PRÁCTICA No.

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TÉCNICAS DE MICROSCOPÍA Y USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO BINOCULAR COMPUESTO
Giraldo A, 117021​1​ - Abadía C, 117001​2​ - Monsalve A, 117031​3
Universidad Nacional de Colombia - Sede Palmira

RESUMEN

Con el propósito de afianzar los conocimientos sobre los aspectos básicos del microscopio, se realizó la práctica número 2 sobre las
técnicas de microscopía y uso correcto del microscopio binocular compuesto; previamente se identificaron las partes que lo conforman
y posterior a ello, la observación de placas preparadas mediante los lentes objetivos de 4x, 10x, 40x con el fin de describir lo
observado y evidenciarlo mediante registro fotográfico. Además, se instruyó cómo debe utilizarse de forma correcta el objetivo de
100X mediante el aceite de inmersión.

Palabras claves:​ lentes objetivos, microorganismos, partes y uso del microscopio, aceite de inmersión.

INTRODUCCIÓN METODOLOGÍA

Para un buen desarrollo de las prácticas de laboratorio es
importante conocer todos los aspectos básicos en cuanto al
manejo del microscopio, siendo este un instrumento óptico que
aumenta la capacidad de observación a niveles de
acercamiento tal que hasta hace posible el análisis de
partículas y microorganismos, es decir, permite la visibilidad de
aquellos objetos que no pueden observarse y ser estudiados a
simple vista. (A. 2017,12)
El microscopio de luz, compuesto u óptico ​está integrado por 3
sistemas, los cuales son: mecánico, óptico y de iluminación; el
primero de estos es el esqueleto o armazón del microscopio, el
cual proporciona soporte y estabilidad al equipo; el segundo
hace referencia a los lentes oculares los cuales van montados
en la parte superior del tubo del microscopio y a los lentes
objetivos que son los que se encuentran en el revólver y
quedan cerca del objeto a observar; por último se encuentra el
componente lumínico el cual está formado por la fuente de
iluminación, espejo, condensador, y diafragma. (Pérez, A,
2014)
No solo basta con conocer la forma en la que se compone el
microscopio óptico, también hay que tener en cuenta ciertas
indicaciones sobre el manejo y cuidado de este durante el
periodo en el cual se esté utilizando; es por esto, que la
práctica estuvo basada en reconocer cada una de las partes
que componen el microscopio óptico y la función que cumplen
en el equipo, al igual que desarrollar en los estudiantes
habilidades para la utilización correcta del microscopio
compuesto, enfatizando en las recomendaciones necesarias
para lograr un mayor tiempo de vida útil del equipo. (Rojas
Triviño, 2011)
Las partes del microscopio fueron identificadas por una sola
persona del grupo de laboratorio, escogida al azar por la
docente; luego se le asignó a cada estudiante una placa
preparada con un microorganismo diferente para que realizara
una descripción de lo que observó; posteriormente, esta se
montó y se ajustó en la platina; luego con la ayuda del tornillo
macrométrico se localizó la muestra y se colocó en posición
de enfoque empleando el tornillo micrométrico en el objetivo de
4x . De igual modo, se realizó el mismo procedimiento con los
lentes de 10x y 40x, haciendo su respectivo cambio al girar el
revólver. Además, se añadió una gota de aceite de inmersión
en el centro de la placa y se procedió a dar uso del objetivo de
100x .
Una vez realizadas las observaciones correspondientes y el
registro fotográfico, se procedió a bajar la platina para
desmontar la placa; posterior a ello se utilizó solución
limpiadora y un trozo de toalla papel para limpiar
cuidadosamente el lente objetivo de 100x y el portaobjeto
donde se encontraba la muestra. Finalmente se giró el revolver
para que quedara nuevamente en el objetivo de menor
aumento y así apagar el microscopio.
RESULTADOS
El registro fotográfico de los microorganismos observados y su
respectiva descripción, se plasmó en las (tablas 1, 2, 3 y 4) las
cuales se muestran a continuación.
.

MATERIALES

Microscopio óptico. Muestras de apoyo a la docencia. Aceite

de inmersión. Solución limpiadora. Toallas de papel.

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Tabla 1. ​Observación de las muestras con el objetivo de 4x.
Fig.1 ​Puccinia graminis Uredia
(Foto de Abadía, C, 2018)
A través del objetivo 4x se observó un microorganismo de
color morado con tonalidades rosas y en el contorno una
especie de filamentos que sobresalen de color anaranjado
formando un círculo.
Fig. 2
(Foto de Giraldo, A, 2018)
En la (fig. 2), mediante el objetivo de 4x puede observarse
una estructura en forma de hongo de color verde; al parecer
este tiene un tallo grueso que sostiene la parte superior de
la cual sobresalen unos filamentos que varían en su grosor.
Fig. 3 ​Oospora Scabies
(Foto de Monsalve, A, 2018)
Por medio de este objetivo, logra observarse una gran
comunidad de filamentos verdes y puntos rosas, debido a la
tinción de Gram.
Tabla 2. ​Observación de las muestras con el objetivo de 10X.
Fig. 4. ​Puccinia graminis Uredia
(Foto de Abadía, C, 2018)
Por medio del objetivo 10x se logró observar algunas
estructuras que contiene el microorganismo como unos
espacios incoloros entre las líneas de su contorno.
Fig. 5
(Foto de Giraldo, A, 2018)
Al realizar el aumento de objetivo, pudo observarse con
mejor claridad como unos puntos negros aparecían a los
alrededores de la muestra definiendo su contorno, así
como se muestra en la (fig. 5).
Fig.6 ​Oospora Scabies
(Foto de Monsalve, A, 2018)
Al cambiar de objetivo, la muestra se observa mejor. Se
logra diferenciar entre puntos rosas y filamentos verdes
en forma helicoidal.
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Tabla 3. ​Observación de las muestras con el objetivo de 40X.
Tabla 4.​ Observación de las muestras con el objetivo de 100X.

