——< Capitulo 24 METABOLISMO DE LOS AMINOACIDOS 1, Desaminacién de los aminoacidos ‘A. Transaminacién B. Desaminacién oxidativa: glutamato deshidrogenasa ©. Otros mecanismos de desaminacion 2. El ciclo de la urea ‘A. Carbamoil fostato sintetasa: adqulsicion del primer ‘tomo de nitrégeno de la urea B. Omitina transcarbamilasa C. Argininosuccinato sintetasa: adquisici6n det segundo ‘tomo de nitrégeno de la urea D. Argininosuccinasa E Arginasa F. Regulacién del ciclo de la urea 3. Degradacién metabélica de cada uno de los aminoacidos A. Los aminoacidos pueden ser glucogénicos, cetogénicos 0 ambas cosas B. La alanina, la cisteina, la glicina, la serina y la treonina se degradan a piruvato C. Laasparagina y el aspartato se degradan a oxalacetato D. La arginina, el glutamato, la glutamina, la histidina y la prolina se degradan a a-cetoglutarato E. La isoleucina, ia metionina y la valina se degradan a succinil-CoA F. La loucina y la lisina se degradan a acetoacetato y/o acetil-CoA G.EI triptétano se degrada a alanina y aceti-CoA H. La fenilalanina y la tirosina se degradan a fumarato y acetoacetato 4, Los aminodcidos como precursores biosintéticos A. Biosintesis y degradacién del grupo hemo B. Biosintesis do aminas fisiologicamente activas ©. Glutation D. Cofactores del tetrahidrofolato: e! metabolismo de las unidades C, 5. Biosintesis de los aminoacidos A. Biosintesis de los aminodcidos no esenciales B. Biosintesis de los aminodcidos esenciales jon del nitrogeno Los a-aminoacidos, ademas de su papel como unidades monoméricas de las proteinas, son metabolitos energéti- cos y precursores de muchos compuestos biolégicos im- portantes que contienen nitrogeno, tales como el hemo, aminas fisioldgicamente activas, el glutatién, los nucled- tidos y los coenzimas nucleotidicos. Los aminoacidos se clasifican en dos grupos: esenciales y no esenciales. Los mamiferos sintetizan los aminoacidos no esencia- les a partir de precursores metabolicos pero deben obtener los esenciales a partir de la dieta. El exceso de aminoacidos de la dieta ni se acumula para su uso futuro ni se excreta. Son convertidos en metabolitos intermediarios comunes tales como el piruvato, el oxalacetato y el a-cetoglutarato. En consecuencia, los726 Secci6n 24-1. Desaminacién de los aminodcidos ‘aminodcidos también son precursores de la glucosa, de los acidos grasos y de 10s cuerpos cetonicos y, por lo tanto, son combustibles metabélicos. En este capitulo consideraremos las rutas de la degradacién, sintesis y utilizacion de los aminoacidos. Empezaremos examinando las tres etapas comunes de la degradacion de los aminoacid 1. La desaminaci6n (la eliminacin del grupo ami- no), mediante la cual los grupos amino se convier- ten en amoniaco o en los grupos amino del aspar- tato. 2. La incorporacién de los atomos de nitrogeno del amoniaco y del aspartato a la urea para la excre- 3. La conversion de los esqueletos de carbono de los aminoacidos (los a-oxoacidos producidos por la desaminacién) en intermediarios metabélicos co- munes. Muchas de estas reacciones son similares a las que hemos considerados en otras vias metabélicas. Otras utilizan cofactores enzimaticos que no hemos visto previamente. Uno de nuestros objetivos al estudiar el metabolismo de los aminodcidos es entender el meca: nismo de accién de estos cofactores. Después de nuestra discusién sobre la degradacién de los aminoacidos, examinaremos las rutas mediante las cuales se utilizan los aminoacidos para la sintesis del hemo, de las aminas fisiolégicamente activas y del glutation (la sintesis de los nuclestidos y de los coen- zimas nucleotidicos es el tema del Capitulo 26). A continuacién, estudiaremos las rutas biosintéticas de los aminoacidos. El capitulo acaba con una discusion sobre la fijacion del nitrogeno, un proceso que con- vierte el N, atmosférico en amonfaco y constituye la fuente ultima del nitrogeno metabélicamente atil, . DESAMINACION DE LOS AMINOACIDOS La primera reacci6n en la degradacién de los aminoa- cidos es casi siempre la eliminacion de su grupo a-amino con el objeto de excretar el exceso de nitrogeno y degra- dar el esqueleto de carbono restante. La urea, el produc- to de excrecién de nitrogeno predominante en los mamiferos terrestres, se sintetiza a partir de amoniaco y aspartato. Estas dos tltimas sustancias son, principal- mente, derivadas del glutamato, producto, a su vez, de la mayoria de las reacciones de desaminacién. En esta seccién examinaremos las rutas mediante las cua- les los grupos a-amino se incorporan al glutamato y luego al aspartato y al amoniaco. Después, en la Seccién 24-2, discutiremos la biosintesis de la urea a partir de estos precursores. La mayoria de los aminoacidos son desaminados por transaminacién, la transferencia de un grupo amino a un a-oxoacido para producir el a-oxoacido del aminodcido original y un nuevo aminodcido, en reacciones catalizadas por aminotransferasas (tam- bien denominadas transaminasas). El principal grupo aceptor es el a-cetoglutarato, produciéndose glutama- to como nuevo aminoacido: Aminodcido + a-cetoglutarato = a-oxoacido + glutamato El grupo amino del glutamato, a su vez, es transferido al oxalacetato en una segunda reaccién de transami- nacién produciendo aspartato: Glutamato + oxalacetato = a-cetoglutarato + aspartato La transaminacién, por supuesto, no da lugar a ninguna desaminaci6n neta. La desaminacién ocurre principalmente a través de la desaminacién oxidativa del glutamato mediante la glutamato deshidrogenasa produciéndose amoniaco. La reaccion requiere NAD* © NADP* como agente oxidante y regenera el a-ce- toglutarato para ser usado en nuevas reacciones de transaminacion: Glutamato + NAD(P)* + H,0 = a-cetoglutarato + NH, + NAD(P)H Los mecanismos de la transaminacion y de la desami- naciOn oxidativa constituyen el tema de esta seccién. También consideraremos otros medios para eliminar los grupos aminos de aminoacidos especificos. A. Transaminaci6n Las reacciones de la aminotransferasa ocurren en dos etapas: 1. El grupo amino de un aminodcido es transferido al enzima, produciendo el correspondiente a-oxoaci- do y el enzima aminado. Aminoacido + enzima = ‘-oxoacido + enzima-NH, 2. El grupo amino es transferido al oxoacido aceptor (por ¢}., el a-cetoglutarato) formando el aminoaci- do producto (por ¢j., el glutamato) y regenerando el enzima. a-Cetoglutarato + enzima-NH, = enzima + glutamato Para transportar el grupo amino, las aminotransfera- sas requieren la participacién del piridoxal-5'-fosfato LP), un derivado de la piridoxina (vitamina B,; Fig. 24-1), El grupo amino se acomoda por conversion de este coenzima a piridoxamina-5’-fosfato (PMP; Fig. 24-1). El PLP se une covalentemente al enzima me- diante una uni6n por base de Schiff (imina) formadapor la condensacién de su grupo aldehido con el grupo e-amino de un resto de lisina del enzima. (CHp),— Enzima it BN ANy Esta base de Schiff, que esta conjugada al anillo piri- dinico del coenzima, es el foco de la actividad del coenzima. Esmond Snell, Alexander Braunstein y David Metz- ler demostraron que la reaccién ocurre mediante un mecanismo de bi bi ping pong cuyas dos etapas con- sisten en tres pasos cada una (Fig. 24-2): Primera etapa: conversion de un aminocido en un oxodcido 1. El grupo amino nucleofilico del aminodcido ataca al atomo de carbono del enzima-base de Schiff del PLP en una reaccién de transaminacién (trans- Schiffizacién) para formar un aminoacido-base de Schiff del PLP (aldimina) con la consecuente elimi- nacién del grupo amino de la lisina del enzima, 2. El aminoacido-base de Schiff del PLP se tautome- tiza a un a-oxoacido-base de Schiff del PMP me- diante la eliminaci6n del hidrogeno a del aminoa- cido y la protonacién del atomo C(4’) del PLP a través de la estabilizacién por resonancia de un carbanién intermediario. Esta estabilizacion por re- sonancia facta la rotura del enlace C,H. 3. El a-oxodcido-base de Schiff del PMP se hidroliza a PMP y un a-oxodcido. Segunda etapa: conversion de un a-oxoacido a un aminodcido Para completar el ciclo catalitico de la aminotrans- ferasa, el coenzima debe convertirse de PMP nueva- mente en enzima-base de Schiff del PLP. Esto implica los mismos tres pasos descritos mas arriba pero en. orden inverso. 3, El PMP reacciona con un d-oxoacido para formar tuna base de Schiff. 2 El a-oxoacido-base de Schiff del PMP se tautome- riza para formar un aminodcido-base de Schiff del PLP. El grupo €-amino de un resto de lisina ataca el aminoacido-base de Schiff del PLP en una reac- cion de transaminacion para generar el enzima- base de Schiff del PLP activo liberando el aminoa- cido recientemente formado. Capitulo 24. Metabolismo de los aminodcidos 727 ‘ on WE? Hye ~top—o- nd on no-no A om (ad | kad 2 Won, 87 cs nom i Piridoxal Piridoxin tostate (PLE) (Vitamina By) eh ~o,p—o-Hc_ on I N7~cH, H Piridoxamina-S'- fostato (PMP) Figura 24-1 Los coenzimas piridoxal-5'-fostato (PLP) y pitidoxamina-5'-fosfato (PMP) son derivados de la piridoxina (vitamina Bg). La estequiometria general de la reaccién es, pot lo tanto: Aminoacido, + a-oxoacido, —= d-oxoacido, + aminoacido, Examinando la estructura del aminoécido-base de Schiff del PLP (Fig. 24-2, Paso 1) se ve por qué este sistema es llamado “el deleite del empuje de electro: nes". La rotura de cualquiera de los tres enlaces (indi. cados como a, b y c) del dtomo de C, del aminoécido produce un carbanién C, estabilizedo por resonancia ‘cuyos electrones se desplazan hasta el dtomo de nitroge- no piridinico protonado del coenzima; es decir, el PLP funciona como un sumidero de electrones. Para las reac- ciones de transaminacion, esta capacidad de quitar electrones facilita la eliminacién del protén a (la rotu- ra del enlace a) en la tautomerizacion de la base de Schiff. Las reacciones dependientes del PLP que im- plican la rotura del enlace b (la descarboxilacin de aminodcidos) y el debilitamiento del enlace c se dis- cuten en las secciones 24-4B y 24-3B y G, respectiva- mente. Las aminotransferasas difieren en su especificidad por los aminoacidos que hacen de sustrato en la primera etapa de la reaccion de transaminacién, pro- duciendo, por lo tanto, diferentes a-oxodcidos como productos. La mayoria de las aminotransferasas, sin embargo, aceptan solo un a-cetoglutarato o (en me~ nor grado) un oxalacetato como el a-oxoacido sustra- to de la segunda etapa de la reaccién, produciendo, por lo tanto, glutamato o aspartato como tinicos ami noacidos. Los grupos amino de la mayoria de los ami nodcidos son dirigidos, en consecuencia, a la formacién de glutamato 0 aspartato, que son a su vez reconvertidos728 Seccién 24-1. Desaminacién de los aminodcidos 108 1 y 1": Transiminactén: i R—G5- 600", Mt, @Aminodeido —_-_-Enzima-base de Schiff del PLP Pasos 2 y 2': Tautomerizacién: Cetimina | Pasos 3 y 3': Hidrélisis: H Carbinolamina Figura 24-2 Mecanismo de la transaminacién catalizado por un enzima ependiente del PLP. La primera etapa de la reaccién, en la que el grupo a-amino de un aminodcido es transferido al PLP produciendo un a-oxoacido y PMP, consiste en tres pasos: (1) transiminacton, (2) tautomerizacién y (3) Intermediario geminal Aminoseldo-base de Schift aiaminico del PLP (aldimina) \ Lys— Enzima —BH* Lys — Enzima —BH* Boe COO, Ro-Ger coor e oa H-C<+"H Sa CC NZ cH, i I Intermediario estabilizado por resonancia Lys— Enzima —B: R—C;-COO™ eOxoscido Enzima piridoxamina fosfato (PMP) hidrdlisis. La segunda etapa de la reaccién, en la cual el {grupo amino del PMP se transfiere a diferentes ‘a-oxoAcidos para producir un nuevo aminoacido y PLP, es, esencialmente, el proceso inverso de la primera etapa: los. Pasos 3°, 2' y 1" son, respectivamente, los inversos de los Pasos 3, 2 y 1entre si por Ia accién de la glutamato-aspartato ami- notransferasa: Glutamato + oxalacetato = a-cetoglutarato + aspartato La desaminacién oxidativa del glutamato (Seccion 24- 1B) produce amonfaco y regenera el a-cetoglutarato para nuevas reacciones de transaminacion. El amo- niaco y el aspartato son los dos dadores de grupos amino en la sintesis de la urea. El ciclo de la glucosa-alanina transporta nitrégeno al higado Una excepcién importante a esta situacién lo cons- tituyen un grupo de aminotransferasas musculares que aceptan al piruvato como su a-oxoacido sustrato. El aminodcido producto, la alanina, es liberado al torrente sanguineo y transportado al higado donde suffe transaminacion para producir piruvato para ser utilizado en la gluconeogénesis (Seccién 21-1A). La glucosa resultante vuelve al masculo donde sera de- gradada glucoliticamente a piruvato. Este es el ciclo de Ia glucosa-alanina. El grupo amino termina en amonfaco 0 aspartato para la biosintesis de la urea, Evidentemente, el ciclo de la glucosa-alanina funcio- na para transportar nitrégeno del mésculo al higado. B. Desaminacion oxidativa: glutamato deshidrogenasa El glutamato es desaminado oxidativamente en la mitocondria por la glutamato deshidrogenasa, el tini- co enzima conocido que, por lo menos en algunos organismos, puede aceptar tanto NAD* como NADP* como su coenzima rédox. Se piensa que la oxidacién ocurre debido a la transferencia de un ion hidruro del C, del glutamato al NAD(P)*, formando asi un c-iminoglutarato, que es hidrolizado a a-cetoglutarato y amoniaco (Fig. 24-3). La glutamato deshidrogenasa es inhibida por el GTP y activada por el ADP in vitro sugiriendo que estos nuclestidos regulan al enzima in vivo. Sin em- argo, estudios de las concentraciones de los sustratos y productos celulares indican que el enzima funciona in vivo cerca del equilibrio (AG ~ 0). Es poco proba- ble que cambios en la actividad de la glutamato des- hidrogenasa debidos a interacciones alostéricas pro- duzcan cambios en el flujo. Lo mas probable es que el, flujo esté controlado por las concentraciones de sus- tratos y productos (Seccién 16-4A). La posicién de equilibrio favorece la formacién de glutamato sobre la formaci6n de amoniaco (AG* ~ 30 kj - mol" para Ia reaccién tal como esta escrita en la Fig. 24-3). Dado que las concentraciones elevadas de amonfaco son toxicas, la posicién de equilibrio es fisiolégicamente importante; ayuda a mantener bajas las concentracio- nes de amoniaco. El amoniaco producido se convierte en urea (Seccién 24-2), Capitulo 24. Metabolismo de los aminodcidos 729 Nay “000—cH,—cHis—C—COo™ + Nap H Glutamate ‘00C—CH,—CH,— re NAD@)H + HY ‘Iminoglutarato i 9 ~, i '00C—CH,—CH,—C—COO™ + NHT a-Cetoglutarato Figura 24-3 La oxidacién del glutamato por parte de la glutamato a-cetodcido + NH, + FADH, FADH, -> FAD + H,0; La D-aminodcido oxidasa se encuentra principalmen- te en el rifién. Su funcién es enigmatica dado que a los D-aminoacidos se los asocia, mayoritariamente, con las paredes bacterianas (Seccién 10-38). Sélo unos pocos aminodcidos, tales como la serina y la histidina, son desaminados no oxidativamente (Sec- ciones 24-3B y D). 