Capitulo 26 MIETABOLISMO DE NUCLEOTIDOS Estructuras quimicas de nuciestidos, nucledsidos y bases . Sintesis de ribonuctestidos purinicos A. Sintesis de inosina monofosfato B. Sintesis de ribonuclestidos de adenina y guanina a partir de inosina monofosfato C. Regulacién de a biosintesis de nucleétidos purinicos D. Recuperacién de purinas 3. Sintesis de ribonucledtides pirimidinicos A Sintesis de UMP B. Sintesis de UTP y CTP. ©. Regulacién de la biosintesis de nuclestidos pitimidinicos Formacién de desoxirribonuclestidos A. Produccién de restos de desoxirribosa B. Origen de la timina . Degradacién de nucledtidos ‘A. Catabolismo de purinas B. Destino del Acido urico C. Catabolismo de pirimidinas . Biosintesis de coenzimas nucleotidicos A. Coenzimas de nicotinamida B. Coenzimas de flavina ©. Coenzima A Los nuclestidos son sustancias biologicamente ubi- cuas que participan en casi todos los procesos bioqui- micos: 1. Forman las unidades monoméricas de los acidos nucleicos. En efecto, los acidos nucleicos se sinteti- zan directamente a partir de los nucledsido trifos- fatos, la forma activada de los nuclestidos (Seccién 31-14). 2. Los nucleésido trifosfatos, més especificamente el ATP, son los productos finales “ricos en energia” de muchas vias liberadoras de energia cuya utiliza- cién impulsa muchos de los procesos que requie- ren energfa. Varios intermediarios activados, como la UDP-glucosa en la sintesis del glucdgeno (Sec- cién 17-2A), contienen componentes nucleotidicos. 3. Muchas vias metabilicas son reguladas, al menos en parte, por los niveles de nucledtidos como ATP, ADP y AMP. De modo similar, muchas sefiales hormonales, como las que controlan el metabolis- mo del glucégeno (Seccién 17-3), son mediadas intracelularmente por AMPc o por su andlogo de guanina GMPc 4, Los nucleétidos de adenina son componentes de os coenzimas NAD‘, NADP", FMN, FAD y coen- zima A. La importancia de los nucle6tidos en el metabolis- mo celular se desprende de la observaci6n de que en casi todas las células pueden sintetizarse de novo (de nuevo) y de los productos de degradacion de los Acidos nucleicos. En este capitulo, consideramos lanaturaleza de estas vias biosintéticas. Al mismo tiem- po, examinaremos cémo se regulan y las consecuen- Gias de su bloqueo, tanto por defectos genéticos como por la administracion de agentes quimioterapéuticos. Discutimos luego cémo se degradan los nuclestidos. Finalmente se da una idea general de la biosintesis de los coenzimas nucleotidicos. Empezamos con una presentacién de la nomenclatura quimica de los nu- deétidos y sus componentes. 1, ESTRUCTURAS QUIMICAS DE NUCLEOTIDOS, NUCLEOSIDOS Y BASES Los nucleotidos son ésteres fosfato de pentosas (azti- cares C,), en los que una base nitrogenada se une al C(1) del resto de azticar. En los ribonucledtidos (Fig. 26- 1a), la pentosa es el resto de D-ribosa mientras que en los desoxirribonucleétidos (Fig. 26-10), que forman parte del DNA, el aziicar es la 2’-desoxi-p-ribosa (obsérvese que los nimeros “prima’ se refieren a los tomos de los restos de ribosa; los ntimeros “sin pri- ‘ma’ se refieren a la base nitrogenada). El grupo fosfa- to puede unirse al C(3’) 0 al C(5') de una pentosa para formar su 3'-nucledtido o su 5’-nuclestido, respecti- vamente. Si el grupo fosfato esté ausente, el com- puesto se conoce como nucleésido. Un 5’-nucle6tido, por ejemplo, puede por tanto llamarse un nucleésido- 5'-fosfato. En todos los nuclestidos y nucleésidos que existen de forma natural, el enlace N-glucosidico que une la base nitrogenada al atomo C(1’) de la pentosa tiene una configuracion B [se encuentra en el mismo lado del anillo de furanosa que el enlace C(4’)-C(5"); Seccion 10-1B]. Obsérvese que los grupos fosfato de los nucleotidos estan doblemente ionizados a pH fi- siolégico; es decir, los nucledtidos son dcidos moderada- mente fuertes. Las bases nitrogenadas son moléculas planas, arométi- cas, heterociclicas que, en su mayor parte, son derivados de Ia purina o pirimidina. xP Ay oO aa ° aad i