Fig. 7. ​Puccinia graminis Uredia

(Foto de Abadía, C, 2018) Fig. 10. ​Puccinia graminis Uredia
(Foto de Abadía, C, 2018)

En la imagen observada por el objetivo 40x se logró Al aplicar aceite de inmersión al objetivo 100x se pudo
diferenciar el tejido celular en donde unas partes observar con una mejor resolución el microorganismo y
contienen una tonalidad morada fuerte y otras partes se identificó una pared celular gruesa.
con tonalidades más claras y de color rosa.

Fig. 11
Fig. 8 (Foto de Giraldo, A, 2018)
(Foto de Giraldo, A, 2018)
Se puede diferenciar claramente cómo las estructuras
descritas en la imagen anterior, al parecer ya no se
Se logró visualizar unas estructuras en forma de caña encuentran tan unidas, sino que entre ellas se forman
relativamente cercanas unas con otras, cuyo contorno espacios como se muestra en la (fig. 11).
era de color verde claro.

Fig. 9 ​Oospora Scabies Fig. 12 ​Oospora Scabies

(Foto de Monsalve, A, 2018) (Foto de Monsalve, A, 2018)

Se puede diferenciar claramente filamentos de

Se logró identificar y visualizar nuevamente los bacterias, que contienen en su interior un orgánulo de
filamentos y puntos rosados correspondientes a color negro no identificado.
bacterias Gramnegativas.

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DISCUSIÓN instrumentos, generando nuevas destrezas que permitieron un
buen desarrollo de la práctica, como el adquirir el conocimiento
Los microscopios compuestos presentan un tipo de objetivo adecuado con respecto al uso del lente objetivo de 100X por
que debe ser utilizado con aceite de inmersión, como lo es el medio del aceite de inmersión.
de 100X, este se identifica por tener grabada la palabra oil
(aceite, en inglés) en un lado, cerca del número que indica el BIBLIOGRAFÍA
aumento; el uso de lentes de inmersión es esencial cuando se
Botánica del CNBA. (n.d.). ¿Qué es el microscopio?
observan estructuras menores de 10 µm de tamaño, por
Recuperado Febrero 27, 2018, de
ejemplo, cuando se requiere determinar la forma de una célula
https://goo.gl/5g39VT
bacteriana; el aceite de inmersión no incrementa el aumento
Concepto.de. (2017). Concepto de microscopio.
de los lentes, pero si mejora la resolución y la nitidez de la
Recuperado Febrero 27, 2018, de
imagen producida por dicho objetivo. (Riley, B, 2003).
https://goo.gl/bisghB
La capacidad visual está dada por la longitud de onda de la luz
Lopera Moreno, C., Alvarez Montes, G., Usares Segura,
visible, lo mismo ocurre con un microscopio, solo que, en este
M. A., & Valle Zapata, Y. A. (2011).
caso, las lentes que conforman la columna del microscopio
LABORATORIO DE MICROSCOPIA 1 y 2.
permite observar detalles que no lograrían verse a simple vista,
Recuperado Febrero 27, 2018, de
aun así, los lentes de 4X, 10X y 40X también dejan de ser
https://goo.gl/wLcwGy
funcionales a cierto número de aumentos, ya que la luz visible
Perez Aguilar, M. I. (2013). El Microscopio: Equipo
se desvía por causa de la distancia del objetivo y el ocular,
fundamental en el Laboratorio de Biología.
además de que tiene una longitud de onda muy grande para
Recuperado Febrero 27, 2018, de
acercamientos tan pequeños; al colocar el aceite de inmersión,
https://goo.gl/yjkmPr
lo que se hace es ocupar el espacio libre entre el ocular y el
Riley, M. (2008). Microscopía básica – Una destreza
objetivo, de modo que la refracción del aceite es similar a la del
importante para Fitopatólogos. ​Plant Health
vidrio, entonces la luz puede ser enfocada sobre la muestra sin
Instructor​.
que esta se desvíe y así se pueda observar con claridad
https://doi.org/10.1094/PHI-I-2008-0715-01
(Lopero et al., 2011).
Rojas Triviño, A. (2011). Conceptos y práctica de
Existe una estrecha relación entre el aumento, el diámetro de
microbiología general.
la lente y la distancia al preparado; el diámetro de la lente se
relaciona de manera inversa con el aumento (a mayor
aumento, menor diámetro), esto se debe al campo que debe
abarcar cada uno (al aumentar el tamaño se reduce el campo,
sino la imagen sería terriblemente grande, por ejemplo, desde
un avión se puede ver mucha superficie (campo) pero muy
pequeña y poco detallada, a medida que se acerca, los
detalles se hacen más grandes pero en menor superficie); en
cuanto a la distancia al preparado, a mayor aumento que
quiera conseguirse, más cerca se debe de estar del preparado
y entender esto es fundamental para comprender el porqué de
las lentes de inmersión: sin ahondar en cuestiones físicas,
llega un momento en que a través del aire se puede acercar
más, entonces, para poder seguir aproximándose se tiene que
modificar las propiedades de refracción del medio; el efecto
que se logra aumentando el índice de refracción es que, para
la luz, el preparado esté más "cerca" del objetivo. (Botánica del
CNBA, s.f.)

CONCLUSIÓN

Se reconoció las partes que conforman el microscopio

resaltando la importancia que cumple cada una de sus
funciones al momento de ser utilizado, de igual manera, se
desarrollaron y se fortalecieron algunos conceptos básicos
encaminados hacia el correcto empleo de este tipo de

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