Cromosomas sin fibra de cromatina de 30 nm.

Yasumasa Joti, 1 Takaaki Hikima, 2 Yoshinori Nishino, 2, 3 Fukumi Kamada, 4 Saera Hihara, 4, 5
Hideaki Takata, 4, 6 Tetsuya Ishikawa, 2 y Kazuhiro Maeshima 2, 4, 5, *

Consulte el artículo "Los cromosomas mitóticos humanos consisten predominantemente en fibras

de nucleosomas plegadas irregularmente sin una estructura de cromatina de 30 nm" en EMBO J,
volumen 31 en la página 1644.

Este artículo ha sido citado por otros artículos en PMC.

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Resumen

¿Cómo se empaqueta una cadena larga de ADN genómico en un cromosoma o núcleo mitótico? Se
ha supuesto durante mucho tiempo que la fibra de nucleosoma (cuentas en una cuerda, se refiere
a cuando se desprende para la replicación y codificación), en la que el ADN se envuelve alrededor
de las histonas centrales, se pliega en una fibra de cromatina de 30 nm y una fibra más grande
doblada helicoidalmente. Sin embargo, cuando se observaron células mitóticas humanas
hidratadas congeladas utilizando microscopía crioelectrónica, no se encontraron estructuras de
orden superior que incluyeran fibras de cromatina de 30 nm. Para investigar más a fondo la
estructura de los cromosomas mitóticos, realizamos una dispersión de rayos X de ángulo pequeño
(SAXS), que puede detectar estructuras periódicas en materiales no cristalinos en solución. Los
resultados fueron sorprendentes: no se detectó ninguna característica estructural mayor de 11
nm, incluso a una escala de diámetro cromosómico (~ 1 μm). También encontramos un patrón de
dispersión similar en los núcleos de interfase de las células HeLa en el rango de hasta ~ 275 nm.
Nuestros hallazgos sugieren una característica estructural común en la interfase y las cromatinas
mitóticas: el plegamiento compacto e irregular de las fibras de nucleosomas ocurre sin una
estructura de cromatina de 30 nm.

Palabras clave: fibra de cromatina de 30 nm, cromatina, crio EM, naturaleza fractal, núcleos
interfásicos, plegamiento irregular, cromosomas mitóticos, dispersión de rayos X

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Introducción

En los libros de texto actuales de biología molecular, el empaquetamiento y organización inicial del
ADN en un cromosoma o núcleo a menudo se representa como se muestra en la Figura 1 (por
ejemplo, ref. 1). La suposición actual es que el ADN está envuelto alrededor de las histonas,
formando "nucleosomas" (cuentas en una cuerda), seguido de un nucleosoma que se pliega en
una fibra de cromatina de 30 nm (p. Ej., Referencias 2-5). El famoso modelo de "plegado helicoidal
jerárquico" afirma que la fibra de cromatina de 30 nm se pliega progresivamente en fibras más
grandes (es decir, ~ 100 nm y luego fibras de ~ 200 nm) para formar los cromosomas mitóticos
finales. Una jerarquía similar se cree que existe en los núcleos interfásicos (p. ej., ref. 10).
Figura 1. En el modelo de libro de texto, una molécula de ADN larga se envuelve alrededor de un
octaómero de histona núcleo básico que consiste en proteínas de histona H2A, H2B, H3 y H4, y
forma un nucleosoma con un diámetro de 11 nm. Se ha supuesto durante mucho tiempo que el
nucleosoma está plegado en fibras de cromatina de 30 nm antes de que ocurra la organización de
orden superior de los cromosomas mitóticos o los núcleos interfásicos. Mostramos un modelo
típico de hélice de un inicio entre dos modelos estructurales bien conocidos para fibras de
cromatina de 30 nm: hélice de un inicio (solenoide) y hélice de dos comienzos (zigzag). Las
imágenes se reproducen con modificaciones menores de la referencia 60 con permiso de Elsevier.

Para visualizar los cromosomas mitóticos en un estado cercano al intacto, realizamos microscopía
de crioelectrones (cryo-EM), en colaboración con Eltsov, Frangakis y Dubochet.11 Para cryo-EM,
las células HeLa mitóticas se recolectaron y congelaron por congelación a alta presión. . Luego se
prepararon secciones delgadas a baja temperatura y se observaron. Cryo-EM y el posterior
procesamiento computacional de la imagen no revelaron estructuras de cromatina de 30 nm en
los cromosomas mitóticos, sino más bien una textura desordenada uniforme, argumentando
enérgicamente contra la hipótesis establecida actualmente (ver también las referencias 12 y 13).
Sin embargo, las observaciones de cryo-EM se limitaron a examinar una porción de un cromosoma
porque el grosor de la sección era de solo ~ 70 nm, lo que puede haber impedido la observación
de estructuras jerárquicas regulares en los cromosomas.

