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EXPOSICION

Composición del cabello: La matriz pilosa es ácida, contiene además proteínas fibrosas: 65
% a 95 % (alto % de queratinas), lípidos: 1 % a 9 %, sales minerales 0.25 % a 0.95 % (sobre
peso seco), sustancias hidrófilas, trazas de otros elementos, polisacáridos, agua 15% a 35
%, melaninas porcentaje variable porque dependerá del color del pelo. Los gránulos de
melanina se encuentran mayoritariamente en el córtex o corteza, también puede
encontrarse en menor proporción en la médula, normalmente está ausente en la cutícula.
Hasta el momento no se conoce con exactitud las vías de entrada de las drogas al pelo y
los sitios específicos donde se quedan retenidas. Las principales rutas propuestas de
incorporación son: corriente sanguínea, glándulas sebáceas y sudoríparas, el 90% de la
incorporación de la droga se realiza a través de la sangre. Los componentes que
intervienen en la retención de las drogas en el pelo son: Las proteínas, la melanina y los
lípidos.
La papila dérmica, una estructura muy rica en vasos y nervios que proporciona las
sustancias necesarias para el crecimiento capilar.
La unión droga queratina es inalterable a través del tiempo (días, meses, años) y sólo se
disociará por el empleo de métodos hidrolíticos, ácidos, alcalinos o enzimáticos.
El córtex o corteza es el componente morfológico que mayor influencia tiene en la
retención de las drogas ya que la melanina y la queratina forman parte de este. El segundo
lugar lo ocupa la medula que es donde se encuentran los lípidos y proteínas, la cutícula
tiene una influencia mínima. Así mismo en la retención e incorporación de las drogas al
pelo influyen factores que dependen de las propiedades físico-químicas de la droga misma
como ser: estructura química de la droga, lipófila, afinidad por la melanina, capacidad de
penetración de membrana. Los estudios científicos, muestran que la melanina juega un rol
importante en la incorporación de drogas en el pelo. la lipofilicidad es un factor clave para
la fijación de las drogas en este tipo de matriz. Por ejemplo: la cocaína y heroína son
mucho mejor incorporadas a la matriz del pelo que la benzoilecgonina y la morfina, ya que
las primeras son más liposolubles. Lo mismo puede decirse de la metanfetamina que es
mejor incorporada que el acetil anfetamina por la misma causa, esto sugiere que la
basicidad es un factor importante en la fijación de una droga en el pelo.
la velocidad de crecimiento del pelo se refiere por lo que la Shot recomendó que para la
determinación de drogas de abuso en casos forenses se puede aceptar el parámetro que
el cabello crece a una velocidad de 1 cm cada mes. Los análisis de drogas en pelo en el
ámbito de la Toxicología Forense se utilizan en forma rutinaria, en casos de divorcio y de
custodia de hijos,2 en traficantes para demostrar consumo crónico, en privados de
libertad para demostrar el consumo de drogas en la cárcel o antes de ingresar a la cárcel,
en cadáveres en avanzado estado de putrefacción para establecer consumo de drogas
previo a su muerte.

Cabello.
Los análisis de muestras de cabello son útiles para establecer el historial de la exposición a
las drogas de abuso, pero no lo son para determinar una intoxicación aguda letal. La
contribución de esta muestra a los estudios post mortem radica en determinar la
implicación o exclusión con la que el abuso habitual de una sustancia ha influido en la
causa de la muerte.
Esta contribución se tendrá cuenta en los casos en que la muerte se origina como
consecuencia de patologías causadas por hábitos de consumo, en las muertes por
sobredosis relacionadas con tolerancia o períodos de abstinencia, especialmente para los
compuestos opiáceos y metadona; en accidentes de consumidores habituales en los que
hay un resultado de muerte, cuando hay intencionalidad criminal en un contexto de
consumo habitual o en casos en que el análisis de la muestra de cabello pueda contribuir a
la identificación de un cadáver.
Las muestras de cabello deben ser tomadas al comienzo de la autopsia, cortadas de la
región occipital de la cabeza, tan cerca como sea posible del cuero cabelludo del grosor de
un lápiz. Si se necesita información sobre el uso reciente, se recomienda además una
muestra que incluya la raíz del cabello. Dependiendo de las condiciones del cadáver el
envío en sobre de papel, indicando los extremos raíz y punta, puede ser insuficiente
necesitando recipientes más consistentes.