Purina Pirimidina Las estructuras, nombres y abreviaturas de las bases, nucledsidos y nuclestidos més frecuentes se dan en la Tabla 26-1. Los principales componentes purinicos de los acidos nucleicos son los restos de adenina y gua- nina; los principales restos pirimidinicos son los de citosina, uracilo (presente en el RNA) y timina (pre- sente sobre todo en el DNA). Las purinas forman enlaces glucosidicos con la ribosa a través de sus 4tomos N(9), mientras que las pirimidinas lo hacen a través de sus atomos N(1) (obsérvese que las purinas y las pirimidinas usan distintos esquemas en la nume- racién de sus Atoms). Capitulo 26. Metabolismo de nucledtidos 791 @ ® 7 5 a 5 Base 20,;PO—CHe 0. *0,;PO—CHy 0 (un puente j1-0x0) y el grupo carboxilo de un resto de Glu. Ademas, cada Fe(III) esta ligado también pot dos tomos de O carboxilicos de Asp o de Glu, un tomo N, de His y una molécula de agua. Los dos centros binucleares Fe del dimero estan separados 25 A. Estudios espectroscopicos recientes indican que el radical tirosilo del enzima es un radical fenoxi (-O), y no un radical protonado como se propuso previa- mente (Figura 26-11). La estructura de rayos-X indica que el radical tirosilo esta a 5 A del tomo de Fe mas cercano y esta enterrado 10 A por debajo de la super- ficie de la proteina, donde esta lejos del contacto con el disolvente y con cualquier cadena lateral oxidante. Por lo tanto, el radical tirosilo no puede abstraer directamente un atomo de hidrogeno del sustrato (Fi- gura 26-12). En lugar de ello, probablemente partici- pa en un proceso de transferencia de electrones de largo alcance que también incluiria el centro de Fe. La tiorredoxina y la glutarredoxina son agentes reductores fisiolégicos de la ribonucledtido reductasa El tiltimo paso del ciclo catalitico de ta ribonuclestido reductasa es la reduccién del enlace disulfuro recién formado en el enzima para regenerar su par sulfhidriloCepitule 26. Metabolismo de nucestides 803 © 0 eae “oF 0-F-0- 0 cos O-F 0B o oO BOR: Figura 26- Mecanismo enzimstico de la ribonuctedtdo reductase, '0n sportados por la formacion de un enlace dsulturo a reacclon tone lugar a través de un proceso meciado en al ena. [Sogn Stub, JA. Ato. y Krontaky, T, or un radical libre, en el que los equvalertes de euccion J Bal Ghom. 258; 1680 (1065) me © Estructura de rayos-x de la tiorredaxina de E. cal en su Soaarase Sanam eee Siocneutae cree ee ane eee aa amie leer enas a oeB04 Secon 26-4, Formacin de desoiribonucl6tidos ‘NADPH. FAD sR eT s sh Xt mes ak me “ereeoinn reduce Teredone redox-activo. Los ditioles como el ditiotreitol (Seccién 6-1B) pueden servir como agentes reductotes para este proceso in vitro, a traves de una reaccion de intercambio de disulfuro, Uno de los agentes reducto- tes fisiologicos del enzima, sin embargo, es la torre doxina, una proteina monomérica ubicua de 12 kD ue tiene un par de restos de Cys muy cercanos (hemos encontrado previamente tiorredoxina en nuestro estudio de la activacion inducida por luz en el ciclo de Calvin; Seccién 22-3B). La tiorredoxina redu- ‘ce Ia ribonuclestido reductasa oxidada mediante el, intercambio de disulfuro. 28H aN. ‘Torrens + | Rivomucestido (eves) SH 8" eductasa ; HSS, itonelesido HS~" reductasa (educa) “8 ‘Derredoxira® | + (oxidada) 8 La estructura de rayos-X de la tiorredoxina (Fig. 26- 13) revela que su grupo disulfuro redox-activo esta localizado en una protuberancia molecular, lo que hace de esta proteina el nico ejemplo conocide de un ‘enzima ‘macho’. La tiorredoxina oxidada es, a su vez, reducida por NADPH en una reaccién mediada por la favoproteina tiorredoxina reductasa. E] NADPH sir- ve, por tanto, como agente reductor terminal en la reduccion de NDPs a GNDPs mediada por la ribonu- cleotide reductasa (Fig. 26-14), ‘La existencia de un mutante viable de E.coli, des. pprovisto de tiorredoxina, indica que esta proteina no 3 la nica sustancia capaz de reducir la nbonucleoti- do reductasa oxidada in vivo, Esta observacion permi- tio el descubrimiento de