2, EL CICLO DE LA UREA Los organismos vivos excretan el exceso de nitroge- no resultante de la degradacion metabélica de los, aminodcidos mediante una de tres rutas. Muchos ani- males acuaticos simplemente excretan amoniaco. Sin embargo, donde el agua es menos abundante, han evolucionado procesos para convertir el amoniaco en productos de deshecho menos toxicos que, por lo tanto, requieren menos agua para la excrecion. Uno de estos productos es la urea, que es excretada por la mayoria de los vertebrados terrestres; otro es el 4cido730 Seccidn 24-2, El ciclo de la urea larico, que es excretado por las aves y los reptiles te- rrestres, z H iat N NH HaN—C—NH, ye I eo o Ny Woon ‘Amoniaco Urea Keido sirico Seguin esto, los organismos se clasifican como amo- notélicos (excretan amoniaco), ureotélicos (excretan urea) 0 uricotélicos (excretan acido tirico). Algunos animales pueden pasar del amonotelismo al ureotelis- ‘mo 0 uricotelismo si se les restringe el suministro de agua. Aqui centraremos nuestra atencién en la forma~ ‘ion de urea. La biosintesis de Acido trico se discutira fen !a Seccién 26-5A. La urea se sintetiza en el higado por los enzimas del ciclo de la urea. Luego se secreta a la sangre y es captada por los rifiones para excretarla en la orina. El ciclo de la urea fue elucidado en lineas generales en 1932 por Hans Krebs y Kurt Henseleit (fue el primer ciclo metabélico conocido; Krebs no elucidé el ciclo del Acido citrico hasta 1937). Las reacciones particula~ res fueron descritas en detalle mas tarde por Sarah Ratner y Philip Cohen. La reaccién global del ciclo de la urea es: fee NH + 00; + “00c—cit,—CH—Coo™ Aspartate SAT? ° 2ADP + 22; + AMP + FP, W H,N——Nn, + “000—cl=CH—COo™ Urea Femarate Por lo tanto, los dos atomos de nitrégeno de la urea provienen del amoniaco y del aspartato mientras que Jos atomos de carbono vienen del HCO}. El ciclo de la urea comprende cinco reacciones enziméticas, dos de las cuales son mitocondriales y tres citosélicas (Fig. 24-4). En esta seccion examinaremos los mecanismos de estas reacciones y su regulaci6n. A. Carbamoil fosfato sintetasa: adquisicién del primer atomo de nitrogeno de la urea La carbamoil fosfato sintetasa (CPS) no es técnica- mente un miembro del ciclo de la urea. Cataliza la condensacién y la activacion del NH y del HCO; para formar el carbamoil fosfato, el primero de los, dos sustratos del ciclo que contiene nitrégeno, con la consecuente hidrdlisis de dos ATPs. Los eucariotas tienen dos formas de CPS: 1. La CPS I mitocondrial utiliza amoniaco como da- dor de nitrogeno y participa en la biosintesis de la urea. 2. La CPS I citosélica utiliza glutamato como dador de nitrogeno y esta involucrada en la biosintesis de la pirimidina (Seccién 26-3A). Se piensa que la reaccién catalizada por CPS I incluye tres pasos (Fig. 24-5): 1. La activacion del HCO} por ATP para formar car- bonilo fosfato y ADP. 2. El ataque del amoniaco sobre el carbonilo fosfato, desplazando el fosfato para formar carbamato y P,. 3. La fosforilacion del carbamato por el segundo ATP para formar el carbamoil fosfato y ADP. La reaccion es esencialmente irreversible y es el paso limitante del ciclo de la urea. La CPS I esta sujeta a activacion alostérica por el N-acetilglutama- to como se discutiré en la Seccion 24-2F. B. Ornitina transcarbamilasa La ornitina transcarbamilasa transfiere el grupo carbamoil del carbamoil fosfato a a ornitina, pro- duciendo citrulina (Fig. 24-4, Reaccion 2; notese que estos dos compuestos son d-aminoécidos ‘no estan- dar’ en el sentido de que no forman parte de las proteinas). La reaccion tiene lugar en la mitocondria por lo que la ornitina, que se produce en el citosol, debe entrar en la mitocondria a través de un sistema de transporte especifico. Igualmente, dado que el res- to del ciclo de la urea ocurre en el citosol, la citrulina debe ser exportada de la mitocondria, C. Argininosuccinato sintetasa: adquisicién del segundo 4tomo de nitrogeno de la urea El segundo atomo de nitrogeno de la urea es intro- ducido en la tercera reaccién del ciclo de la urea cuando el grupo ureido de la citrulina se condensa con el grupo amino de un aspartato por accién de la argininosuccinato sintetasa (Fig. 24-6). El atomo de oxigeno del grupo ureido se activa a través de la formacién de un intermediario citrulil-AMP, que es Tuego desplazado por el grupo amino del aspartato. Experimentos utilizando citrulina marcada con "0 (“en la Fig. 24-6) proporcionan evidencias a favor de la existencia del intermediario citrulil-AMP. El 4tomo marcado fue aislado del AMP producido por la reac- ion, demostrando que en algun paso de la reaccién el AMP y la citrulina estan unidos covalentemente a través del stomo de oxigeno del grupo ureido. D. Argininosuccinasa Con la formacién del argininosuccinato, se han reunidos todos los componentes de la molécula de urea. Sin embargo el grupo amino proveniente del aspartato todavia esta unido al esqueleto de carbonoMitocondria Capitulo 24. Metabolismo de los aminodcidos 731 1 1 . 2ATP + HOOT + NH,—* 1, \—C—Opo} +2apP +P, Carbamoil fosfato z | Ornitina, 2 nu} Cieratina (Gtias Hogan 00" hae cierotina by, Ornitina Ciclo de ATP at—iu, ° laures 3 1 boo- HN—C— Nu, AMP +P, ee tree |, coo" HA 0 Arginine: (1, “ ‘Arginina succinate | if i Wg—n—¢ aan, km ry ¢ coo" MH NH Hae (Gide coo" He—Nuy H-—NHE A Citosot coo" coo" ey i 00" Famarato Figura 24-8 El ciclo de la urea tiene lugar parcialmente en la mitocondria y parcialmente en el citosol, incluyendo e! transporte de la ornitina y de la citruina a través de la membrana mitocondrial mediante sistemas de transporte del aspartato. Esta situacién es remediada por la eli- minacion, catalizada por la argininosuccinasa, de la arginina del esqueleto de carbono del aspartato for- mando fumarato (Fig. 24-4, Reaccion 4), La arginina es el precursor inmediato de la urea. Nétese que el ciclo de la urea y el ciclo del acido citrico estan ligados por la producci6n del fumarato en la reaccién de la argininosuccinasa y la transaminacién del oxalacetato a aspartato, que es utilizado en la reaccion de la argininosuccinato sintetasa (Fig. 24-7). E. Arginasa La quinta y altima reaccién del ciclo de la urea es la hidrélisis de la arginina catalizada por la arginasa para producir urea y regenerar la ornitina (Fig. 24-4) especiticos. Cinco enzimas participan en el ciclo de la trea: (1) carbamoll fosfato sintetasa, (2) ornitin transcarbamilasa, (3) argininosuccinato sintetasa, (8) argininosuccinasa y (6) arginasa. La omnitina es devuelta a la mitocondria para otra vuelta del ciclo, El ciclo de la urea convierte de ese modo dos grupos amino, uno del amoniaco y otro del aspartato, y un atomo de carbono del HCO;, en la urea, producto de excrecién relativamente no t6xi con el coste de cuatro enlaces fosfato de ‘alta energi (tres ATPs hidrolizados a dos ADPs, dos P,, AMP y PP, seguido de la rapida hidrolisis del PP), Este coste energético se recupera con creces, sin embargo, me- diante la energia liberada con la formacién de los sustratos del ciclo de la urea. La liberacién de amonia- co en la reaccién de la glutamato deshidrogenasa esta acompaitada por la formacién de NADH, al igual que la reconversiOn del fumarato a través del oxalacetato a aspartato (Fig, 24-7). La reoxidacion mitocondrial de este NADH produce seis ATPs.732 Seccién 24-2. El ciclo de la urea Carbonilo foafato ATP. 9 ~!9,P—0—C—NHy Carbamoll fosfato Figura 24-5 Mecanismo de accién de la CPS |: (1) activacién de! HCO; por fosforilacién para formar el intermediario postulado, el carbonilo fosfato, (2) ataque sobre el carbonilo fosfato por el NH, para formar el carbamato y (3) fosforilacion del carbamato por ATP produciendo carbamoil fosfato. F, Regulacion del ciclo de la urea La carbamoil fosfato sintetasa I, el enzima mitocon- drial que cataliza el primer paso del ciclo de la urea, es activada alostéricamente por el N-acetilgluta- mato. coo I (City). 1? H—C—N—C—CH, “ook ‘0c NeAcetilglutamato Este metabolito es sintetizado a partir de glutamato y acetil-Co por la N-acetilglutamato sintetasa, e hi- drolizado por una hidrolasa especifica. La velocidad PP, ee ee eee aa \e/ fe , (Gms (CH) H—C—NH}, H-O—NHS boo" boo" de produccién de la urea por el higado esta, de hecho, en correlacién con la concentracién de N-acetilgluta- mato. Cuando aumenta la degradacion de aminoaci- dos generando un exceso de nitrégeno que debe ser excretado, se requiere un aumento en la velocidad de sintesis de la urea. Los incrementos en esta tasa de degradacion implican un aumento en la concentra- cin de glutamato a través de reacciones de transami- nacién (Seccién 24-1). Esta situacién, a su vez, provo- ca un aumento en la sintesis del N-acetilglutamato, estimulando a la carbamoil fosfato sintetasa y, por lo tanto, a todo el ciclo de la urea. Los restantes enzimas del ciclo de la urea estén controlados por las concentraciones de sus sustratos. De esta forma, las deficiencias heredadas en enzimas del ciclo de la urea, excepto la arginasa, no provocan una disminucién significativa en la produccion de urea (la falta total de cualquier enzima del ciclo de la urea tiene como consecuencia la muerte poco después del nacimiento). Lo que ocurre es que se acumula el sustrato del enzima deficiente, aumentando la veloci- dad de la reaccién deficiente hasta niveles normales. La acumulacion anémala de sustrato no esta, sin em- bargo, exenta de coste. Las concentraciones de los sustratos se vuelven elevadas a lo largo de todo el ciclo incluyendo al amoniaco, produciéndose una hi- peramonemia (clevados niveles de amoniaco en san- gre). Aunque la causa ultima de la toxicidad del amo- jaco no se conoce completamente, una concentra- cin elevada de amonfaco pone mucha presién sobre l sistema eliminador del amoniaco, especialmente en el cerebro (los sintomas de deficiencias en los enzimas del ciclo de la urea incluyen retraso mental y letargo). En este sistema de eliminacién participan la glutama- to deshidrogenasa y la glutamina sintetasa, que hace decrecer las reservas de a-cetoglutarato y glutamato Gecciones 24-1 y 24-5A). El cerebro es muy sensible al agotamiento de estas reservas. El agotamiento de a-cetoglutarato disminuye la velocidad del ciclo del Acido citrico, generador de energia, mientras que el glutamato es tanto un neurotransmisor como un pre- cursor del y-aminobutirato (GABA), otro neuro- transmisor (Seccién 34-4C). Figura 24-6 Mecanismo de accion de la argininosuccinato sintetasa: (1) activacién de! oxigeno del grupo ureido de la citrulina por la formacion del citrull-AMP y (2) desplazamiento de! ‘AMP por el grupo a-amino del aspartato. El asterisco (*) muestra el destino del '®0 del grupo ureido de la citrulina. —NH—¢~ CH: COo- N coo” (Fis H-CONHT coo" ArgininosuccinatoCapitulo 24. Metabolismo de los aminodcidos 733, ° g Rg c00 BN SERN an rea nitina @-Cetoglutarato nines a , Aminatido 1 _ kt HN—~C— oro? HOO3 + NHy Glutamate re 120° Ciclo de Carbamoil 0 Ta'uree eel prin aabP GATE] Nap@y* oOxndcido citatna 3 [Arginino-| ‘ cine Ni 3. DEGRADACION METABOLICA. DE CADA UNO DE LOS AMINOACIDOS La degradacién de los aminodcidos los convierte en intermediarios del ciclo del dcido citrico 0 sus precurso- res, de modo que pueden ser metabolizados a CO, y H,O © utilizados en la gluconeogenesis. De hecho, la degra- dacién oxidativa de los aminodcidos representa entre el 10 y el 15 % de la energia metabolica generada por los animales. En esta seccion consideraremos como se catabolizan los esqueletos de carbono de los aminoa- cidos. Los 20 aminodcidos “estandar’ (los aminodci- dos de las proteinas) tienen esqueletos de carbono muy diferentes, por lo que sus conversiones a inter- mediarios del ciclo del acido citrico siguen vias muy diversas, No describiremos todas las miltiples reac- ciones involucradas en detalle. En cambio, considera- remos cOmo estan organizadas estas rutas y nos cen- ‘traremos en unas pocas reacciones de interés quimico y/o médico. A. Los aminodcidos pueden ser glucogénicos, cetogénicos o ambas cosas Todos los aminodcidos “estandar” son degradados a uno de estos siete intermediarios metabolicos: piruvato, a-cetoglutarato, succinil-CoA, fumarato, oxalacetato, acetil-CoA 0 acetoucetato (Fig. 24-8). Por lo tanto, los 1 “00c—cH,—cH—coo™ eae ‘Aspartate R—¢H—coo™ 1 NET ~00C—CH,—CH—coo ‘@-Cetoglutarato Aminodcido Malato ‘NAD’ 7 7 2 Glutamato- ‘-R—C—COO™ cineca 2 coo" lam outa El ciclo de la urea y ol ciclo del acido citrico estan ligados a través de la formacién y degradacion del argininosuccinato. Los enzimas (1) furarasa y (2) malato deshidrogenasa son enzimas del ciclo del acido citrico (Secciones 19-2G y H}. El ‘oxalacetato es desviado del ciclo del Acido citrico para formar aspartato a través de la acci6n de (3) una aminotransterasa. El ATP es hidrolizado en las reacciones e la (5) carbamoil fosfato sintetasa | y de la (6) argininosuccinato sintetasa. Este ATP es regonerado Por la fosforilacién oxidativa a partir del NAD(P)H producido en las reacciones de la (4) glutamato eshidrogenasa y de la (2) malato deshidrogenasa, aminodcidos pueden dividirse en dos grupos segiin su ruta catabélica (Fig. 24-8): 1, Aminodcidos glucogénicos, cuyos esqueletos de carbono se degradan a piruvato, a-cetoglutara- to, succinil-CoA, fumarato u oxalacetato y son, por lo tanto, precursores de la glucosa (Seccién 21-1A). 2, Aminoicidos cetogénicos, cuyos esqueletos de carbono son degradados a acetil-CoA 0 acetoaceta- to y pueden ser convertidos en Acidos grasos 0 cuérpos ceténicos (Seccién 23-3) Por ejemplo, la alanina es glucogénica porque su producto de transformacién, el piruvato (Seccién 24- 1A), puede ser convertido en glucosa por gluconeogé- nesis (Seccién 21-14). La leucina, por el contrario, es cetogénica; su esqueleto de carbono se convierte en acetil-CoA y en acetoacetato (Seccién 24-3F). Dado que los animales carecen de rutas metab6licas para la conversién neta de acetil-CoA 0 acetoacetato en pre- cursores gluconeogénicos, no es posible a sintesis neta de carbohidratos a partir de leucina, o de lisina,734 Seccién 24-3. Degradacién metabélica de cada uno de los aminodcidos el Gnico otro aminodcido puramente cetogénico. Sin embargo, la isoleucina, la fenilalanina, la treonina, el triptofano y la tirosina son tanto glucogénicos como cetogénicos; la isoleucina, por ejemplo, se degrada a succinil-CoA y acetil-CoA y, por lo tanto, es precursor tanto de carbohidratos como de cuerpos cetonicos (Geccién 24-3E). Los 13 aminodcidos restantes son puramente glucogénicos. Al estudiar las vias especificas de degradacion de los aminodcidos, organizaremos a los aminoacidos en grupos que son degradados a cada uno de los siete intermediarios metabélicos mencionados anterior- mente: piruvato, oxalacetato, a-cetoglutarato, succi- nil-CoA, fumarato, acetil-CoA y acetoacetato, B. La alanina, la cisteina, la glicina, la serina y Ia treonina se degradan a piruvato Cinco aminodcidos, 1a alanina, la cisteina, Ia glicina, la serina y la treonina se degradan para producir piruva- to (Fig. 24-9). El triptofano también deberia ser inclui- do en este grupo dado que su producto de degrada- cion es la alanina (Seccion 24-3G), la que, como hemos visto, es transaminada a piruvato. La serina se convierte en piruvato a través de la deshidratacién mediada por la serina deshidratasa. Este enzima PLP, al igual que las aminotransferasas (Seccién 24-1), funciona formando un aminoacido- base de Schiff del PLP para facilitar la eliminacin del tomo de hidrégeno a del aminoacido. En la reaccion de la serina deshidratasa, sin embargo, el carbanion C, se degrada con la eliminacién del C,-OH del aminoacido, en vez de por tautomerizacion (Fig. 24-2, Paso 2), de manera que el sustrato sufre eliminacién 4, B de H,O en vez de desaminacion (Fig. 24-10). El producto de la deshidratacién, la enamina aminoacri- lato, se tautomeriza no enzimaticamente a la corres- pondiente imina, la que espontaneamente se hidroli- za a piruvato y amoniaco, La cisteina puede convertirse en piruvato a través de varias rutas en las que el grupo sulfhidrilo se libera como H,S, SO} 0 SCN. La glicina se convierte en serina mediante la accién del enzima serina hidroximetil transferasa, otro en- zima que contiene PLP (Fig. 24-9; Reaccién 4). Este enzima utiliza el N'N®-metilén-tetrahidrofolato (N*,N"-metilén-THF) como cofactor para proveer la unidad C, necesaria para esta conversion. Dejaremos la discusion de las reacciones catalizadas por los co- factores THF para la Seccién 24-4D. El grupo metileno del N°,N""-metilén-THF utilizado en la conversion de glicina a serina se obtiene de una segunda degradacion de la glicina (Fig, 24-9, Reac- cion 3) catalizada por el sistema de escisién de la glicina (también llamado glicina sintasa en la direc- cidn inversa; Seccién 24-5A). El sistema de escision de la glicina, un complejo multienzimatico que re- cuerda a la piruvato deshidrogenasa (Seccién 19-2A), contiene cuatro componentes proteicos (Fig. 24-11): rina Gstena icra Serra Treanna “upton total? | teeing 5 Teoma co, Pirate Tog Giese an \ Feniganing senate Sb Twos Oralacetato Gtato woe om \ Feniatanina —> Fumarate acide igocirato i CF T., SucciniLCoA —a.Cetog{utarato Lo “a N Isolecina 0, aan Metonina Caran Valine Histaine Proina Figura 24-8 Los aminodcides son degradados a uno de siete intermediarios metabélicos comunes. Las degradaciones glucogénicas y cetogénicas estan indicadas en verde y rojo respectivamente. 