UNSCH Departamento Académico de Ciencias Biológicas Biología Celular

PRÁCTICA 7

RECONOCIMIENTO DE ALGUNOS ORGANELOS

CITOPLASMÁTICOS
I. INTRODUCCIÓN

La investigación del hombre acerca de la estructura de los organismos, no término con

el estudio de la célula, sino que por el contrario, aumentó la búsqueda de información
sobre la estructura celular, en un intento de saber más acerca de ella. Actualmente, los
estudios son más amplios debido al gran avance de la ciencia y de la tecnología, que
permite contar con mejores técnicas e instrumentos de observación. Una de las metas
planteadas por los investigadores biológicos, es la de obtener una mayor claridad en la
visión y estructura de la célula. Dando como resultado la obtención de una serie de
fotografías detalladas que permiten localizar e identificar cada uno de sus
componentes.

Todas las funciones intracelulares (síntesis de proteínas, replicación de DNA y rutas

metabólicas en general) son realizadas gracias a una compleja organización de las
organelas. Una célula eucariota típica contiene organelas membranosas (retículo
endoplasmático, aparato de golgi, peroxisomas, mitocondrias, etc.) y ribosomas,
proteosomas, etc. Todas ellas efectúan una función puntual en la célula que le permite
su supervivencia y replicación.

La supervivencia de la célula depende, entre otros factores, de la obtención de energía

neta. Dicho proceso está a cargo de las mitocondrias y/o de los cloroplastos. Las
mitocondrias se encuentran en mayor número en células animales pero también
pueden presentarse en células vegetales, mientras que los cloroplastos son exclusivos
de células vegetales y algas.

OBJETIVOS:
• Identificar y diferenciar orgánulos de células vegetales y animales.

II. MARCO TEÓRICO

Plástidios
Son organelos celulares propios de las plantas. Pueden ser cloroplastos, cromoplastos
y leucoplastos. Todos los plástidios de una especie particular de plantas poseen
múltiples copias del mismo relativamente pequeño genoma, y están delimitados por
una envoltura formada por dos membranas.
Los cromoplastos no contienen clorofila sino otro tipo de pigmentos: los carotenos, que
le dan el color a muchas flores y frutos, lo que atrae animales polinizadores y
dispersores de semillas. Los leucoplastos, son blancos y almacenan almidón. Los
cloroplastos son de color verde y en ellos se realiza la fotosíntesis

Cloroplastos
Los cloroplastos son organelos citoplasmáticos membranosos característicos de las
células vegetales. Se han originado, al igual que las mitocondrias, en momentos
tempranos de la evolución a partir de la endocitosis de bacterias fotosintéticas (teoría
endosimbiótica). Son uno de los principales miembros de una familia de orgánulos
llamados plástidios.
Los cloroplastos llevan a cabo muchos procesos biosintéticos, a parte de la
fotosíntesis. Los ácidos grasos de la célula y algunos aminoácidos, por ejemplo, están
hechos por enzimas ubicadas en el estroma del cloroplasto. Los cloroplastos capturan
UNSCH Departamento Académico de Ciencias Biológicas Biología Celular

energía de la luz y la transforman en ATP mediante el proceso denominado

fotosíntesis.

De manera similar, el poder reductor de electrones activados por energía solar en el

cloroplasto, dirigen la reducción del nitrito a amoniaco. Este amoniaco es empleado
por la planta para la síntesis de aminoácidos y nucleótidos. La importancia metabólica
de los cloroplastos para las plantas y las algas, es más complejo que su rol en la
fotosíntesis.

