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Iso 4832 - 2006 PDF

Este documento describe el procedimiento para realizar un recuento de colonias de coliformes según la norma ISO 4832:2006. Incluye la preparación de muestras y diluciones, la inoculación e incubación en placas de agar Violet Red Bile Lactose a 30-37°C durante 24 horas, y la enumeración y confirmación de colonias típicas y atípicas mediante su inoculación en tubos de caldo Brilliant Green Lactose Bile y detección de gas.

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Este documento describe el procedimiento para realizar un recuento de colonias de coliformes según la norma ISO 4832:2006. Incluye la preparación de muestras y diluciones, la inoculación e incubación en placas de agar Violet Red Bile Lactose a 30-37°C durante 24 horas, y la enumeración y confirmación de colonias típicas y atípicas mediante su inoculación en tubos de caldo Brilliant Green Lactose Bile y detección de gas.

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Coliformes ISO 4832:2006 Recuento de colonias (Revisado y confirmado en 2015)

RECUENTO DE COLONIAS

Preparación de las muestras y diluciones, dependiendo del tipo de muestra


según ISO 6887-1,2,3,4:2004
En Peptona Salina ISO:
CM0733B Maximum Recovery Diluent (Peptone Saline Diluent) ISO 500 g
TV5016D Maximum Recovery Diluent ISO 50 x 9 ml

Inoculación e incubación
Inscrita el 31 octubre de 2012, en el Registro Mercantil de Valladolid, tomo 1429, folio 218, inscripción 1ª, hoja VA-25213.

Preparar dos placas para la muestra líquida y/o para cada dilución

Transferir 1 ml de cada dilución a placas Petri vacías estériles

Verter 15 ml de Violet Red Bile Lactose Agar enfriado a 40ºC-47ºC a cada placa
CM0968B Violet Red Bile Lactose Agar (ISO) 500 g
BO0455M VRBL Agar (ISO) 10 x 100 ml

Una vez solidificadas, añadir 4 ml de VRBL Agar a cada placa.

Incubar a 30ºC o 37ºC durante 24 h ± 2 h

Enumeración

Seleccionar placas con >10 y <150 colonias. Seleccionar placas con >10 y <150 colonias.
Contar las colonias típicas: moradas, en Contar las colonias atípicas: por ej. de pequeño
ocasiones rodeadas de un halo rojizo de tamaño y todas las colonias derivadas de
precipitación. productos lácteos
Estas colonias no requieren identificación
posterior
Confirmación

Inocular 5 colonias atípicas de cada tipo en tubos de Brilliant Green Lactose Bile Broth
CM0031B Brilliant Green Lactose Bile (2%) Broth (ISO) 500 g
TV5009E Brilliant Green Lactose Bile (2%) Broth (ISO) con campana Durham 50 tubos

Incubar a 30ºC o 37ºC durante 24 h ± 2 h

Considerar como coliformes aquellas que


produzcan gas en la campana Durham.

SISTEMAS AVANZADOS DE ANALISIS S.L.


Cardenal Torquemada 24. 47010 VALLADOLID.
Tno / Fax: 983 251143 Móvil: 637 596017
C.I.F.: B47700026
www.analisisavanzados.com 15112017

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