1. Una glicina descarboxilasa, dependiente del PLP (proteina P). 2. Una aminometiltransferasa, que contiene lipoami- da, que lleva el grupo aminometilo remanente de Ja descarboxilacion de la glicina (proteina H). 3. Un enzima que sintetiza el N®,N"°-metilén-THF (proteina T), que acepta el grupo metileno de la aminometiltransferasa (el grupo amino se libera ‘como amoniaco). 4. Una lipoamida deshidrogenasa dependiente de NAD? y que requiere FAD (proteina L). Dos observaciones indican que esta via es la prind- pal ruta de degradacin de la glicina en los tejidos de mamiferos: 1. La serina aislada de un animal que habia estado alimentado con [2-'C}glicina esté marcada con “C tanto en C(2) como en C(3). Esta observacién indi- ca que el grupo metileno del N*,N'°-metilén-THF utilizado por la serina hidroximetil transferasa se deriva del C(2) de la glicina.Capitulo 24. Metabotismo de los aminodcidos 735 a ee HO NBT frecan ° 1 : ee ee. ? BF 000 rs —scon NH} ‘Acetil-CoA, A NADH + NHT + COp NSN®Metilén THE x 4) NAD*+ NH}—CH,—COO™ THF ae a4 t meteor meh coer NHS NAG cea ae #0: e-Cetoglutarato Varies Q 4 Giutamato (HS , SOF, 0 SCN™) NHs + H,C—¢—COO™ a NHs f Piravato Figura 24-9 Futas para convertir la alanina, la cisteina, la gicina, la serina y la treonina en piruvato, Los enzimas implicados 2. La enfermedad hereditaria humana hiperglicine- mia no cetésica, que se caracteriza por retraso mental y acumulacion de gran cantidad de glicin en los fiuidos corporales, es el resultado de la falta del sistema de escisin de la glicina La treonina es tanto glucogénica como cetogénica, dado que una de sus rutas de degradacion produce tanto piruvato como acetil-CoA (Fig. 24-9, Reaccin 5). La serina hidroximetil transferasa (actuando en direccién inversa a la de la Reaccion 4) escinde la treonina en acetaldehido y glicina. Esta reaccion no requiere THF como aceptor del aldehido; se libera directamente el acetaldehido. La glicina puede ser convertida, a través de la serina, en piruvato, mien- tras que el acetaldehido es oxidado a acetil-CoA. La serina hidroximetil transferasa cataliza la escisin del enlace C.-C, dependiente del PLP Hasta aqui hemos considerado reacciones cataliza- das por el PLP que empiezan con la escision del enlace C,-H del aminoacido (Fig. 24-2). La degrada- cion de la treonina a glicina y acetaldehido por la serina hidroximetil transferasa demuestra que el PLP son (1) alanina aminotransterasa, (2) serina deshidratasa, @) sistema de escision de la glicina, (4) y (5) serina hidroxilmetil transferasa. también facilita la escisién de un enlace C.-C, del aminoacido mediante la deslocalizacion de electrones del carbanién resultante hacia el anillo del PLP conju- gado. {Como puede el mismo aminodcido-base de Schiff del PLP estar implicado en la escision de diferentes enlaces de un C, de aminoacido en diferentes enzi- mas? La respuesta a este problema fue sugerida por Harmon Dunathan. Para que los electrones puedanmor mbt 000 NH, H,0 H,c—¢—000~ ° Piruvato Figura 24-10 La serina deshidratasa, un enzima dependiente del PLP, ‘ataliza la eliminacién de agua de la serina. Los pasos de la reaccion son (1) formacin de una serina-base de Schiff ‘Aminotransferasa Glutamato Seccién 24-3. Degradacién metabdlica de cada uno de los aminodcidos E50 BO cog use e—coo ‘ ie vp nexgnoor —L— able coor Nut Cun, minuto formar un carbanién establlizado por resonancia, ) Breliminaci6n del OH”, (4) hidrolisis de la base de Schiff para producir el enzima-PLP y el aminoacrilato, (6) tautomerizacién no enzimatica de la imina y (6) hidrélisis Ro enzimatica para formar piruvato y amoniaco. ? [B-Pur—cu HjN—CHy—COO™ Gticina (E-pur—cn—hi—crty—coo™ +e es [BL pip—cu=NH—cH,— sar + Ni NSN! Metilén THF Figura 24-11 Reacciones catalizadas por el sistema de escision de ia glicina, un complejo multienzimatico (a menudo también llamado glicina sintasa). Los enzimas implicados son (1) una glicina descarboxilasa, dependiente del PLP (proteina P), (2) una proteina que contiene lipoamida (proteina H), () un enzima que requiere THF (proteina T) (4) una lipoamida deshidrogenasa dependiente de NAD* y que requiere FAD (proteina L).‘Amnodcido-base de et PLP er © Figura 24-12 (a) Esqueleto de orbitales x de un aminodcido-base de Schiff del PLP. El enlace a C, en el plano perpendicular al del sistema de orbitales x del PLP (% en la figura) es lébil ‘como consecuencia de su solapamiento con el sistema x, lo que permite la deslocalizacion del par de electrones del enlace roto hacia la molécula conjugada. (b) Complejo de la base de Schiff del inhibidor a-metilaspartato con el PLP en la estructura de rayos-X de la aspartato aminotransferasa porcina. Aqui, el atomo de C del metilo (bola amaritiaindicada con una GC) ocupa la posicion del ‘tomo de H que el enzima normalmente escinde de! aspartato, Notese que el enlace que une el atomo de C del metilo con el aspertato esta en un plano perpendicular con respecto al anillo del piridoxal y por lo tanto tiene la orientacin ideal para la escision del enlace. [Cortesia de Craig Hyde, NIH.] Capitulo 24, Metabolismo de los aminodcidos 737 La asparagina también se convierte en oxalacetato de esta manera después de su hidrolisis a aspartato por la asparaginasa: Asparagina H,0— Asparaginasa nat rN Nut ‘0 Aspartato D. La arginina, el glutamato, la glutamina, la histidina y la prolina se degradan a a-cetoglutarato La arginina, la glutamina, la histidina y la prolina se degradan por conversion a glutamato (Fig. 24-13), el que, a su vez, se oxida a a-cetoglutarato por la glutamato deshidrogenasa (Seccién 24-1). La conver- sion de la glutamina a glutamato implica s6lo una reaccién: la hidrdlisis por la glutaminasa. La conver- sion de la histidina a glutamato es algo mas complica- da: es desaminada no oxidativamente, hidratada y su anillo imidaz6lico es escindido para formar N-formi minoglutamato. El grupo formimino es entonc transferido al tetrahidrofolato formando glutamato y N*-formimino-tetrahidrofolato (Seccion 24-4D). Tanto Ja arginina como la prolina se convierten en glutamato a través de la formacién del intermediario E. La isoleucina, la metionina y la valina se degradan a succinil-CoA La isoleucina, la metionina y la valina tienen rutas de degradacién complejas que producen, todas, pro- pionil-CoA. El propionil-CoA, que es también un pro- ducto de la degradacién de acidos grasos de cadena par, se convierte, como hemos visto, en succinil-CoA mediante una serie de reacciones que incluyen la participacion de la biotina y el coenzima By: (Seccién 23-38) La degradacién de la metionina implica la sintesis de S-adenosilmetionina y de cisteina El proceso de degradacién de la metionina (Fig, 24-14) empieza con su reaccion con el ATP para formar S-adenosilmetionina (AM). Este grupo metilo altamen- te reactivo del ion sulfonio lo hace un importante agente biolégico metilante. Por ejemplo, ya hemos visto que el SAM es el dador de metilo en la sintesis de la fosfatidilcolina a partir de Ja fosfatidiletanolamina (Geccién 23-8A). Tambien es el dador de metilo en la738 Seccién 24-3. Degradacin metabélica de cada uno de los aminodcidos conversi6n de la norepinefrina a epinefrina (Seccién 24-4B) La reaccién de metilacion que involucra a SAM produce $-adenosilhomocisteina ademas del aceptor metilado. El primero de estos productos es hidroliza- do a adenosina y homocisteina en la siguiente reac- cién de la ruta de degradacién de la metionina. La homocisteina puede ser metilada para formar metio- H nina a través de la reaccion en la que el N*-metil- THE es el dador de metilo. Alternativamente, la ho- mocisteina también puede combinarse con serina para producir cistationina, que subsecuentemente forma cisteina (biosintesis de la cistefna) y a-cetobu- tirato, El a-cetobutirato continda la ruta degradativa a propionil-CoA y luego a succinil-CoA. i Ho=¢— city —6—coo" Pre Cte 6 Ny NH Mut a 1 Wistidina i. Ho=¢—CH=cH—coo™ 7 oN ay i [22 Ny NH ~000—C—CHly~CHy~CHly—NH—C—NH, ~ooeAy, ¢ sat Nag Hy Urocanato Arginine Protina 5 fae 402 rea 6 OH _ sf - ie 1,0 SoG city ctt—c007 i Ny NH ~00c—¢—cH,—CH;—CH,—=NHt ~ooc-A $7 § wat H ‘CImidazotons Ornitina a ‘propionate med Searboxilato 40|—H:0 eo atitamate Fi 10 on - H o ‘00¢—@—CHy~CH~CO0 1 a ~000-—-9-- CHs— Clr & HNy (NH Nut H H tutamate- NFormiminogutamato Sseminachiao ‘NADIPY 1 Acup SCoxaperst : os qt g 2 i 1 eo ~00C—C—CH,—CH,—C—NH, ~00C—C—CH,—CH,— COO aut Y sat Glutamina ONE ey Figura 24-13, Rutas de degradacion de la arginina, el glutamato, la glutamina, la histidina y la prolina a a-cetoglutarato. Los tenzimas que catalizan las reacciones son (1) glutamato eshidrogenasa, (2) glutaminasa, (8) arginasa, NADPH + NH (000—¢—cy—CHt,— Coo ° aCetoglntarato (4 ornitina-8-aminotransferasa, (5) glutamato semialdehido deshidrogenasa, (6) prolina oxidasa, (7) espontanea, (8) histidina amoniaco liasa, (9) urocanato hidratasa, (10) imidazolona propionasa y (11) glutamato formimino transterasa,¥ ATP + Hy cH;—S—cH,—cH,—c—coo- _*2° Metionina, THF 4 N*-Metil- THF H i HS—CH,—CH,—C—coo” —Adenosina Momacateoa seria 5 14,0 4 i $cc —-b—coo eo F= 007 0 wi \et te 000" e Biotee NH de la cistefna Cistatonina CoASH + NADY z NADH + CO, HyC—CHy—C—ScoA 5 4. Propionil-Coa Figura 24-14 Ruta de degradacion de la metionina que produce cisteina y succini-CoA. Los enzimas implicados en la ruta son (1) metionina adenositransferasa, en una reaccién que produce el agente metilante bioldgico S-adenosilmetionina (SAM), (2) metilasa, (8) adenosilhomocisteinasa, (@) homocisteina metiltransferasa (enzima dependiente del coenzima B,,), (5) cistationina-f-sintasa (enzima dependiente del PLP), (6) cistationina-y-liasa (enzima ependiente del PLP), (7) a-oxodcido deshidrogenasa, (8) propionl-Coa carboxilasa, (8) metiimaionl-CoA racemasa ¥ (10) metiimalonil-CoA mutasa (enzima dependiente dei coenzima By; las Reacciones 8-10 se discuten en la Seccién 23-26), HO hep AB a-Cetobutirato Capitulo 24. Metabolismo de los aminodcidos 739 H + I (Cle 8— CH CH,—C—COO™ CH, NH} P+ 1 \ 1 4S HOH NHS H a HO OH ‘S-Adenosiimetionina (SAM) ‘Aceptor de metilo Meitacon viosmticn *L peptor metado x §~cH—ctty~¢—co0~ & wat ox. Adenine 2 Wey nO OH ‘S-Adenostthomocisteina 4 Beem p— 000 + mi cor o.: Nut Cisteina ~00C~CH,—CH,—C—SCaa 2, 1, 3} Succinil-Coa, Las rutas de degradacion de los aminoacidos de cadenas ramificadas contienen pasos comunes a todas las oxidaciones de acil-CoA. La degradacién de los aminoacidos de cadena rami- ficada isoleucina, leucina y valina, comienza con tres reacciones que utilizan enzimas comunes (Fig. 24- 15, arriba): (1) transaminacién al correspondiente a-oxoacido, (2) descarboxilacion oxidativa al corres- pondiente acil-CoA y (3) deshidrogenizacién por el FAD para formar un doble enlace. El resto de la ruta de degradacion de la isoleucina (Fig, 24-15, izquierda) es idéntica a la oxidacion de los acidos grasos (Seccién 23-2C): (4) hidratacion del doble enlace, (5) deshidrogenacion por el NAD* y740 Seccién 24-3. Degradacin metabélica de cada uno de los aminodcidos Figura 24-15. Degradacion de los aminodcidos de cadena ramificada (A) isoleucina, (B) valina y (C) leucina Las primeras tres reacciones de cada ruta utlizan enzimas comunes: (1) transaminasa de aminodcidos con cadena ramificada, (2) a-cetoisovalerato deshidrogenasa y (3) acil-CoA deshidrogenasa. La degradacién de la iscleucina continua (izquierda) con (4) encil CoA hidratasa, (8) Phidroxiaci-CoA deshidrogenasa y (6) aceti-CoA aceti transterasa para producir aceti-CoA y propioni-CoA. La AMP + PP, AcetilCoA CoASH ® coo” af ai? tos io HO=C— COO” 44440 bog 48440¢00 Ciclo “on, Oxalacetato, delacido gh 4 citric gen ECON Citrato \ 3440 699° 44440 696 ee am A “om i 1+ 109, fe2 “on, ay CH #4 +30 ¢00" “—— al * 24+ 20¢0, Suceinato 9-0 _ ScoA Succinil-CoA Origen de los atomos de C del succinilCoA derivados de! acetato via el ciclo del Acido citrico. Los atomos de C ‘marcados con triangulos y cuadrados derivan, respectivamente, de los atomos de C metilico y carboxilico del acetato. Los atomos con simbolos llenos derivan del acetato en esta vuelta del ciclo del acido citrico, mientras ‘que los atomos con simbolos abiertos derivan det acetato fen rondas previas del ciclo del Acido citrico. Notese que los ‘tomos C(1) y C(4) del succinil-CoA han sido mezclados formando el succinato, dos veces simétrico. A. Biosintesis y degradacion del grupo hemo El hemo (Fig. 24-24), como hemos visto, es un ‘grupo prostético que contiene Fe que es un compo- nente esencial para muchas proteinas, particularmen- te, la hemoglobina, la mioglobina y los citocromos. Las reacciones iniciales para la biosintesis del hemo son comunes a las de la formacién de otros tetrapirro- les como la clorofila de las plantas y bacterias (Sec- cin 22-14) y el coenzima B;; que aparece en las bacterias (Seccion 23-28). Las porfirinas derivan del succinil-CoA y de la glicina El descubrimiento de la ruta biosintética del hemo implicé una interesante tarea de detective. David Shemin y David Rittenberg, que estaban entre lose11,—coo™ “Nut Gicina a :B—Bne—PLP 10 4! cB Ene a nSc—coo sn 1 cH S mae mabe Capitulo 24. Metabolismo de los aminodcidos 749 SCoA ® coo coo" "i ai aa ra i it A ott = oth 4 a tene Eme—B: “CH, “Gh “Ki fi, bi sAntastevatnats (ALA) ane Figura 24-26 Mecanismo de accion del enzima dependiente de PLP -aminolevutinato sintasa. Los pasos dela reaccién son (1) transiminacion, (2) formacion del carbanion estabiizedo por el PLP, (3) formacion del enlace C~ : del CoA, (6) descarboxiiacén facilitada por la base de Schiff det PLP y (6) iransiminacion para product el ALA y regeneracién del enzima del PLP primeros que usaron marcadores isotépicos en la elu- cidacion de las rutas metabolicas, demostraron, en. 1945, que todos los dtomos de C y N del hemo podian derivarse del acetato y la glicina. La glicina fue el nico metabolito, entre los varios que probaron, incluyendo al amoniaco, el glutamato, la leucina y la prolina, que cuando tenia N como marcaje, producia hemo mar- cado con "N en la hemoglobina de suj mentales a los que se les habia su metabolitos. Experimentos similares, utilizando aceta- to marcado con *C en sus grupos metilo 0 carboxilo, © glicina ['*C,], demostraron que 24 de los 34 atomos de carbono del hemo derivan del carbono metilico del acetato, 2 del carbono carboxilico del acetato, y 8 del tomo C, de la glicina (Fig. 24-24). En cambio, ningu- no de los atomos del hemo derivan del atomo de carbono carboxilico. La Figura 24-24 indica que los atomos de C del hemo derivados de los grupos metilo del acetato apa- recen en grupos de tres atomos ligados. Evidentemen-750 Seccién 24-4, Los aminodcidos como precursores biosintéticos "coo" CH CH, a 0 + HN—Bne al CH —1o Sin ene CH. 4 "00" "coo "coo "coo “ous "coo “cH, "coo “cH al al cH, cH, ‘CH GE, Gk +L NN°An Gh “NH NHy Porfobilinégeno (eae) Figura 24-27 Posible mecanismo para la porfobilinégeno sintasa. La reaccién incluye: (1) formacién de la base de Schiff, (2) formacion de la segunda base de Schiff, (3) formacion te, el acetato se convierte primero en otro metabolito con este patron de marcaje. Shemin y Rittenberg postularon que este metabolito es el succinil-CoA, basandose en los siguientes razonamientos (Fig. 24- 25): 1. El acetato se metaboliza via el ciclo del acido citri- co (Seccién 19-31). Estudios mediante marcaje indican que el atomo C(3) del intermediario del ciclo del acido citrico succinil-CoA deriva del atomo de C del grupo metilo del acetato, mientras que el étomo C(4) viene del atomo de C carboxilico del acetato. 