cepas de Streptomyces fradiea y Streptomyces decaris2.
Está compuesto principalmente de neomicina B, el mayor componente del sulfato de
neomicina y contiene menos de 3% de neomicina C.

En este experimento es necesario parámetros de calidad, enumerándose los criterios

cuantitativos de funcionamiento de los instrumentos, criterios que se pueden utilizar para
decidir si un determinado método instrumental es adecuado para resolver un problema
analítico3. Los objetivos de este experimento es aplicar el método Espectrofotométrico
para la determinación cuantitativa de un principio activo (framicetina) por medio de la
formación de complejos coloreados, asimismo demostrar una actitud solidaria y tolerante
adecuándose al trabajo en equipo y asume el proceso de aprendizaje con interés y
responsabilidad.

MATERIALES Y MÉTODOS

Materiales y reactivos

● Pipetas volumétricas de 1,0; 2,5; 5,0 mL de centésimo, vasos de precipitados,

fiolas de 25 mL.

Equipos

● Espectrofotómetro UV-Visible y su respectivo manual de instrucciones, celdas de

vidrio o cuarzo.

Procedimiento experimental

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

1. Detallar los cálculos previos. Detallar los cálculos del factor de dilución.

● Framicetina 1%

● Factor de dilución (FD): 117041.1985 ml/g

● El espectrofotómetro UV-visible a λ=585 nm

 2. ¿Hacer los cálculos de la concentración de framicetina en la forma
farmacéutica expresados en mg/mL?

Cm = 0.233/0.286 x 8 ug/ml

Cm = 6.5174 ug/ml

Cm = 0.0065174 mg/ml

Al hacer una dilución se tiene que multiplicar por el Factor de dilución

C= 0.0065174 x 117041.1985 = 762.8043 mg/ml

3. ¿Concluya si la muestra se acepta o se rechaza, por qué?

Según lo declarado por el fabricante:

152.56 %

La USP número 36 nos indica que usado como ungüento oftálmico contiene el
equivalente al no menos de 90.0% y no más del 135.0% de la cantidad declarada; por lo
que nuestra muestra es RECHAZADA ya que no está dentro del rango permitido de
concentración

Discusión:

En el experimento se utilizó una muestra en blanco, una muestra estándar y una muestra
problema (framicetina) cada uno con diferentes funciones en el proceso de
espectrofotometría Gary T. Bender enuncia que para que el analista conozca las
longitudes de onda adecuadas para los monocromadores se preparan varias soluciones
estándar a partir del analito puro y de un solvente apropiado que no sea fluorescente y
que no contenga iones o impurezas que puedan hacer variar los resultados4, una vez
obtenidos los datos de las absorciones con ellos se calculó la concentración de la muestra
problema la cual fue de 0.0065174 mg/ml al compararla con la concentración de la
muestra descrita por el producto que es de 10 mg/ml se puede observar que ha variado
por lo tanto el porcentaje real de la Framicetina es un 152.56 %, según la USP5. Se puede
deducir que la concentración es diferente a lo establecido por el fabricante esto podría
deberse a errores sistemáticos o pequeños desplazamientos de las celdas o cubeta en
la porta cubetas según Harris. Así mismo estas diferencias ligeras se puede deber a la
inestabilidad del compuesto coloreado producto de la reacción de la Framicetina
con el Nitroprusiato de Sodio.
CONCLUSIONES (en cuantitativas)

● Se aplicó el método Espectrofotométrico para la determinación cuantitativa del

FRAMIDEX (framicetina al 1%) por medio de la formación del complejo coloreado
púrpura por acción del prusiato de sodio.

● Se demostró que el rango de porcentaje de aceptación del FRAMIDEX según la

United States Pharmacopeia (USP) no es el mismo para otro fármaco similar, así
tenga el mismo principio activo (framicetina), es decir, el rango de aceptación
cambia con respecto a todos los componentes del fármaco (principio activo y
excipientes)

RECOMENDACIONES

• Preparar soluciones tomando siempre en cuenta la presencia de un estándar

(evitar interferencias a nivel de la matriz en análisis).

• Trabajar mediante concentraciones, las cuales permitan ejecutar un diagnóstico

adecuado de la operación, tomando en cuenta las interferencias halladas.

