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BIORREMEDIACION DE
EFLUENTES DE CURTIEMBRES
EXPERIENCIAS CON CHORELLA
SP. Y PSEUDOMONAS SP.
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CONTENIDO
I. RESUMEN.................................................................................................................0
II. INTRODUCCIÓN.....................................................................................................0
III. ANTECEDENTES.................................................................................................1
IV. MARCO TEORICO...............................................................................................4
a) Industria del curtido...................................................................................................4
b) Proceso de Curtiembre...............................................................................................5
c) Contaminación por la Industria de Curtiembre..........................................................6
d) Cromo.........................................................................................................................9
e) Contaminación e Impacto Ambiental por el Cromo................................................10
f) Cromo y sus Efectos en la Salud Humana...............................................................12
g) Métodos Convencionales.........................................................................................12
h) Métodos No Convencionales...................................................................................16
i) Biorremediación.......................................................................................................16
j) Tipos de Biorremediación........................................................................................17
m) Reduccion del Cromo VI a Cromo III..................................................................22
V. METODO Y MATERIALES..................................................................................23
a) Lugar de Ejecución..................................................................................................23
b) Caracterización físico química del efluente industrial.............................................23
c) Aislamiento y cultivo de microorganismos nativos.................................................23
d) Pseudomonas............................................................................................................24
VI. RESULTADOS Y DISCUSION..........................................................................24
VII. CONCLUSIONES................................................................................................27
VIII. RECOMENDACIONES......................................................................................28
IX. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS.................................................................28
ILUSTRACIONES
Ilustración 3: Mapa de ubicación del Parque Industrial de Río Seco................................7
Ilustración 4: Diagrama de Flujo de la Generación de residuos por el Proceso
Productivo en una Curtiembre.........................................................................................11
Ilustración 1: Características generales del género Pseudomonas................................21
Ilustración 2: Características Bioquímicas del género Pseudomonas.............................21
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I. INTRODUCCIÓN
Las operaciones y procesos de las curtiembres generan residuos líquidos y sólidos que
se distinguen por su elevada carga orgánica y presencia de agentes químicos que pueden
tener efectos tóxicos, como es el caso del sulfuro y el cromo. Las variaciones en cuanto
al volumen de los residuos y a la concentración de la carga contaminante se presentan
de acuerdo a la materia prima procesada y a la tecnología empleada, (Luján Veláquez,
M., & Chávez Castillo, M. 2007).
En el Perú de acuerdo a la normativa ambiental los LMP son de 0,4 mg/L para Cr (VI)
y 2,0 mg/L para Cr total. Mientras que los VMA, para las descargas de aguas residuales
no domésticas en el sistema de alcantarillado sanitario son de 0,5 mg/L para Cr (VI) y
10,00 mg/L para Cr Total,
El Cr (VI) por ser un poderoso oxidante de sustancias orgánicas, es peligroso para los
organismos vivos y para la salud humana. El ácido crómico y los cromatos pueden
producir intoxicaciones accidentales agudas por vía digestiva. El envenenamiento agudo
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por ingestión produce vértigo, sed intensa, dolor abdominal, vómito, choque y oliguria o
anuria. La muerte se produce por uremia. La inhalación de vapores de cromo por largos
periodos, causa ulceración indolora, hemorragia y perforación del tabique nasal,
acompañado de secreción nasal fétida,
II. ANTECEDENTES
Los efluentes obtenidos de los procesos de la curtiembre se caracterizan por tener una
elevada carga contaminante y por ello no pueden ser descargados al alcantarillado ni a
cuerpos de agua sin recibir un tratamiento previo. Dependiendo de los contaminantes
presentes y las características propias del efluente, puede ser sometido a tratamientos
físico-químicos, biológicos o una combinación de ellos para mejorar el rendimiento y la
flexibilidad de los mismos.
Para mitigar esta contaminación, se han hecho muchos esfuerzos para tratar el cromo
por medio de métodos fisicoquímicos, entre los que se incluyen los tratamientos
químicos tradicionales con agentes reductores, la electrocinética, la síntesis de arcillas
aniónicas y la fotocatálisis , cuyos resultados se ven limitados por las inversiones
económicas, el consumo de energía o la producción de otros contaminantes, haciendo
improcedentes y poco aplicables los procesos de descontaminación a gran escala.
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efectuado estudios que involucran procesos de biorreducción o biorrecuperación de Cr
(VI) con múltiples organismos, entre los que se encuentran plantas terrestres, algas
hongos y bacteria, es importante enfatizar en los estudios que involucran bacterias
nativas de sitios contaminados con este metal, dada la mayor probabilidad de encontrar
cepas que desarrollan diversas estrategias de supervivencia, que además de permitirles
resistir a la contaminación con cromo, contribuyen a la detoxificación del sustrato o
entorno con el cual coexisten. (Ramírez, A. R., & Benítez-Campo, N. 2013)
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horas durante 6 días, mediante: Determinación de cromo total y cromo VI por
espectrofotometría de absorción atómica. Se observó que Pseudomonas sp. no lleva a
cabo una reducción significativa de cromo VI, pues solo lo reduce en un 13,51%, con
una velocidad de reducción de 4,16 x 10 ppm/h, mientras el cromo total alcanza una
reducción considerable a las 24 horas pasando de 2460 a 340 ppm. Con una velocidad
de reducción de 89.166 ppm/h. Se observa que en este mismo tiempo de tratamiento la
población bacteriana alcanza su fase logarítmica, alcanzando una velocidad de
crecimiento de 0,198/h y que la población empieza a disminuir a partir de las 24 horas,
después de las 24 horas no hay reducción de cromo total en cantidades apreciables. y
para ser aceptable según las normas de saneamiento de aguas residuales.