2 Después de muchas vueltas del ciclo del Acido citrico, C(1) y C(2) tambien derivan totalmente del, tomo de C metilico del acetato. aN + H.N—Enes—— 20 5 H a el carbanién a sobre la base de Schitt, (4) formacién del Ciclo mediante una condensacién de tipo aldol, (6) eliminacién del grupo NH, del enzima y {6) tautomerizacién, Veremos que este patron de marcaje lleva sin duda al del hemo. La primera fase en la biosintesis del hemo es la condensacién del succinil-CoA con la glicina por des- carboxilacién para formar el acido 8-aminolevulini- co (ALA) catalizada por la 6-aminolevulinato sinta- sa (Fig. 24-26), enzima dependiente del PLP. El grupo carboxilo que se pierde en la descarboxilacién (Fig. 24-26, Reaccion 5) es el que se origina en la glicina, raz6n por la cual el hemo no contiene étomos marca- dos provenientes de este grupo. El anillo pirrélico es el producto de dos moléculas del acido 5-aminolevulinico (ALA) El anillo pirrolico se forma en la siguiente fase de la ruta a través de la union de dos moléculas de ALACapitulo 24. Metabolismo de los aminodcidos 751 Uroporfiri- nn6geno TIT Intermediario espiralado Metilbilano-enzima Uroporfirinégeno HI Figura 24-28 ‘Sintesis del uroporfiinégeno Ill a partir de PBG catalizada por la uroporfirindgeno sintasa y la uroporfirinogeno til Cosintasa: (1) Desplazamiento por parte del enzima del ‘grupo amino de un PBG para formar un complejo Covalente. (2-4) Adicién secuencial de un segundo, un tercer y un cuarto PBG a través del desplazamiento del ‘grupo amino primario de un PBG por el étomo de carbono para producir porfobilinégeno (PBG). La reaccién es catalizada por el enzima porfobilinégeno sintasa (0 alternativamente, la acido 6-aminolevulinico deshi- dratasa), que requiere Zn, e incluye la formacion de tuna base de Schiff entre una de las moléculas del sustrato con un grupo amino del enzima. Uno de los posibles mecanismos de esta reaccién de condensa- ci6n-eliminaci6n incluye la formacién de una segun- da base de Schiff entre el ALA-base de Schiff del enzima y la segunda molécula de ALA (Fig. 24-27). En este punto, si continuamos siguiendo la pista de Uroporfirinégeno T del anillo pirdlico del siguiente PBG. (5) Hidrolisis del metibilano-enzima para formar el hidroximetifbilano. 6) Sintesis del uroporfrindgeno Ila través de un intermediario espiralado mediante la uroporfirinogeno sintasa y la uroporfirinégeno Ill cosintasa. (7) Formacion ‘espontanea del ciclo del hidroximetibilano en ausencia de la uroportirindgeno Ill cosintasa. A y P corresponden, respectivamente, a los grupos acetlo y propionilo. los marcajes del acetato y de la glicina a través de la reaccién de la PBG sintasa (Fig. 24-27), podemos empezar a ver c6mo aparece el patron de marcaje del hemo. La inhibicién de la PBG sintasa por plomo es una de las principales manifestaciones del envenenamien- to agudo por plomo. De hecho, se ha sugerido que la acumulacion en la sangre del ALA, que se parece al neurotransmisor 4cido y-aminobutirico (Seccién 24- 4B), es la responsable de la psicosis que frecuente- mente acompafia al envenenamiento por plomo,752 “00: —CHy—CH,—C—t SuceinilL-CoA. H,N—CH,—Coo™ uci Ferroquelatasa mm a, M Protoporfirina IX Protoporfirinégeno joxidasa oo. yoy y - | 1 a,c— “00; —CHly—CH,—C—CH,—NH, Acido 5.aminolevulinico (ALA) at See Wn =e NH HN : : aw \=ly ion. i. el: boM bo M Heme Protoporfirinéyeno 1X ALA Porfobilinsgeno Copropor- sintasa 2h ~fieindgeno Joxidasa 00 Porfobilinégeno (PBG) ANH, Uroporti rinseanoiie | Geer Uroporfiri Uroporfirindgeno IIL Figura 24-29 Fula global de la biosintesis del hemo. El écido S-aminolevulinico (ALA) es sintetizado en la mitocondria por la ALA-sintasa. El ALA (izquierda) deja la mitocondria y se cconvierte en PBG, del que cuatro moleculas se condensan para formar el anillo portirinico. Las tres reacciones siguientes implican la oxidaciOn de los sustituyentes det anillo pirrélico para producir el protoportirinogeno IX cuya Citosol | He { y CH, PoM Coproporfirindgeno IIT formacion va acompafiada de un nuevo transporte a la mitocondtia, Despues de la oxidacion de los grupos: ‘metiienos unidos a los pirroles para producir ia protoporfirina IX, la ferroquelatasa caializa la insercién de Fe** para producir el hemo. A, P, M y V corresponden, respectivamente, a los grupos acetilo, propionilo, metilo y vinilo (-CH,=CH,). Los atomos de C originarios del grupo carboxilo de un acetato estan coloreados.La uroporfirin6geno sintasa tiene un dipirrometano como cofactor La siguiente fase en la biosintesis del hemo es la condensacién de cuatro moléculas de PBG para for- mar el uroporfirinégeno Iil, la porfirina nuclear, en una serie de reacciones catalizadas por la uroporfiri- négeno sintasa (alternativamente, porfobilinégeno desaminasa) y la uroporfirinégeno III cosintasa. El mecanismo de la reaccién fue elucidado por Alan Battersby. Los pasos 1 a 4 de la Figura 24-28 indican que la biosintesis del hemo a partir de unidades de pirroles empieza por la unién secuencial de cuatro moléculas de porfobilinégeno (PBG) en una reaccién catalizada por la uroporfirindgeno sintasa para produ- cir metilbilano que esta unido covalentemente al e zima. La naturaleza de esta unién covalente result ser sorprendente. La uroporfirinogeno sintasa contie- ne un tnico dipirrometano como cofactor (dos pirro- es unidos por un puente de metileno como el del diagrama de la Figura 24-28, después del Paso 2) que esté covalentemente unido, a través de un enlace C-S, a un resto de cisteina del enzima. Asi, el complejo metilbilano-enzima contiene realmente un hexapirrol lineal. El siguiente paso de la reaccién, también catalizado por la uroporfirindgeno sintasa (Paso 5 en la Figura 24-28), es la hidrélisis del enlace que une la segunda y tercera unidad pirrolica: del hexapirrol para producir hidroximetilbilano y el co- factor dipirrometano todavia unido al enzima, que queda listo para catalizar una nueva reaccién de sin- tesis del metilbilano. zCémo se sintetiza el cofactor dipirrometano? Re- sulta que la uroporfirindgeno sintasa sintetiza su pro- pio cofactor a partir de dos unidades de PBG utilizan- do, segiin parece, la misma maquinaria catalitica con la que sintetiza el metilbilano. Por lo tanto, los Pasos Ly 2 de la Figura 24-28 representan mejor la sintesis, del cofactor dipirrometano. El cofactor permanece asociado al enzima en vez de ser incorporado a los productos, tal como lo demostraron los estudios con marcaje con ¥C, Para la adquisicién de la estructura ciclica se re- quiere la participacion de la uroporfirinogeno III co- sintasa (Fig. 24-28). En ausencia de la cosintasa, el hidroximetilbilano se libera de la sintasa y rapida- mente forma un ciclo, no enzimaticamente, para dar el uroporfirinégeno I, de estructura simétrica, El hemo, sin embargo, es una molécula asimétrica; el metilo sustituyente en el anillo pirrdlico D tiene una posicion invertida si la comparamos con la de los ani- los A, B y C (Fig, 24-24). Se cree que esta inversion del anillo para producir el uroporfirinogeno Ill ocu- re a través de la union de los metilenos de los ani- llos A y C al mismo carbono del anillo D para formar un compuesto espiral (un compuesto biciclico con un atomo de carbono comin a ambos anillos; Fig. 24-28), La biosintesis del hemo tiene lugar parcialmente en la mitocondria y parcialmente en el citosol (Fig. 24- 29). El ALA es sintetizado en la mitocondria y trans- Capitulo 24, Metabolismo de los aminodcidos 753 portado al citosel por conversin al PBG y luego a uroporfirinégeno Ill. La protoporfirina IX, ala que se aftade el Fe para formar el hemo, se produce a partir del uroporfirinégeno Ill en una serie de reacciones catalizadas por (1) la uroporfirinégeno descarboxila- sa, la que descarboxila las cuatro cadenas laterales de acetatos (A) para formar grupos metilos (M); (2) la coproporfirinégeno oxidasa, que descarboxila oxida- tivamente dos de las cadenas laterales de los propio- natos (P) a grupos vinilos (V); y (3) la protoporfirind- geno oxidasa, que oxida los grupos metilenos unien- do los anillos pirrolicos a grupos metenilos. En total, seis grupos carboxilos, provinientes de acetato con su. carboxilo marcado, se pierden como CO,. Los éinicos atomos de C de los carboxilos marcados de moléculas de acetato que permanecen son los de los grupos carboxilos de las dos cadenas laterales de propionato (P). Durante la reaccién de la coproporfirindgeno oxi- dasa, el macrociclo es transportado nuevamente a la mitocondria para las reacciones finales de la ruta. La toporfirina IX es convertida a hemo mediante la insercion de Fe(II) en el nicleo tetrapirrOlico por la fe- rroquelatasa. La regulaci6n de la biosintesis del hemo es diferente en las células eritroides con respecto a las células del higado Los dos sitios principales de biosintesis del hemo son las células eritroides, que sintetizan aproximada- mente el 85 % de los grupos hemo del cuerpo, y el higado, que sintetiza la mayor parte del resto. Una funcién importante del hemo en el higado es como grupo prostético del citocromo Py, un enzima oxida- tivo involucrado en la destoxificacion, que es requeri- do durante toda la vida de la célula hepatica en cantidades que varian con las condiciones. En con- traste, las células eritroides, donde el hemo es, por supuesto, un componente de la hemoglobina, reali- zan la sintesis de! hemo sélo después de su diferen- ciacién, cuando sintetizan hemoglobina en grandes cantidades. Esta es una sintesis que se realiza s6lo una vez; el hemo debe durar toda la vida del eritrocito (normalmente unos 120 dias) dado que la sintesis del hemo y de la hemoglobina se detiene con la madura- cion del globulo rojo (se acaba la sintesis de proteinas por la pérdida del niicleo y de los ribosomas). La manera diferente en que est regulada la biosintesis del hemo en el higado y en las células eritroides refleja estas distintas necesidades: en el higado, la biosintesis del hemo debe estar realmente “controla- da’, mientras que en las células eritroides, es mas como romper una presa. En el higado, el sitio principal de control en la biosintesis del hemo es la ALA-sintasa, enzima que cataliza el primer paso que determina la ruta. El hemo, 0 su producto de oxidacion -que lleva Fe(Ill)-, la hemina, controlan la actividad de este enzima a través de tres mecanismos: (1) retroinhibicién, (2) inhibicion del transporte de la ALA-sintasa de su sitio de sintesis en el citosol a su sitio de accion en la754 Seccién 24-4, Los aminodcidos como precursores biosintéticos y PoP oM My - 6 — ns co + Pel [el D P oN N N N q Bhiverdina > oM aos NADPH + H™ Glocuron GIuCwA Lp gucurenato nape anaaria Moy Mop oP oM ™ ¥ Je c | piL Ja ar N N N q Nay 8 q Diglucaronnro de bilirubin Biirrobina ‘microbi: ‘8He (antetine erueso) Genoa #40 chesney PoP MoM & cl folate No N 2H H H, Hw y H Urobiinégene ansimas mieobiance——_ingn) (Inteatino grass) one M Mop oPpoM M & u A Blu tel Lolula no 07 ys NOON q tof i Estercobitina Urobitina Figura 24-30 Ruta de degradacion del hemo. M, V, P y E corresponden, respet mitocondria (Fig. 24-29) y (3) represion de la sintesis de la ALA-sintasa. En las células eritroides, el hemo ejerce un efecto muy diferente en su biosintesis. El hemo estimula, en vez de inhibir, la sintesis de proteina en los reticuloci- tos (eritrocitos inmaduros; Seccion 30-4A). Aunque la gran mayoria de las proteinas sintetizadas en los re- ticulocitos corresponde a globina, hay evidencias de ctivamente, a los grupos metilo, vino, propionilo y eto. que el hemo también induce a estas células a sinteti- zar los enzimas de la ruta biosinteética del hemo. Mas atin, el paso limitante de la biosintesis del hemo en las células eritroides puede no ser la reaccion de la ALA-sintasa. Experimentos en distintos sistemas de células eritroides en diferenciacion implican a la fe- rroquelatasa, el enzima que cataliza la insercion del hierro, y a la uroporfirindgeno sintasa, en el controlde la sintesis del hemo en estas células. También hay indicios de que la captacion de hierro por parte de la célula puede ser limitante. El hierro es transportado en el plasma en complejo con una proteina transpor- tadora de hierro, la transferrina. La velocidad a la que el complejo hierro-transferrina entra en la mayo- ria de las células, incluyendo a las del higado, est controlada por la endocitosis mediada por receptor (Seccién 11-4B). Sin embargo, los complejos de hierro solubles en lipidos que difunden directamente a los reticulocitos estimulan in vitro a la biosintesis del hemo. La existencia de varios puntos de control avala Ja suposicién de que cuando se activa la biosintesis del hemo en las células eritroides, todas sus etapas funcionan a su maxima velocidad, en vez. de que haya tun paso determinado que limite el flujo de la ruta. La sintesis de globina estimulada por el hemo asegura también que el hemo y la globina se sinteticen en la relacién correcta para el montaje de la hemoglobina (Seccién 30-44). Las porfirias tienen extrafios sintomas Se conocen varias defectos genéticos en la biosinte- sis del hemo, en el higado o en las células eritroides. Todos implican la acumulacion de porfirina y/o sus precursores y, por lo tanto, se los conoce como porfi- rias, Se sabe que dos de estos defectos afectan a las células eritroides: la deficiencia en uroporfirinégeno III cosintasa (porfiria eritropoyética congénita) y la deficiencia en ferroquelatasa (protoporfiria eritropo- yética). La primera causa la acumulacion de uroporfi- Findgeno | y su producto de descarboxilacion, el co- proporfirinégeno I. La excrecién de estos compues- tos colorea la orina de rojo, su depésito en los dientes los vuelve de un color pardo-rojizo fluorescente, y su acumulacion en la piel la hace muy fotosensible de modo que se forman tilceras y cicatrices desfiguran- tes. En los individuos afectados se observa también un aumento del crecimiento del pelo, de manera que gran parte de su cara y extremidades puede estar cubiertas por pelos finos. Estos sintomas sugieren especulaciones sobre un posible base bioquimica para la leyenda del hombre lobo. ; La porfiria més comin que afecta primariamente al higado es la deficiencia en uroporfirinégeno sintasa (porfiria aguda intermitente). Esta enfermedad se caracteriza por ataques intermitentes de dolor abdo- minal y disfuncién neurologica. Durante y despues de los ataques se excreta en la orina cantidades excesivas de ALA y PBG. La orina puede volverse roja como resultado de la excrecién del exceso de porfirinas sintetizadas a partir del PBG en células no hepaticas a pesar de que la piel no se vuelve inusualmente foto- sensible. El rey Jorge III, que gobern6 