la glutarredoxina, una pro teina monomérica con disulfuros de 11 kD que también puede reducir la ribonuclestido reductasa (Jos mutantes desprovistos tanto de tiorredoxi como de glutarredoxina son inviables). La glutarredo- sina oxidada se reduce, a traves de un intercambio de disulfuro, mediante el glutatiOn, un tripéptido que contiene Cys y que se reduce a su vez mediante NADPH, proceso que cataliza la flavoproteina gluta~ tion reductasa (glutation y glutation reductasa se des. criben en la Seccién 14-4). La importancia relativa de la tiorredoxina y la glutarredoxina en la reduccién de ribonucledsido difosfatos no esta establecida, Figura 26-14 Via de transteranca electénica en le Feduccién del nuclebsico ctosata (NOP), EINADPH aporta fos tequvalentes de reduecion para est proceso, a través do ia mediacon de fa torredoxina reauctasa a tlorredoxinay la rbenucleotiso reductasa, NDP. aNDP La superdxido dismutasa y 1a catalasa participan en la generacién del radical de la ribonuclestido reductasa Uno de los aspectos mas notables de la ribonucles- tido reductasa de E. coli es su capacidad de mantener indefinidamente su estado de radical altamente reac- tivo. Y sin embargo, una vez destruido el radical, por ejemplo, mediante tratamiento con hidroxiurea, el tenzima se inactiva, 2Como se genera pues el radical para empezar? El radical puede recuperarse in vitro por simple tratamiento del enzima inactivo con Fe() ¥ acido ascérbico, en presencia de O. In vitro, sin embargo, la generacion de radicales requiere cuatro proteinas y O;: 1, Una NAD(P)Hiflavina oxidorreductasa, que part cpa en la generacion de radicales de trosina y libera el ion superéxido, O; (que es también un producto minoritario del metabolismo oxidative), 2. La superéxido dismutasa (SOD), que elimina el radical superdxido altamente reactivo y, por lo tan- to, destructive: 207 +2H'—+H,0, + 0, 3. La catalasa, que completa el proceso de desintox ‘cacion del radical oxlgeno, desproporcionando el H,0, a H,0 y 0, (Seccion 1-24) 4. Una. proteina de funcion desconocida pero que puede ser sustituida, in vitro, por Fe(I). La ribonuclestido reductasa esta regulada por una red compleja de retroalimentacién La sintesis de los cuatro dNTPs, en las cantidades ‘equeridas para la sintesis de DNA, tiene lugar gracias al control por retroalimentacin. Ei mantenimiento de las proporciones intramoleculares adecuadas de los. NTPs es esencial para un crecimiento normal. Ade- ‘mis, una perturbacion de este equilbri resulta mutagé- nica, ya que la probabilidad de que un dNTP dado se incorpore por error en la hebra de DNA creciente au- rmenta con su concentracion relativa a la de otros aNTPs Las actividades de las ribonucleétido reductasas, tanto de E, coli como de mamiferos, responden de forma notable a los niveles de diferentes nucle6tidos presentes, La subunidad B, de la ribonucleotido re- ductasa de E. coli tiene dos sitios alostéricos indepen- dientes que controlan la actividad catalitica del enzi- rma y su especificidad de sustrato (Fig, 26-11):H@}-@-- scor —- ace ONA oe Gor @}-@}-@- acor — bel ADP +@|L-——@ cade —» ante Seas alee Figura 26-15 Red de control para la regulacién de la biosintesis de desoxirribonuciestidos mediante las ribonucledtido reductasas de E. coli y de mamiferos. Los circulos y las. flechas verdes representan activacién; los octagonos y las flechas rojos indican inhibicién. [Segun Thelender, L. y Reichard, P., Annu. Rev. Biochem. 48, 153 (1978)] 1, La union de ATP al sitio alostérico que controla la actividad global del enzima (sitio de actividad) activa el enzima frente a los sustratos, determina- dos por el efector unido al sitio alostérico que controla la especificidad del enzima (sitio de espe- cificidad). La union de dATP al sitio de actividad inhibe la actividad de la enzima frente a todos los sustratos. 