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cromo presente en aguas residuales galvánicas reales, empleando un reactor con cultivo
inmovilizado de S. obliquus. La eficiencia de bioremoción de cromo fue del 92,40 %,
recuperándose el 83 % de la masa de cromo presente en el efluente residual original. La
temperatura del efluente residual estuvo entre 29,4 y 34 °C, condición óptima para el
buen desarrollo del alga y del proceso de remoción de los metales pesados.
La Industria del curtido es una actividad que se viene realizando desde hace muchísimos
años, pero que con el tiempo sus procesos han ido mejorando. En el Perú las empresas
(formales e informales) que se dedican a la industria de curtiembre se ubican
principalmente en las ciudades de Arequipa, Lima y Trujillo. Tanto en la ciudad de
Arequipa como en la de Trujillo las industrias de curtiembres se encuentran agrupadas
en un parque industrial, lo cual es una ventaja ya que las empresas podrían colaborar
entre ellas para realizar el tratamiento a los diferentes residuos que emiten. (Rey de
Castro Rosas, 2013)
En el Parque Industrial de Río Seco (PIRS) de la región de Arequipa no solo vienen
trabajando empresas de curtido sino también otras empresas que realizan otras
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actividades como fabricación de Cola industrial, productos farmacéuticos, químicos,
entre otros. Dichas empresas terminan liberando efluentes, los cuales contienen varios
químicos, materia orgánica y sólidos suspendidos que terminan afectando la calidad del
recurso, es por tal motivo, que han construido dos lagunas de oxidación; sin embargo,
hasta la fecha solo funciona una que no abastece a todas las empresas que eliminan sus
efluentes, por lo que el resto de efluentes están siendo dirigidos por canales que en
algunas zonas presentan grietas por donde el efluente se está rebalsando y hasta la fecha
a llegado a formar 2 lagunas. Así mismo, los canales que llevan el rebose de las lagunas
de oxidación terminan liberando los efluentes a una pequeña quebrada, la cual termina
en la quebrada de Añashuayco que desemboca en el río Chili. (OEFA 2017)
b) Proceso de Curtiembre
- Materia prima: La piel es la estructura externa del cuerpo de los animales. Es una
sustancia heterogénea, generalmente cubierta con pelos o lanas formadas por varias
capas superpuestas. (Pinedo R., 2012)
- Insumos: En los procesos de curtición se utilizan insumos de origen químico.
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El proceso general para el curtido de pieles contempla tres etapas básicas, que son:
1. Etapa de ribera
La etapa de ribera comprende aquellos procesos que permiten la eliminación del pelo o
lana de la piel, también permite la limpieza y desinfección de éstas antes de comenzar el
proceso de pelambre, por lo que demanda de un mayor consumo de agua y su efluente
presenta un elevado pH. Devuelve el estado húmedo inicial a aquellas pieles que se
conservaron antes de ser llevadas a la curtiembre. Este proceso emplea sulfuro de sodio
y cal para eliminar la epidermis de la piel además del pelo que la recubre. Antes de
comenzar con la etapa de curtido se procede al descarnado y dividido, donde se separan
las grasas y carnazas todavía unidas a la parte interna de la piel. (SANTIAGO C., 1999;
Aragón M., 2004).
2. Etapa de Curtido
La curtición es un tratamiento químico para estabilizar el colágeno de la piel,
haciéndolo resistente a la putrefacción y dándole una cierta resistencia a la temperatura.
Los procedimientos de curtición son muy diversos, dependiendo de los tipos de piel y
del destino que esta tendrá. Entre estos procedimientos los más comunes son aquellos
donde se utilizan sales de cromo y extractos vegetales. Generalmente este proceso se
realiza en dos etapas, la primera curtición, que tiene como objetivo la estabilización del
colágeno, y la segunda que se le llama recurtido que tiene como objetivo conferir a la
piel ya curtida todas las características necesarias según el artículo o producto que se
prepara con dicho cuero. En el momento de curtición normalmente se realiza la
eliminación de la grasa natural de la piel, el cual es un componente no deseado que ha
sido poco alterado durante el proceso de ribera (Muñoz P., 2005).