Inglaterra du- ante la Revolucién Americana, y al que se describia generalmente como loco, tenia, en realidad, ataques aracteristicos de la porfiria intermitente aguda; se decia que tenia la orina del color del vino de Oporto, y tuvo varios descendientes afectados por esta enfer- medad. La historia americana podria haber sido muy Capitulo 24. Metabolismo de los aminodcidos 755 distinta si el rey Jorge II no hubiera tenido este defecto metabélico. El hemo se degrada a pigmentos biliares Al final de su vida, los globulos rojos son elimina- 68.de la circulaci6n y sus componentes degradados. El catabolismo del hemo (Fig. 24-30) comienza con la escision oxidativa de la porfirina entre los anillos Ay B para formar biliverdina, un tetrapirrol lineal verde. EI puente central de metenilo de Ia biliverdina (entre Jos anillos C y D) se reduce, entonces, para formar la bilirrubina, de color rojo-naranja. Los colores cam- biantes durante la curacién de las contusiones son manifestaciones de la degradacién del hemo. En la reaccin de formacin de la biliverdina, el carbono del puente metenilico entre los anillos porfi- rinicos A y Bes liberado como CO, que como vimos es un tenaz ligando del hemo (con 200 veces mas afinidad por la hemoglobina que el O,; Seccién 9-1A).. ‘Como consecuencia, aproximadamente un 1 % de los sitios de unién al O, de la hemoglobina estan blo- queados por CO, incluso en ausencia de contamina- ion del aire. Esta cantidad seria mucho mayor si no fuera por la presencia del resto de histidina distal de la hemoglobina (E7, el resto de histidina que se tune por enlace de hidrégeno al O; unido; Seccién 9-2), La histidina distal restringe estéricamente al CO, que tiene una geometria lineal preferente para ligarse al hemo Fe(II), hacia una geometria con curvatura favorable al O,, Esto reduce la afinidad del hemo por el CO en més de 100 veces, permitiendo asi que el CO se exhale lentamente. De hecho, en el mutante Hb Zurich [His E7(63)B— Arg], alrededor del 10 % de los hemos llevan CO. La bilirrubina, altamente lipofilica, es insoluble en soluciones acuosas. Como otros metabolites lipofili- cos, tales como los acidos grasos libres, es transporta- da en la sangre en complejo con Ia albtimina sérica En el higado, su solubilidad acuosa aumenta debido a la esterificacion de sus dos grupos laterales de propio- nato con Acido glucurénico produciendo el dighucu- ronuro de bilirrubina, que se secreta en la bilis. Los enzimas bactetianos del intestino grueso hidrolizan los grupos de Acido glucurénico y, en procesos de muchas etapas, convierten la bilirrubina a varios pro- ductos, especialmente el urobilinégeno. Algo de uro- bilinégeno es reabsorbido y transportado a través de la cortiente sanguinea al rifén donde es convertido en la urobilina amarilla; ésta es excretada y daa la rina su color caracteristico. La mayor parte del urobi- linégeno, sin embargo, es convertido por los micro- bios en estercobilina, de color rojo-pardo, el mayor pigmento de las heces. Cuando la sangre contiene cantidades excesivas de bilirrubina, la deposicion de esta sustancia, altamente insoluble, colorea la piel y el blanco de los ojos. Esta condicién, llamada ictericia, indica una tasa anormal- mente alta de destruccién de glébulos rojos, una dis- funcién hepatica, 0 una obstruccién del conducto bi- liar. Los bebés recién nacidos, especialmente los756 Seccién 24-4. Los aminoacids como precursores biosintéticos prematuros, frecuentemente presentan ictericia debi- do a que sus higados todavia no fabrican suficiente bilirrubina glucuronil transferasa para ahadir glu- curonato a la bilirrubina que llega. Los bebés con ic- tericia son tratados mediante bafios de luz fluorescen- te; esto convierte fotoquimicamente la bilirrubina en. ismeros més solubles que el nifio puede degradar y excretar, B. Biosintesis de aminas fi: activas La epinefrina, la norepinefrina, 1a dopamina, la serotonina (5-hidroxitriptamina), el acido y-amino- butirico (GABA) y la histamina 6gicamente x HK t Ho- -C—CH)—NH—R 1 H X= OH, R=CH, Bpinefrina X=OH, R=H ' Norepinefrina X=, R=H — Dopamina HO, (CH,—CH,—NH} } N Serotonina (G-hidroxitriptamina) ~00C—CH,—cH,—CHy—NHt Acido yraminobatirico (GABA) aN \_ NH Histamina son hormonas y/o neurotransmisores derivados de ami- nodcidos. Por ejemplo, la epinefrina, como hemos vis- to, activa la adenilato ciclasa muscular estimulando asi la degradacion del glucgeno (Seccién 17-3E); la deficiencia en la produccién de dopamina esta asocia~ da a la enfermedad de Parkinson, una condicion degenerativa que causa “pardlisis temblorosa’; la se- rotonina causa la contraccién del musculo liso; el GABA es uno de los principales neurotransmisores, inhibidores del cerebro, liberandose en 30% de las sinapsis; y la histamina est implicada en las respues- tas alergicas (como sabrin los que sufren alergias y toman antihistaminicos), asi como en el control de la secrecién de acido por el estomago (Seccién 18-3C). La biosintesis de cada una de estas aminas fisiologi- camente activas implica la descarboxilacién del co- rrespondiente aminodcido precursor. Las aminodcido descarboxilasas son enzimas dependientes del PLP que forman una base de Schiff del PLP con el sustrato de manera que pueda estabilizarse el carbanion C, formado por la escisién del enlace C,-COO- (Seccién 24-14). La formacién de la histamina y el GABA son procesos de una etapa (Fig, 24-31). En la sintesis de la serotoni- na a partir del triptofano, la descarboxilacin es pre- cedida por una hidroxilacién (Fig. 24-32) por la trip tofano hidroxilasa, uno de los tres enzimas de mamifero que tiene a la 5,6,7,8-tetrahidrobiopterina ‘como cofactor (Seccién 24-3H). La dopamina, la nore- pinefrina y la epinefrina son denominadas ¢atecola- minas porque las tres son aminas derivadas del cate- col. on oO” Catecot La conversion de la tirosina a las distintas catecolami- nas ocurre de la siguiente manera (Fig. 24-33): 1, La tirosina es hidroxilada a 3,4-dihidroxifenilala- nina (L-DOPA) por la tirosina hidroxilasa, otro enzima que requiere 5,6,7,8-tetrahidrobiopterina 2. La L-DOPA es descarboxilada a dopamina. 3. Una segunda hidroxilacion produce norepinefrina 4. La metilacion del grupo amino de la norepinefrina por la S-adenosilmetionina (Seccion 24-3E) produ ce la epinefrina La catecolamina especifica que produce una célula depende de los enzimas de 1a ruta que estén presen- tes. En la médula adrenal, cuya funcion es producit hormonas (Seccién 34-4), la epinefrina es el produc to predominante, En algunas areas del cerebro, la norepinefrina es mas comun. En otras areas, especial- mente en la substantia migra, la ruta acaba en la sintesis de la dopamina. En efecto, la enfermedad de Parkinson, que es causada por una degeneracion de la substantia nigra, ha sido tratada con cierto éxito me- diante la administracion de L-DOPA, el precursor mediato de la dopamina. La dopamina misma no es efectiva porque no puede atravesar la barrera hema- ta-encefallica. La L-DOPA, sin embargo, es capaz de egar a su sitio de accion donde es descarboxilada a dopamina. El enzima que cataliza esta reaccion, la aminoacido aromatic descarboxilasa, descarboxila todos los aminodcidos aromaticos y es, por lo tanto, también responsable de la formacién de serotonina.. Capitulo 24. Metabolismo de los aminodcidos 757 coor be 000 cee §— 00 el “000 ccc Na NAT ovscarboxilasa Glutamato (dependiente del PLP) Acido y-aminobutirico nor SF VN ct, vat Om © ie — L, Figura 24-31 Reacciones de descarboxilacién par y la histamina a partir de la histidina, formar el acido y-aminobutirico (GABA) a partir del glutamato a Tipstre rg moe hidroxilasa HO, oe OL tas ™~ T° kw Aas ag 7 rartére: _piNére x H biopterina —_biopterina H ‘Triptéfano: + 5-Hidroxitriptéfano On Aminofcido aromatico: ewarbonase {> CO, Cdepeniete de PLP) Ho por H-NET " x cereal Figura 24-92 La serotonina se forma por la hidroxilacién y subsecuente descarboxilacién del triptéfano En un método reciente para el tratamiento del Parkin- son, una porcion de la médula adrenal del paciente es trasplantada quirargicamente a su cerebro. Presumi- blemente, la dopamina y L-DOPA liberada por este tejido sirva para reemplazar la que se ha perdido por la degeneracion de la substantia nigra, La -DOPA es también el precursor de la melanina. C. Glutation E] glutation (GSH; y-glutamilcisteinilglicina), « ee 7 H boo yGlutamileisteinilglicina lutation (GSE) tun tripéptido que contiene un enlace inusual y-amina, participa en una variedad de procesos metabolicos, de destoxificacion, y de transporte (Fig. 24-34). Por ejemplo, es un sustrato para las reacciones de la peroxidasa, ayudando a destruir los peréxidos gene- tados por las oxidasas; est implicado en la biosintesis, de los leucotrienos (Seccion 23-7C); y el balance entre sus formas reducida (GSH) y oxidada (GSSG) mantie- ne los estados de oxidacién correctos de los grupos sulfhidrilos de las proteinas intracelulares. El ciclo del y-glutamilo, que fue elucidado por Alton Meister, proporciona un vehiculo para el trans- porte, dependiente de energéa, de los aminodcidos hacia el interior de las células mediante la sintesis y ta degra- dacién del GSH (Fig. 24-35). El GSH se sintetiza a partir del glutamato, de la cisteina y de la glicina por la accion consecutiva de la y-glutamilcisteina sintetasa y la GSH sintetasa (Fig. 24-35, Reacciones 1 y 2). La hidrélisis del ATP proporciona la energia libre para758 Seccién 24-4. Los aminoscidos como precursores biosintéticos 10S) ef =cor as Tirosina ‘Tetrahidrobiopterina ‘Tirosina +03 hhidroxitasa “+ Dihidrobiopterina + HO HO, , ' Dihidroxifenilalanina (LDOPA) Aminosicido aromstico | 9 ‘desearboxilasa [> CO, HO, Ho. CH,—CH,—NH Dopamina, Dopamina | 02 * Ascorbato Bhidroxilasa \3 1,0 + Deshidroascorbato HO, on w{O)-¢ Norepinefrina Feniletanolamina /— S-Adenesilmetionina N-Metiltransferasa ‘S-Adenesithomocistefna HO, Ho: CH.) a cH; Epinefrina cada reaccién. El grupo carboxilo es activado para la sintesis del enlace peptidico mediante la formacion de tun acil fosfato intermediario. ADP ° 9 1 } i - R—C—o" + aTp—+ R—C—oPo? Figura 24-33 Sintesis secuencial de .-DOPA, dopamina, norepinetrina y epinetrina, a partir de tirosina. La \-DOPA’es tambien precursor del pigmento negro de la piel, la melanina, un ‘material polimérico oxidado. La degradacion del GSH es una reaccién catalizada por la y-glutamil transpeptidasa, la y-glutamil clotransferasa, la $-oxoprolinasa y una proteasa in- tracelular (Fig, 24-35, Reacciones 3-6). El transporte de aminoacidos tiene lugar porque mientras el GSH es sintetizado intracelularmente y esta localizado en su mayor parte dentro de la célula, la y-glutamil transpeptidasa, que cataliza la degradacion del GSH (Fig. 24-35, Reaccion 3), esta situada en la superficie externa de la membrana celular y acepta aminoacidos, en especial cisteina_y metionina. EL GSH primeramente es transportado a la superficie externa de la membrana celular donde ocurre la transferencia del grupo y-glutamilo del GSH a un aminoacido externo. El aminoacido y-glutamilo es en- tonces transportado nuevamente dentro de la célula y es convertido en glutamato en un proceso de dos etapas en el que se libera el aminoacido transportado y se forma la 5-oxoprolina como intermediario. El iltimo paso en el ciclo, la hidrolisis de la 5-oxoproli- na, requiere la hidrolisis del ATP. Esta observacion sorprendente (la hidrdlisis de un enlace amida es casi siempre un proceso exerg6nico) es una consecuencia del enlace interno amida, inusualmente estable, de la 5-oxoprolina. D. Cofactores del tetrahidrofolato: el metabolismo de las unidades C, Muchos procesos biosintéticos incluyen la adicion de una unidad C, a un precursor metabélico, Un ejemplo familiar es la carboxilacién. Por ejemplo, la SH 7 Proteina Proteina 27 2G8Ht ssa 4 B NaDP* NADPH Leucotrienos Figura 24-34 ‘Algunas reacciones en las que participa el glutation: (1) destoxificacién de peréxidos por ia glutation peroxidasa, (2) regeneracion del GSH a partir del GSSG por la glutation reductasa (Seccion 14-4), (3) modulacion del balance disulfuro-tiol en las proteinas por la tio! transferasa y (4) biosintesis de los leucotrienos por la ‘lutation-S-transterasa.Capitulo 24. Metabolismo de los aminodcidos 759 HyN—C—CH,—CH,—C ADP + Pi coo Grutation 2 are €H,—CO0 “= Nat 6 Cys-Gly Glicina 4 —clt,—CH, coo ie boo" y-GluCys a (He ADP + P, 1 are. P H.C— CH, i 7 \ CH “ooc—cH _o=0 i an coo H Gtutamato 5-Oxoprolina apps py ATP Figura 24-35 Sintesis del glutatién como parte del ciclo del y-glutamilo, del metabolismo del glutati6n. Las reacciones del ciclo estén catalizadas por: (1) y-glutamilcisteina sintetasa, gluconeogénesis a partir de piruvato comienza con la adicion de un grupo carboxilo para formar el oxalace- tato (Seccion 21-1A). El coenzima implicado en esta y ‘muchas otras reacciones de carboxilacién es la biotina (Geccién 21-1). En cambio, la S-adenosilmetionina funciona como un agente metilante (Seccion 24-2B). El tetrahidrofolato (THF) es mas versétil que tos cofactores anteriores en cuanto a que funciona para transferir unidades C, en varios estades de oxidacién. EL THE es un derivado de la 6-metilpterina unido se- cuencialmente a restos de acido p-aminobenzoico y glutamato (Fig, 24-36). Hasta cinco restos de Glu x TH on a Reg ® H 2-Amino-4-oxo.6-metilpterina P. Acido pteroico Figura 24-96 Tetrahidrofolato (THF). aminobenzol (2) glutation sintetasa, (3) 7-glutamil transpeptidasa, (4) y-glutamil ciclotransterasa, (5) 5-oxoprolinasa ¥y (6) una proteasa intracelular. adicionales pueden estar unidos al primer glutamato a través de enlaces isopeptidicos para formar una cola polighutamica. EI THF es un derivado del acide félico (del latin: fotium, hoja), una forma doblemente oxidada del THF que debe ser reducido enzimaticamente para conver~ tirse en un coenzima activo (Fig. 24-37). Ambas re- ducciones estan catalizadas por la dihidrofolato re- ductasa (DHFR). Los mamiferos no pueden sintetizar el acido folico por lo que debe ser provisto por la dieta © por los microorganismos intestinales. Las unidades C, estan covalentemente unidas al coo” tt g i thx —tu—cn,—cr—C on Acido pteroilglutamico (tetrahidrofolato; THF)760 Seccién 24-5. Biosintesis de los aminodcidos + H + H sage or sage ae i + HN. Nv a + HN? H LoRa gute eeu . ae i T ° N-R ° H wN—-R i ! (DHF) (THF) Reduccin en dos etapas del Acido folico al THF. Ambas reacciones son catalizadas por a ihidrofolato reductasa (DHFR) ‘THF en sus posiciones N(5), N(10), 0 en ambas. Estas unidades C,, que pueden encontrarse en un nivel de ‘oxidacién de formato, formaldehido o metanol (Tabla 24-1), son todas interconvertibles mediante reaccio- nes enzimaticas rédox (Fig. 24-38). La principal entrada de unidades C, al sistema THF es como NiN¥-metilén-THF a través de la conver- sign de serina a glicina por la serina hidroximetil transferasa (Secciones 24-3B y 24-5A) y la escision de la glicina por la glicina sintasa (el sistema de escision de la glicina; Seccién 24-38, Fig. 24-11). La histidina también contribuye con unidades C, mediante su de- gradacién con la formacién del N*-formimino-THF (Fig. 24-13, Reaccion 11). Una unidad C, dentro del sistema THF puede tener distintos destinos (Fig. 24-39): 1. Puede ser utilizada como N°,N'-metilén-THF en Ia conversion del desoxinucledtido (UMP a dTMP por la timidilato sintasa (Seccién 26-48). 2. Puede ser reducida a N*-metil-THF para la sinte- sis de metionina a partir de homocisteina (Seccion 24-38). 