REGULACION GÉNICA EN PROCARIOTAS
Evidencia genética
Historia
En 1965 François Jacob,
Jacques Monod, y André Lwoff
ganarón el Premio Nobel en de
Medicina y Fisiología por sus
descubrimientos de cómo se
regula la expresión de genes.
Regulación génica: se asegura
de que los genes se expresen
bien, ayuda a un organismo a
responder a su entorno. Se
lleva a cabo por la
modificación química de los
genes y la activación o
desactivación de los mismos
mediante su asociación con
proteínas reguladoras.
Regulación génica
Las bacterias regulan la
expresión de sus genes con
motivos adaptativos, son
oportunistas nutricionales
(obtener biomoléculas para el
metabolismo a partir del
ambiente o sintetizarlos por
vías enzimáticas (gasto
enzimático).
Las bacterias desarrollaron
sistemas de regulación que
acoplan la expresión de
productos génicos a un sistema
que monitoriza y detecta
compuestos importantes en el
ambiente de la bacteria. Los
mecanismos son capaces de
activa o reprimir la
transcripción de genes.
Represión catabólica
Interruptores genéticos
Interacciones proteína-ADN
que están cerca del sitio donde
comienza la transcripción de
genes.
1. Determina donde comienza
la transcripción. Es un
segmento de ADN llamado
“promotor” y la proteína ARN
polimerasa. Cuando la ARN
pol. se une al ADM promotor,
cada gen debe tener un
promotor o no será transcrita.
2. Determina si la transcripción
impulsada por promotor tiene
lugar. Segmentos de ADN cerca
del promotor sirven como
sitios de unión (operadores)
para proteínas reguladoras
específicas de secuencia
denominadas activadores y
represores.
Regulación positiva: proteína
activadora se une al sitio del
ADN diana para la
transcripción.
Regulación negativa: se evitar
que una proteína represora se
una al sitio de unión para
iniciar la transcripción. La
ausencia de la unión del
represor permite la
transcripción.
Proteínas reguladores: se une
a dos sitios diferentes en la
estructura de la proteína, uno
es el sitio “dominio de unión a
ADN” y el sitio alostérico.
Sitio alostérico: actúa como
sensor para la unión a ADN en
uno de sus modos: funcional o
no funcional. Interactúa con
pequeñas moléculas (efectores
alostéricos) para cambiar su
actividad.
Circuito regulador de lac
En 1950, François Jacob y
Jacques Monod demostraron
como el metabolismo de la
lactosa está regulado
genéticamente. Se evaluó en
dos condiciones, presencia y
ausencia de lactosa.
Se requiere dos enzimas: una
permea a la lactosa para su
transporte y una β-
galactosidasa para modificar la
lactosa en alolactosa y de
cortar la molécula de lactosa
en glucosa y galactosa.
Genes controlados juntos:
inducían β-galactosidasa y
también inducía la enzima
permeasa.
Evidencia genética para
el operador y represor
Indujeron mutaciones en los
genes estructurales y
elementos reguladores del
operón lac para ver las
consecuencias fisiológicas.
Bacterias son haploides, las
hicieron diploides, creando
cepas heterocigotos.
Mutaciones constitutivas (Oc y
I-): causan que los genes
estructurales del operón lac se
exprese independientemente
de la presencia del inductor, y
que el operador sea incapaz de
unirse a un represor
Mutaciones que inactivan los genes
estructurales para β-galactosidasa
y permeasa (designados Z- e Y- )
son recesivas.
para alostério
Fue por otra mutación represora
La transcripción del represor
Lac inhibe el operón de Lac en
ausencia de un inductor, pero
permite la transcripción
cuando el inductor está
presente.
Cuando se une la proteína
represora al sitio alostérico ,el
represor se somete a un cambio en
la estructura donde el sitio de
unión a ADN ya no funciona.