Soria-Sánchez, M. L., & Valverde-Villarreal, J. L. (2015). Interés de las muestras para los


estudios químico-toxicológicos post mortem. Revista Española de Medicina Legal, 41(2),
72–80. dio: 10.1016/j.reml.2015.01.002 

https://global.economistjurist.es/BDI/legislacion/legislaciongeneral/emergentelegislacion.
php?id=97649
JOHANN LUDWIG CASPER.
El primer caso de determinación de venenos en pelo humano, fue publicado por Casper en
1858, quién encontró arsénico en el pelo de un cadáver exhumado 11 años después de su
muerte.
-También en el pelo de Beethoven se encontró plomo cuando había transcurrido un
tiempo largo de su fallecimiento.
Así, entre otras cosas, se pudo determinar que la intoxicación con plomo comenzó 111
días antes de la fecha de su fallecimiento en Viena, el 26 de marzo de 1827.
Esa es la conclusión de una investigación basada en un análisis de cabellos de Beethoven
efectuada por el médico forense vienés Christian Reiter en cooperación con la Universidad
de Edafología de Viena, según ha confirmado el científico.
(https://www.20minutos.es/noticia/269590/0/Beethoven/intoxicado/musica/)

los análisis se habían realizado por espectrometría de absorción atómica que aún hoy es el
método de elección para detectar metales.

El primero en encontrar opiáceos en el pelo fue Baumgarten en 1979, quién detectó


morfina y heroína. A partir de ese momento, investigadores de distintos países
continuaron con distintas metodologías para detectar todo tipo de compuestos. El éxito
obtenido llevo a la necesidad de crear una sociedad internacional llamada Soviet o huir
testigo que realiza a partir del año 1992 reuniones anuales en las cuales se intercambian
los conocimientos adquiridos en el tema.

Bibliografía de esto;
Matriz biológica
Toda droga, medicamento o tóxico que ingresa al organismo siguiendo la vía oral,
endovenosa, intramuscular, anal, vaginal, subcutánea, inhalatoria, es llevada por la
corriente sanguínea al folículo piloso, uniéndose a la matriz queratínica del pelo
acompañando a este en su crecimiento permaneciendo en él en tanto no se corte.
Recolección de la muestra.
Se utiliza un kit:
-papel aluminio
- bolsa transparente
- tijeras esterilizadas
Recolección de muestras de cabello post mortem
El análisis de muestras de cabello post mortem puede proporcionar información
importante relacionada con el historial de consumo de drogas del difunto. Los
procedimientos de recolección detallados anteriormente se aplican en casos post-
mortem, sin embargo, una lámina y un sobre estándar de recolección de cabello pueden
ser inapropiados dependiendo de la condición del cabello del fallecido y se requiere un
recipiente de recolección alternativo más robusto. El análisis de las raíces del cabello
puede ayudar a proporcionar información adicional relacionada con el uso de drogas del
fallecido antes de la muerte.
Recomendaciones para la recolección de muestras de cabello post mortem
 El cabello debe recogerse al comienzo de la autopsia.
Si se requiere información relacionada con el uso reciente de drogas, se recomienda la
recolección de una muestra de cabello extraído con raíces, además de la recolección de
una muestra de cabello cortado.

Recolección de muestras de cabello en delitos de drogas.


La recolección de muestras de cabello en casos de presunto DFC es de tiempo crítico ya
que el demandante puede no informar el incidente durante varios días o varias semanas o
meses en algunos casos. Los detalles relacionados con el tiempo transcurrido entre el
incidente y la fecha del informe son esenciales al decidir las fechas apropiadas de
recolección de muestras. El tratamiento químico del cabello después del incidente
afectará negativamente la idoneidad del cabello como matriz de prueba.

