1 Histologia Teoria Procesamiento Histológico 2020 2 PDF

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE MEDICINA HUMANA

MORFOFISIOLOGÍA GENERAL
PROCESAMIENTO
HISTOLÓGICO
Semana N° 1
PROFESORES:
• Callo Balcázar Lucy
• Chauca Torres Nadia Emely
• Coca Calderón Marie-Claudia
• De La Cruz Anticona Shirley Mirna
• Neira Alatrista Elizabeth María
• Samanéz Urrunaga María Carolina
• Zarria Romero Jacquelyne Yessenia
SÍLABO
ANTECEDENTES
SEM PUBLIC DE INGRESO DE

CURSO CATEGORÍA DESCR CORTA DESCR PESO NOTAS
APLIC NOTAS
MORF. EV-DX ED Evaluación Diagnóstica 2% 1 3 09/09/2020
GENERAL
MORF. EVC1 EC1 Evaluación Continua 1 10% 4 5 30/09/2020

GENERAL

GENERAL
EPP 14% 8 9 28/10/2020

Evaluación Parcial Práctica
MORF.
EV-PARCIAL
GENERAL EPT Evaluación Parcial Teórica 14% 8 9 28/10/2020

GENERAL

GENERAL
EFP 14% 15 15 06/12/2020

Evaluación Final Práctica
MORF.
EV-FINAL
GENERAL EFT Evaluación Final Teórica 14% 16 16 16/12/2020
Donde la fórmula es:
ED (0.02) + EC1(0.1) + EC2(0.11) + EPP (0.14) + EPT (0.14) + EC3(0.1) + EC4(0.11)+ EFP(0.14) + EFT (0.14)
CARRERA DE MEDICINA HUMANA. MORFOFISIOLOGÍA
GENERAL. Microscopía
PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
Logros
Definir la Histología.
Identificar los tejidos animales,

por sus características.
Al finalizar la sesión el estudiante Será capaz de:
Reconocer las etapas del
Procesamiento en Histología.
Valora la importancia del uso de

colorantes en Histología.
CARRERA DE MEDICINA HUMANA - Curso Morfofisiología

General - PROCESAMIENTO HISTOLÓGICO
PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
Temario
¿Qué es la Histología?
Tejidos Animales
Técnicas histológicas
Pasos de la Técnica Histológica
Tinción de los cortes

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
¿Qué es Histología?
La Histología es una La comprensión de los
ciencia básica que se procesos fisiológicos y
ocupa del estudio de PERMITE patológicos que pue-
las células y tejidos den presentarse en el
normales ser humano.
Los Tejidos son un conjunto de

células muy relacionadas, dentro
de un entorno que constituye la
Matriz Extracelular (MEC).
PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
TEJIDOS ANIMALES:
Se encuentra cubriendo superficies, revistien-
EPITELIAL
do cavidades o formando glándulas.
Conformado por células que Es el tejido más abundante de

son capaces de recibir estímu- NERVIOSO TEJIDOS CONECTIVO nuestro cuerpo, da soporte,
los y dar respuesta a ellos. relleno, defensa, etc.
Formado por células capaces de realizar MUSCULAR

el movimiento de nuestro cuerpo.

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
CLASIFICACIÓN DE LOS TEJIDOS

CLASES DE TEJIDO CARACTERÍSTICAS FUNCIONES UBICACIÓN
- Es avascular (carece de vasos sanguíneos). - Protección - Piel
- Todos presenta Membrana Basal ( a través - Absorción - Tracto digestivo
1.- TEJIDO EPITELIAL de la cual se nutren). - Secreción - Glándulas
- Con escasa sustancia intercelular. - Intercambio - Vasos sanguíneos
- Células poco diferenciadas. - Reproducción - Gónadas
- Abundante sustancia intercelular, que - Mecánica - Ligamento, tendones.
2.- TEJIDO CONJUNTIVO O puede ser semisólida, sólida o líquida. - Protección. - Huesos.
CONECTIVO - Gran variedad de células - Reserva - Adiposo.
- Proviene de mesodermo.
- Defensa - Sangre
- Conformado por células cuya principal - Mov. del cuerpo. - Sobre el esqueleto.
3.- TEJIDO MUSCULAR función es la contractibilidad. - Mov. de vísceras - En el tubo digestivo.
- Las células reciben el nombre de fibras - Circulación. - En el corazón
musculares.
- Formado por las neuronas, células espe- - Transmitir impulsos - En el sistema nervioso.
4.- TEJIDO NERVIOSO cializadas. nerviosos y
- Se caracteriza por su irritabilidad y responder a
conductibilidad. estímulos.