Super-represor (Is): carece de un
sitio de unión a la alolactosa
funcional (sitio alostérico) y no es
inactivado por un inductor y
bloquea así la transcripción del
operón lac.
Promotor (P): sitio de inicio
para la transcripción por la
ARN pol. Esta entre el gen del
represor I y el sitio del
operador O.
Caracterización
molecular del represor
Lac y el promotor Lac
En 1966 Walter Gilbert y Benno
Müller-Hill demostraron el sistema
lac al monitorear la unión del
inductor marcado radiactivamente
IPTG a la proteína represora
purificada.
1.-El represor consta de 4
subunidades idénticas (4 sitios de
unión IPTG-) y alolactosa.
2.- La proteína represora se une al
ADN que contiene el operador y
sale del ADN en presencia de IPTG
El represor protege bases
específicas en el operador de
reactivos químicos
del operón Lac
Para maximizar la eficiencia
energética, se deben cumplir dos
condiciones ambientales para que
se expresen las enzimas
metabólicas de la lactosa.
1.- La lactosa debe estar presente
en el medio ambiente.
2.- La glucosa no puede estar
presente en el ambiente de la
célula y está puede capturar más
energía de la descomposición de la
glucosa que de la descomposición
de otros azúcares
Elegir el mejor azúcar
para metabolizar
La síntesis de β-galactosidasa
se induce hasta que toda la
glucosa ha sido metabolizada.
El producto de descomposición de
la glucosa previene la activación del
operón lac por lactosa.
El producto de descomposición de
la glucosa modula el nivel del
monofosfato de adenosina cíclico
(AMPc)
A [glucosa] altas, [AMPc] es
bajo, es inversamente
proporcional.
A [AMPc] alta se activa el
operón lac.
cAMP se une al activador CAP para
permitir la inducción del operón lac
(efecto alostérico)
A altas [catabolitos] de glucosa
inhiben la producción de
AMPc, por lo que no pueden
producir AMPc-CAP y no
activan el operón lac.+
 Estructura de los
sitios diana de ADN
Tienen en común la simetría
doble rotacional de los sitios
de unión al ADN.
Anatomía molecular
del interruptor
genético
El operador OR esta entre los
genes que codifican el represor
λ y cro, y contiene 3 sitios
(OR11, OR2, y OR3) que se
superpone a dos promotores
opuestos
PR: promueve la transcripción
de genes líticos.
PRM: transcribe para el gen cl.
De lisogenia a ciclo litíco por Luz
UV: induce la expresión de
genes del huésped (proteína
RecA que estimula la escisión
del represor λ)
Genes de toxinas clave de C.
botulinum, C. tetani, y C.
perfringens están controlados
por factores σ alternativos y
reconocen secuencias
similares en las regiones - 35 y
- 10 de los genes de la toxina.
Factores Sigma
alternativos regulan
grandes conjuntos de
genes
La bacteria se divide
asimétricamente al inicio de la
esporulación
El compartimento pequeño se
convierte en espora y el grande
nutre la espora en el desarrollo y
se lisa cuando la morfogénesis de
la espora se completa.
Proteínas regulan la expresión
génica para la espora o la
célula madre, cuatro de ellas
son factores σ alternativos.
Factores σk y σG son activados
en la célula madre y en la
espora.
Cada factor σ tiene diferentes
propiedades de unión a ADN
de secuencia específica
σE se une al menos a 121
promotores, dentro de 34
operones y 87 genes
individuales, para regular más
de 250 genes.
σF se une al menos a 36
promotores para regular 48
genes.
Factores σ alternativos son
indispensables para la
virulencia en patógenos para
humanos.
Bacterias del género
Clostridium producen toxinas
responsables de enfermedades
graves.
REGULACION GÉNICA EN PROCARIOTAS
Control dual positivo y
negativo: el operón de
arabinosa
Una proteína de unión al ADN
puede actuar como un
represor o un activador.