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Dispersión de rayos X de ángulo pequeño (SAXS)

Para investigar la estructura masiva de los cromosomas mitóticos en solución, realizamos la

dispersión de rayos X de ángulo pequeño (SAXS). Cuando se usan rayos X para irradiar materiales
no cristalinos, la dispersión en ángulos pequeños generalmente revela estructuras periódicas
dentro de las muestras (Fig. 2A) (por ejemplo, ref. 14). En la Figura 2C se muestra un patrón de
dispersión típico de SAXS compuesto por anillos concéntricos. Las señales en ángulos más
pequeños (más cerca del centro) reflejan estructuras periódicas más grandes y viceversa.14
Figura 2. (A) Cuando los materiales no cristalinos se irradian con rayos X, la dispersión de ángulo
pequeño generalmente refleja el tamaño y la separación de las estructuras internas. (B)
Configuración experimental: un sedimento cromosómico en un tubo capilar de cuarzo se expuso a
un haz de rayos X sincrotrón y los patrones de dispersión se registraron con una cámara CCD o
placa de imagen. Los detalles de la configuración se describen en Nishino et al.15 (C) Un patrón de
dispersión típico se compone de anillos concéntricos. Las señales en ángulos de dispersión más
pequeños [tamaño más pequeño del vector de dispersión (S) más cercano al centro] reflejan
estructuras periódicas más grandes y viceversa. En la Figura 3, los sencillos en los anillos
concéntricos se promedian y se muestran en un diagrama unidimensional. El tamaño del vector de
dispersión se define por S = 2sin (θ) / λ, donde λ es la longitud de onda y 2θ es el ángulo de
dispersión. La longitud periódica viene dada por el inverso de S. Por lo tanto, "pico de 30 nm" se
refiere a un pico de dispersión a S = 0.033 nm – 1. (D) Los cromosomas consisten en fibras de
nucleosomas (cuentas en una cuerda) dobladas irregularmente. Las condensinas (azul) mantienen
las fibras de nucleosomas (rojo) globalmente alrededor del centro cromosómico. Localmente, la
fibra del nucleosoma se pliega de manera irregular o desordenada, formando estructuras de asa
que se colapsan hacia el centro cromosómico (azul). La fibra colapsada (roja) forma un dominio
que podría ser compatible con el gran módulo observado por el grupo Belmont.8

En la instalación de radiación sincrotrón SPring-8 en Japón, los cromosomas humanos aislados en

el fondo de un capilar de vidrio se expusieron a un haz de rayos X sincrotrón y se registraron los
patrones de dispersión (Fig. 2B) .15 Tenga en cuenta que los cromosomas no fueron fijados o
deshidratado para evitar posibles artefactos causados por tales tratamientos16,17. El patrón de
dispersión típico de los cromosomas mitóticos mostró tres picos a 6, 11 y 30 nm, 15 consistentes
con experimentos previos de Langmore y Paulson18,19. El 6 y 11 Se cree que los picos de nm
provienen del posicionamiento de nucleosomas de borde a borde y cara a cara,
respectivamente.18-20 Se supone que el pico de 30 nm representa el empaquetamiento de lado a
lado de las fibras de cromatina de 30 nm. , 18-20 que durante mucho tiempo se ha considerado
como una fuerte evidencia de la existencia de estas fibras en los cromosomas. Sin embargo, con
base en cryo-EM, estas estructuras de 30 nm no son aparentes en los cromosomas mitóticos.11-13

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Organización del cromosoma mitótico

Para examinar la naturaleza del pico de 30 nm observado por SAXS, los cromosomas aislados
fueron examinados por cryo-EM. Como se señaló anteriormente, no se observaron estructuras de
cromatina de 30 nm dentro de los cromosomas.15 Sin embargo, las imágenes de cryo-EM
mostraron inesperadamente que la superficie del cromosoma estaba recubierta con gránulos
densos en electrones del tamaño de ribosomas. 15 Transferencia de Western e inmunotinción con
anticuerpos específicos confirmó que había ribosomas contaminantes en la superficie
cromosómica15. Los ribosomas se apilaban regularmente a una separación de ~ 30 nm.15
Eliminamos los ribosomas de la superficie del cromosoma lavando con un tampón isotónico que
contiene poliamina y EDTA (tampón A; véanse las referencias 19, 21 y 22) 15, manteniendo el
tamaño y la forma de los cromosomas15. Sorprendentemente, en los cromosomas, SAXS no
detectó picos de 30 nm, aunque quedaron otros picos procedentes de una estructura interna de
nucleosomas.