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
INTRODUCCIÓN AL ESTUDIO
DE LA HISTOLOGÍA
HISTOLOGÍA “estudio de los tejidos”
Es la rama de la Anatomía que estudia los tejidos
ANATOMÍA MICROSCÓPICA

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
Técnicas Histológicas
Definición:
• Pasos que se deben seguir con el fin de preparar un corte histológico.
• Son una serie de métodos y técnicas utilizados para poder estudiar las características
morfológicas y moleculares de los tejidos.
• Se utilizan diferentes técnicas, dependiendo de la característica que deseemos observar
de los tejidos a través del microscopio.
• Se debe obtener una rebanada de tejido muy delgada, colocada sobre una lámina
portaobjetos, coloreada y cubierta por una laminilla cubre-objetos, lista para su
observación y análisis.
https://pt.slideshare.net/agclinica
Técnicas Histológicas por Dra. Violeta González
PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
PASOS DE LA TÉCNICA HISTOLÓGICA

1. Obtención de la muestra
2. Fijación
3. Inclusión: Deshidratación y aclaramiento
4. Corte
5. Montaje
6. Tinción de los cortes
PROCESO HISTOLÓGICO
https://simplebooklet.com/julianrojashistologianimal#page=2
PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
1. OBTENCIÓN DE LA MUESTRA
Las muestras de tejido pueden ser obtenidas de

materiales quirúrgicos, necropsias, biopsias,
estas deben de ser procesadas adecuadamente
y prontamente para obtener buenos cortes
histológicos.

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
TOMA DE LA MUESTRA
Las muestras pueden ser obtenidas por:-
• Frotis.
• Aspiración y/o lavado
• Punción aspiración con aguja fina
• Impronta
• Biopsia
• Punción con trocar
• Necropsia.
HISTOLOGÍA TEJIDOS NORMALES
ANATOMÍA PATOLÓGICA TEJ. PATOLÓGICOS
PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
OBTENCIÓN DE LA MUESTRA
En caso de ser necesario se debe realizar un examen y descripción

preliminar de los materiales y su adecuación para un correcto
procesamiento.

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
2. FIJACIÓN:
Es la fase en la cual se preserva la morfología y la composición
química de los tejidos evitando la AUTÓLISIS.

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
ROTULACIÓN DE LA MUESTRA
Paso muy importante del

procesamiento por medio del
cual se debe obtener toda la
información posible del material
a procesar.

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
FIJACIÓN
 Tratamiento del tejido con sustancias químicas que no solo

retardan las alteraciones hísticas posteriores a la muerte,
sino que conservan la configuración normal del tejido.
 Un fijador modifica un tejido mediante la estabilización de

las proteínas de modo que lo hace resistente a los cambios
posteriores. Este cambio se produce tanto por métodos
químicos (soluciones fijadoras) o físicas (calor, desecación)
en un proceso llamado desnaturalización.
PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
FIJACIÓN
Fijador:
Sustancia que detiene en forma rápida los procesos de autólisis y que,

al mismo tiempo, debe de tener un alto poder de penetración para
asegurar la fijación correcta hasta las capas más profundas del tejido.
Conservar, en lo posible, los detalles estructurales de las células y los
tejidos tal como se encontraban en vida.

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
FIJACIÓN
Tipos de fijadores
Físicos:
• Desecación: Extendidos, líquidos de punciones.
• Calor seco: Bacteriología.
• Calor húmedo: Microquímica, Zoología.
• Frío: No es una verdadera fijación. Detiene los procesos de autólisis y
necrosis, pero cuando deja de actuar los mismos se reanudan.

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
FIJACIÓN
Tipos de fijadores
Químicos:
• Aldehídos: no precipitan proteínas y no contrae estructuras .
• Mercuriales: precipitan proteínas y tóxico por sus vapores.
• Alcoholes: precipitan proteínas.
• Agentes oxidantes: precipitan proteínas y tóxico por sus vapores.
• Picratos: precipitan proteínas.

