TECNICAS DE COLORACION BACTERIANA

BACTERIAS
Características
Son procariontes
El tamaño generalmente vario de 0,5 a 5 micrómetros
Solo pueden ser vistas con el microscopio
Sin el microscopio es posible ver las colonias
FORMAS Y ARREGLOS BACTERIANOS

BACILOS
Bacteria de forma cilíndrica alargada.

COCOS
Los cocos son bacterias que tienen forma
esférica.

ESPIRAL
son bacterias en forma de sacacorchos

LOS COCOS PUEDEN UNIRSE EN COLONIAS

Formas esférica-coco
 División a lo largo del mismo plano, formando cadenas cortas
2 cocos juntos- diplococos
4-20 en cadenas- estreptococos
 División a lo largo de 2 planos diferente
 Tétradas
 División a lo largo de 3 planos
 Regularmente- sarcinas
 Irregularmente-estafilococos

LOS BACILOS PUEDEN UNIRSE EN COLONIAS

Forma de vara- bacilos
Dos bacilos- diplobacilos
Cadenas- estreptobacilos
PARED CELULAR
 Compuesta de peptidoglicano
 Peptidoglicano- está formado por “eneasetilglucosamina” NAG y
“eneasetilacidomuramico” NAM

Unido a cada NAM se encuentra un tetrapeptido, es decir 4 aminoácidos unidos

entre ellos mediante enlaces peptídicos
CADENA DE GLICANO
Es una cadena continua de NAG y NAM

Enlace o cadena peptídica- une los tetrapeptido

Puente peptídico

CATEGORIZACION DE LA BACTERIAS
Dos grandes grupos
1. Bacteria gran positiva- tiñen purpura
2. Bacteria gran negativa- tiñen rojo

PARED CELULAR DE LA GRAM

POSITIVA
 Gruesa capa de peptidoglicano
Contiene ACIDOS TEICOICOS- permite una mayor estabilidad en cada
cadena de glicano

PARED CELULAR DE LAS GRAM NEGATIVAS

Tiene una
membrana
plasmática
externa
DIFERENCIA ENTRE BACTERIA GRAN POSITIVA Y GRAM NEGATIVA
GRAM POSITIVA GRAM NEGATIVA
Es más ancha 10% de la estructura es
Peptidoglicano.
El 90% está constituida por Capa adicional de Lipopolisacáridos
Peptidoglicano.
10% ácido teicoico. Zona peri plasmático

ESTRUCTURAS ACIDOS LIPOTEICOICOS

Permiten una mayor estabilidad entre las cadenas de glicano y la membrana
plasmática

ESPACIO
PERIPLASMATICO
Espacio entre membrana y
membrana
CARACTERISTICAS
el espacio periplásmico no se trata de una sustancia líquida, sino más bien de un
gel que se conoce como periplasma. Este está comprendido por la red de
peptidoglucano y diversos componentes proteicos y moleculares.
CARACTERISTICAS ESTRUCTURALES
La membrana externa está estrechamente asociada con el peptidoglucano
incluido en el periplasma gracias a la presencia de una pequeña y abundante proteína
denominada lipoproteína de Braun o lipoproteína de mureína. Esta proteína se asocia con
la membrana externa a través de su extremo hidrofóbico y apunta hacia el interior del
espacio periplásmico.

FUNCIONES

El espacio periplásmico ha de ser visto como un continuo funcional y la

localización de muchas de sus proteínas depende, más que de limitaciones físicas
dentro del compartimiento, de la localización de algunos de los componentes
estructurales a los que estas se unen. Este compartimiento provee un ambiente
oxidante donde muchas estructuras proteicas pueden estabilizarse por medio de
puentes disulfuro (S-S).

La presencia de este compartimento celular en las bacterias les permite secuestrar

enzimas degradativas potencialmente peligrosas como RNasas y fosfatasas
alcalinas, y por esta razón se le conoce como el precursor evolutivo de los
lisosomas en las células eucariotas.

TINCIONES EN MICROBIOLOGIA

Una tinción es el resultado de la interacción entre un tinte con una superficie

El tinte es una molecula orgánica natural o sintética que imparte color a las
sustancias con las que entra en contacto
TINTE
CROMOGENOS
Benceno- solvente orgánico incoloro
Cromoforo- grupo químico que imparte color al benceno
AUXOCROMO
Grupo químico que le da al cromoforo la propiedad de ionizarse (+) (-)

TINTE BASICO
tiene carga positiva (catiónica), la porción de cromógeno interacciona con
superficies, componentes o compuestos celulares negativos
TINTE ACIDICOS
tiene carga negativa (anionica) gran afinidad por los compuestos positivos

TIPOS DE TINCION
TINCION SIMPLE- uso de un solo tinte

Para visualización de formas (cocos,

bacilos y espirilos) y arreglos (cadenas,
clúster, pares y tétradas)
Ejemplo: azul de metileno--- tiene cargas positivas
TINCION DE GRAM - Uso de dos tintes o mas
Se puede categorizar (Gram positiva o Gram negativas)
Se podrá visualizar formas y arreglos
TINCION ACIDA- es para los bacilos alcohol resistente (BAAR) permite identificar
las microbacterium que ocasionan tuberculosis y lepra
nos permite la visualización de estructuras
tinción de flagelo
tinción de capsula
tinción de espora
tinción nucleares

PROCEDIMIENTO
se limpia el portaobjeto
se toma la muestra (ya sea un medio solido o un medio liquido)
se deja secar y se fija la muestra (para detener el metabolismo de la
bacteria y para que se adhiera al vidrio)
se tiñe
se lleva al microscopio al
objetivo 100x con aceite de
inmersión
TINCIONES DIFERENCIALES
PROCEDIMIENTO
verter cristal violeta por 1 minuto
agregar lugol por 2 minutos
se usa un descolorizante (alcohol acetona)
agregamos safranina alrededor de 20 segundos