Informes anteriores han sugerido que los núcleos de eritrocitos de pollo, que están casi
completamente silenciados transcripcionalmente, contienen fibras de cromatina de 30 nm23,24;
por lo tanto, estos fueron utilizados como controles positivos. Los análisis SAXS y cryo-EM
demostraron estructuras de fibra de cromatina de 30 nm en núcleos de eritrocitos de pollo, que
carecían de ribosomas.15 Por lo tanto, deberíamos haber detectado fibras de 30 nm en los
cromosomas mitóticos humanos si estuvieran presentes. Con base en los datos combinados SAXS
y cryo-EM, concluimos que las fibras de cromatina de 30 nm plegadas regularmente no están
presentes en los cromosomas mitóticos humanos.

Luego, investigamos una región completa de cromosomas mitóticos utilizando un aparato

recientemente desarrollado para la dispersión de rayos X de ángulo ultra pequeño (USAXS) .25
Nuevamente, no encontramos estructuras periódicas regulares entre 50 y 1,000 nm.15 El cryo-EM,
SAXS y Los datos de USAXS indican colectivamente que el plegado irregular de las fibras de
nucleosomas es la estructura en masa de los cromosomas mitóticos humanos.

Luego consideramos cómo se organiza la fibra del nucleosoma en un cromosoma mitótico. Debido
a que la condensina26 y la topoisomerasa IIα, 27 que son esenciales para la condensación
cromosómica, forman un eje en el cromosoma22,28-32 (Fig. 2D), asumimos que aseguran
globalmente las fibras de nucleosomas alrededor del centro cromosómico. Localmente, una fibra
nucleosómica se pliega de manera irregular hacia el centro cromosómico (Fig. 2D). Además, un
sitio genómico se incorpora de forma aleatoria en una región amplia, pero no reproducible,
específica en el cromosoma durante el proceso de condensación. Esta visión es consistente con la
observación del grupo de Belmont de que las posiciones tridimensionales de los loci genómicos
marcados con GFP mostraron una variabilidad intrínseca entre las cromátidas hermanas en el
cromosoma.33

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Organización de cromatina interfásica

A fin de examinar la estructura periódica en masa de la cromatina interfásica, a continuación, nos