3. Etapa de acabado
La etapa de acabado comprende las operaciones y procesos que dan al cuero las
características finales que requiere para la confección a diferentes fines. En esta etapa se
procede al teñido, ablandado, estirado, raspado, recortado, desempolvado, pintado,
bruñido y planchado final del producto. (SANTIAGO C.; 1999; Muñoz P., 2005)
Las diferentes etapas de la curtiembre generan una gran variedad de residuos sólidos y
líquidos que necesitan un tratamiento adecuado antes de ser vertidos a los cuerpos
receptores. Se estima que, la producción de una tonelada de cuero crudo se necesita
aproximadamente 500 kg de productos químicos, donde solo el 15 % se termina
incorporando en el cuero, así mismo, para procesar una tonelada de piel desde el
proceso de ribera hasta el proceso final de acabados, se usan entre 15 y 40m 3 de agua
fresca, lo que genera un volumen semejante de residuos líquidos, además de los
residuos sólidos y gaseosos con una combinación extremadamente compleja de
compuestos orgánicos e inorgánicos que hace que el sector sea altamente
contaminante. (Instituto Boliviano de Ciencia y Tecnología Nuclear, 2004;
Greenpeace, 2012; Lazo, 2017)
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Dentro de los desechos generados por la industria de la curtiembre, los efluentes que
contaminan el recurso hídrico son los más importantes ya que dentro de sus
características presenta: aceites y grasas, nitrógeno amoniacal, sulfuros, sulfatos,
colorantes y el metal Cr, este último es el más peligroso, ya que si se encontrara en un
estado de valencia +6 es altamente tóxico por lo que genera un alto impacto tanto en la
salud humana como en los ecosistemas ambientales en los que termina siendo vertidos.
(Lazo, 2017). En la Ilustración 4, se muestra un esquema de todo el proceso de
curtiembre, donde nos indica los residuos que son liberados.
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Ilustración 2: Diagrama de Flujo de la Generación de residuos por el Proceso
Productivo en una Curtiembre
Fuente (CEPIS,1995).
d) Cromo
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cromo (VI) en el agua potable son descargas de fábricas de acero y celulosa, y
la erosión de depósitos naturales de cromo (III). En muchos lugares, los compuestos
de cromo han sido diseminados al medio ambiente mediante filtraciones, pobre
almacenaje, o prácticas inadecuadas de disposición. Los compuestos de cromo son
muy persistentes en el agua como sedimentos.
Existen referencias sobre el cromo; que indican que es un metal pesado que
reacciona químicamente con valencias II, III y VI (Cr2+, Cr3+, Cr6+) siendo este
último de gran poder tóxico y el más difícil de oxidar o eliminar de los organismos
vivos. El cromo III y el cromo VI o cromo hexavalente, en particular son
desnaturalizadores de proteínas y precipitan ácidos nucleicos; además son de acción
cancerígena sobre los pulmones y el aparato digestivo. (Otiniano Garcia, Collantes, &
Lurdes, 2007)
El cromo hexavalente es uno de los contaminantes, que produce mayores impactos
negativos en el crecimiento del país, ya que compromete la salud humana, dañando los
procesos ecológicos que sostiene la producción de alimentos (Garcia, 1993)
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En el Perú y el mundo se han realizado estudios sobre el cromo en los seres vivos
y en el agua, por lo que, aquí citaremos algunos antecedentes relacionados con
el cromo en la vida del hombre y en el agua que consume.
A pesar de las recomendaciones y ordenanzas hechas por parte de las autoridades y
entidades ambientales, en los últimos años los ambientes naturales han recibido un
creciente aporte de efluentes industriales y domésticos que han llevado al deterioro
de muchos cursos de agua haciéndolos incompatibles con la vida. Los efluentes
industriales que contienen cromo hexavalente son descargados por industrias
químicas, principalmente por las curtiembres. Aun cuando los Límites Máximos
Permisibles (LMP) para descargas de efluentes líquidos de actividades Minero-
Metalúrgica para el cromo hexavalente es de 0.10 mg/L, D.S. Nº 010-2010-MINAM
y según el Reglamento de la Calidad de Agua para Consumo Humano, D.S. N°
031-2010-SA., para el cromo total es de 0,05 mg/L. (MINAM, 2008)
Los efluentes industriales que contienen Cr (VI) son descargados por industrias
químicas, de construcción de maquinarias e instrumentos, de radio electrónica,
curtiembres, efluentes de torres refrigerantes de estaciones generadoras de energía
eléctrica, entre otras. La concentración de Cr (VI) varía en los efluentes desde
docenas a cientos de gramos o miligramos, la cantidad de aguas contaminadas con
cromo que se vierten al ambiente varía de docenas a cientos de metros cúbicos por
hora. Aun cuando internacionalmente las Concentraciones Máximas permitidas
(MAC) en el ambiente son 0,1 mg/L de Cr (VI) y 0,5 mg/L de Cr (III).
Impacto en Agua:
En los sistemas acuáticos, la toxicidad de los compuestos solubles del cromo varía
según la temperatura, pH y dureza del agua, y según las especies de organismos que
los pueblan. Los compuestos del cromo (VI) se disuelven con facilidad, pero en
condiciones naturales y en presencia de materia orgánica oxidable, se reducen
rápidamente a compuestos cromo (III) más estables y menos hidrosolubles. (Guatibonza
Hernández, B. R., & Torrijos Gómez, D. M. (2018).