3, Puede ser oxidada a N"*-formil-THE, a través del N5.N"-metenil-THF, para ser usada en la sintesis de las purinas (Seccién 26-2A). Dado que el anillo purinico del ATP esté implicado en la biosintesis, de la histidina en microorganisms y plantas (Sec- cién 24-5B), el N"*-formil-THF esté indirectamente implicado en esta ruta también. Los procariotas usan N""-formil-THF en una reaccion de formila- cin que produce formilmetionil-tRNA, que nece- sitan para la iniciacién de la sintesis proteica (Sec- cin 30-3). Tabla 24-1 Las sulfonamidas (drogas sulfa) tales como la sul- fanilamida son antibisticos que son estructuralmente analogos del Acido p-aminobenzoico, constituyente del THE. Inhiben de forma competitiva la sintesis bacteriana de THF en el paso de la incorporacién del Acido p-aminobenzoico, bloqueando asi las reacciones que requieren THF antes mencionadas. La incapacidad de Jos mamiferos para sintetizar el acido félico los hace insensibles a las sulfonamidas, lo que explica la utili- dad médica de estos agentes antibacterianos 5. BIOSINTESIS DE LOS AMINOACIDOS ‘Muchos aminodcidos son sintetizados mediante rutas que estin s6lo presentes en las plantas y en los microor- ganismos, Dado que los mamiferos deben obtener es- tos aminodcidos de sus dietas, estas sustancias son conocidas como aminodcidos esenciales. Los otros aminoacidos, que pueden ser sintetizados por los ma- miferos a partir de intermediarios comunes, son de- nominados aminoacidos no esenciales. Los aminoa- cidos esenciales y no esenciales para el hombre se Niveles de oxidaci6n de los grupos C, transportados por el THF Nivel de oxidacion Grupo transportado Derivado(s) de THF Metanol Metil (-CH,) N8.Metil-THF Formaldehido Metileno (-CH.-) N5,N"°.Metilén-THF Formato Formil (-CH=0) N‘-Formil-THE, N° formil-THF Formimino (-CH=NH) Metenil (-CH=) N°-Formimino-THE N®.N1®-Metenil-THECapitulo 24. Metabolismo de los aminodcidos 761 1N.Rormil-THE sintetasa fj ae COs + ATP | ADP + Py Formato Figura 24-38 interconversion de unidades C, transportadas por el THF. 2 -NMILTHE =P mein SAMS . fosfatidicolina :NSNI0Metilén-THE 2 timbdiato (ATMP) N80? Meteni-THE {ormlmetionina tRNA Figura 24-39 10.pormi- THES Destino biosintético de las aed tinidades C, en el sistema THF. purinas—> histidina762 Seccidm 24-5. Biosintesis de los aminodcidos Tabla 24-2 Aminodcidos esenciales y no esenciales en el hombre Esenciales No esenciales Arginina’ Alanina’ Fenilalanina Asparagina Histidina Aspartato Isoleucina Cisteina Leucina Glicina Lisina Glutamato Metionina Glutamina Treonina Prolina Tript6fano Serina Valina Tirosina A pesar de que los mamiferos sintetizan arginina, usan la mayor parte para formar urea (Secciones 24-2D y E), muestran en la Tabla 24-2. La arginina esta clasificada como esencial, a pesar de que es sintetizada en el ciclo de la urea (Seccion 24-2D), porque se la necesita en mayor cantidad de la que puede producirse por esta ruta durante el crecimiento normal y el desarrollo del nitto (pero no para los adultos). Los aminoacidos esenciales se encuentran en las proteinas de los animales y vegetales. Proteinas dife- Tentes contienen, sin embargo, diferentes proporcio- nes de los aminoacidos esenciales. Las proteinas de la leche, por ejemplo, los contienen a todos en las pro- porciones requeridas para una nutricién humana ade- cuada. Las proteinas de las judias, por el contrario, contienen abundancia de lisina pero son deficientes en metionina, mientras que el trigo es deficiente en lisina pero contiene mucha metionina. Una dieta pro- teica equilibrada debe contener, por lo tanto, una variedad de diferentes fuentes de proteinas que se complementen mutuamente para suministrar las pro- porciones adecuadas de todos los aminoacidos esen- ales. En esta seccion estudiaremos las rutas implicadas en la formacién de los aminodcidos no esenciales. También consideraremos brevemente las rutas para Jos aminoacidos esenciales que tienen lugar en las plantas y en los microorganismos. Debe tenerse en cuenta, sin embargo, que aunque se discuten algunas de las rutas mas comunes para la biosintesis de los ° Q ° Q ° i w V = \ 1 - H,c—6—coo™ ‘—c1i,—C—coo ‘b—cH,—city-0—coo Piruvato © oxaincetato io aCetoglutarato Amino: Amino- Aino: Aminotransferasa [1 cido Aminotransferasa (q ido Aminotransferasa [g dcido a-0x0- @.0x0- @Oxo- feido tate feido Q i %. ree HsC—C—COO™ —COO™ Br Se Og ae Oe, Nat 2 i we tucamato Giutanina arr Gtutanina ar sineasa Asparagina aoe sinetasa AMP + PP; a a chuama (0H, ~G—coo OPO; NH} H ‘rGlucamtlfotato % cS Intermediario ‘— CHa C— COO NH HW NHS 5 Asparagina * Figura 24-40 u Ca sintosis dela alana, del aspartato, dl glatameto, dela ei, cn HL Goo asparagina y de la glutamina implcan, respectivamente, las 7 on Re, transaminaciones de (1) piruvato, (2) oxalacetato y HN Nut 8) a-cetogiutarato, y la amidacion de (4) aspartato Giutamiga: ¥ (5) glutamato.aminoacidos, existe gran variacién de las mismas en diferentes especies. Por el contrario, como hemos vis- to, las rutas basicas del metabolismo de los carbohi- dratos y de los lipidos son casi universales. A. Biosintesis de los aminoacidos no esenciales Todos los aminodcidos no esenciales excepto la tirosi- na son sintetizados mediante rutas simples a partir de uno de estos cuatro intermediarios metabdlicos comunes: piruvato, oxalacetato, a-cetoglutarato y 3-fosfoglicerato La tirosina, que esta realmente mal clasificada como no esencial, es sintetizada mediante la hidroxilacion de una etapa del aminodcido esencial fenilalanina (Geccion 24-3H). En efecto, los requerimientos de fe nilalanina en la dieta reflejan también la necesidad de tirosina. La. presencia de tirosina en la dieta hace disminuir, al mismo tiempo, la necesidad de fenilala- La alanina, la asparagina, el aspartato, el glutamato y la glutamina son sintetizados a partir de piruvato, oxalacetato y a-cetoglutarato El piruvato, el oxalacetato y el a-cetoglutarato son oxoacidos que corresponden a la alanina, al aspartato y al glutamato, respectivamente. En efecto, tal como hemos visto (Seccion 24-1), la sintesis de cada uno de estos aminoacidos es una reaccién de desaminacion de una etapa (Fig. 24-40, Reacciones 1-3). La aspara: gina y la glutamina son sintetizadas a partir del aspar- tato y del glutamato, respectivamente, por amidacion (Fig. 24-40, Reacciones 4 y 5). La glutamina sintetasa cataliza la reaccion de formacion de la glutamina en una reaccién en la que el amoniaco es el dador del grupo amino y el ATP se hidrotiza a ADP y P, a través, del intermediario y-glutamilfosfato (Fig. 24-40, Reaccién 5). Curiosamente, la amidacion del asparta to por lo asparagina sintetasa para formar aspara- gina sigue una ruta diferente; utiliza la glutamina como dador del grupo amino e hidroliza el ATP a AMP + PP, (Fig. 24-40, Reaccién 4) La glutamina sintetasa es un punto central de control en el metabolismo del nitrogeno La glutamina es el dador del grupo amino para la formacién de muchos productos biosintéticos (ver més adelante), asi como una forma de reseroa de amoniaco, La consecuente posicin central de la glutamina sinte- tasa en el metabolismo del nitrogeno hace de este enzima un excelente candidato para controlar el flujo metabolico de los compuestos nitrogenados, En efec- to, las glutamina sintetasas de mamiferos son activa das por a-cetoglutarato, el producto de la desamina ci6n oxidativa del glutamato. Este control presumible mente evita la acumulacion de amoniaco producido por esa reaccidn, La glutamina sintetasa bacteriana, como demostrd Earl Stadtman, tiene un sistema de control mucho mas elaborado. Este enzima, que consiste en 12 subu- Capitulo 24. Metabotismo de los aminodcidos 763 ® oy) Figura 24-41 Estructura por rayos-X de la glutamina sintetasa de ‘Saimonelia typhimurium. El enzima consiste en 12 subunidades identicas dispuestas con simetria D, (simetria de un prisma hexagonal). (a) Vista superior sobre el eje de simetria hexarradial, mostrando s6lo las seis subunidades del anillo superior en colores alternados azul y verde. Las subunidades del anillo inferior estan casi directamente ebajo de las del anillo superior. La proteina, incluyendo ‘sus cadenas laterales (que no se muestran), tiene un radio de 143A, Los seis sitios activos que se muestran estan ‘marcados por los pares de iones Mn** (esferas rojas; para la actividad del enzima se requiere un ion divalente metaiico, fisioldgicamente el Mg"). Cada sitio de adenillacion, Tyr 997 (rojo), se encuentra entre dos subunidades a un radio mayor del correspondiente al sitio. activo. (b) Vista lateral a Io largo de uno de los ejes bilaterales mostrando sélo las seis subunidades mas cercanas. La molécula se extiende 103 A a lo largo del eje hexarradial, que queda vertical en esta vista. Comparese estos diagramas con las micrografias electrénicas de la glutamina sintetasa (Fig. 7-59). [Cortesia de David Eisenberg, UCLA]764 Seccidn 24-5. Biosintesis de los aminodcidos ‘utamina sintetasa (menos activa) a-Cetoglutarato ATP. Glutamina Adenilitransferasa are on oH Figura 24-42 Regulacion de la glutamina sintetasa bacteriana mediante la adenillacion/desadenililacion de un resto especifico de ‘Tyr. El nivel de adeniliacion de la glutamina sinteasa esta controlado por el de uridiliacién de una adenilitransferasa ‘espacifica-P,- resto de tirosina, Este nivel de nidades idénticas de 51,6 kD dispuestas en los vérti- ces de un prisma hexagonal (Fig. 24-41), esta regula- do por varios efectores alostéricos asi como por modificacion covalente. Aunque aqui no se exponga una detallada descripcion de este enzima complejo, hay varios aspectos de su sistema de control que vale la pena considerar. Nueve inhibidores alostéricos por retroalimentaci6n, cada uno con su propio sitio de unién, controlan la actividad de 1a glutamina sintetasa bacte- riana de una manera acumulativa: la histidina, el trip- ” Uridililtransferasa : + Pu = ; S~ Enzima eliminador de uridililo Glutamina sintetasa (mds activa) Adenilitransferasa, Py ° v Uracilo O=P—0-GH o HH C2 0 H H on OH uridiilacién, a su vez, esta controlado por las actividades relativas de la uridilitransferasa, que es sensible a los niveles de una variedad de metabolites nitrogenados, y del enzima eliminador de urdillo, cuya actividad es independiente de los niveles de esos metabolitos. tofano, el carbamoil fosfato (tal como Io sintetiza la carbamoil fosfato sintetasa Il), la glucosamina-6- fosfato, el AMP y el CTP son todos productos finales de rutas que comienzan en la glutamina, mientras que la alanina, la serina y la glicina reflejan el nivel de nitrogeno en la célula. La glutamina sintetasa de E. coli es modificada cova- lentemente por adenililacién de un resto especifico de tirosina (Fig. 24-42). La susceptibilidad del enzima ala retroinhibicién acumulativa aumenta y, por lo tanto,su actividad disminuye con el grado de adenililacion. EI nivel de adenililacion es controlado por una com- pleja cascada metabélica que es conceptualmente milar a la que controla la glucogeno fosforilasa (aun- que el tipo de modificacién covalente difiere en que la glucdgeno fosforilasa es fosforilada en un resto espe- Gifico de serina; Secciones 17-3B y C). Tanto la adeni- lilacién como la desadenililacién de la glutamina sin- tetasa estén catalizadas por la adenililtransferasa en complejo con una proteina reguladora tetramérica, la Py, Este complejo desadenilila la glutamina sinteta- sa cuando la P, es uridililada (también en un resto de tirosina) y adenilila la glutamato sintetasa cuando la P, carece de los restos de UMP. El nivel de uridili- lacién de Py, a su vez, depende de las actividades relativas de dos actividades enziméticas localizadas en la misma proteina: una uridililtransferasa que uridilila la Py y el enzima eliminador del uridililo que quita hidroliticamente los grupos UMP unidos a la Py (Fig. 24-42). La uridililtransferasa es activada por el d-cetoglutarato y por el ATP e inhibida por la glutamina y el P,, mientras que el enzima eliminador de uridililo es insensible a estos metabolitos. Esta compleja cascada, por lo tanto, hace que la actividad de la glutamina sintetasa de E. coli sea extremada- mente sensible a las necesidades de nitrogeno por parte de la célula. El glutamato es el precursor de Ja prolina, la ornitina y la arginina La conversion de glutamato a prolina (Fig. 24-43, Reacciones 1-4) tiene como consecuencia la reduccion del grupo y-carboxilo a aldehido seguida de la forma- cion de una base de Schiff interna, cuya reduccion posterior produce la prolina. La reduccién del grupo ‘y-carboxilo a aldehido es un proceso endergénico que es facilitado por la previa fosforilacién del grupo car- boxilo por la y-glutamil quinasa. El producto inest ble, el glutamato-5-fosfato, no ha sido aislado a par- tir de las mezclas de reaccién pero se supone que es el, sustrato de la siguiente reduccién. El glutamato-5- semialdehido resultante adopta espontaneamente la forma ciclica para formar la base de Schiff intema A}-pirrolina-5-carboxilato. La reduccién final a pro- lina es catalizada por la pirrolina-5-carboxilato re- ductasa. No queda claro si el enzima requiere NADH. o NADPH. La ruta en E. coli de glutamato a omnitina y de alli a arginina implica, de manera similar, la reduccion de- pendiente de ATP del grupo y-carboxilo del glutama- to a aldehido (Fig. 24-43, Reacciones 6 y 7). La adop- cién espontanea de la forma ciclica de este interme- diario, N-acetilglutamato-5-semialdehido, se evita mediante la previa acetilacion de su grupo amino por la N-acetilglutamato sintasa para formar N-acetil- glutamato (Fig. 24-43, Reaccién 5). El N-acetilgluta- mato-5-semialdehido es convertido, a su vez, en'la correspondiente amina por transaminacion (Fig. 24- 43, Reaccion 8). La hidrolisis del grupo acetilo protec- tor produce finalmente la ornitina, la que, como he- Capitulo 24. Metabolismo de los aminoécidos 765 mos visto (Seccién 24-2), se convierte en arginina a través del ciclo de la urea. En el hombre, sin embargo, la ruta a la omitina es més directa. No tiene lugar la N-acetilacion del glutamato que lo protege de la adopcién de la estructura cictica. En cambio, el gluta- mato-5-semialdehido, que est en equilibrio con el ‘Al-pirrolina-5-carboxilato, es directamente transami- nado para producir ornitina en una reaccién cataliza- da por la ornitina-8-aminotransferasa (Fig. 24-43, Reaccién 10). La serina, la cisteina y la glicina derivan del 3-fosfoglicerato La serina se forma a partir del intermediario gluco- litico 3-fosfoglicerato mediante una ruta de tres reac- ciones (Fig. 24-44): 1. La conversi6n del grupo 2-OH del 3-fosfoglicerato en una cetona produciendo el 3-fosfohidroxipiru- vato, el oxodcido fosforilado andlogo de la serina. 2. La transaminacion del 3-fosfohidroxipiruvato a fosfoserina. 3. La hidrolisis de la fosfoserina para producir serina, La serina participa en la sintesis de la glicina de dos maneras (Seccién 24-38): 1, Conversion directa de Ja serina en glicina por la serina hidroximetil transferasa en una reaccién que también produce N',N'°-metilén-THF (Fig, 24-9; Reacci6n 4 inversa). 