centramos en los núcleos interfásicos de las células HeLa. Langmore y Paulson informaron picos de
SAXS a ~ 30, ~ 11 y ~ 6 nm en los núcleos de las células HeLa o de los linfocitos de ratón18,19.
Estos autores sugirieron que el pico de 30 nm representa el empaquetamiento de 30 nm lado a
lado fibras de cromatina, 18,19 y esto se ha considerado durante mucho tiempo una fuerte
evidencia de la existencia de estas fibras en la cromatina interfásica. De acuerdo con sus datos,
también detectamos picos similares a ~ 30, ~ 11 y ~ 6 nm en los núcleos HeLa, que se aislaron
utilizando su procedimiento (Fig. 3A). Debido a que detectamos componentes de ribosomas en la
muestra de núcleos mediante transferencia Western (Fig. 3B), en analogía con el caso de los
cromosomas mitóticos, los eliminamos nuevamente lavando los núcleos con el tampón
A.19,21,22. Este tratamiento eliminó la mayor parte de los agregados ribosómicos de las
fracciones nucleares (Fig. 3B). Como se esperaba, el pico de 30 nm en el patrón SAXS desapareció
casi por completo (Fig. 3C), lo que nuevamente sugiere la ausencia de la estructura de 30 nm.
Tenga en cuenta que los picos restantes en ángulos más grandes, que provienen principalmente
de las estructuras internas de los nucleosomas, no cambiaron (Fig. 3A y C). Similar al caso de los
cromosomas mitóticos, el perfil de dispersión de la cromatina interfásica también mostró que el
pico de ~ 6 nm (posicionamiento cara a cara) predominaba sobre el pico de ~ 11 nm
(posicionamiento de borde a borde) (Fig. 3C). Como la formación de la fibra de cromatina de 30
nm requiere frecuencias similares de posicionamiento cara a cara (~ 6 nm de pico) y de borde a
borde (~ 11 nm de pico), el perfil de dispersión en la Figura 3C también es compatible con la casi
ausencia de fibras regulares de cromatina de 30 nm en cromatinas interfásicas.
Figura 3. (A) Perfil SAXS de los núcleos de interfase HeLa, que se aislaron mediante el
procedimiento de Langmore y Paulson18,19. Se detectaron tres picos a ~ 6, ~ 11 (débil) y ~ 30 nm
(flechas). En la gráfica de log (I × S2) vs. S, I es la intensidad media medida y S es el tamaño del
vector de dispersión, el inverso del tamaño de la estructura o el espaciado (para más detalles,
consulte la referencia 15). Se cree que los picos de 6 y 11 nm provienen del posicionamiento de
borde a borde y cara a cara de los nucleosomas, respectivamente. Se supuso que el pico de 30 nm
representaba el empaquetamiento lado a lado de fibras de cromatina de 30 nm. (B) La presencia y
eliminación de ribosomas en los núcleos de interfase HeLa se verificaron mediante transferencia
Western. Los lisados nucleares de ~ 2 × 104, 1 × 104 y 5 × 103 células se cargaron en los carriles 1-
3, respectivamente. Las proteínas se separaron por SDS-PAGE y luego se transfirieron a
membranas. La proteína P ribosómica64 y la histona H2B (control) y la histona H3 (control) se
detectaron utilizando anticuerpos específicos (H2B, Upstate 07–371; H3 Abcom ab1791). La
proteína P se detectó en los núcleos originales, pero mucho menos en los núcleos después del
lavado, mientras que las histonas H2B y H3 se observaron de manera similar en ambos núcleos. (C)
Solo el pico de 30 nm desapareció después de la eliminación de los agregados de ribosomas,
mientras que los otros picos permanecieron.

De acuerdo con nuestro hallazgo, los núcleos de interfase en la mayoría de los tipos de células
eucariotas superiores examinadas por cryo-EM no contienen fibra de cromatina de 30 nm (p. Ej.,
Referencias 16, 34 y 35). Usando una combinación de una técnica de captura de conformación
cromosómica (3C) y modelado de polímeros, Dekker también descubrió que la cromatina en un
dominio transcripcionalmente activo en la levadura no formaba una fibra compacta de 30 nm, sino
que se extendía con una disposición bastante suelta de nucleosomas .36 Más recientemente, el
grupo Bazett-Jones hizo una observación similar por imagen espectroscópica de electrones (ESI),
proporcionando mapeo de fósforo y nitrógeno con suficiente contraste y resolución para visualizar
fibras de nucleosomas de 10 nm.37,38 Aunque el cryo-EM y ESI, ambos métodos basados en EM,
examinan solo una porción limitada de núcleos, nuestro estudio SAXS corrobora la noción de que
las fibras de cromatina de 30 nm están ausentes en la cromatina interfásica.

Además, usando el aparato USAXS, no observamos estructuras periódicas en las cromatinas de

interfase en el rango entre ~ 50 y ~ 1,000 nm (Fig. 4A). Tomados junto con los datos de SAXS,
sugerimos que la cromatina de interfase en masa también consiste en fibras nucleosómicas
plegadas irregularmente (Fig. 4D).
Figura 4. (A) Por dispersión de rayos X de ángulo ultrapequeño (USAXS), no se detectaron
estructuras notables ~ 100-150 o 200-250 nm en los núcleos de interfase HeLa. Más allá del rango
de ~ 275 nm (flecha roja), la pendiente en la cromatina interfásica disminuyó en magnitud. (B)
Para comparación, se reproduce un perfil USAXS de cromosomas mitóticos de Nishino et al.15. (C)
La intensidad de dispersión obedece a la ley de potencia con respecto al tamaño de la estructura o
el espaciado. Una gráfica de log (I) vs. log (S) en una línea recta (línea roja) cubre un amplio rango,
que se extiende por casi tres órdenes de magnitud. El ajuste de mínimos cuadrados muestra que I
es proporcional a S a la potencia de –3,36 (R = 0,999), 39 lo que sugiere que los cromosomas no
poseen estructuras regulares notables en una escala muy amplia y exhiben una naturaleza fractal
de la organización del genoma (ver también ref. . 15). (D) En el núcleo interfásico, existen
numerosos dominios de cromatina compactos como "gotas de cromatina líquida" (bolas amarillas)
.60 Nucleosoma rojo transcrito; Verde, ARN polimerasa y ARN. La formación de una fibra de
cromatina de 30 nm puede ocurrir cuando las fibras de nucleosomas se eliminan del dominio de
cromatina o del territorio cromosómico para la transcripción (arriba, vea el texto). En nuestra
opinión, el silenciamiento transcripcional puede establecerse mediante la captura dinámica de
regiones transcripcionales dentro de los dominios de cromatina compacta. Estos dominios pueden
considerarse como gotas de líquido viscoso, que podrían formarse mediante la interacción
nucleosoma-nucleosoma y un efecto de amontonamiento macromolecular.60 Notablemente, esta
vista está en línea con las predicciones del modelo de compartimento de cromosoma territorio-
intercromatina (CT-IC) 65, 66 y evidencia previa para un compartimento de intercromatina, así
como la región de pericromatina (ver ref. 35).