Recomendaciones para la recolección de muestras de cabello en DFC


Se debe recolectar una muestra de cabello un mínimo de 4 a 6 semanas después del
presunto incidente.
Si la muestra da positivo, se recomienda recolectar una segunda muestra de cabello para
corroborar los hallazgos.
El demandante no debe recibir ningún tratamiento cosmético ni cortarse el cabello entre
las colecciones de cabello o hasta que las investigaciones hayan concluido.
preparación de la muestra
La preparación de muestras de cabello implica una serie de pasos que incluyen lavado,
segmentación (opcional) y obtención de una muestra representativa del material
disponible.
Análisis segmentario
Dependiendo del tipo de caso, pueden aplicarse diferentes estrategias de segmentación.
El pelo de la cabeza cortado en segmentos medidos de entre 10 y 30 mm puede
proporcionar un perfil histórico más detallado de la exposición a drogas de un individuo.
En casos de presunto DFC, incluida la agresión sexual facilitada por drogas (DFSA), donde
se sospecha una sola administración de GHB u otra droga depresora del sistema nervioso
central, el análisis de segmentos aún más pequeños puede ayudar a mejorar el
establecimiento de una prueba capilar positiva en un marco de tiempo más estrecho. La
precisión del análisis segmentario depende tanto del muestreo como del procedimiento
de segmentación en el laboratorio. Además, las concentraciones de drogas en el cabello
pueden disminuir desde la raíz hasta el extremo distal del cabello, a través del "lavado"
natural de las drogas del cabello.
Recomendaciones para el análisis segmentario: Solo el cabello cortado del cuero
cabelludo y alineado con el extremo de la raíz identificado debe someterse a un análisis
segmentario.
Lavado
El lavado de muestras de cabello antes del análisis tiene dos propósitos principales.
Primero, para eliminar productos para el cuidado del cabello, sudor, sebo o material de
superficie (por ejemplo, células de la piel, piojos, fluidos corporales, etc.) que pueden
interferir con el análisis o que pueden reducir la recuperación de la extracción. Segundo,
para eliminar la posible contaminación externa de los medicamentos del medio ambiente
Los procedimientos de lavado estandarizados que eliminarán efectivamente cualquier
rastro de contaminación externa sin eliminar activamente los medicamentos incorporados
en el cabello no están disponibles actualmente y, como tal, se debe considerar el posible
papel de la contaminación externa al interpretar los resultados de las pruebas de cabello.
Sin embargo, se han descrito varios enfoques para discriminar entre la contaminación
externa y las drogas incorporadas por ingestión.
En general, se acepta que los solventes orgánicos como el cloruro de metileno o la
acetona eliminarán solo la contaminación de la superficie, mientras que las soluciones
acuosas o el metanol hincharán el cabello y extraerán los medicamentos del interior de la
matriz capilar.
Recomendaciones para lavar
El laboratorio debe tener un procedimiento para lavar muestras de cabello antes del
análisis.
El procedimiento debe incluir pasos de lavado con disolventes orgánicos y soluciones
acuosas.
El laboratorio debe investigar hasta qué punto su procedimiento de lavado elimina la
contaminación de la superficie.
Las muestras de cabello muy sucias con fluidos corporales pueden requerir
procedimientos de limpieza adicionales