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
FIJACIÓN
FIJADOR MÁS USADO
Químicos:
 Aldehídos (formaldehido/glutaraldehido): Son los más
utilizados. Los tejidos son fijados por uniones cruzadas en
las proteínas, al reaccionar con los grupos amino.
SOLUCIÓN AL 40% DE ALDEHIDO FÓRMICO
USO FORMOL AL 10%

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
FIJACIÓN POR PERFUSIÓN

 La Perfusión es el método que más se
utiliza en animales de experimentación, es
casi instantáneo ya que el líquido fijador es
inoculado en el sistema circulatorio del
espécimen, por lo tanto, fija en principio
desde adentro hacia fuera de los órganos
a estudiar, lo que puede dar excelentes
resultados.
 La perfusión consiste en anestesiar al

animal y, mediante un sistema especial de
inyección y drenaje, reemplazar la sangre
con una solución salina y después se
inyecta el fijador. Con este procedimiento
se garantiza que los tejidos se fijen
Se realiza en animales pequeños. rápidamente.
PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
3. INCLUSIÓN
El tejido debe de embeberse en Parafina para dar dureza al tejido,
previo a eso la muestra se debe de:
3.1 Lavar: para eliminar el fijador.
3.2 Deshidratar: se utilizan alcoholes en grado ascendente

para eliminar el agua de los tejidos ya que la parafina no
es miscible en agua.
3.3 Aclarar: Se debe buscar un líquido que sea miscible

en alcohol y parafina.
PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
3.2 DESHIDRATACIÓN
Se obtiene por medio de un reactivo anhidro pero
ávido de agua:
• Alcohol Etílico.
• Alcohol Isopropílico.
• Alcohol Butílico.
• Acetona
PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
3.3 ACLARAMIENTO
Se debe embeber la pieza con una sustancia miscible
con el alcohol y la parafina:
• Xilol.
• Toluol.
• Benceno.

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
 INCLUSIÓN
La parafina penetra en los vasos, en los espacios intercelulares
y también en el interior de las células embebiendo el tejido y
haciendo más fácil la obtención de cortes con el micrótomo.

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
Procesador Automático

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
CONFECCIÓN DEL TACO

Obtención del bloque de parafina de forma regular, para
ser cortado con el micrótomo. BARRAS DE LEUKART

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
 CONFECCIÓN
DEL TACO

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
4. CORTE
Micrótomo Rotativo.
Micrótomo de Deslizamiento.
Micrótomo de Congelación.
Crióstato.

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
CORTE EN ULTRAMICRÓTOMO.
PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
 EXTENSIÓN
 Utilizar portaobjetos limpios y
preparados con el adhesivo
adecuado.
 Se realiza en agua tibia (38°C).

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
5.MONTAJE
 Precaución: el preparado debe
quedar bien extendido y sin
pliegues.
 Rotular.

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
6.TINCIÓN DE LOS CORTES

Los colorantes pueden agruparse en tres clases principales:
• Colorantes que diferencian los componentes

básicos y ácidos de la célula (hematoxilina y
eosina).
• Colorantes especializados que distinguen los

componentes fibrosos de la matriz extracelular.
• Sales metálicas que se precipitan en los tejidos

y forman depósitos de metales en ellos.
PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
Colorantes usados con mayor
frecuencia en histología
Actúa como un colorante

BÁSICO que se asocia y tiñe
componentes ÁCIDOS de la
célula como estructuras Colorante ÁCIDO
aniónicas (predomina densidad de
(que posean fosfatos,
carga negativa), que se
sulfatos y/o carboxilos asocia y colorea estructuras
ionizados) catiónicas (componentes
BASICOS) del citoplasma y
matriz extracelular
- Heterocromatina y nucléolos
- ARN ribosomal, - Filamentos citoplasmáticos.
- RER - Componentes membranosos
intracelulares.
- Matriz extracelular (por los
sulfatos de los GAGs). - Fibras extracelulares (por sus
aminoácidos básicos ionizados).
Color: azul o violeta
Color: rosado
PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
 TINCIÓN DE LOS CORTES
La reacción de los grupos aniónicos con un

colorante básico se denomina BASOFILIA
(que tiene afinidad por lo básico)
La reacción de los grupos catiónicos con un

colorante ácido se denomina EOSINOFILIA
(que tiene afinidad por lo ácido)

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
Coloraciones y reacciones histológicas frecuentes