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Similitud de organización entre la interfase y las cromatinas mitóticas

En particular, una comparación de los perfiles de dispersión USAXS de cromatinas mitóticas e

interfásicas muestran similitudes en un rango de hasta ~ 275 nm, lo que sugiere una organización
similar en este rango (Fig. 4A y B). Más allá de este rango, la pendiente en la cromatina interfásica
disminuye en magnitud (Fig. 4A), y la curva se vuelve plana.

Encontramos que ambos patrones de dispersión siguen la relación ley de potencia entre la
intensidad de dispersión y el vector de dispersión S en un amplio rango (Fig. 4C; ref. 15). Esta
propiedad de dispersión sugiere una naturaleza fractal 39, aunque no podemos descartar la
posibilidad de que otras formas de organización puedan conducir a un patrón de dispersión
similar. La relación ley de potencia continúa hasta ~ 1,000 nm en cromosomas mitóticos y ~ 275
nm en cromatina interfásica (Fig. 4C y E en la referencia 15). Esto sugiere que la cromatina mitótica
e interfásica tiene características estructurales comunes que son similares a muchos aumentos, al
menos en un rango de hasta ~ 275 nm. De acuerdo con este hallazgo, recientemente se obtuvo
evidencia de una estructura fractal de la cromatina interfásica humana40-43 (véase también la ref.
44).

La similitud de dispersión también está de acuerdo con nuestra idea de que la interfase y la
cromatina mitótica son localmente indistinguibles17 (ver también las referencias 45-46). Incluso
en los núcleos interfásicos, ya se forman numerosos dominios de cromatina como "gotas de
cromatina líquida" (Fig. 4D). Para el ensamblaje cromosómico, dichos dominios de cromatina se
pliegan juntos, presumiblemente por condensinas y / u otros factores proteicos, para crear una
forma cromosómica en forma de barra.17 Los dominios de cromatina en la interfase se
identificaron originalmente como focos de replicación que contenían ~ 1 Mbp de la región del
genoma utilizando marcado de pulso.47-49 Los dominios se han analizado adicionalmente
mediante microscopía de superresolución50 y ensayo Hi-C51 (un método para estudiar la
arquitectura tridimensional de los genomas). Recientemente se informó que los dominios están
correlacionados con estructuras de glóbulos fractales.52 El glóbulo fractal, que fue identificado por
Lieberman-Aiden et al. usando el ensayo Hi-C, 41 es una estructura interesante, en la cual las
fibras de cromatina están poco enredadas.41,42
Consistentemente, se ha informado que las regiones de heterocromatina típicas en núcleos de
plantas o mamíferos que han sido visualizadas por cryo-EM son muy similares a los cromosomas
mitóticos.34,35 En conjunto, la cromatina interfásica y los cromosomas mitóticos tienen
organizaciones locales similares (p. Ej., Dominios de cromatina, gotas líquidas de cromatina o
glóbulos fractales), que muestran plegamiento irregular compacto de fibras de nucleosomas sin
una fibra de cromatina de 30 nm (Figs. 2D y 4D), 4D), aunque con diferente morfología a escala
micrométrica.