Los valores límites establecidos según antecedentes bibliográficos, para el cromo en el
ambiente general son los siguientes:
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La movilidad del cromo en la litósfera solamente puede evaluarse si se consideran la
capacidad de adsorción y reducción de los suelos y de los sedimentos. Los hidróxidos
de cromo (III), una vez sedimentados y fijados en el sedimento acuático, difícilmente
vuelven a movilizarse, dado que la oxidación de los compuestos de cromo (III) para
formar compuestos de cromo (VI) prácticamente no ocurre en forma natural. El cromo
(VI), aún en concentraciones relativamente bajas, ya resulta tóxico, siendo el pH del
suelo un factor fundamental. El uso de abonos fosfatados incrementa el ingreso de
cromo al suelo
Cadena Alimentaria:
Los compuestos del cromo (III) asimilados junto con los alimentos resultan
relativamente inocuos; los compuestos del cromo (VI), en cambio, tienen efectos
altamente tóxicos. Tanto los animales como los seres humanos, sólo se incorporan a su
organismo cantidades relativamente pequeñas de cromo por inhalación; la mayoría de
las sustancias que contienen cromo ingresan al organismo a través de los alimentos y del
agua que se bebe. La resorción en el intestino depende en gran medida de la forma
química en que se presenta el cromo: se asimilan aproximadamente entre un 20-25% de
los complejos de cromo orgánico y aproximadamente un 0,5% del cromo inorgánico.
En la Salud
Existen referencias sobre el cromo; que indican que es un metal pesado que funciona
químicamente con distintas valencias: bivalente, trivalente y hexavalente, siendo este
último de gran importancia por su alto poder tóxico. El cromo trivalente y el cromo
hexavalente en particular es un desnaturalizador de proteínas y precipitante de los
ácidos nucleicos; además, es considerable la acción cancerígena de los cromatos sobre
el pulmón y el aparato digestivo. El Cr (VI) por ser un poderoso oxidante de sustancias
orgánicas, es peligroso para los organismos vivos y para la salud humana. El ácido
crómico y los cromatos pueden producir intoxicaciones accidentales agudas por vía
digestiva. El envenenamiento agudo por ingestión produce vértigo, sed intensa, dolor
abdominal, vómito, choque y oliguria o anuria. La muerte se produce por uremia. La
inhalación de vapores de cromo por largos períodos, causa ulceración indolora,
hemorragia y perforación del tabique nasal, acompañado de secreción nasal fétida,
También se ha observado conjuntivitis, lagrimeo y hepatitis aguda con ictericia.
Los datos de laboratorio indican que en personas que sobrepasan el valor máximo
permisible hay hematuria y proteinuria y deterioro de la función hepatocelular; así
mismo, que el cromo y los cromatos son irritantes y destructores para todas las células
del organismo. En las muertes por envenenamiento agudo, se encuentra nefritis
hemorrágica. Puede aparecer hipotermia y metahemoglobinuria transitorias.
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g) Métodos Convencionales
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incrementa el flujo de entrada y el tiempo de reacción se han llegado a conseguir
remociones de hasta 92% .
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pueden emplear diferentes compuestos, dependiendo de las necesidades
operativas en el proceso y de los costos A continuación se mencionan algunos
de los principales álcalis y sus ventajas y desventajas de uso:
Hidróxido de calcio: Empleando el mismo, a un pH entre 8 y 9 se logra la
precipitación del cromo en forma de hidróxido (porcentajes de remoción de
alrededor del 99%). Sin embargo, empleando este álcali se obtiene una
considerable cantidad de lodo (365 ml de los 500 ml de agua residual
corresponden a lodo de proceso) y la consistencia del mismo no promueve su
adecuada sedimentabilidad
Hidróxido de sodio y carbonato de sodio: Estos reactivos favorecen una
precipitación rápida, sin embargo una de sus mayores desventajas es la elevada
generación de lodo. Si al proceso se añaden polielectrolitos éstos facilitan la
coagulación y precipitación rápida
Óxido de magnesio: Se produce una precipitación lenta a un pH entre 7-9, en
la misma se emplea menor cantidad de reactivo y se produce un lodo más
denso susceptible a decantación. Como la principal desventaja de este
método se tiene la interferencia de grasas y proteínas para la sedimentación del
hidróxido. Complementario a la utilización de este reactivo se han
-3
realizado pruebas con sonicación a 0.12 W cm para favorecer
la sedimentación de las partículas y disminuir los tiempos de sedimentación de
3 horas a 1 aproximadamente. El orden de efectividad de remoción de
cromo para los álcalis es el siguiente: Hidróxido de calcio > Hidróxido de
sodio > Hidróxido de amonio > Carbonato de sodio Adicionalmente, al
cromo recuperado en forma de hidróxido se lo puede re-disolver empleando
ácido sulfúrico concentrado e incorporarlo nuevamente al proceso en una
relación 2:1 (dos partes de sales nuevas de cromo por una parte de sales de
cromo regeneradas).