2. En el sitio de especificidad de sustrato, la union de ATP o dATP estimula la reduccion de CDP y UDP, la union de dTTP estimula la reduccion de GDP pero inhibe la reduccion de CDP y UDP, y la union de dGTP estimula la reduccién de ADP pero inhi- be la reduccién de CDP, UDP y GDP. En ausencia de cualquiera de estos efectores, la ribo: nuclestido reductasa es inactiva Estos efectos alostéricos sugieren la siguiente se- cuencia de sucesos en la reduccion de ribonucledtidos (Fig. 26-15). En presencia de una mezcla de NDPs, la ribonucledtido reductasa comienza la produccién de NDP mediante la reducci6n, estimulada por ATP, de CDP y UDP. El dUDP resultante se convierte en ATTP, como se describe en la Seccién 26-4B, el cual inhibe la continuacion de la reduccién del CDP y UDP, pero estimula la produccién de dGDP. Este producto, después de su fosfarilacion a dGTP, inhibe Ia reduccion de CDP, UDP y GDP, pero estimula la produccién de dADP y, por tanto, de dATP. A medi- da que se acumula el dATP, se une al sitio activo, inhibiendo por tanto la reducci6n de todos los NDP, a no ser que el nivel de ATP sea lo suficientemente elevado como para desplazar el dATP. El equilibrio intracelular adecuado entre dCTP y dTTP no esta regulado por la ribonucleotido reductasa, sino que se mantiene mediante la desoxicitidina desaminasa, Capitulo 26. Metabolismo de nucleétidos 805 que rinde dUMP, el precursor de dTTP. Este enzima se activa por dCTP y se inhibe por dTTP. Aunque este esquema es sin duda una descripcién muy sim plificada de un proceso dinamico, explica la conocida capacidad de las células para sintetizar los desoxinu- cledtidos en las cantidades requeridas de cada uno de ellos para la sintesis del DNA. Los dNTPs se producen por fosforilacion de dNDPs EI paso final en la produccidn de todos los dNTPs es ta fosforitacién de los correspondientes dNDPs: dNDP + ATP == dNTP + ADP Esta reaccion esta catalizada por la nucledsido difos- fato quinasa, el mismo enzima que fosforila los NDPs (Seccién 26-2B). Como antes, la reaccién se escribe con el ATP como dador de fosfatos, aunque todo NTP 0 dNTP puede actuar con esta capacidad B. Origen de la timina El componente dTMP del DNA se sintetiza, como discutiremos posteriormente, por metilacién del Figura 26-16 Estructura de rayos-X de una subunidad del enzima dimérico de E. coli timidilato sintasa, complejada con 5-fluorodesoxiuridilato (FAUMP; bolas amarillas) y el anlogo no reactivo del acido folico, acido 10-propargil-5,8-dideazofdlico (bolas rojas). El esqueleto olipeptidico aparece coloreado, de modo que las helices son verdes, las hojas f son marrones y los restantes segmentos son azules. [Por cortesia de David Matthews, ‘Agouron Pharmaceuticals.806 Seccidm 26-4, Formac de desoiribonuclstidos dUMP. El dUMP se genera a través de la hidrélisis del UTP por la dUTP difosfohidrolasa: dUTP + H,0 = dUMP + PP, La raz6n aparente de este proceso derrochador de cenergia (una vez se forma el dTMP, se fosforila de nuevo a dTTP) es que las células deben minimizar su ‘oncentracién de dUTP para impedir la incorporacion de uracilo a su DNA. Ello es debido, como discutimos fen la Seccion 31-5B, a que el sistema enzimatico que sintetiza DNA a partir de los dNTPs no discrimina ceficazmente entre dUTP y dTTP. ‘Timidilato sintasa EL TMP se sintetiza a partir de dUMP mediante la timidilato sintasa (19) con N'.N".metilentetrahidrofo- lato (N?,N®-metilén-THE) como dador de metilos: g H 5 i A wm tee An + AAs ae. He Ia ' enter aRib—® bo a pane ce e al i Co ee ee (Los cofactores del THF se discuten en la Seccion 24-4D,) Obsérvese que el grupo metileno transferido (en el cual, el carbono tiene el estado de oxidacion del formaldehido) se reduce a un grupo metilo (en el que tiene el estado de oxidacién del metanol) a expensas de la oxidacién del cofactor THF a dihidrofolato (HP. El mecanismo catalitic de la timidilato sintasa, una proteina dimérica de 70 kD, muy conservada (Fig, 26-16), se ha investigado extensamente. Tras la incu- bacion del enzima con N5N®metilén-6-[HITHF y UMP, el 7H se transfiere cuantitativamente al grupo ‘metilo’ del producto TMP. Cuando el sustrato es 5-PHIUMP, sin embargo, ei Hse libera al disolven- te acuoso, Esta informacién, junto con el conocimien- to de que el C(6) del uracilo que ocupa la posicion B de una cetona a,B-insaturada, es susceptible al ataque ‘nucleofilico, permitié a Daniel Santi proponer el si Buiente esquema mecanistico (Fig. 26-17). 