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CURSO: Biotecnología
DOCENTE: Dr. Hebert Soto Gonzales
ESTUDIANTE: Karesly Rojas Talavera
CICLO: VII
ANTECEDES
ARTHOSPIRINA Método de
Aplicación (métodos de
MAXIMA Cultivo
Extracción)
PROCEDIMIENTO
Métodos 1
Se determinó Clorofila a, â- Extracción de pigmentos
caroteno y zeaxantina. ficobiliproteinicos
3er Método -
4to Método -
Métodos 2
2do Método - Extracción con
1er Método - Extracción con
Extracción con regulador de
Extracción agua a baja
Solución Alcalina fosfato tratado
temperatura.
con hielo seco.
- 20 mg de biomasa húmeda
- papel de fibra de vidrio Advantec GC50 (1,2 μm) Regulador de Fosfatos y
- Equipo Millipore Enzima. - 20 mg de la biomasa de la - Triturador Vortex
- 20 mg de cianobacteria cianobacteria. - 20 mg de la biomasa de la
- 10 mL de acetona al 90%
Materiales
- 8 ml de CaCl2 - 4mL de regulador de cianobacteria.
- Centrifugadora (3500 r.p.m., 5 min)
- 4 mL de solu-ción alcalina fosfato - 4 mL agua destilada fría
- Secador con nitrógeno gaseoso y se mantuvo a -20 (pH = 10; NaHCO3- (4°C)
ºC. - Congelador con hielo
Na2CO3) seco.
- Agilent Hypersil MOS (4,6 x 100 mm, 5 μm de tamaño - 4 mL de C6H14 - Centrifugadora (3500
de partícula)
- Filtrador r.p.m., 5 min)
- Cromatógrafo (HPLC)
-Medición de Absorbancia.
- Detector de arreglo de diodos.
PASO 2 Análisis Estadísticos
Materiales
ANOVA (fases de
crecimiento,sistema de Método de
ANOVA (fases de crecimeinto y sistema de comparaciones Statgraphics
cultivo)Detector de arreglo de diodos. cultivo y metodologíade
extracción múltiples de Scheffé.
RESULTADOS
Se corroboró que Arth-
rospira maxima es una
cianobacteria con
potencial biotecnológico
El tratamiento de la por el contenido de
biomasa de A. maxima pigmentos
con buffer de fosfato
más hielo seco permitió
El pigmento en mayor extraer un contenido
proporción fue la considerable de
ficocianina (78,51±0,778 ficocianina.
mg L-1; 8,72% con • Para mayor cantidad de pigmentos
Mayores contenidos de respecto a la masa seca) liposolubles se recomienda utilizar un
ficobiliproteínas en el fotobiorreactor helicoidal y cosecha en
fotobiorreactor fase exponencial.
cilíndrico, en la fase de • Para mayor cantidad de ficobiliproteínas se
Contenidos de clorofila recomienda utilizar fotobiorreactor
crecimiento estacionario cilíndrico y cosecha en fase estacionaria
a, zeaxantina y β- (24 días) y cuando la con extracción con regulador de fosfato
caroteno. El análisis de extracción fue realizada tratado con hielo seco.
varianza reveló con regulador de fosfato • Es importante seguir desarrollando nuevos
Los valores de pH diferencias significativas
registrados en los tratado con hielo seco. diseños de fotobiorreactores que permitan
(P<0,05) en el contenido obtener biomasa de Arthrospira rica en
cultivos de A. maxima en de estos pigmentos tanto compuestos de interés biotecnológico.
ambos fotobiorreactores en los tipos de
variaron entre 9,81 y fotobiorreactores.
10,32 unidades de pH.
CONCLUSIONES