Adsorción del cromo en intercambiadores catiónicos: Para este proceso
se han empleado resinas a base de sílice-alúmina a las que se les agrega un
grupo carboxilato para mejorar el desempeño en la formación de complejos
con las especies de cromo El cromo (III o VI) se recupera de la resina a través
de un proceso de elución con piridina, ácido di carboxílico y solución buffer de
fosfato. Los experimentos que se han llevado a cabo en columnas empacadas
-1
con la resina, partiendo de concentraciones iniciales de 3145±24 µg ml de
Cr (III) arrojan porcentajes de remoción del 97.2% Sin embargo, estos
procesos son muy costosos (regeneración del material) y altamente
dependientes de la capacidad de intercambio iónico, la temperatura, de la
concentración del metal, del pH y del tiempo de contacto/agitación Cabe
indicar también que otros adsorbentes también han sido utilizados para la
remoción de cromo, por ejemplo, una mezcla de aluminosilicato con carbón
-1
activado (con una capacidad de adsorción de 92 mg g ) así como también
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carbón activado elaborado a partir de desechos agrícolas (capacidad de
-1
adsorción de 39.5 mg g ).
Coagulación química: Zouboulis et al., realizaron investigaciones para
remoción de cromo (tratamiento secundario a una remoción previa en una
planta de tratamiento) empleando coagulantes como el sulfato de aluminio y
5
el cloruro de polialuminio a diferentes pH . Encontraron que a un pH de 8,
-1
una dosis de coagulante de 100 mg l se obtuvieron concentraciones de
-1
cromo de 0.45 mg l y una turbidez de 15.7 NTU .
h) Métodos No Convencionales
i) Biorremediación
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Muchos tratamientos biotecnológicos de contaminantes son considerados
biorremediación, sin embargo, la biotecnología es tecnología que usa elementos
biológicos, sea un organismo o una enzima para mejorar la biodiversidad.
“En estricto rigor un sistema de tratamiento de efluentes o un sistema de compostaje
no son biorremediación, son tratamientos biológicos o mixtos para evitar la
contaminación, en cambio la biorremediación se utiliza para revertir un daño”.
Tanto el tratamiento de residuos como la biorremediación usan
microorganismos, pero lo distintivo de la biorremediación es la aplicación de una
tecnología a post eriori, una vez que se ha producido el daño ecológico. (Pérez,
2010) La biorremediación puede ser empleada para atacar contaminantes específicos
del suelo y aguas y aire. (Guitiérrez, 2013)
j) Tipos de Biorremediación
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Pseudomonas
Son bacterias mesofilas, sobreviven en temperaturas de 4 - 42°C que pueden llegar a
utilizar más de 100 componentes distintos como fuente de carbono, pero éstos deben
ser siempre compuestos orgánicos de bajo peso molecular, ya que estas bacterias
carecen de las enzimas hidrolíticas necesarias para llevar a cabo la degradación de
polímeros. Las características mínimas con las cuales pueden ser identificadas son el
metabolismo oxidativo que presentan, la movilidad, oxidasa casi siempre positiva,
en medio OF con glucosa produce acido (color amarillo) y no genera gas y son indol
negativas (Pérez S. G., 2017). Pseudomonas son microorganismos móviles, debido a
la presencia de uno o más flagelos polares. Algunas especies sintetizan una capa de
exopolipolisacaridos que facilita la adhesión celular, formación de biopeliculas o
biofilms, y protege de la fagocitosis, de los anticuerpos o complementos,
aumentando así su patogenicidad. (Diaz, 2011) Se encuentran normalmente en el
suelo, aunque también pueden ser patógenos oportunistas en animales(P.
aeruginosa, P. fluorescens) y patógenos de plantas(P. syringae). Algunas bacterias
de este grupo producen pigmentos fluorescentes de colores amarillo verdoso,
fácilmente solubles en agua. (Jean Marie Meyer, 2002)
Pseudomonas son quimiorganotrofos, aunque algunas crecen quiolitotroficamente de
forma facultativa. El género Pseudomonas estratifica al prototipo de la familia y se
caracteriza por los siguientes distintivos de la familia. Desde el punto de vista
fisiológico y metabólico los Pseudomonas se caracterizan por el amplio espectro de
nutrientes orgánicos utilizables. También utilizan un gran número de
compuestos heterocíclicos y aromáticos, que no son atacados por otras bacterias. Los
azúcares se degradan generalmente por la vía de Entner-Doudoroff. Algunas especies
de Pseudomonas oxidan los azucares de forma incompleta y excretan los ácidos
correspondientes (Martinez L. C., 2012).
Las bacterias del género Pseudomonas son un grupo heterogéneo de bacterias
gramnegativos que tienen en común la incapacidad para fermentar lactosa. En el
pasado, clasificados dentro del género Pseudomonas, los miembros de este grupo se
han asignado ahora a tres géneros importantes desde el punto de vista médico
(Pseudomonas, Burkholderia y stenotrophormonas), cuyos comportamientos
biológicos comprendes similitudes y diferencias notorias, con repertorios
genéticos que difieren en muchos aspectos. (Ramphal, 2016).