• Respetar los tiempos de medición, con el fin de poder realizar una medición
estable de cada uno de los compuestos.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS (SEGÚN VANCOUVER)

[1] Dubon A, Ivette A. Determinación Cuantitativa de Elementos Presentes en Sales

Inorgánicas por Métodos Complejométricos No Oficiales. [Internet] Universidad
del Salvador [citado el 20 de nov. de 2020] Disponible en:
http://ri.ues.edu.sv/id/eprint/2597/1/16101216.pdf

[2] Iqb.es. Framicetina. [Internet] Vademecum [citado el 20 de nov. de 2020]

Disponible en: https://www.iqb.es/cbasicas/farma/farma04/f065.htm

[3] Harris D. Análisis Químico Cuantitativo. [Internet] 3ra ed. Barcelona: Editorial
REVERTE; 2007. [citado el 20 de nov. de 2020] Disponible en:
https://books.google.com.pe/books?id=H-
_8vZYdL70C&pg=PA45&hl=es&source=gbs_selected_pages&cad=3#v=onepag
e&q&f=false

[4] Gary Bender. Métodos instrumentales de análisis en química clínica. España,

Zaragoza. Editorial ACRIBIA S.A. Cap 7 pág. 92-93

[5] The United States Pharmacopeial Convention. USP 36 – NF 31. Farmacopea de

los Estados Unidos de América – Formulario Nacional. Vol. 3; 2013 p. 4895

[6] Sánchez M. Métodos de Calibrado. [Internet] Universidad de Los Andes Mérida -

Venezuela. [citado el 20 de nov. de 2020] Disponible en:
http://webdelprofesor.ula.ve/ciencias/angelisa/Downloads/tecnicascalibracio_vr1.
pdf

[7] Ciencias Ambientales. DETERMINACIÓN DE FOSFATOS EN AGUAS POR

ESPECTROFOTOMETRÍA. [Internet]. [Citado 20 Nov 2020]. URL disponible en:
https://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/docencia/TAQ/TAQP1_0506.pdf
CUESTIONARIO

1. Desarrolle la ecuación química del fundamento.

2. ¿Cuál es la ventaja de esta forma de cuantificación?

La ventaja de esta forma de cuantificación es su aplicación en la determinación

de un analito, en el cual los componentes de la matriz de la muestra como los
reactivos usados en su preparación no interfieren en el análisis. También se
emplea en condiciones como la contribución de los interferentes, sobre las
medidas se mantiene constante, con lo cual se puede realizar la oportuna
corrección del error determinado por el interferente6.

3. ¿En qué consiste un patrón externo? Ejemplos prácticos

En una curva de calibrado representa la respuesta de un método analítico (señal

detectada) sobre muestras patrón o estándar con concentraciones conocidas de
analito. Se prepara además una disolución blanca, que contiene únicamente la
matriz, es decir todos los reactivos y disolventes de la muestra salvo el analito de
interés. En el intervalo de respuesta lineal del método analítico (dentro del cual la
señal es proporcional a la concentración de analito), se obtiene una recta de
calibrado a partir del procedimiento siguiente7:

• Se representa la señal detectada corregida de la señal del blanco frente a

la concentración de cada disolución patrón.

• Se realiza una regresión lineal de los puntos resultantes por el método de

mínimos cuadrados (ver el apéndice de este guión). Se recomienda el uso
de Excel para obtener la recta de ajuste. La recta de calibrado y = a x + b
(x: concentración, y: señal) permite obtener la concentración de cualquier
muestra problema a partir de la señal obtenida experimentalmente.

Fig. 1. Recta de calibrado a partir de patrones externos

4. Determine el valor K de los datos obtenidos en la preparación de la curva de
calibración y observe si es constante o no. Intérprete. A st/Cst=K

❖ K = Ast / Cst = 0 / 1 = 0

❖ K = Ast / Cst = 0.539 / 1 = 0.539

❖ K = Ast / Cst = 0.612 / 1 = 0.612

5. ¿Cómo se puede calibrar la influencia de la matriz en el método?

Las interferencias multiplicativas o de la matriz son causadas por componentes

de la matriz que alteran la respuesta de la señal del componente analito en una
forma proporcional a la señal (por ejemplo, cambio en la pendiente de la línea de
calibración).

Una posibilidad para evitar el efecto matriz sería construir siempre la recta de
calibrado tomando una muestra parecida a la muestra problema, pero libre del
constituyente a determinar (un blanco de muestra), y añadirle cantidades
conocidas del constituyente para formar soluciones patrón. Sin embargo, esta
aproximación resulta, en numerosos casos, impracticable, pues el efecto matriz
puede variar de una muestra a otra y además, no siempre se puede disponer de
una muestra sin el constituyente en cuestión. La mejor alternativa, sin embargo,
para soslayar el efecto matriz es utilizar la técnica de las adiciones estándar, que
consiste en la adición de cantidades conocidas y crecientes del constituyente a la
propia muestra problema, la lectura de las correspondientes respuestas
instrumentales y la posterior construcción de la recta de adiciones estándar. La
posterior cuantificación del constituyente se realiza por extrapolación de la recta
de calibrado al punto del eje de abscisas donde la respuesta es cero4, 5.