41. Un grupo nucleofilico del enzima,_identificado como el grupo sulfhidrilo de la Cys 198, ataca la posicion C(6) del dUMP, formando un aducto co- valente. 1 C(6) del ion enolato resultante ataca el grupo CH, del cation iminio, en equilibrio con el 1N®, N"-metilén-THE, formando un complejo cova- lente temnario enzima-dUMP-THF. 43. Una base del enzima abstrae el protéin acidico de la pposicion C(5) del dUMP, formando un grupo meti- Teno exociclico y eliminando el cofactor THF. Se- guidamente, el proton abstraido se intercambia con fl disolvente, 4. El cambio redox tiene lugar a través de la migra- ion del stomo de H del N(6) del THF, como ion hidruro, hacia el grupo metileno exociclico, convir tiendolo en un grupo metilo (explicando, asi, la transferencia de *H descrita anteriormente) y tin- diendo DHF. Esta reduccion favorece el despla: ‘iento del grupo sulfhidrlo de la Cys del interme- dio, de modo que se libere el producto, ATMP, y se reconstituya el enzima active. 2 EL 5-fluorodesoxiuridilato es un potente agente antitumoral 'El mecanismo anterior esté apoyado por la observa- cién de que el 5-fluorodesoxiuridilato (FAUMP) on ‘SFluorodesoxiuridiiato (FAUMP) ‘es un inhibidor ireversible de la timidilato sintasa Esta sustancia, al igual que el UMP, se une al enzi- ma (un atomo de F es aproximadamente del mismo tamafio que un atomo de H) y experimenta los prime- ros dos pasos de la reaccidn enzimatica normal. En el Paso 3, sin embargo, el enzima no puede abstraer el ‘tomo de F como F* (recordar que el Fes el elemento més electronegativo), de modo que el enzima resulta ‘casi_permanentemente -inmovilizado, en forma de complejo temario enzima-FAUMP-THF. Los inhibi- dores enziméticos como el FAUMP, que inactivan un fenzima sélo después de experimentar una parte 0 toda la reaccidn catalitica normal, se denominan inhi- bidores basados en el mecanismo (de otra forma, ‘sustratos suicidas, porque hacen que el enzima “se Suicide’), Los inhibidores basados en el mecanismo, al estar divigidos a determinados enzimas, se encuentranFigura 26-17 Mecanismo cataltico de a tmisiato sigtasa. El grupo metio 10 aporta el NN" metiontetranirotoito cue, ‘mismo tempo, se oxida a ahicrot entre los inactivadores enzimaticos ms potentes, especi- {ficos y, por tanto, mas tiles ‘Se ha determinado la estructura de rayos-X de la timidilato sintasa de E. coli, formando un complejo con el N°,N"*-metilentetrahidrofolato (N?.N-metilen- THR) y con el inhibidor basado en el mecanismo 5-fluorodesoxiuridilato (FAUMP). La estructura revela que el enlace C(6)-N(10) del cofactor THF se ha Capitulo 26, Metabolismo de nucledvides 807 ri HN pa Ce WN transferido del N(10) al C(S) del FAUMP y que un resto de Cys conservado forma un enlace $=C con el C(6) del FAUMP. Esta estructura de rayos-X se cree, por tanto, que es un anlogo estructural estable del Intermedio de reaccién propuesto de la TS, que se representa después del Paso 2 en la Figura 26-17. El estudio de la estructura indica cémo la TS podria activar al UMP y al N5,N'"-metilén-THF para formarB08. Secién 26-5. Degradacion de nucledtidos el intermedio y sugiere un mecanismo estereospeci- fico para la descomposicion de este intermedio a sus productos. La posicion estratégica de la timidilato sintasa en la biosintesis del DNA ha conducido al uso clinico del FAUMP, como agente antitumoral, Las células que proliferan rpidamente, como las células cancerosas, Tequieren un aporte constante de dTMP para poder sobrevivir y, por lo tanto, mueren al ser tratadas con FAUMP. En cambio, la mayoria de las eélulas norma- Jes de mamiferos, que cuando crecen lo hacen lenta- ‘mente, requieren mucho menos dTMP, de modo que son relativamente insensibles al FAUMP (algunas ex- cepciones son las células de la