Mitocondrias
Las mitocondrias poseen una gran importancia, ya que en ellas se realizan una serie
de reacciones de óxido-reducción que permiten el sustento energético de la célula. Las
mitocondrias oxidan moléculas orgánicas utilizando oxígeno del aire como aceptor de
electrones y forman ATP. De esta manera, las células que realizan un mayor gasto de
energía poseerán una mayor cantidad de mitocondrias.
Las mitocondrias están formadas por una doble membrana de naturaleza lipídico-
proteica, que define dos compartimientos submitocondriales: El espacio
intermembrana y la matriz. La membrana externa está formada por una bicapa de
fosfolípidos que tiene asociada una gran cantidad y diversidad de proteínas, tales
como enzimas y canales iónicos sensibles al voltaje.

Lisosomas
Los lisosomas son bolsas membranosas que contienen enzimas hidrolíticas usadas
para la digestión intracelular. Estos contienen más de 40 tipos de enzimas, incluyendo
proteasas, nucleasas, glicosidasas, lipasas, fosfolipasas, fosfatasas y sulfatasas.
Todas estas enzimas son hidrolasas ácidas. El lisosoma posee en su interior un pH
cercano a 5 (a diferencia del pH próximo a 7 existente en el citosol), por lo que en este
lugar, las enzimas hidrolíticas mencionadas poseen una gran actividad. Por otra parte,
este requerimiento de un pH determinado permite que en caso de que estas enzimas
salieran del lisosoma, no sean capaces de degradar los componentes citoplasmáticos.

III. MATERIALES Y MÉTODOS

3.1. MATERIALES:

 Material Biológico: Zanahoria (Daucus carota), ají (Capsicum sp) o pimiento,

mashua (Tropaeolum tuberosum), papa (Solanum tuberosum), yacón
(Smallanthus sonchifolius), granos de trigo (Triticum spp), pallar (Phaseolus
lunatus), hojas del alga filamentosa de Spirogyra y Elodea sp, Paramecium sp., y
apio.
 Material de vidrio: Láminas portaobjetos y láminas cubreobjetos.
 Equipo: Microscopio compuesto.
 Soluciones: Verde de janus, glucosa 5%, Rojo neutro y Lugol.
 Otros materiales: Goteros, pinzas, hoja de afeitar, y papel lente.

3.2. METODOLOGÍA:

3.2.1. METODOLOGÍA PARA LA OBSERVACIÓN DE PLASTIDIOS

a). Cromoplastos en Daucus carota y Lycopersicum esculentum

 Haga cortes muy finos en la zanahoria, tomate y en el ají.
 Colocar los cortes sobre las láminas portaobjetos. Adicionar un agota de agua.
 Cubrir con una laminilla cubreobjetos.
 Observar al microscopio a menor y mayor aumento.
UNSCH Departamento Académico de Ciencias Biológicas Biología Celular

 Esquematice sus observaciones, señalando la magnificación total.

https://www.youtube.com/watch?v=Jkk_FXTFsFc

b). Cloroplastos en Elodea sp.

 Con una pinza extraiga una hoja fresca de Elodea sp. y colóquela en una lámina
portaobjeto. Agregue una gota de agua y cubrir con una laminilla cubreobjetos.
 Observar al microscopio a menor y mayor aumento.
 Esquematice sus observaciones, señalando la magnificación total.
https://www.youtube.com/watch?v=UWbGZMO4o_U

c. Leucoplastos en papa
 Cortar un pedazo de papa, yacón, trigo y pallar, luego realizar un raspado con la
hoja de afeitar y colocar el raspado sobre dos láminas portaobjetos.
 Adicionarle a la lámina una gota de lugol y colocarle una laminilla.
 Observar a través del microscopio a 10X y 40X.
 Dibujar sus observaciones e indicar la magnificación total.
 Repetir el mismo tratamiento para los granos de trigo y pallar.

