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Muestra seca y molida (50g)

Dejar por 24 horas a T° ambiente


Refrigerar durante 4 horas
Añadir 500 ml de etanol
Calentar en baño de agua de 5' a 10'
Filtrar en caliente

Tomar 50 mL Extracto etanólico

Concentrar a sequedad.
Fracción A Extraer con 150 mL HCl 1% 50°C.
Insoluble Filtrar sobre ceolita.

Flavonoides
Taninos
(Ensayo Shinoda) Lavar con agua destilada y
Solución ácida
secar
Tomar 10 mL en tubo de ensayo
Tomar 10 mL en tubo de ensayo

Añadir limaduras de Mg Extraer con cloroformo


Añadir 2 gotas de FeCl3 1%

Acidificar con HCl concen. Verter lentamente por las Filtrar y aforar en balon de 25
Coloración (37%) paredes del tubo mL
Negativo para
verde, azul o No
compuestos fenólicos
negra
Coloración Fracción B
Si naranja, roja, No Negativo para flavonoides
Positivo para compuestos violeta o rosa
fenólicos
Si

Agregar gotas de solución Esteroides Quinonas


Positivo para flavonoides
gelatina - sal
Tomar 5 mL en tubo de ensayo
Tomar 5 mL en tubo de ensayo
Verter lentamente por las
Turbidez o Adicionar 3 mL H2SO4 10%
Negativo para taninos Adicionar 1 mL de anhídrido paredes del tubo
precipitado Verter lentamente por las
acético puro y 2 gotas de HCl
paredes del tubo
conc. Calentar en baño de agua Hasta ebullición
Si

Positivo para taninos Enfriar muestra y adicionar 5


Coloración Agitar suavemente
verde o No Negativo para esteroides mL de tolueno
violeta
Adicionar 1 mL de NaOH 5%
Si En amoniaco al 2%

Positivo para esteroides


Coloración
rojo cereza No Negativo para quinonas
en capa ac.

Si

Positivo para quinonas


Solución ácida

Filtrar

Medir pH con papel indicador Adicionar gota a gota


hasta pH ≈ 12 amoniaco 0,1N

Extraer con cloroformo

Fase orgánica - liposoluble Fase acuosa - hidrosoluble

Lavar con agua destilada y


secar

Extraer con cloroformo

Filtrar y aforar en balon de 50


Fracción D
mL Tomar 2 mL en
tubo de ensayo
Tomar 10 mL en tubo de ensayo.
Concentrar a sequedad.
Fracción C Adicionar 5 mL de HCl 1%.
Filtrar.
Tomar 4 mL en tubo de ensayo.
Concentrar a sequedad.
Añadir 1 mL de cloroformo. Alcaloides

Esteroides

Tomar 5 mL en tubo de ensayo


Ensayo de Wagner Ensayo de Dragendorff Ensayo de Mayer
Adicionar 1 mL de anhídrido
Verter lentamente por las
acético puro y 2 gotas de HCl Tomar 5 mL del filtrado Tomar 5 mL del filtrado Tomar 5 mL del filtrado
paredes del tubo en tubo de ensayo en tubo de ensayo en tubo de ensayo
conc.

Agregar 3 gotas de reactivo Agregar 3 gotas de reactivo Agregar 3 gotas de reactivo


Coloración
verde o No Negativo para esteroides
violeta
Precipitado Precipitado
Precipitado
naranja- blanco o
Si café Si No amarillo claro
marrón
No Si
Positivo para esteroides

Negativo para Positivo para Negativo para Positivo para


alcaloides alcaloides alcaloides alcaloides
Fase acuosa - hidrosoluble

Saturar con Na2SO4 sólido.


Extraer con sln de clorformo:etanol (2:3)

Fase orgánica - liposoluble Fase alcohólica - hidrosoluble

Lavar con sln saturada de Na2SO4


Tomar 2 mL en
tubo de ensayo Tomar 2 mL en
Fracción D Tomar en tubo de ensayo 2 mL tubo de ensayo
Tomar 2 mL en
tubo de ensayo
Tomar 2 mL en
tubo de ensayo
Flavonoides
Leucoantocianidinas
(Ensayo Shinoda)
Esteroides
Tomar 10 mL en tubo de ensayo
Tomar 2 mL en tubo de ensayo Adicionar 1 mL de HCl conc.
Añadir limaduras de Mg (37%)
Adicionar 1 mL de anhídrido
Verter lentamente por las
acético puro y 2 gotas de HCl
paredes del tubo
conc. Acidificar con HCl concen. Verter lentamente por las Calentar en baño de agua x
(37%) paredes del tubo 15'

Coloración
verde o No Negativo para esteroides
violeta Coloración
Coloraciones Negativo para
naranja, roja, No Negativo para flavonoides No
rojizas leucoantocianidinas
Si
violeta o rosa

Si
Positivo para esteroides Si

Positivo para
Positivo para flavonoides
leucoantocianidinas

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