Los genes estructurales araB,
araA y araD codifican las
enzimas metabólicas que
descomponen el azúcar
arabinosa. Estos se transcriben
en una unidad como un solo
ARNm.
La transcripción se activa en
araI (región iniciadora) que
contiene un sitio de unión para
una proteína activadora.
El gen araC codifica una
proteína activadora. Cuando se
une a la arabinosa, esta
proteína se une al sitio araI y
activa la transcripción del
operón ara y ayuda a que la
ARN pol. se una al promotor.
El sistema de represión de
catabolitos CAP-AMPc impide
la expresión del lac operón en
presencia de glucosa y evita la
expresión del operón ara.
En presencia de arabinosa: el
complejo CAP-AMPc como el
complejo AraC-arabinosa se
unen a araI para que la ARN
pol. se una al promotor y
transcriba el operón ara.
En ausencia de arabinosa: la
proteína AraC asume una
conformación diferente y
reprime el operón ara al unirse
a araI y al sitio distante, araO,
formando un bucle que impide
la transcripción.
Vías metabólicas y
niveles adicionales de
regulación: atenuación
Los genes que codifican las
enzimas se organizan en
operones, completos con
ARNm multigénicos
En ausencia de la proteína
represora TrpR, la presencia
de triptófano detiene la
transcripción después de las
primeras 140 bases.
En ausencia, la transcripción
del operón continua.
Hay 2 elementos clave para
terminar o continuar la
transcripción
1. La secuencia líder de ARNm
de trp codifica un péptido de
14 aminoácidos que incluye
dos codones de triptófano
adyacentes.
2. Partes de trp líderde ARNm
forma estructuras de tallo y asa
que se alternan entre dos
conformaciones, y una de ellas
favorece la terminación de la
transcripción.
Sí el triptófano es abundante, hay
suficiente aminoacil-tRNA Trp para
permitir la traducción del péptido
de 14 aminoacidos.
Cuando es escaso, el ribosoma se
detiene en los codones de
triptófano, segmentos 2 y 3 de
pares de bases, y la transcripción
puede continuar.
el operon phe tiene 7 codones
de fenilalanina en su péptido
líder y su operon tiene 7
codones de histidina en
tándem en su péptido líder
Ciclos de vida de
bacteriófagos
El bacteriófago lamda es un Tres clases de mutantes
fago templado que tiene dos reguladoras del fago λ.
ciclos de vida alternativos.
1.-Mutantes para el cl, cll y clll
Ciclo lítico: cuando una forman placas clara (no
bacteria está infectada por un pueden establecer la
fago, este puede replicarse y lisogenia).
lisar la célula.
2.- Mutantes aislados de
Ciclo lisogénico: los 71 genes células que no lisogenizaban,
del fago se expresan en algún pero podían replicarse e
punto, o el genoma del fago ingresar al ciclo lítico en una
puede integrarse en el célula lisogenizada.
cromosoma bacteriano. Son
3.-Puede lisogenizar pero no
genes inactivos.
lisar células, el gen mutado es
Recursos abundantes: ciclo lítico el gen cro.
Recursos escasos: ciclo lisogénico
El gen cl codifica un represor
El interruptor genético que
(represor λ) reprime el
controla los dos ciclos tiene crecimiento lítico y promueve
dos estados: en el lisogénico cl
lisogenia.
es activo, pero cro no, y en el
lítico cro es activo pero cl no.
El gen cro codifica un represor
que permite lisogenia y el
El genoma de λ codifica
crecimiento lítico.
proteínas para la replicación
del ADN, recombinación, El gen N codifica un regulador
ensamblaje y lisis. positivo y permite que la ARN pol
continue transcribiendo que de
La transcripción viral tiene dos otro modo causaría la terminación
promotores: PL y PR e inicia la de la transcripción
(antiterminador)
infección de la ARN pol.
El gen cll codifica una proteína
activadora que se une a un sitio
que promueve la transcripción de
un promotor diferente (PRE) que
activa la transcripción del gen cl.