El género Pseudomonas es bien conocido por su versatilidad metabólica y plasticidad
genética. Las especies de Pseudomonas, en general, crecen rápidamente y
presentan gran habilidad para metabolizar una amplia variedad de substratos,
incluyendo compuestos orgánicos tóxicos, como hidrocarburos alifáticos y
aromáticos. Las cepas de las especies de Pseudomonas son frecuentemente
resistentes antibióticos, desinfectantes, detergentes, metales pesados y solventes
orgánicos. Este género puede vivir en números hábitats, que van desde diversos tipos
de ambientes acuáticos y terrestres, hasta tejidos diversos de animales, incluyendo
frutas y verduras, por lo tanto, el hábitat primario es ambiental. También se encuentran en
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suelos y aguas que presentan condiciones aeróbicas, mesofilas y pH neutro (Martinez L.
R., 2007)
Existen numerosas especies, sin embargo, las que con mayor frecuencia se aíslan de
muestras clínicas son: Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas
putida, Pseudomonas stutzeri. Las tres primeras especies se caracterizan por producir
pigmento fluorescente verde limón. Pseudomonas stutzeri generalmente presenta cultivos
de aspecto seco y rugoso.
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Fuente: (Helguero, 2009)
Microalgas
Chorella sp..-
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Es un alga verde que, debido a su capacidad de fotosintetizar y a su situación en las
cadenas tróficas como productor primario, la convierte en un organismo ideal para
acumular metales. Se ha demostrado que es capaz de absorber grandes cantidades
de metales, principalmente Cr4+, Fe2+, Cu2+, Zn2+, Pb2+ y Hg2+. Este proceso se
realiza para incorporar metales a sus células en dos etapas. (Dueñas, 2014)
La primera de ellas, denominada biosorción, transcurre en muy poco tiempo y es
similar tanto en la pared celular como en toda la célula, es decir que ambas
estructuras introducen, en un tiempo similar, Cd, Pb y Cu, mediante un intercambio
de iones en el que el Na, Mg y Ca resultan desplazados a favor de los metales
pesados. A continuación, el metal puede unirse a distintos grupos funcionales como
aminas, alcoholes, fosfatos, hidroxilos. La segunda fase, llamada bioacumulación
requiere un período de tiempo mayor y a diferencia de la primera etapa, se trata de
un proceso activo en el que se piensa que interviene en el metabolismo de la célula
(Zapana, 2018).
k) Biotransformación
Para que los microorganismos puedan crecer y desarrollar sus funciones vitales
necesitan un aporte de nutrientes, así como aceptores y donantes de electrones,
estos últimos son imprescindibles como fuente de energía. Debido a que algunos
metales pesados pueden actuar como aceptores y donantes de electrones, las
bacterias pueden biotransformarlos; esto, en el caso del cromo, involucra un cambio
químico sobre dicho metal (biorreducción). (Flores, 2012)
Estos tratamientos disminuyen la toxicidad de otros contaminantes inorgánicos como
metales tóxicos a través de la actividad biológica natural, mediante reacciones que
forman parte de sus procesos metabólicos. Estos tratamientos utilizan bacterias,
hongos y plantas para detoxificar las sustancias de riesgo para el hombre y el medio
ambiente. Para que los tratamientos sean efectivos no sólo hay que tener en cuenta
factores biológicos, como la existencia de poblaciones microbianas susceptibles de
transformar los contaminantes, la presencia de nutrientes y oxígeno u otros aceptores
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de electrones alternativos, sino también factores ambientales como el tipo de suelo,
la temperatura y el pH. (Bernad, García, & Valiño, 2007)
l) Biorreducción
Las células microbianas pueden ser funcionales en la inmovilización de una o más
especies metálicas, actuando como un bioadsorbente. Es un proceso no enzimático y
no mediado metabólicamente, se basa en la afinidad per se dé la pared celular hacia
iones metálicos en solución, debido a la composición de su estructura. Estos procesos
son factibles con biomasa viva o muerta, así como productos derivados. La
bioadsorción puede ser considerada el primer paso en la interacción metal-
microorganismo, ya que involucran la captura del metal. La adsorción se debe a la
unión no específica de la especie iónica a grupos funcionales de los polisacáridos y a
las proteínas superficiales asociados a la célula o a metabolitos excretados.
(Hernández, 2008)
El uso de biomasa muerta o productos derivados de ella elimina el problema de la
toxicidad, no solo de la provocada por metales disueltos, sino también por
condiciones adversas de operación, además del componente económico de
mantenimiento incluyendo el suplemento de nutrientes. Sin embargo, las células
vivas pueden presentar una variedad más amplia de mecanismos para la acumulación
de metales como el transporte, la formación de complejos extracelulares y la
precipitación (Villanueva, 2000). La eficiencia de un proceso de bioadsorción
depende de las condiciones físico-químicas de la solución en que se encuentre el
metal, entre los que se encuentran, el pH, la temperatura, la concentración inicial del
metal, la fuerza ióica, entre otros (NaranjoI, Ratón, Álvarez, & Silva, 2013)
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3.- Condiciones ambientales: pH de la solución, temperatura, presencia
de i ones fuertes, competencia de otros iones metálicos suaves e intermedios
en solución y sus respectivas concentraciones, el tiempo de contacto y otros
compuestos que pueden acomplejar al ión metálico o precipitar (Hernández,
2008)
a) Lugar de Ejecución
Para evaluar los parámetros físico-químicos, se tomaron muestras del efluente que se
forma después de que se lleven a cabo todos los procesos para la formación del cuero.