Nota: En el raspado de papa aparecerán unos granos formados por capas o láminas
llamadas lamelas que se encuentran alrededor de un punto llamado hilum. Dibuje unos
granos y señale las lamelas y el hilum.
https://www.youtube.com/watch?v=XDqExIQQEBk
https://www.youtube.com/watch?v=B9lzwlEQTMM
https://www.youtube.com/watch?v=L5Jfkv-awSA
https://www.youtube.com/watch?v=_x0c3AWdGbI

3.2.2. METODOLOGÍA PARA LA OBSERVACIÓN DE MITOCONDRIAS: EN

CÉLULAS DE EPITELIO BUCAL.
 Expandir la muestra de epitelio bucal en un portaobjeto.
 Flamear con las llamas del mechero para lograr la fijación de las células.
 Dejar enfriar
 Agregarle gotas del colorante verde de janus al 0.01% (por 5 minutos).
 Lavar para eliminar el exceso de colorante.
 Observar en microscopio a mayor aumento.
https://www.youtube.com/watch?v=yESjENUN8Ng

3.2.3. METODOLOGÍA PARA LA OBSERVACIÓN DE LISOSOMAS: Paramecium

sp.
 Preparar un cultivo de Paramecium sp.
 Agregar la solución de rojo neutro al frasco que contiene cultivo de paramecio.
 Incubar de una a dos horas a 25°C y dejar en un lugar oscuro.
 Colocar una gota del preparado sobre el portaobjeto y cubrir con una laminilla
cubreobjetos.
 Observar a 10X y 40X.
 Esquematice sus observaciones e indique la magnificación total.
https://www.youtube.com/watch?v=cAQ6WGo_m_g

IV. RESULTADOS

4.1 OBSERVACIÓN DE PLASTIDIOS

a). Cromoplastos en Daucus carota y Capsicum pubescens
UNSCH Departamento Académico de Ciencias Biológicas Biología Celular

Cromoplastos en Red Pepper

Pared celular

Citoplasma

Cromoplasto
Cromoplasto

Los cromoplastos contienen gotitas de

lípidos donde se almacenan carotenoides.
http://metabolism.net/bidlack/botany/botanypics/default.htm

b). Cloroplastos en Spirogyra y en Elodea sp.

Pared celular

Citoplasma

Cloroplasto

http://metabolism.net/bidlack/botany/botanypics/plant%20cells/Anacharis%20%28water%29.jpg

c. Leucoplastos en mashua (Solanum tuberosum).

Pared celular

Citoplasma

Amiloplasto
(contiene gránulo de
almidón)

Muestra: papa sin lugol Muestra: papa con lugol

Nota: En el raspado de papa aparecerán unos granos formados por capas o láminas
llamadas lamelas que se encuentran alrededor de un punto llamado hilum. Dibuje unos
granos y señale las lamelas y el hilum

Los amiloplastos contienen gránulos grandes de almidón.

UNSCH Departamento Académico de Ciencias Biológicas Biología Celular

¿Qué diferencias observo entre los leucoplastos de las diferentes muestras?

Debido a los protocolos de seguridad en la actualidad solo pudimos encontrar la
muestra de la papa y no obtuvimos más búsquedas para observar las diferencias.

3.2.2. METODOLOGÍA PARA LA OBSERVACIÓN DE MITOCONDRIAS: EN

CÉLULAS DE EPITELIO BUCAL.

- Expandir la muestra de epitelio bucal en un portaojeto.

- Flamear con las llamas del mechero para lograr la fijación de las células.
- Dejar enfriar
- Agregarle gotas del colorante verde de janus al 0.01% (por 5 minutos)
- Lavar para eliminar el exceso de colorante.
- Observar en microscopio a mayor aumento.

Membrana
plasmática

Núcleo

Citoplasma

Mitocondria

SOBRE EL VERDE JANO: Para evidenciar mitocondrias es utilizado verde Jano al

0,01%. Este producto al reducirse vira del azul al verde brillante. Es un marcador
especifico porque al colocarlo en presencia de mitocondrias, emplea en su reducción
los electrones de la cadena respiratoria que se encuentra emplazada en la membrana
mitocondrial interna y las colorea de "verde brillante."

