Tanto en eucariotas como en procariotas ocurre

de manera coordinada con la división celular

(fase S/fisión binaria).

La doble hélice se desenrolla gradualmente y

sus dos hebras se van separando a medida que
ocurre la replicación (modelo semiconservador).

No comienza al azar, sino en sitios definidos

denominados orígenes de replicación.
modelo semiconservador
Cebador: La replicación NO es autoiniciadora, se
necesita de una molécula que proporcione un –OH
libre, “in vivo” se usa un oligonucleótido de RNA.
Molde: Hebra de ADN que sirve como guía para
el orden en la incorporación de los nucleótidos.
Materia prima: dNTP´s.
Cationes: Mg2+ o Mn2+, se asocian a los dNTP´s
y además actúan como cofactores enzimáticos.
Clasificación:

DdDp

DdRp

RdDp

RdRp

ADN polimerasas dependientes de ADN.

Además de la actividad polimerasa, algunas
poseen actividad exonucleasa.
Como inicia en E. coli?.
Posee un único origen de replicación,
denominado oriC.
oriC es una secuencia de 245 pb que contiene:
- 3 repeticiones directas de: GATCTNTTNTTTT.
- 4 o más repeticiones de la secuencia:
TTATNCANA.
La secuencia de 9pb es la diana de unión a DnaA,
mientras que la de 13 pb (%T) representan el sitio por
donde comienza la desnaturalización de la doble hebra.

Fis regula negativamente el proceso, mientras que

HU lo promueve.
DnaA se oligomeriza y con ayuda de IHF se crea una
tensión superhelicoidal negativa sobre DUE.
Apertura de la doble hélice en el sitio origen de
la replicación.

Proteínas de iniciación (DnaA-IHF) provocan una

desnaturalización local sobre la región DUE:
complejo de reconocimiento del origen.

La formación y estabilización de la horquilla esta

a cargo de las siguientes proteínas:
Helicasas: rompen los puentes de H entre las dos
hebras, desnaturalizándolo, usando para ello ATP
Se generan dos frentes que avanzan en sentidos
opuestos (bidireccionalidad).
Proteínas SSB (de unión a monohebra): Se unen a
la hebra sencilla que genera la helicasa evitando
su renaturalización.
En eucariotas esta función la cumple la Proteína
de Replicación A (RPA).
Topoisomerasas (Tipo I y II (Girasa)).
Primasa: ARNpol dependiente de ADN.
Genera cadenas cortas de ARN complementarias a las
hebras desnaturalizadas libres.
En procariotas la primasa es una proteína
independiente.
En eucariotas tal acción reside
en una de las subunidades de
la ADN polimerasa alfa ().
Ambas hebras son copiadas simultaneamente. a
medida que avanza la horquilla.
La hebra 3’→5’ sirve como molde para una síntesis
continua de su complementaria en sentido 5’→3’.
Esto lo hace uno de los dímeros de la ADN pol III
(procariotas).
La hebra 5’→3’ no ofrece las mismas condiciones, de
manera que se generan múltiples primers por lo que
la síntesis de la nueva hebra se hace por segmentos
(discontinua).
Maduración de los fragmentos de Okazaki:
Incluye la eliminación de los cebadores, elongación
del fragmento adyacente para rellenar el “gap”
dejado por el cebador.
Unión de los extremos resultantes para generar una
hebra continua.
Procariotas
 Eucariotas

Sistema de nucleasas: (FEN1+RNAsa H1) retira el

cebador.
DNApol δ o DNApol ε: Rellena el “gap”.
Ligasa: repara las mellas.
E. coli: Modelo de replicación monofocal y
bidireccional. Un origen de replicación y dos puntos
de crecimiento.
https://proteopedia.org/wiki/index.php/RTP_and_Tus
Modelo Tus-Ter.
El genoma de
E. coli contiene
regiones que son
reconocidas por la
proteína Tus.
Esta proteína hace
parte de un curioso
mecanismo.
La proteína se asocia de manera que
permite/asegura el paso de la horquilla de
replicación, pero no su regreso.
Eucariotas: Modelo de replicación multifocal y
bidireccional. Múltiples orígenes de replicación,
múltiples horquillas de replicación.
Consulta:
 Dada la situación anterior, el acortamiento supone la
disminución progresiva de la longitud del cromosoma,
poniendo en riesgo la información genética contenida en él.

Zonas de ADN repetitivo No codificante.

Forman bloques de 1 – 12 Kpb, con unidades de 6-8 pb
repetidas en tandem.
Son adicionados por la Telomerasa.
Ribonucleoproteína (RNA +
proteína)
Es una DNA pol dependiente
de RNA
(transcriptasa inversa).

Particularidad: NO necesita “cebadores”, ni “molde”.

Su expresión se reprime durante el desarrollo
embrionario.
Los telómeros protegen el cromosoma de
degradaciones y perdida de información.
Relacionada con el envejecimiento y cáncer.
El genoma de la mitocondria es
circular.
Una de las 2 hebras posee mas
purinas que la otra, por lo que
se conoce como la hebra H
(heavy).
La otra es la hebra L (light).

Otra zona recibe el nombre de bucle-D (D-loop): única

región no codificante que desempeña un papel de
regulación de la replicación y transcripción.
No ocurre durante la fase S, sino a lo largo de
todo el ciclo celular.
Su replicación es unidireccional, por medio de 2
horquillas que parten de sitios diferentes.
Cada hebra tiene su propio origen de replicación
por tanto es bifocal.
En consecuencia su replicación no
es simultánea y es continua
(no se generan fragmentos de
Okazaki).
Es la pérdida de la forma duplohelicoidal.
Las 2 hebras se separan y pasan a una conformación
al azar.
Se debe a la pérdida de las interacciones hidrofóbicas
y la rotura de los puentes de H.

NO hay rotura de enlaces covalentes (hidrólisis).

Digestión es diferente a desnaturalización.

Agentes caotrópicos: moléculas pequeñas,
altamente polares con grupos amino y carbonilo.