Para la medición primero se midieron con la ayuda de un multiparámetro en situ
parámetros como: Ph, conductividad, sólidos totales disueltos (STD) y porcentaje de
oxígeno disuelto (OD%), mientras que los parámetros de demanda bioquímica de
oxígeno (DBO), demanda química de oxígeno (DQO), sólidos suspendidos (SST),
aceites y grasas, cromo total, cromo hexavalente, nitrógeno amoniacal, sulfuros y
sulfatos, fueron evaluados en un laboratorio acreditado.
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c) Aislamiento y cultivo de microorganismos nativos
Clorella sp
El muestreo de los microorganismos se hizo en las pozas formadas por las grietas de los
canales que llevan los efluentes provenientes de las diferentes empresas de curtiembre,
ubicados en el Parque Industrial río Seco (PIRS) ubicado al Noreste del centro de la
Ciudad de Arequipa; distrito Cerro Colorado, Provincia Arequipa, Perú (71°35'59´´ LO;
16°21'22´´ LS; 2250 msmm). (Dueñas, 2014)
Apartir de las muestras colectadas se realizaron diluciones y plaqueo con el medio
BG11 (Blue ¬Green Medium), hasta la obtención del cultivo puro de la microalga que
se utilizó como inóculo. Se describió a la microalga mediante la observación de sus
células en un exámen al fresco y en láminas fijadas a través del microscopio óptico.
Además se observaron las características morfológicas coloniales de la microalga.
Luego de la obtención de las cepas puras se procedio a hacer el cultivo en masa. Así
mismo, para la evaluación del crecimiento de las microalgas, se realizó diariamente un
recuento celular con la ayuda de una cámara de Neubauer y cámara de Sedgewick
Rafter usando un microscopio.
Pseudomonas
Aislamiento e identificación
Posteriormente, se realizó el aislamiento en Medio Base King suplementado con K2
pág. 25 de 34
(4 mg/L Cr VI) a 30ºC por 24 horas. Se seleccionaron 9 colonias aisladas verde
fluorescente y se purificó en Medio King B obteniendo 9 cultivos 1A, 1B, 1C; 2A, 2B,
2C; 3A, 3B, 3C que se conservaron en Agar Luria Bertani. Los nueve cultivos aislados
presentaron las mismas características fenotípicas observando colonias verdes
fluorescentes en Medio King B y pigmento verde fluorescente en Caldo Glutamato. Se
seleccionó el cultivo 3C que se identificó fenotípicamente como P. fluorescens mediante
pruebas usadas para tal fin
Determinación de la reducción de Cr VI
La reducción de Cromo VI se llevó a cabo en Medio Luria Bertani suplementado con
K2 (Cr VI 69,75 mg/L) en condiciones de aerobiosis y agitación (130 RPM) a 22,3 °C
durante 12 horas. La reducción se determinó mediante método colorimétrico que se basa
en la reacción del cromo hexavalente con 1,5-difenilcarbazida en medio ácido, lo que
produce la formación de un compuesto desconocido de color rojo violeta. Éste puede ser
medido espectrofotométricamente a una longitud de onda de 540 nm y la absorbancia es
proporcional a la concentración de cromo en la muestra.
V. RESULTADOS Y DISCUSION
Clorella sp
En la tabla 1 se muestran todos los parámetros fisicoquímicos del efluente industrial que
fue utilizado para los diferentes tratamientos. Dentro de los parámetros fisicoquímicos,
DBO, DQO, SST, aceites y grasas, Cromo total, Nitrógeno amoniacal, sulfuros y
sulfatos del efluente emitido por la Curtiembre Austral SRL del PIRS. (Informe técnico
legal N° 522, 2019)
Tabla 1: Comparación de los LMP y VMA en referencia a los efluentes de la
Curtiembre Austral SRL
Límites máximos permisibles de efluentes de curtiembres VMA Efluente
PARÁMETROS Alcantarillado Aguas superficiales Alcantarillado Austral
Ph 6 -9.0 5 - 8.5 6 - 9.0 12.1
Temperatura (°C) 35 35 35 26.5
DBO (mg/L) 500 30 500 4200
DQO (mg/L) 1500 50 1000 18400
SST (mg/L) 500 30 500 3432
Aceites y Grasas (mg/L) 50 20 100 133
Cromo Total (mg/L) 2 0.5 10 62.39
Cromo VI (mg/L) 0.4 0.2 0.5 -
Nitrógeno Amoniacal (mg/L) 30 10 80 334
Sulfuros (mg/L) 3 0.5 5 2020
Dentro de los parámetros fisicoquímicos evaluados todos excepto la T están muy por
encima de los LMP según el DECRETO SUPREMO (DS) N° 003-2002-PRODUCE y
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al DS N° 010-2019-VIVIENDA, lo cual nos indicaría que estos efluentes
necesariamente necesitan un tratamiento previo para que recién puedan ser vertidas al
alcantarillado o a las pozas.