Muestra de homogeneidad
El cabello como matriz difiere de los fluidos corporales como la sangre o la orina, ya que
ambos se pueden dividir fácilmente en alícuotas para su análisis. Ya sea que una muestra
de cabello haya sido cortada en segmentos más pequeños antes del análisis o analizada
como una muestra a granel, es importante que la muestra sea homogénea y que la
porción tomada sea una muestra representativa.
Recomendaciones para la homogeneidad de la muestra.
Las muestras de cabello que han sido lavadas y secadas deben cortarse en trozos más
pequeños o molidos hasta obtener un polvo, y luego típicamente 10 a 50 mg de cabello
pesado con precisión antes del análisis.
Procedimientos de prueba
El análisis del cabello implica un paso inicial de pretratamiento para liberar los
medicamentos desde la matriz del cabello. El extracto resultante puede analizarse
directamente utilizando técnicas de detección o requerirá una limpieza adicional
mediante extracción líquido-líquido (LLE) o extracción en fase sólida (SPE) antes de los
procedimientos de confirmación.
Incubación y extracción.
La eficacia del método se ve comprometida significativamente mediante el uso de
procedimientos de extracción inadecuados que no están dirigidos a medicamentos
específicos. Es importante considerar el posible efecto nocivo sobre los medicamentos en
cuestión al elegir las soluciones de extracción. La hidrólisis in vitro de compuestos lábiles
como la cocaína y la heroína se ha informado en condiciones ácidas o alcalinas. Los
procedimientos de incubación con metanol, por otro lado, no tienen los mismos
problemas con la hidrólisis, pero las recuperaciones son más bajas.
Recomendaciones para incubación y extracción.
Los laboratorios que introducen nuevas metodologías de prueba capilar deben investigar
la eficiencia de las diferentes condiciones de incubación para optimizar sus
procedimientos de extracción internos y minimizar la hidrólisis de los medicamentos
lábiles.
Técnicas de cribado
La detección de una variedad de medicamentos en el cabello se logra a través de
metodologías inmunológicas o cromatográficas. Los inmunoensayos comúnmente
utilizados para la detección rápida de medicamentos en fluidos biológicos también están
disponibles para el cabello. El uso de técnicas cromatográficas con capacidades de
espectrometría de masas en tándem y tiempo de vuelo (TOF), aunque menos prácticas
para el cribado de grandes cantidades de muestras, tiene la ventaja de poder cribar e
identificar simultáneamente un rango más amplio de analitos en un solo análisis. Esta es
una ventaja significativa cuando se trata de pequeños volúmenes de muestra.
Recomendaciones para técnicas de detección
Los laboratorios deben asegurarse de que los ensayos de detección tengan suficiente
sensibilidad para detectar niveles bajos de fármaco en el cabello y estén dirigidos a
reflejar el perfil del fármaco en el cabello.
La matriz capilar no debe interferir con el inmunoensayo.
Todas las pruebas de detección de inmunoensayo positivo presuntivas deben confirmarse
utilizando una prueba más específica para el analito objetivo, p. espectrometría de masas.
Técnicas de confirmación
La separación y detección de los analitos de interés se logran utilizando métodos
cromatográficos guiados con espectrometría de masas, p. cromatografía de gases-
espectrometría de masas (GC-MS) y cromatografía de líquidos-espectrometría de masas
(LC-MS). Los niveles de drogas en el cabello son considerablemente más bajos que los que
se encuentran en matrices probadas rutinariamente como la sangre y la orina y, como
tales, la espectrometría de masa única y en tándem se emplea para confirmar las drogas
en el cabello.
Recomendaciones para las técnicas de confirmación Los laboratorios deben asegurarse de
que las técnicas de confirmación tengan la sensibilidad suficiente para los niveles bajos de
fármaco que se encuentran en el cabello y estén dirigidas a reflejar el perfil del fármaco en
el cabello.
 Los métodos de confirmación deben incluir la determinación del fármaco original y los
metabolitos, cuando corresponda, para ayudar a distinguir entre contaminación e
ingestión.
De forma genérica, los pasos necesarios para el análisis toxicológico del pelo son:
1. Recogida de la muestra y almacenamiento.
2. Segmentación del mechón.
3. Eliminación de la contaminación externa.
4. Procesos de purificación.
5. Extracción de los analitos de la matriz.
6. Análisis instrumental.
2.1. Recogida de la muestra y almacenamiento La recogida de muestras de pelo puede
realizarse de diferentes regiones anatómicas como el cuero cabelludo, pubis, axila, o
cualquier otra zona corporal con pelo. Estos se pueden dividir en 3 tipos:
1. Pelo de la barba, crece 0.27mm por día(5).
2. Vello púbico y axilar, crece 0.25mm por día (5).
3. Pelo capilar: es el más útil por su crecimiento regular de 0.33 a 0.60mm por día (5).
Sin embargo, siempre que esté disponible, se seleccionará preferentemente el cabello
como la muestra de elección para el análisis rutinario de drogas, alcohol o medicamentos.
La recogida del cabello debe realizarse en la parte posterior de la cabeza conocida como
verte posterior, debido a que es en esta zona donde existe menor variabilidad tanto entre
la ratio de crecimiento de los folículos pilosos, como por razones de edad o sexo, y, por