2. Condensacién del N3,N"°-metilén-THF con CO, y NH; por la glicina sintasa (Fig. 24-9; Reaccién 3 in- versa). Ya hemos discutido la sintesis de la cisteina a partir de la serina y de la homocisteina, un producto de degradacién de la metionina (Seccién 24-3E). La ho- mocisteina se combina con la serina para producir cistationina, la que subsecuentemente forma cisteina y a-cetobutirato (Fig. 24-14, Reacciones 5 y 6). Dado que el grupo sulfhidrilo de la cisteina deriva del ami- noacido esencial metionina, la cisteina es en realidad tun aminoécido esencial, B. Biosintesis de los aminoacidos esenciales Los aminoacidos esenciales, como los no esencia- les, son sintetizados a partir de precursores metabéli- cos comunes. Sin embargo, sus rutas sintéticas s6lo estan presentes en los microorganismos y en las plan- tas, y normalmente incluyen més pasos que las de los aminoécidos no esenciales. Por ejemplo, la lisina, la metionina y la treonina se sintetizan todas a partir del aspartato mediante rutas cuya primera reaccién co- miin es catalizada por la aspartoquinasa, un enzima que s6lo esta presente en las plantas y en los microor- ganismos. De manera similar, la valina y la leucina se forman a partir del piruvato, la isoleucina a partir del piruvato y del a-cetobutirato, y el triptofano, la fenila-766 Seccién 24-5. Biosintesis de los aminodcidos oct foo cet —cor SiatesteSsefnie ifpesainsc bs N-Acetilglutamato-5-semialdehido Glutamato Glutamato @Cetoglutarato a Cetoglutarato + I _ 88 CH, CH,— CHC COO" NH (i 1 cH N-Acetitornitina oe cH COO™ 4 $c ccf 000" NHS rain 1 Ciclo de la urea tiesroarreeigrs esiisam al pee is en PRCT la ae Ebeeaneene& . . i . 768 sspararo cH —¢—coo ri . Nag Hye—eH—C—coo™ ATP OH NHt i ‘Treonina aor 4 ce PCH; C—COO™ HO “0,00! ae x Aspartitpfostato geo —c00" NaDPit b—po} tat NaDPt + P; Fosfohomoserina Q H NS I - ‘ADP CH C— Coo NADPH 4 Piruvato. wf Aut ATP . NADP . Jo Semialdehido del fraspartato CHy—CH,—| oH OH o~ coo I i -00c—¢—cH,—C—CH,—¢—Coo™ on Nag i ust Homoserina ° H Nu Succinik Cos ; ohne an : NADPH NADP* il ene OL onan ‘0c ‘coo 7m ‘00c” SN~ ~coo” O—Suc NET Dihidroptcotinato ALPiperidine. O-Suceinithomoserina 2,6-dicarboxllato Getetna a Suecinil-CoA + 1,0 7 i Suceinato H ; lee a T" @Cetoglutarato —Glutamato mace S—CH,— CH,—C—Coo f H—G—Nut wat ~o0c” Nu, coo” 1 2 Ns tH COO” Te a Comin NSucetnttite NSuccinit amino inmate wt, =2 cdleming. eectopimelato pimelato z 0 Hs~cH,—cits~¢—coo™ a : ‘Succinato at Homocisteina goo G7 at coy NewenTHE NHS—0—H H—-C—NHy cn,—Nut 15 1 VS 1 ‘THE Gis (CHy)s, 16 (GAs H-C—NHy HOG—Nat wut cs i’ H.0—$— chy city 6— 000" coo" boo" boo LuvaeDiamin- —mesouie dlamino- Nat pimelato pimelato sina Metionina Figura 24-45 (2) homocisteina mettransferasa (que también existe on Biosintesis de los aminodcidos de a “familia del aspartato’ la lisina, la metionina y la treonina. Los enzimas de la ruta son (1) aspartoquinasa, (2) semialdehido del B-aspartato deshidrogenasa, (3) homoserina deshidrogenasa, (4) nomoserina quinasa, (5) treonina sintasa (un enzima de PLP), (6) homoserina aciltransferasa, () cistationina-7-sintasa, (8) cistationina-f-llasa, los mamiferos; Seccién 24-3E), (10) dihidropicolinato sintasa, (11) A'-piperidina-2,6-dicarboxilato deshidrogenasa, (12) N-succinil-2-amino-6-catopimelato sintasa, (13) succini-diaminopimelato aminotransferasa (un enzima de PLP), (14) succini-diaminopimelato desuccinilasa, (15) ciaminopimelato epimerasa y (16) diaminopimelato descarboxilasa.769 es Sonn + - tot 7 = g--000- inti iho ttiee ono? =k mob -4—000 ; Hyo=0— COO" s eb las Ea i Pome cas eo. : : i x00 TPP bs git sso gf 000" eee ae Bee ; al f Hs We BaC—G-"G COO ened f [son ae N+ napey* NADKP)* a ey ee yy Hyc—¢—C—Coo™ Hye—0—C—cH, C00 Hyo—0—6— coo" «,8-Dihidroxi- @leoprepiimalato «,8-Dihidroxi- ‘isovalerato Acetil-CoA | B-metilvalerato zi wk no Sob ng ur Kno ° Hye—¢—C—cHh—COo™ is iat HOH OH ae Hye BHsopropilmalato Hsc—C—C— COO HyC—C—C—Coo™ Ce HO ie a-Ceto-p- a o NADH + Oz metilvalerato: Eoeeconnas ae cee one wet —cmyng— oo ; Cetogutarato iM i e-Cetogutarato. pecrereae om eats eo pie wo oo e-coopuarae went) cor i HO ONHT Hat ae HO ONHT ra noha oor roe H NH ae Biosintesis de los aminodcidos de la “familia del piruvato": la isoleucina, la leucina y la valina. Los enzimas de la ruta son (1) acetolactato sintasa (un enzima de TPP), (2) acetolactato mutasa, (8) reductasa, (4) dihidroxi eshidratasa, (5) valina aminotransferasa (un enzima de enzima de PLP). PLP), (6) a-isopropiimalato sintasa, (7) a-isopropiimalato deshidratasa, (8) isopropilmalato deshidrogenasa, (@) leucina aminotransterasa (un enzima de PLP) ido. y (10) treonina desaminasa (serina deshidratasa, un770 Seccién 24-5. Biosintesis de los aminodcidos Fosfoenol- piravato (PEP) Eritrosa fosfato 2.Ceto-3-desoxiarabino- heptulosonato7. fosfato (DAHP) ~40,P—0- HO no Siquimato-5- fosfaco Figura 24-47 Biosintesis det corismato, el precursor de los aminoacidos aromaticos. Los enzimas que intervienen en la ruta son (1) 2-ceto-3-desox-o-arabinoheptulosonato-7-fosfato sintasa, (2) deshidroquinato sintasa (una reaccién que requiere NAD* produciendo un NAD* no modificado y que 8, por lo tanto, un indicativo de un intermediario con el TPP, que es descarboxilado a hidroxietil-TPP. Este carbanién estabilizado por resonancia se afiade al grupo ceténico de un segundo piruvato para formar acetolactato en la via de la valina, 0 el grupo cetonico del a-cetobutirato, derivado de la treonina, para for- mar el a-aceto-t-hidroxibutirato en la via de la iso- leucina. La ruta biosintética de la leucina se ramifica de la ruta de la valina en el a-cetoisovalerato (Figu- 1a 24-46, Reaccién 6). Las Reacciones 6 a 8 en la Figura 24-46 son reminiscencias de las tres primeras teacciones del ciclo del Acido citrico (Secciones 19- 3A-C). El acetil-CoA se condensa con el a-cetoi valerato para formar el a-isopropilmalato, que luego “Ce SHs\\ apt m+ wapt HA, 000 ¢—H —-on u—t—on ne ee eae 5.Deshidroquinato coo" XH HO Oh HO OH Siquimato BDeshidrosiquimato tm 0-600" Corismato ‘oxidado como ocurre en la reaccién de la UDP-galactosa-4-epimerasa; Seccién 16-58), (8) 5-deshidroquinato deshidratasa, (4) siquimato deshidrogenasa, (6) siquimato quinasa, (6) 3-enolpiruvilsiquimato-5-fosfato sintasa y (7) corismato sintasa. sufre una reaccién de deshidratacién/hidratacion se- guida de una descarboxilacion oxidativa y una transa~ minacién para producir leucina, Los aminoacidos aromaticos: la fenilalanina, la tirosina y el triptéfano Los precursores de los aminodcidos aromaticos son los intermediarios glucoliticos fosfoenolpiruvato (PEP) y eritrosa-4-fosfato (un intermediario en la ruta de las pentosas fosfato; Seccién 21-4C). Su condensa- cion forma el 2-ceto-3-desoxi-p-arabinoheptuloso- nato-7-fosfato, un compuesto de C; que adopta una estructura ciclica y finalmente se convierte en coris-Capitulo 24. Metabolismo de los aminodcidos 71 “000, ,cH,—¢—coo™ — Corismato Glutamina, i - 1 Nap’ OH” + CO, Piruvato + Glutamato CO, + NADH- 8 10 coo" 9 ° NH, i _ i - GH,—C— coo” CH,—C— coo” Antraniiato 5-Fosforribosl- pirofosfato (PRPP) | 9 PP, on - ‘4Hidroxifenll- Fenilpiruvato oor) piruvato Giutamato: Glutamato -%0,P—0—CHy 9 HN ° aa e-Cetoglutarato eCotoglutarato BH 8 H ‘ a HO On Tees Ve N&S"Fostorribosil cH,—C—coo gits-E— C00 antranilato Ant Mae 3 > OH OH coo HO—C—C—G—CHs— OFOF oe Tirosina Fenilalanina CoH H NOH a Enol--o-carboxifenilamino- > Tedesoxirribulosa fostato . HO 4 co; 2 Gliceraldehido- af ” oa a ‘Sfosfato. Serina HyO CHy —o= coo c—¢—C—cH,—oPoe- yA } say tir a 4 weg eH Bi Indot t6fano Indol-3-glicerol dol 1 ts fosfato Figura 24-48 - Biosintesis de la fenilalanina, del triptétano y de la tirosina ‘mato (Fig. 24-47), el punto de ramificacion para la @ partir del corismato, Los enzimas de la ruta son sintesis del triptofano. El corismato se convierte en (1) antranilato sintasa, (2) antranilato-tosforribosit antranilato y luego a triptofano, o en prefenato y transterasa, (3) N{S-fostornbosi-antraniato isomerasa, _—Iuego en tirosina 0 fenilalanina (Fig. 24-48). A pesar (8) indol-3-glicerol fosfato sintasa, (8) triptofano. i \ Pesar sintasa, subunidad a, (6) triptéfano sintasa, subunidad fj, de que los mamiferos sintetizan tirosina por hidroxi @) corismato mutase, (8) prefenato deshidrogenasa, lacién de la fenilalanina (Seccién 24-3H), muchos {8) aminotransferasa, (10) prefenato deshicratasa microorganismos Ja sintetizan directamente a partir ¥y (11) aminotransferasa, del prefenato.772. Secci6n 24-5. Biosintesis de los aminoacidos Un tunel de proteina canaliza el producto intermediario de la tript6fano sintasa entre dos sitios activos Las dos reacciones finales en la biosintesis del trip- tofano, las Reacciones 5 y 6 en la Fig. 24-48, son catalizadas ambas por la triptéfano sintas 1. La subunidad a (29 kD) de este enzima bifuncional af, escinde el indol-3-glicerol fosfato producien- do indol y gliceraldehido-3-fosfato (Reaccion 5). 2, La subunidad f (43 kD) une al indol con la L-serina en una reaccién dependiente del PLP para formar L-triptofano (Reaccion 6). Cada una de las subunidades por si sola es enzimati- camente activa pero, cuando se unen en el tetramero aap, las velocidades de las dos reacciones y las afini- dades de los sustratos aumentan en 1 0 2 drdenes de magnitud. El indol, el producto intermediario, no aparece libre en la solucion: aparentemente el enzima lo secuestra, La estructura de rayos-X de la tript6fano sintasa de Salmonella typhimurium, determinada por Craig Hyde, Edith Miles y David Davies, explica esta tiltima observacion. La proteina forma un complejo a-B-B-a de 150 A de largo, con doble simetria (Fig. 24-49) en cl que los sitios activos de las subunidades a y B vecinas estan separados por ~ 25 A. Estos sitios acti- vos estin unidos por un tiinel leno de solvente que es suficientemente ancho para contener al sustrato interme- diario, el indol. Esta estructura sin precedentes sugiere Ja siguiente serie de eventos. El sustrato indol-3- glicerol fosfato se une a la subunidad a a través de tuna abertura en su sitio activo, su “puerta principal”, y el producto gliceraldehido-3-fosfato se va mediante ia misma ruta, De manera similar, el sitio activo de la subunidad tiene una “puerta principal” abierta al solvente, a través de la cual entra la serina y sale el triptofano. Ambos sitios activos también tienen puertas traseras” que estén conectadas por un tunel. Presumiblemente, el indol intermediario difunde en- tre los dos sitios activos a través del tiinel y asi no escapa al solvente. Fste fendmeno, en que el intermediario de dos reacciones se transfiere directamente del sitio activo de un enzima al sitio activo de otro, se llama canaliza- cién (el término “tunelizacion” se reserva para ciertos fenémenos de la mecanica cudntica). La canalizacion aumenta la velocidad de una ruta metabolica ya que impide la pérdida de los productos intermediarios al mismo tiempo que protege de la degradacion a ese intermediario. Hemos visto un fen6meno similar en la serie de reacciones catalizadas por la acido graso sin- tasa en las que el producto creciente se mantiene en la vecindad del sitio activo del enzima multifuncional mediante union covalente al brazo flexible de fosfo- panteteina del enzima (Seccién 23-4C). La canaliza- cin esta también implicada en la biosintesis de mu- cchas etapas de las purinas y las pirimidinas (Seccion 26-3A). Figura 24-49 Estructura de rayos-X del enzima bifuncional tript6fano sintasa de S. typhimurium representada por su superficie molecular. Sélo se muestra una unidad af de este heterotetramero u,[, doblemente simétrico: los puntos azules dibujan la superficie de la subunidad a (268, restos), los puntos turquesa dibujan la superficie de la subunidad ( (397 restos) y los puntos amarillos muestran la interfase entre las dos subunidades adyacentes. El sitio activo de la subunidad a queda localizado por la union de su inhibidor competttvo, el indolpropano! fosfato (superficie de puntos rojos'a la derecha), mientras que el de la subunidad ff esta marcado por su coenzima. el PLP. (superficie de puntos amarilios y rojos a la izquierda). El tunel” que conecta los sitios activos de las subunidades a y B. a través del cual se cree que pasa hacia la subunidad ei indo\, producto de la reaccién de la subunidad a, esta remarcado en verde. [Cortesia de Craig Hyde, Edith Miles y David Davies, NIH] Biosintesis de la histidina Cinco de los seis atomos de C de la histidina deri- van del 5-fosforribo: rofosfato (PRPP; Fig. 24- 50), un intermediario también implicado en la biosin- tesis del triptofano (Fig. 24-48, Reaccion 2), de los nucleotides purinicos (Seccién 26-2A) y de los nu dlestidos pirimidinicos (Seccién 26-3A). El sexto car bono de la histidina se origina del ATP. Los atomos del ATP que no se incorporan a la histidina son eliminados como 5-aminoimidazol-4-carboxamida ribonuclestido (Fig. 24-50, Reaccion 5), que es tam~ bien un intermediario en la biosintesis de las purinas (Geccion 26-24), La biosintesis inusual de la histidina a partir de una purina ha sido citada como una evidencia a favor de que la vida se basaba originariamente en el RNA Geccién 1-4C), Los restos de histidina, como hemos visto, son componentes frecuentes de sitios acti- vos de enzimas donde actitan como nucledfilos y/o catalizadores generales para reacciones acido-base. El reciente descubrimiento de que el RNA puede tenerCapitulo 24. Metabolismo de los aminodcidos 773 i ca we + INE 1 Bommt“0-O-® : HO OH Fibosa—B-O—® &-Fosforribosila- ate pirofosfato (PREP) 1, az N= ribos—®—-B—® 0 PP, eh DF . 0p-0-c8, ea N1.8-Fosforribostl ATP [N1.8:Fosforribosil-AMP af Ho ‘Ala sites de las purinas a NZ y—riosa | 7~n— ribosa—B Nv UN —® aN % fan ~ N7~y—ribosa—® uw) Hn a mde moreno HNC NH, HOG—H KH We 5 Aminotmidazol- ae nome h ‘tearboxamida oe uo on shomaeleociao HoiE—0 ¥4.-Fostorribosiforminine H=¢—on S-aminoimidazold- 1 CH,OPO;” ‘carboxamida ribonucléotide Glusmina—_N45"Fostorribulositformimino S-aminoimidazols- Glutarato carboxamide ribonneléotido Imidazol glicerol fosfato oR, ; K x x. N x aoN ae“Ny \ Ae Jew : ik 1 you . iow Can7 Ghutamilo acetoglutarato PNY ROP Pi NADY 2NADH) © Oy’ fae gy, LD Git dat c=0 7 HO+NH} 8 BONES 9 HC—NH} 1 eas . G1,0P0%- Gi,0P03 bi,on boo Imidazol acetol stidinol ellsidinot istidina fosfato fostato Figura 24-50 Biosintesis de la hstidina. Los enzimas de la ruta son ()ATP fostorribosi transterasa, (2) pirofosfohidrolasa, {@) fosforibosiLAMP ciiohidroiasa, {@)fosforiboslformimino-5-aminoimidazol carboxamida ribonuctéotido isomerasa, (5) glutamina amidotransferasa, (6) imidazol glicerol fosfato deshidratasa, (7) L-hstidinol fosfato aminotransferasa, (8) histidinol fosfato fosfatasa, {9) histidinot deshidrogenasa.‘774 Seccién 24-6. Fijacién del nitrégeno propiedades cataliticas (Seccién 29-4C) sugiere, por lo tanto, que la parte imidazélica de las purinas juega un papel similar en estos enzimas de RNA (ribozimas). Esto refuerza atin mas la hipétesis de que la ruta biosintética de la histidina es un “fésil” de la transi cién hacia formas de vida més eficientes basadas en las proteins. 