Según Rajendran et al, 2003, el cultivo de microalgas provenientes de los mismos
ecosistemas impactados, nos indica que estos microorganismos han podido desarrollar
estrategias biológicas, que les permite poder desarrollarse en estos ambientes que
poseen altas concentraciones de metales pesados, lo cual coincide ya que logramos
aislar y cultivar siete microalgas de ecosistemas impactados por los efluentes que son
vertidos por las diferentes curtiembres del PIRS.
Así mismo, los metales pesados cuando se presentan en altas concentraciones crean
efectos citotóxicos y letales (Nies, 1999). Según Nessner & Esposito, 2010 dentro de los
metales que son tóxicos encontramos el cromo (Cr),
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celular hacia el citoplasma. En algunos casos, el transporte de iones metálicos también
puede ocurrir a través de la difusión pasiva debido al aumento inducido por el metal en
la permeabilidad de la membrana celular.
Tabla 3: Resultado de Remoción del Cromo Hexavalente - Cr(VI)
La tabla 4, se observan los datos obtenidos en los dos tratamientos que se realizaron al
agua residual de papelera con la misma dosificación con Chlorella sp.
pág. 28 de 34
El primer y segundo tratamiento que se realizó, se obtuvo los promedios de los dos
tratamientos obteniendo una concentración de DQO 106 mg/l con un porcentaje de
remoción de 98,11, una concentración de Cr (VI) 0,015 mg/l con un porcentaje de Cr
(VI) de 83,51 y un pH de 8,40 entre los dos tratamientos. (Alvarez & Bobadilla, 2018)
En un trabajo realizado por Alvarez & Bobadilla (2018) se evidencio que las microalgas
Chlorella vulgaris si tienen la capacidad de remover contaminantes como nutrientes
inorgánicos, donde se determinó que la eficiencia máxima de remoción de Cr(VI) y
DQO se obtuvo de la dosificación del 15% de microalgas Chlorella vulgaris alcanzando
un valor promedio de 98,11% de remoción DQO y 83,51% de Cr (VI), lo cual se lo
llevó a cabo mediante los análisis realizado de DQO, Cr (VI), pH en los laboratorios
que se utilizaron durante toda la experimentación.
El estudio realizado por (Pellón & Benitez, 2016), demostraron el empleo de la
microalga Scenedesmus obliquus en la reducción del cromo presente en el agua
residual, y obtuvo una eficiencia de reducción de Cr (VI) hasta 12%, en cambio, el
actual trabajo de investigación realizado con Chlorella vulgaris permitió lograr una
reducción de Cr (VI) hasta 83,51%.
Pseudomonas sp
Resultados de reducción de cromo VI con pseudomonas
Bibliografía Tiempo Reducción de Efectividad
Pseudomon (Horas) concentración %
a
25. Miranda Paz, K. X. General 40 1,6033 mg/L a 16%
(2019). Efecto de diferentes 1, 3547 mg/L
concentraciones de
Pseudomonas sp en la
biorreducción de cromo VI en
agua residual de curtiembre
de la provincia de Trujillo,
2017
(Castillo, S., Díaz, T., Holguín, P. 12 69,75 mg/L a 51.90%
A., Peláez, C., Ramírez, M., Fluorescent 33, 58 mg/L
Rodríguez, H., & Robles, H.
(2018))
Otiniano García, M., Tuesta General 28 0,37 mg/L a 5%
Collantes, L., Robles Castillo, 0,35 mg/L
H., Luján Veláquez, M., &
Chávez Castillo, M. (2007).
Biorremediación de cromo VI
de aguas residuales de
curtiembres por
Pseudomonas sp y su efecto
sobre el ciclo celular de
Allium cepa. Rev. Med.
pág. 29 de 34
Vallejiana, 4(1), 32-42.
Lujan Meza, O. R. (2015). P. 1,08 mg/L a 69%
Reducción de Cromo (VI) en Aeruginosa 0,33 mg/L
efluente de curtiembre por
216
Pseudomonas aeruginosa
MBL-03 en condiciones de
laboratorio.
Fuente: Elaboracion Propia
VI. CONCLUSIONES
- El efluente de la curtiembre que está siendo vertido por la curtiembre excede los
Límites máximos permisibles establecidos para efluentes de curtiembres.
VII. RECOMENDACIONES
pág. 30 de 34
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
pág. 31 de 34
en efluente de Parque Industrial Rio Seco (PIRS) y toxicidad aguda sobre
Daphnia magna (crustacea: Daphniidae), Arequipa, Perú. The Biologist-Lima, 9-
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en efluente de Parque Industrial Rio Seco (PIRS) y toxicidad aguda sobre
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