Reactivos Resultados
Hematoxilina Color azul: núcleo; regiones ácidas del citoplasma; matriz del cartílago.
Eosina Color rosado: regiones básicas del citoplasma; fibras de colágeno.
Tricrómica de Masson Color azul oscuro: núcleos

Color rojo: músculo; queratina; citoplasma
Color azul claro: mucinógeno, colágeno
Coloración elástica de Orceína Color pardo: fibras elásticas
Coloración elástica de Weigert Color azul: fibras elásticas
Coloración argéntica Color negro: fibras reticulares

Hematoxilina férrica Color negro: estrías del músculo, núcleos, eritrocitos
Ácido periódico de Shiff Color magenta: glucógeno y moléculas ricas en carbohidratos
Coloración de Wright y Giemsa Se emplea para la coloración diferencial de las células sanguíneas.
Color rosado: eritrocitos; gránulos de los eosinófilos
Color púrpura: núcleos de los leucocitos; gránulos de los basófilos.
Color azul: Citoplasma de monocitos y linfocitos

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
Coloración con Coloración con Coloración

Hematoxilina Eosina Hematoxilina-Eosina

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
Basófilo
(azul)
Acidófilo
(rosado)

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
OBSERVACIÓN DE LAS MUESTRAS

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
OBSERVACIÓN DE LAS MUESTRAS
Hematoxilina – Eosina
(H-E)
Secciones coloreadas vistas al microscopio de luz.

PROCESAMIENTO
ANTECEDENTES
Secciones con coloraciones especiales vistas al microscopio de luz.

MUCHAS GRACIAS

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CARRERA DE MEDICINA HUMANA

SEM PUBLIC DE INGRESO DE

MORF. EVC1 EC1 Evaluación Continua 1 10% 4 5 30/09/2020

MORF. EVC2 EC2 Evaluación Continua 2 11% 6 7 14/10/2020

EPP 14% 8 9 28/10/2020

MORF. EVC3 EC3 Evaluación Continua 3 10% 12 13 25/11/2020

MORF. EVC4 EC4 Evaluación Continua 4 11% 14 14 02/12/2020

EFP 14% 15 15 06/12/2020

Donde la fórmula es:

Identificar los tejidos animales,

Valora la importancia del uso de

CARRERA DE MEDICINA HUMANA - Curso Morfofisiología

Pasos de la Técnica Histológica

Tinción de los cortes

Los Tejidos son un conjunto de

Conformado por células que Es el tejido más abundante de

Formado por células capaces de realizar MUSCULAR

CARRERA DE MEDICINA HUMANA - Curso Morfofisiología

CLASIFICACIÓN DE LOS TEJIDOS

CARRERA DE MEDICINA HUMANA - Curso Morfofisiología

Es la rama de la Anatomía que estudia los tejidos

CARRERA DE MEDICINA HUMANA - Curso Morfofisiología

PASOS DE LA TÉCNICA HISTOLÓGICA

Las muestras de tejido pueden ser obtenidas de

CARRERA DE MEDICINA HUMANA - Curso Morfofisiología

En caso de ser necesario se debe realizar un examen y descripción

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CARRERA DE MEDICINA HUMANA - Curso Morfofisiología

Paso muy importante del

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 Tratamiento del tejido con sustancias químicas que no solo

 Un fijador modifica un tejido mediante la estabilización de

Sustancia que detiene en forma rápida los procesos de autólisis y que,

CARRERA DE MEDICINA HUMANA - Curso Morfofisiología

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SOLUCIÓN AL 40% DE ALDEHIDO FÓRMICO

USO FORMOL AL 10%

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FIJACIÓN POR PERFUSIÓN

 La perfusión consiste en anestesiar al

3.1 Lavar: para eliminar el fijador.

3.2 Deshidratar: se utilizan alcoholes en grado ascendente

3.3 Aclarar: Se debe buscar un líquido que sea miscible

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CONFECCIÓN DEL TACO

ser cortado con el micrótomo. BARRAS DE LEUKART

CARRERA DE MEDICINA HUMANA - Curso Morfofisiología

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 Se realiza en agua tibia (38°C).

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6.TINCIÓN DE LOS CORTES

• Colorantes que diferencian los componentes

• Colorantes especializados que distinguen los

• Sales metálicas que se precipitan en los tejidos

Actúa como un colorante

 TINCIÓN DE LOS CORTES

La reacción de los grupos aniónicos con un