médula osea, que ‘comprenden los tejidos hematopoyéticos y la mayor parte del sistema inmunologico, la mucosa intestinal ¥ los foliculos del pelo). EI S-fluorouracilo y la 5 ‘Aluorodesoxiuridina son también agentes antitumo- rales efectivos, ya que se convierten en FAUMP a través de las reacciones de recuperacion. EL Wt-metlen-THE e regenera através de dos La reaccién de la timidilato sintasa es bioguimicamen- te nica, en el sentido de que oxida el THF a DHE; ninguna otra reaccin enzimatica que emplee el cofactor THF altera el estado neto de oxidacign del coenzima, EL producto DHF de la reaccion de la timiilato sintasa se recicla al cofactor NS,N-metilén-THF del enzima, através de dos reacciones secuenciales (Fig. 26-18): 1. El DHF se reduce a THF mediante NADPH catali- zada por dihidrofolato reductasa (DHFR; Seccién 24-40), eum. amp} arp nen THP uF NADPH HY sos A 2 1 an fat, cH, C00 an seco \~ nur vert ee Arninoptering vertons wart Tine fit,—cx~ coo G08 Figura 26-18 EINE.N""-moilentetranidrofolato, ue se convierte @ OHF ‘eciante ia reaccion dela tmiciato sntasa, se regenera medlante las aclones secuorcials oe (1) dicrofoato ‘eductasa y (2) serina Pigroximetl transferaea, La timdlato Sintasa es Inhibida por FAUMP, miontras que ia [ee : ‘ane smaeos eho, wy SH {0% andres 1G oy {ress fe ce cartagionn tic ext nes mass Fou 2628 Degraccion del Acido urco @ amonlaco. 3 proceso termina ‘on ditintos puntos de lava en las especies naieadas, ‘Slondo excretaco el procucto nitrogenado resultant. temilemente dolorosa, de ataque repentino, en las Srculadones, me fecuentemente en el dedo gordo et pe (Pig, 26-25), causada por la depescon de ‘ists ca inslubles de uratosédico. El urato sod ool dcido drico pueden precipitar tambien en los fikones.y urétees en forma de piedras,causando Tesionesfenales y obsrucelon del acto ucinaio. La aque afecta ~ 3 de cada 1000 personas, en su ‘ayor parte varones, 4 ha azoGado tradicionalmen- te aungue equvocadamente, aun exceao de comidaPwr 26:25, iyo t too Janes toy Yale Une Medical Historical Library.) eae ee y bebida, El origen probable de esta asociacion esque Un'Ssios pasado Cuando el vino se contamina menudo con plomo durante su fabrcacon slmace- Tamiento, el sbuso en la bebua provocas un enve- emuneniacrnico por plomo que entre ors cous, Ginmunuia I capacdad del 0h para excretar ido Ta casa mas fecuente de goa esa dfcutad ena excretion de iedo inco aunque, normale; por tras razones dsinas al envenenamiento or Po: tno), La gos puede resulta tambien de un gran tmevo de ineficencar metablicas, muchas de Tas Chales no est ben craceizadan, Una de causes quest comprencen ben ela deficencia de HGPRT Cindrome de Leach Nyhan en cass graves), que con- dhce una evcelva prodaccion dado tio a traves dels acumulacin de PRPD (Seen 26:20) tn produccion de tedo urco en excso puede set Ublde tambien aa defend de glacos-€fosttasa (Cnfermedad del alacenamiento del glocogeno de Non Gerke, Secon 17-4) a mayor disponible de Juco fostatoestinula la vis dela penton fox Eo (ection 21-9, umentando la velocidad de po- ducaon de boss 5-fonat y, por consghient, i de PREP que, asa vez, estas Bloninesis de pur a gota puede tratarse por administracon del inhi- bidor Ge lazantina oxidase alopurinl un anlogo de In iporanina con las postones NUM) 7 C1) ner -cambiadas a ng 1 Be Aloparinot Copitule 26. Metabolismo de muclesidos 813 La xantina oxidasa hidroxila el alopurinel, como lo ‘hace con Ia hipoxantina, rindiendo aloxantina, LY cr Aloxantina la cual permanece fuertemente unida a la forma redu- ida del enzima, inactivandola. Por consiguiente, el alopurinol aliva los sintomas de gota disminuyendo la velocidad de produccion de acido rico, mientras aumenta los niveles de hipoxantina y xantina, mas solubles, Mientras que el alopurinol controla los si- tomas de gota del sindrome de Lesch-Nyhan, no tiene efecto alguno sobre los sintomas neuro del sindrome. acai C. Catabolismo de pirimidinas Las células animales degradan los nuclestidos de pirimidina a sus bases