3.2.3. METODOLOGÍA PARA LA OBSERVACIÓN DE LISOSOMAS: Paramecium

sp.

http://intranet.tdmu.edu.ua/data/kafedra/internal/histolog/classes_stud/en/stomat/ptn/1/
01%20Microscope.%20Microscopic%20equipment.%20Histologic%20technique.

Lisosoma %20Cytology.%20General%20structure%20of%20the%20cell.%20Superficial

Paramecio
%20complex.htm
UNSCH Departamento Académico de Ciencias Biológicas Biología Celular

VI. CONCLUSIONES
 Conocemos e identificamos los orgánulos de células vegetales y animales;
como los plastidios, mitocondrias y lisosomas.
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.

C, A. (08 de 03 de 2016). One Minute Microscope: Potato Cells (Stained). Obtenido de

Youtube: https://www.youtube.com/watch?v=B9lzwlEQTMM
Nurd, S. (16 de 10 de 2017). starch grains under microscope. Obtenido de Youtube:
https://www.youtube.com/watch?v=L5Jfkv-awSA
Proto, P. v. (s/f). paramecium caudatum with neutral Red. Obtenido de Youtube:
https://www.youtube.com/watch?v=cAQ6WGo_m_g
Samartin, l. a. (24 de 10 de 2013). Práctica de la observación mitocondrias.
Observation of mitochondria: laboratory practice. Obtenido de Youtube:
https://www.youtube.com/watch?v=yESjENUN8Ng
Samartin, l. a. (11 de 03 de 2017). Práctica de la observacion de Plastidios
(Observation of plastids). Obtenido de Youtube:
https://www.youtube.com/watch?v=_x0c3AWdGbI
Seed, B. t. (07 de 01 de 2018). Episode 1: Elodea wet mount. Obtenido de Youtube:
https://www.youtube.com/watch?v=UWbGZMO4o_U
Seed, B. t. (07 de 01 de 2018). Episode 2: Red pepper wet mount. Obtenido de
Youtube: https://www.youtube.com/watch?v=Jkk_FXTFsFc
WPI. (22 de 04 de 2010). Potato Staining for Microscopy. Obtenido de Youtube:
https://www.youtube.com/watch?v=XDqExIQQEBk

CUESTIONARIO
1. ¿Cuáles son los plástidios que se observaron durante el desarrollo de la
práctica? Indique la función de cada uno.
CROMOPLASTOS: plastidios maduros de la célula vegetal que almacenan pigmentos
fotosintéticos secundarios y reservas nutritivas.
CLOROPLASTOS: plastidios que contienen los pigmentos verdes clorofila a y b, así
como carotenoides de color anaranjado y xantofilas amarillas, son característicos de
los seres fotoautótrofos, que poseen la maquinaria enzimática para transformar la
energía solar en energía química, a través de la fotosíntesis.
LEUCOPLASTOS: plastidios que almacenan sustancias incoloras o poco coloreadas.
Los leucoplastos almacenan almidón o, en algunas ocasiones, proteínas o aceites.
2. ¿Qué tipo de pigmentos contienen los cromoplastos presentes en las células
del rocoto, ají amarillo, pimiento, tomate y zanahoria y cuáles son sus
funciones?
Pigmento xantofila (ají amarillo), pigmento licopeno (rocoto y tomate), caroteno
(zanahoria)
3. ¿Qué diferencias presentan los granos de almidón del trigo y del pallar?
Los granos de almidón del trigo con más grandes que los granos de almidón del pallar.
4. ¿Explique el fundamento de la coloración con lugol?
UNSCH Departamento Académico de Ciencias Biológicas Biología Celular

La coloración producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre las

espiras de la molécula de almidón. No es por tanto, una verdadera reacción química,
sino que se forma un compuesto de inclusión que modifica las propiedades físicas de
esta molécula, apareciendo la coloración azul violeta.
5. ¿Cuál es la importancia de los plástidios?
la producción y almacenamiento de importantes compuestos químicos usados por la
célula.