6. FIJACION DEL NITROGENO Los elementos quimicos mas abundantes en los sistemas vivos son O, H, C, N y P. Los elementos O, Hy P son abundantes en formas asequibles metaboli- camente (H,0, O, y P). Sin embargo, las principales formas aprovechables de C y N, el CO, y el Nz, son extremadamente estables (no reactivos); por ejemplo, el triple enlace N =N tiene una energia de enlace de 945 kJ: mol" (frente a los 351 Kj-mol para un enlace sencillo C-O). El CO,, salvo menores excep- ciones, s6lo es metabolizado (fijado) por los organis- mos fotosintéticos (Capitulo 22). La fijacién del N, es aun menos comiin; este elemento s6lo es convertido a formas metabolicamente utilizables por unas pocas cepas de bacterias. Las bacterias fijadoras de nitrogeno del género Rhi- zobium viven en una relacién simbidtica con células de los nédulos de las raices de leguminosas (plantas que pertenecen a la familia de los guisantes que inclu- ye a las judias, el trébol y la alfalfa) donde convierten, N, a NH, N, + 8H? + 8e" + 16ATP 2NH, + H; + 16ADP + 16P, EI NH, asi formado puede tanto ser incorporado al glutamato por la glutamato deshidrogenasa (Seccin 24-1) 0 a la glutamina por la glutamina sintetasa (eccién 24-5A). Este sistema fijador de nitrogeno produce mas nitrogeno util del que la leguminosa necesita; el exceso es excretado al suelo, enriquecién- dolo, Es por lo tanto comin en la practica agricola plantar un campo con alfalfa cada pocos afios para acumular reservas de nitrégeno util en el suelo para el ‘uso posterior por parte de otros cultivos. La nitrogenasa contiene varios centros rédox La nitrogenasa, que cataliza la reduccién del N, a NH,, consiste en dos proteinas: 1. La proteina MoFe, una proteina de ~ 200 kD, con una estructura en subunidades a8; que contiene Fe y Mo. 2. La proteina Fe, un dimero de subunidades idénti- cas, de ~ 64 KD que contiene Fe. Gran parte del Fe de estas proteinas esta contenido en grupos [4Fe-45] (Seccién 20-2C). La proteina Fe con- tiene un grupo [4Fe-45] en cada dimero y dos sitios de unin al ATP, mientras que la proteina MoFe contie- ne cuatro grupos [4Fe-45] junto a dos grupos que Figura 24-51 Fotografia de nddulos de las raices de Ia leguminosa trébol ‘en pie de pajaro. [The Nitragin Co., Inc.] contienen Mo de estructura desconocida pero que se cree que tienen Ia composicién (6Fe-Mo-65} La nitrogenasa se inactiva rapidamente por O; por o que el erzima debe estar protegido de esta sustan- ia reactiva. Las cianobacterias (bacterias fotosinteti- cas que desprenden oxigeno; Seccién 1-1A) le propor- cionan proteccion levando a cabo la fijacion del ni- trégeno en células especializadas no fotosintéticas lla~ madas heterocistos, que tienen el Fotosistema I pero carecen del Fotosistema II (Seccién 22-2C). En los nodulos de las raices de las leguminosas (Fig, 24-51), sin embargo, la proteccién se consigue mediante la sintesis simbidtica de la leghemoglobina. La porcion globina de esta proteina monomérica que une oxige- no es sintetizada por la planta (una curiosidad evolu- tiva dado que las globinas, excepto en este caso, s6lo existen en los animales) mientras que el hemo es sintetizado por el Rhizobium. La leghemoglobina tiene una afinidad muy alta por el Oz, dejando la pO, suficientemente baja como para proteger a la nitroge- nasa mientras que proporciona un transporte pasivo de O, para la bacteria aerobia. La reducci6n del N; es energéticamente costosa La fijacion de nitrogeno tiene otros dos requeri- mientos ademas del N, y la nitrogenasa: (1) una fuente de electrones y (2) ATP. Los electrones son generados oxidativa 0 fotosintéticamente, segin el ‘organismo. Estos electrones son transferidos a la fe- rredoxina, un transportador de electrones que contie- ne [4Fe-45] y que transfiere un electron a la proteina Fe de la nitrogenasa, comenzando el proceso de fija-Capitulo 24. Metabolismo de los aminodcidos 775 2ADP + 2P; (Ferridoxina)isg (Protetna Fe),, | (Proteina MoFe)mqy Ny + 8H* ‘Transporte de lectrones oxidative 0 fotosintético (Perridoxina)oy, (Provetna Fe)pa (Proteina MoFe),, \ 2NHa+ Ha 2ATP, i) 8 veces Figura 24-52 Fiujo de electrones en la reduccién del Np catalizada por la nitrogenasa, Gin del nitrogeno (Fig. 24-52). Dos moléculas de ATP se unen a la proteina Fe reducida y son hidroli- zadas cuando el electron es pasado de la proteina Fe a Ia proteina MoFe. Se piensa que la hidrdlisis del ATP provoca un cambio conformacional en la proteina Fe que altera su potencial rédox de -0,29 a -0,40 V, haciendo al electron capaz de la reduccién del Nz (2° para la célula media N, + 6H* == 2NH, es, 0,34 V) La reduccién real del N, tiene lugar en la proteina MoFe en tres etapas discretas, implicando a un par de electrones cada una: 2H" em 2H" 2c 2H Dem HOW \ 7 H-N=N—H N-N 2NHy ams HOR Diimina Hidrazina Por cada molécula de N, fijada deben ocurrir seis transferencias de electrones de manera que se requie- ren 12ATPs para fijar una molécula de N,. Sin embar- go, la nitrogenasa también reduce 21 H,O a H,, el que, a su vez, reacciona con la diimina para volver a formar N,. HN-NH + H, -» N; + 2H, Este ciclo fiitil es favorecido cuando los niveles de ATP son bajos y/o la reduccién de la proteina Fe es lenta. Sin embargo, incluso cuando hay abundancia de ATP, el ciclo no puede suprimirse por completo mas alld de alrededor de una molécula de H, produci- da por N, reducido. El coste total de la reduccién del Resumen del capitulo Los aminodcidos son los precursores para numerosos ‘compuestos que contienen nitrogeno tales como el hemo, las aminas fisiolégicamente activas y el glutation. El exceso de aminodcidos es convertido en intermediarios metabo ‘cos comunes para su uso como combustible. El primer paso N; es, por lo tanto, de 8 electrones transferidos y 16 ATPs hidrolizados. Asi, la fijacion del nitrogeno es un proceso energéticamente caro; en efecto, las bacterias fijadoras de nitrogeno en los nédulos de las rafces de Jas plantas de guisantes consumen cerca del 20 % del, ATP que la planta produce. Mientras que el N, atmosférico es la fuente ultima de nitrégeno para todos los seres vivos, muchas plan- tas no mantienen el crecimiento simbidtico de bacte- tias fijadoras de nitrogeno. Deben por lo tanto depen- der de una fuente de nitrégeno “prefijado” como el nitrato o el amoniaco. Estos nutrientes vienen de la degradacién de la materia orgénica en el suelo o de fertilizantes aplicados a él. El proceso Haber, que fue inventado por Fritz Haber en 1910, es un proceso quimico para la fijacion del N; que es todavia muy utilizado en la fabricacién de fertilizantes. Esta reduc- ion directa del N, por H; para formar NH, requiere una temperatura de 500 °C, una presion de 300 atm, y el hierro como catalizador. Uno de los principales “objetivos a largo plazo de la ingenieria genética (Sec- cin 28-8) es inducir a las plantas agricolamente utiles que no son leguminosas a fijar su propio nitrégeno, una empresa compleja en la que la planta debe pro- veer un medio ambiente hospitalario para la fijacion del nitrogeno asi como adquirir la maquinaria enzi- matica para hacerlo. Esto liberaria a los agricultores, especialmente a los de paises en desarrollo, de la necesidad de proveerse de fertilizantes, de dejar des- cansar tos campos (dando oportunidad de crecer a las leguminosas), 0 de seguir las técnicas de quema que répidamente estan destruyendo las selvas tropicales y contribuyen de forma significativa al efecto inverna- dero (contaminacién atmosférica con CO, que causa un calentamiento global a largo plazo). ‘en la degradacion de los aminoacidos es la eliminacién del grupo c-amino por transaminacion, Las transaminasas re- quieren el fosfato de piridoxal (PLP) y convierten los ami- nodcidos en sus comespondientes a-oxoicides. El grupo amino es transferido a a-cetoglutarato para formar glutama-776 Bibliografia to, a oxalacetato para formar aspartato, 0 a piruvato para formar alanina. Después el glutamato es desaminado oxida- tivamente para dar amoniaco y regenerar el a-cetoglutarato, En el ciclo de la urea, los grupos amino del amoniaco y del aspartato se combinan con HCO; para formar urea. Esta ruta tiene lugar en el higado, parcialmente en la mitocon- dria y en el citosol. Comienza con la condensacién del NH} y el HCO}, dependiente de ATP, por la carbamoil fosfato Binteasa, El carbamoil fosfato resultante se combina con la comitina para producir citrulina, la que se combina con aspartato para formar argininosuccinato, el que, a su vez, es escindido a fumarato y arginina. La arginina es luego hidro- lizada a urea, que es excretada, y omitina, que vuelve @ entrar al ciclo dela urea, El N-acetilglutamato regula el ciclo de la urea activando a la carbamoil fosfato sintetasa. Los a-oxoicidos producto de las reacciones de transami- nacién son degradados a intermediarios del ciclo del icido ditrico 0 sus precursores. Los aminodcidos leucina y lisina son cetogenicos en cuanto a que sélo son convertidos en precursores de los cuerpos eet6nicos acetl-CoA y acetoace- tato, Los demas aminoacidos son, al menos en parte, gluco- {génicos en cuanto a que son convertidos en precursores de la glucosa como el piruvato, el oxalacetato, el a-cetoglutara- to, el succinil-CoA yy el fumarato. La alanina, la cisteina, la slicina, la serina y la treonina son convertides en piruvato La serina hidroximetil transferasa cataliza la escisin, de- pendiente del PLP, del enlace C,-Cy de la serina para formar glicina. La reaccién requiere tetrahidrofolato (THF) para actuar como aceptor de la unidad de C,. La asparagina Y el aspartato se convierten en oxalacetato, El a-cetoglutara- to es el producto de la degradacién de la arginina, del glutamato, de la glutamina, de la histidina y de la protina, Ta metionina, la isoleucina y la valina son degradados a succinil-CoA. La degradacién de la metionina implica la sintesis de S-adenosilmetionina (SAM), un ion sulfonio que actia como dador de metilo en muchas reacciones biosinté- ticas. La enfermedad de la orina de jarabe de arce es causa- da por un defecto hereditario en la degradacién de los aminodcidos de cadena ramificada, Las ritas de degrada- ion de los aminodcidos de cadena ramificada contienen Bibliografia General Bender, David A., Amino Acid Metabolism, Wiley (1985). Stanbury, J. B, Wyngaarden, J. B, Fredrickson, D. S. Goldstein, J. L. y Brown, M. S. (Eds.), The Metabolic Basis of Inherited Disease (5 ed), Capitulos 11-28, 60 y 61, McGraw-Hill (1983), Walsh, C., Enzyme Reaction Mechanisms, Capitulos 24 y 25, Freeman (1979). [Discute reacciones que involucran a los cofactores PLP, THF y SAM] Desaminaci6n de los amin ciclo de la urea dos y el Braunstein, A. E., Amino group transfer, en Boyer, P.D. (Ed), The Enzymes (3. ed.), Vol. 9, pp. 379-482, Academic Press (1973). reacciones comunes a todas las oxidaciones por acil-CoA. El triptofano es degradado a alanina y acetil-CoA. La fenilala- nina y la tirosina son degradadas a fumarato y acetoacetato, La mayoria de los individuos con la enfermedad hereditaria, fenilcetonuria carecen de la fenilalanina hidroxilasa, que convierte la fenilalanina en tirosina. EI hemo se sintetiza a partir de glicina y succinil-CoA. Estos precursores se condensan para formar el Acido S-aminolevulinico (ALA), que adopta 1a estructura ciclica para formar el pirrol, el porfobilinégeno (PBG). Cuatro ‘moléculas de PBG se condensan para formar el uroporfri- ‘négeno IIL, que continia para formar el hemo. El hemo es, degradado para formar tetrapirroles lineales, que son subse- cuentemente excretados como pigmentos biliares. Las hor ‘monas y neurotransmisores t-DOPA, epinefrina, norepit frina, serotonina, dcido y-aminobutirico (GABA) y la hist ‘mina son sintetizados a partir de aminodcidos precursores. El glutation, un tripeptido que es sintetizado a partir del glutamato, Ia cisteina y la glicina, esta implicado en una variedad de procesos metabélicos, de proteccién y de trans- porte. El tetrahidrofolato es un coenzima que participa en la transferencia de unidades de C, Los aminodcidos son requeridos para muchas funciones vitales del organismo. A aquéllos que los mamiferos pueden sintetizar se los conoce como aminodcidos no esenciales; aquéllos que los mamiferos deben obtener de la dieta se denominan aminoacidos esenciales. Las biosintesis de los, aminoacidos no esenciales presentan rutas relativamente simples, mientras que las que forman aminoacidos esencia- les son generalmente mas complejas. ‘A pesar de que la fuente tiltima de nitrégeno para la sintesis de aminoacidos es el N; atmosférico, este gas ¢asi inerte debe ser primero reducido a una forma metabslica- mente uti, el NH, mediante la fijacién del nitrogeno, Este proceso solo tiene lugar en ciertas especies bacterianas, una de las cuales vive en una relacién simbidtica con legumino- sas. En estos organismos, el Np es fijado por un enzima sensible al oxigeno, la nitrogenasa, que consiste en dos proteinas en la que los grupos [4Fe-45] y [6Fe-Mo-65] ac- ftian como transportadores de electrones. Cohen, P. P., The omnithine-urea cycle: biosynthesis and regulation of carbamyl phosphate synthetase I and ornithi- ne transcarbamylase, Curr. Top. Cell. Regul. 18, 1-19 (1981) [Una interesante revision historica del descubrimiento de la turea y del ciclo de la urea, asi como una discusién sobre la regulacion del ciclo.] Hayashi, H., Wada, H., Yoshimura, T., Esaki, N., y Soda, K,, Recent topics in pyridoxal 5'-phosphate enzyme studies, Ann, Rev. Biochem. 59, 87-110 (1990). Martell, A. E., Vitamin B, catalyzed reactions of a-amino and a-keto acids: model systems, Acc. Chem. Res. 22, 115- 124 (1989). Smith, E. L., Austen, B.M., Blumenthal, K. M., y Nyc, JF, Glutamate dehydrogenases, en Boyer, P. D. (Ed), The Enzy- ‘mes (3.* ed), Vol. 11, pp. 293-367, Academic Press (1975).‘adem eget en lee mao y bsnl oe i ul i Sls Raa ‘Eiki bine fee Sick Sa Soencincr we Seo F Senha Fate Se ere wes os oat bahar orang Ihe er gaat ieee a amino come pacers Shree ee ST SR Ss sro ay Say Migrant sy San na Seinen Saisie 2 on ‘Soiree em ah Soe Sg Bt SG — Siriaas Suhre sears Sieieioos ‘Sah ¥ KS Ape y a We778 Problemas Problemas 1. Los sintomas de una deficiencia parcial en un enzima del ciclo de la urea se pueden atenuar mediante una dieta baja en proteinas. Expliquese. 2. gPor qué se les da instrucciones de beber mucha agua a la gente que consume una dieta alta en proteinas? 3. Un estudiante con una dieta particular gasta 10 000 KJ - dia“, mientras que excreta 40 g de urea. Suponien- do que la proteina es 16 % de N por peso y que su metabolismo produce 18 kJ: g"!, iqué porcentaje de los requerimientos energéticos del estudiante es satis- fecho por proteina? *4, Entre las muchas dietas del tipo “coma lo que quiera y pierda peso” que fueron populares por un tiempo hay tuna que elimina todos los carbohidratos pero permite el consumo de toda la proteina y grasa deseada. {Sera ésta una dieta efectiva? (Ayuda: Los individuos con esta dieta se suelen quejar de que tienen mal aliento.) GPor qué se advierte a los fenilcetontiricos para que no Consuman productos que contengan el edulcorante ar- tificial aspartame (NutraSweet®; nombre registrado del aspartil-L-fenilalanina metil éster)? 6. Demuestre que la sintesis del hemo a partir de PBG ‘como se indica en la Fig. 24-27 resulta en el patron de marcaje de hemo que se muestra en la Fig, 24-24. 7. Explicar por que ciertas drogas y otros reactivos quimi- cos pueden precipitar un ataque de porfiria aguda in- termitente. 8. Uno de los sintomas de kwashiorkor, la enfermedad infantil por deficencia de proteinas en la dieta, es la despigmentacion de la piel y cabello. Explique las bases bioquimicas de este sintoma. 9. {Cuales son las consecuencias metabdlicas de un en- Zima eliminador de uridililo deficiente en Escherichia coli? 10, La Reaccién 9 de la Figura 24-45 indica que la metioni- na es sintetizada en los microorganismos mediante la metilacion de la homocisteina en una reaccin en la que el NS-metil-THF es el dador de metilo. Sin embar- go, en la degradacién de la metionina (Fig. 24-14), su desmetilacion tiene lugar en tres etapas en las que el intermediario es SAM. Discutir por qué razén esta reaccion no tiene lugar a través de una reaccién més simple, de una sola etapa, inversa a la reaccién de me- tilacion. "11. En el ciclo de la glucosa-alanina, el piruvato derivado de la glucdlisis es transaminado a alanina y exportado al higado para su conversin en glucosa y retomo a la célula. Explicar cOmo una célula muscular es capaz de participar en este ciclo bajo condiciones anaerébicas (contrayéndose vigorosamente). (Ayuda: La degrada- ion de muchos aminoacidos produce NH.) 12, Sugiera una razén por la que los heterocistos fjadores de nitrogeno de las cianobacterias han perdido el Foto- sistema II pero retienen el Fotosistema I.