componentes (Fig. 26-26, arri- fa), Estas reacciones, como las de los nuclestidos purinicos, se llevan a cabo a través de desfosforla- cin, desaminacion y rotura del enlace glucosidico. EL turacilo y la timina resultantes se destruyen en el hhigado mediante reduccion (Fig. 26-26, medio), y no mediante oxidacidn, como ocurre en el catabolismo de purinas. Los productos finales del catabolismo de las pirimidinas, f-alanina y -aminoisobutirato, son aminoicidos y se metabolizan como tales, Se convier- ten, a través de reacciones de transaminacion y act vacién, a malonil-CoA y metilmalonil-CoA (Fig. 26- 26, abajo izquierda), para su utlizacion posterior (Sec- cones 23-4 y 2E), 6. BIOSINTESIS DE COENZIMAS NUCLEOTIDICOS En esta seccién, explicaremos en términos genera- les la obtencion, en animales, de los coenzimas nu- cleotidicos NAD" y NADP*, FMN y FAD, y coenzima ‘A. a partir de las vitaminas precursoras, Dichas vita- rminas se sintetizan de novo en plantas y microorga- rismos solamente ‘A. Coenzimas de nicotinamida La nicotinamida de los coenzimas de nicotinamida (NAD* y NADP?) en el hombre deriva de la nicotina- ‘mida de la dieta, del Acido nicotinico o del aminosci- do esencialtriptofano (Fig. 26-27). La nicotinato fos- forribosil transferasa, presente en muchos tejidos de los mamiferos, cataliza la formacion de nicotinato mononucledtido a partir de nicotinato y PRP. Este514 Seccén 26-6, Bisintess de coenzimas nucleotidicos i ° i, ne 7. Ri-® (anw—® oo Capen no Ho oe oe . Citiging —22580N853_, Uridina (Desoxitimidina) Loe neem oe — Ayes (ARibosat Dinidrourscilo yor ‘Uracilo (Timina) eee Dihidrouractlo et eee NADPH+ H® NADY fname ° oe ok ny ee os Pes J é : Ee x Seminidehide malénico -Aminogransferssa BUreldepropionato es eee CoA + NAD* e-Cetoglutarato aon? go brew ae es ee (etiimatonitCoa) Figura 28-28 Vals prinepaies del catabotimo de pirmicinas on los animales Los proguetos aminodcidos de estas reaccones so incorporan a otfos procesos metaboicos. EI UMP y el GTMP son degradados por los ‘mismos enzimas; ava de degradacion del dTMP se indica intermedio puede ser sintetizado también a partir de quinolinato, un producto de degradacion del tripto- fano (Seccion 24-3G), en una reaccién mediada por la quinolinato fosforribosil transferasa, presente prin- ‘palmente en higado y rin. Una dieta pobre, sin ‘embargo, puede provocar pelagra (deficiencia de éci- do nicotinico; Seccién 12-3), ya que, en estas condi- ones, el triptofano sera utilizado casi por completo aréntosis. ppara la biosintesis de proteinas. El nicotinato mono- ‘nucleotido es unido a través de un grupo pirofosfato a tun resto de AMP por accion de la NAD* pirofosfori- asa, indiendo nicotinato adenina dinucledtido (de- samido NAD‘). Finalmente, la NAD" sintetasa con- Vierte este intermedio en NAD", mediante una reac- cién de transamidacion en la que la glutamina es el dador de NH;.Capitulo 26. Metabolismo de nucletids 815 ; Si Figura 26-27 Vise dela osintesis de NAD* y NADP*, a partir de sus vitaminas precursaras, mootnato ¥ nicotinamida, y part del producto de ‘egradacién dal tnpttane, aunotinat. Netinte Nicotinamide prep —J Nieotinato prep —| Nlosunanida ‘oor foxtornbest PP, =| rastran ° i 4 Aye Quinotnato Ky : Ke feted! ~t0,p—o—crly 0 “WN ~*0,P-0- cH 9, ED uy Na ea PREP P+ CO, aioa are Quinotinato Nicotinato mononuctestido _Nicotinamida mononacletido (NMN) we nave ate xap* ‘pp, «- Pitoostoriiasa P<] Pifetorase ATP + Glutamine + #0. SAD" sna oP + cits Lasse ening boa ~@-@=ibowa Nictinmidaadeninadinucletid (NAD*) ane NAD" quinn sor vt, ° é rs a ee g an -o- bo % mobo o-f-0-crts 0-f-o- ery o 0 kee es yi Nr on OW ‘Nicotinamida ad(816. Seccén 26-6, Bisiness de coenzimas nucleotidicos gow H—¢—on -¢—on —¢—on ° Riboftavine are Flavogulnasa ape iso POF H-¢—on H-E—ont aon Gi t ND "xr ana AC xy 0 Flavina mononuclestido (PMN) FAD Pirofostoriase PP, on on Flavina adenina dinuclestido (FAD) Figura 26-28 Biosinesis de FMN y FAD a partir deta vtaming precursora ribolavina EI NAD* puede también sintetizarse