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Fibras de cromatina de 30 nm in vitro y en algunas células específicas

Aunque sugerimos que la fibra de cromatina de 30 nm está casi ausente en las células mitóticas e
interfásicas, puede haber tramos cortos de fibras de 30 nm o pequeñas cantidades de otras
jerarquías plegadas regularmente en las células.15,53 Además, aclare “30- Se han observado fibras
de cromatina nm ”bajo el microscopio (p. ej., referencias 24 y 54-59). ¿Por qué? Una posible
explicación es la siguiente: la formación de una fibra de 30 nm requiere la unión selectiva de
nucleosomas, que son vecinos cercanos en la cadena de ADN (asociación nucleosómica intrafibra).
Una manera simple de construir una asociación nucleosómica intrafibra es el "aislamiento de las
fibras nucleosómicas". Tal aislamiento podría ocurrir bajo condiciones diluidas, como en los
sistemas in vitro, en los cuales las interacciones entre las fibras nucleosómicas son insignificantes.
En particular, en condiciones de poca sal con MgCl2 1–2 mM, las fibras de nucleosomas pueden
repeler suavemente entre sí y formar fácilmente una fibra de cromatina de 30 nm (p. Ej.,
Referencias 55 y 58). En las observaciones EM convencionales, dicha formación podría
estabilizarse aún más a través de la reticulación química (p. Ej., Fijación de glutaraldehído) y la
contracción resultante de la deshidratación del alcohol durante la preparación de la muestra.60 El
aislamiento de las fibras nucleosómicas también puede ocurrir cuando las fibras nucleosómicas se
eliminan del dominio de la cromatina. o territorio cromosómico para la transcripción (Fig. 4D,
arriba).

Además, los tipos de células específicas tienen núcleos que contienen fibras de cromatina de 30
nm aparentes, que incluyen esperma de estrella de mar, 24,61 eritrocitos de pollo23,24,62 y
células fotorreceptoras de ratón.63 Aunque la formación de una fibra de 30 nm requiere
asociación nucleosómica intrafibra , las asociaciones de nucleosomas entre fibras se consideran
dominantes en las células (Figs. 2D y 4D) .11,60 Las fibras de nucleosomas están altamente
interdigitadas, de modo que se impide que formen fibras de cromatina de 30 nm, lo que conduce
al plegamiento irregular de las fibras de nucleosomas. (estructuras de tipo polímero fundido) (Figs.
2D y 4D) .11,15,60 En algunas células específicas que contienen las fibras regulares de cromatina
de 30 nm, puede existir un mecanismo único para aumentar la asociación de nucleosomas
intrafibra, presumiblemente a través de modificaciones específicas de histonas o la unión de
proteínas específicas.
En conclusión, la cromatina interfásica y los cromosomas mitóticos tienen organizaciones locales
similares (p. Ej., Dominios de cromatina, gotas de cromatina líquida o glóbulos fractales). Las
organizaciones muestran un plegado compacto e irregular de fibras nucleosómicas sin una fibra de
cromatina de 30 nm. Aunque el término "irregular" o "desordenado" podría dar la impresión de
que las organizaciones son probablemente irrelevantes funcionalmente, el plegamiento irregular
implica menos restricción física y mayor dinamismo, lo que lleva a un alto grado de accesibilidad al
ADN.15 La organización irregular puede tener varias ventajas en procesos biológicos dirigidos por
plantillas en núcleos interfásicos, incluida la transcripción de ARN y la replicación, reparación y
recombinación de ADN.

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Expresiones de gratitud

Agradecemos a los doctores M. Eltsov, K. Ito, Y. Takahashi, A.S. Frangakis y N. Imamoto, quienes
contribuyeron al trabajo publicado en el EMBO Journal. También agradecemos a T. Fujisawa, T.
Hayakawa y J. Dubochet por el soporte técnico y S. Tamura por la asistencia técnica. Agradecemos
a T. Uchiumi por el anticuerpo anti-P, y a I. Hiratani, T. Cremer, A. Sasaki, S. Nozaki, M. Yamamoto,
M. Nakasako, S. Nair y J. Hansen por sus útiles discusiones y apoyo. . Este trabajo fue apoyado por
una subvención de ayuda para una subvención MEXT y JST CREST. S.H. y H.T. eran compañeros de
JSPS. Los experimentos de radiación sincrotrón se realizaron en BL29XU y BL45XU en SPring-8 con
la aprobación de RIKEN (Propuesta No. 20120023).

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Notas

Nishino Y, Eltsov M, Joti Y, Ito K, Takata H, Takahashi Y, et al. Los cromosomas mitóticos humanos
consisten predominantemente en fibras nucleosómicas plegadas irregularmente sin una
estructura de cromatina de 30 nm EMBO J 2012 31 1644 53 doi: 10.1038 / emboj.2012.35.

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Notas al pie

Publicado anteriormente en línea: www.landesbioscience.com/journals/nucleus/article/21222