ESTUDIO CINETICO DEL ENZIMA ALFA – AMILASA:

EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN, EL pH Y LA TEMPERATURA SOBRE LA VELOCIDAD

DE UNA REACCIÓN ENZIMÁTICA.

RESULTADOS
Método 1

Tiempo de reacción Observación.

(minutos). Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4
0 - - - -
2 Negro  Café  Café  Amarillo
Amarillo  Amarillo
4 claro  Amarillo claro  Amarillo
Amarillo  Amarillo
6 claro  Amarillo oscuro  Amarillo
Amarillo  Amarillo  Amarillo
8 claro oscuro oscuro  Amarillo
Amarillo  Amarillo
10 claro  Amarillo oscuro  Amarillo
Amarillo  Amarillo  Amarillo
12 pálido oscuro opaco  Amarillo
Amarillo- Amarillo Amarillo
14 Amarillo naranja oscuro oscuro
Amarillo Amarillo- Amarillo Amarillo
16 mostaza naranja anaranjado naranja
Amarillo Amarillo
18 Amarillo anarajado Amarillo anaranjado
Amarillo Amarillo
anaranjado Amarillo anajado
20 Amarillo oscuro oscuro oscuro
Amarillo
30 mostaza Naranja Naranja Naranja
Amarillo Naranja Naranja Naranja
40 naranja oscuro oscuro oscuro

Con los datos obtenidos construya una tabla tomando como concentración del enzima el
volumen de la solución de extracto enzimático utilizado en cada tubo.

2. Con estos datos construya un gráfico de [E] en el eje ordenado contra velocidad de reacción
(1/t) en el eje abscisas. ¿Por qué se puede tomar como velocidad de reacción el inverso del
tiempo?
 3. Describa qué características estructurales del almidón permiten su identificación mediante las
disoluciones de yodo, y el efecto de la amilasa salival sobre los enlaces del almidón. Plantee
las conclusiones que se pueden obtener de los resultados del experimento.

4. Resuma las dificultades encontradas en el ensayo.

Método 2

Tiempo de reacción Observación

(minutos). pH 7.0 pH 4.0
0 Tono morado oscuro Tonalidad morado oscuro  
3  Tono morado casi negro Tonalidad morada más clara que el anterior
6 Tono negra   Tono morado cafesoso
9  Tono negro  Tono marrón
12  Tono negro  Tono marrón claro
15  Tono negro Naranja oscuro 
18  Tono negro  Naranja oscuro
21 Tono Negro  Naranja claro
24 Tono negro Amarillo oscuro
27 Tono negro Amarillo mas claro que el anterior
30  Tono negro  Amarillo opaco

Anote si la reacción en cada tubo es positiva o negativa y anote el tiempo en que se agota el
almidón. Llene con sus resultados la tabla 4.2.
1. ¿Qué efecto tendría la utilización del medio con pH muy ácido o muy básico en la realización de
este ensayo?
2. Si hubo diferencia en los tiempos de reacción, ¿cómo explicaría esta diferencia?

Método 3

Tiempo de reacción Observación

(minutos). Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4
0  Color negro Color negro  Color negro  Color negro 
10  Naranja oscuro Naranja oscuro Naranja oscuro   Naranja oscuro
20  Naranja Naranja   Naranja   Naranja  
30  Naranja Naranja   Naranja   Naranja  
40  Naranja  Naranja Naranja   Naranja  
50  Naranja  Naranja  Naranja  Naranja
60  Naranja  Naranja  Naranja  Naranja

1. Con los datos obtenidos construya una tabla, tomando como valor de [S] el del mismo
volumen de sustrato medido en cada tubo.
 2. Con los datos de la tabla construya un gráfico de velocidad de reacción (volumen/tiempo) en
el eje ordenado contra volumen de sustrato en el eje de abscisas (que representa
concentración de sustrato creciente en nuestro experimento). ¿Por qué en este caso para
calcular la velocidad de la reacción es necesario dividir el volumen de sustrato entre el
tiempo?

3. Analice el gráfico y plantee las conclusiones a las que puede llegar en este caso.

4. Describa las dificultades presentadas en este ensayo.

Método 4

Observación
Tiempo de reacción Temperatura
(minutos) 4°C ambiente 50°C
 Azul amoratado  Azul amoratado  Azul amoratado
0 oscuro oscuro oscuro
2  Negro  Azul oscuro  Café oscuro
4  Negro  Café oscuro  Café amoratado
6  Negro  Café claro  Café
8  Negro  Café- naranja  Café
10  Mostaza  Mostaza  Mostaza

1. Con los datos obtenidos en el ensayo complete la Tabla 4.4.

2. Plantee las conclusiones que obtuvo en este ensayo.

DISCUSIONES

1. Consulte con los demás grupos de trabajo, las velocidades de actividad de cada amilasa salival y
compare la suya con la de ellos, identificando la amilasa aparentemente más rápida y la más lenta,
y dando una posible explicación para la variabilidad (si la hay).
2. Ofrezca una explicación a la variación de la actividad de la enzima a diferentes pHs y diferentes
temperaturas.
3. Ofrezca una explicación de por qué no podemos digerir a otro polisacárido de glucosas como la
celulosa. Para esto, mire los tipos de enlace que ocurren en el almidón y los de la celulosa.
4. Consulte sobre el gen de la amilasa salival en humanos comparado con el de otros primates, y
de una explicación de por qué la capacidad de degradar almidón en la saliva pudo haber sido un
factor importante en el desarrollo de las civilizaciones humanas.
http://www.unav.es/acienciacierta/