a partir de nicotinamida: Esta vitamina se convierte en NMN, mediante la nicotinamida fosforribosil transferasa, tun enzima ampliamente distribuido, distinto de la nicotinato.fosforribosil transferasa. Sin embargo, 2 partir de NMN y PRPP, el NAD* se sintetiza por faccién de la NAD* pirofosforilasa, el mismo enzima {que sintetiza el nicotinato adenina dinucleotide. EL NADP" se forma a través de la fosforilacion det ‘grupo C(2")-OH del resto de adenosina del NAD", por medio de la NAD* quinasa. B. Coenzimas de flavina El FAD se sintetiza a partir de riboflavina en una vvia de dos reacciones (Fig, 26-28). Primero, el grupo OH de la cadena lateral de ribitl de la riboflavina se fosforila mediante la flavoquinasa, rindiendo fla- vina mononuicestido (FMN; no un verdadero nucle6- tido ya que el resto de nit no es un verdadero azicar). A continuacion, se puede formar el FAD, acoplando el FMN y el AMP mediante un grupo plrofosfato en una reaccién catalizada por la FAD pirofosforilasa, Estos dos enzimas estin ampliamen- te distribuidos en la naturaleza. C. Coenzima A El coenzima A se sintetiza en las células de los _mamiferos segin la via dibujada en el diagrama de la Fig. 26-29, El pantotenato, una vitamina esencial, se {osforila mediante la pantotenato quinasa y se aco- pla entonces a la cisteina, el destino final del CoA, ‘mediante la fosfopantotenoilcisteina sintetasa. Tras tuna descarboxilacion por accién de la fosfopantote- noilcisteina descarboxilasa, a 4/-fosfopanteteina resultante se acopla al AMP a través de un grupo Pirofosfato mediante la desfosfo-CoA pirofosforila- 4 y, despues, se fosforila en su grupo 3'-OH de la adenosina por accién de la desfosfo-CoA quinasa para formar CoA. Estas dos dltimas actividades enzi- aticas tienen lugar en una misma proteinaCCaptulo 26. Metabolismo de mucestidos 817 Hye oH Ho—ctly—¢—Gn1—0—NH— 0H Cit, COO™ HC Pantotenato 7 rea in sor me oH Mop om cette coor a sae scans | repent oe nae 4*Rostopantotenoillateina Pestopantotenoisteina €0,<7) aescarboxian mg 8 i og 008 = Bs e—b——e— a rc, m ; unin 0-b-0-f- 0-4 f-O——--Oe-FN— Sten & aes Desfosfo-CoA ADP. - tote EE g obo oan Gib sare sarc Adenina CCoensima A (CoA) Figura 26-29 Blgsimtesis del coonzima A a part de pantotenato, su precursor vitaminio,18 Biierafe Resumen del capitulo Casi todas las clas sinttizan lot nucledtidos purinicos de novo a través de vias metabolicas similares. El aillo PPrinico te construye en una secuencia de reacciones con 1 patos que produce IMP. A continuacion, se sintetizan ‘AMP y GMP a partir de IMP, a través de vias separadas. ‘Lop nutcedsido difosfatosy trfosfatos se forman secuencal- mente a parti de esos productos mediante reacciones de {esforilacin. Las velocidades de sintesis de estos diversos ucletidos estan interrelacionadas a través de mecanismos. de inhibicon por retroalimentacion que controlan sus con~ fentraciones, Los nucletides purinicos pueden tambien sintetiatse & partir de purinas bres recuperadas de los procesos de degradacion de ls cides nuceices. La impor- fancia de estas reacciones de recuperacion se demuestra por ejemplo, por las raras y devastadoras consecuencias del ‘indrome de Lesch-Nyhan, Las céllas también sintetizan pisimidinas de nove pero, ‘en este proceso de sels pasos, se forma una base libre antes de convertise en el nucleétido UMP. A continuacin, el UTP se forma por fosforlacin de UMP, y el CTP se sintetiza por aminacin de UTP. La biosintesis de piimidi- nas estd tegulada por inhibicion por retroaimentacion, asi ‘om por las concentraciones de los nuclestidos purincos Los desoxinucedtides se forman por reduccion de los Mercaptopurine tras su conversion al correspondiente nuclebtido a ta- vvés de Tas reacelones de recuperacion, es un potente Inhibidor competitive del IMP en la via de biosintesis de AMP y GMP. Es, portato, un agente anticancerge fo elinicamente Util. La efectividad quimioterapeutica de la 6-mereaptopurina se ve potenciada al admiistar- 6 con alopurinol, Explicar el mecanismo de esta poten- dacion