tanto, la muestra obtenida en esta zona es más reproducible (3)(11). Se debe recolectar la
mayor cantidad posible de folículos en la fase anágena, ya que la papila está en estrecho
contacto con el resto del organismo, a través de la circulación sanguínea, linfa y fluido
extracelular (13). En general, se recomienda un mechón del diámetro de un lápiz (3). Por
último, es recomendable realizar un segundo análisis de confirmación sobre el mechón de
cabello cuando los resultados de la primera son positivos, para corroborar el resultado del
primer análisis (11). El pelo no requiere condiciones especiales de almacenamiento. Las
muestras deben ser conservadas a temperatura ambiente, introducidas simplemente en
un sobre de papel, en papel de aluminio, o bien en un tubo de cristal o plástico, indicando
donde se encuentra la raíz y donde la punta, por si se quiere realizar a posteriori un
estudio secuencial del consumo de una droga a lo largo del tiempo. Es aconsejable
almacenarlas en un lugar seco y oscuro, evitando la luz directa del sol, y no es
recomendable guardarlas en la nevera o el congelador (3).
2.2. Segmentación del mechón Dependiendo del tipo de caso, se pueden seguir diferentes
estrategias para la segmentación. Se pueden cortar segmentos medidos de entre 10 y 30
mm, seguidas en algunos casos por acción mecánica como trituración o pulverización (14),
para proporcionar un historial más detallado sobre el perfil de la exposición a la droga de
un individuo. La precisión del análisis segmentario depende tanto del muestreo como del
procedimiento de segmentación en el laboratorio. Además, las concentraciones de drogas
en el pelo pueden disminuir desde la raíz hasta el extremo distal, a través del lavado. Solo
cabello cortado del cuero cabelludo y alineado con el extremo de la raíz identificado debe
de estar sujeto a análisis segmental (11).
2.3. Eliminación de la contaminación externa
El cabello es propenso a la contaminación de drogas ilícitas que depende de la
disponibilidad del fármaco en forma de polvos y de cómo se administran y consumen (6).
La contaminación externa se compone de una combinación de contaminantes de origen
exógeno y contaminantes de origen endógeno que recubren la parte externa de la fibra
pilosa (3). El cabello expuesto a sangre u orina que contiene drogas puede provocar
contaminación a lo largo de toda la longitud de la fibra capilar. Se ha propuesto que la
contaminación externa de estos fluidos se puede demostrar por la presencia de
concentraciones de fármaco similares en múltiples segmentos del cabello (6). La
eliminación de esta contaminación externa es un paso previo a realizar antes de cualquier
análisis de pelo, tanto para evitar resultados falsos positivos por la posible existencia de
contaminantes exógenos, como para evitar interferencias en la interpretación de los
resultados que puedan causar los contaminantes endógenos. En la práctica, no es posible
diferenciar entre ambos componentes de la contaminación externa (11). La eliminación de
la contaminación externa se realiza mediante la aplicación de lavados sucesivos en el
mechón de pelo o segmento con uno o varios disolventes durante un tiempo
determinado. Una vez eliminada la contaminación externa es importante comprobar que
el método de lavado ha sido efectivo y la concentración encontrada se corresponde con la
cantidad de droga que había sido incorporada en el interior del pelo desde la sangre (3).
2.4. Tratamiento preliminar de las muestras La muestra de pelo debe ser sometida a un
tratamiento preliminar de la matriz sólida que permita ponerla en las condiciones
apropiadas para su posterior extracción. En el procesamiento del pelo, previo a la
extracción se incluye un primer paso de homogenización de la muestra y un segundo paso
mediante la solubilización de los analitos con un disolvente que penetre en el interior de
la fibra pilosa, o mediante la digestión de la matriz del pelo (11).
2.5. Extracción de los analitos de la matriz La muestra obtenida debe ser sometida a un
proceso de extracción que elimine los interferentes y concentre las sustancias para su
posterior análisis. El proceso de extracción es similar al que se emplea para la
determinación de drogas en sangre u orina. Los métodos más empleados para este fin son
la extracción líquido-líquido (LLE) y la extracción en fase sólida (SPE). La selectividad del
proceso afecta al resultado final del análisis, ya que una técnica selectiva proporciona
extractos más limpios, aumentando la detectabilidad de los compuestos (3).
Generalmente, los métodos SPE son los más usados debido a que producen extractos más
limpios, tienen una mayor selectividad y reproducibilidad, y evitan la formación de
emulsiones, comparados con los métodos de LLE (3). La eficacia de la extracción
dependerá de diversos factores como son: el estado de conservación de la matriz, la
estructura química de los analitos, la polaridad del disolvente empleado, y la duración y
forma de extracción (15).
2.6. Análisis instrumental El análisis de pelo requiere el empleo de técnicas
instrumentales que permitan determinar las sustancias de manera inequívoca,
cuantificarlas con una adecuada precisión y exactitud, y con suficiente sensibilidad para
alcanzar concentraciones en el rango de los picogramos por miligramo de pelo (3). Por
ello, las dos metodologías de elección en el análisis cuantitativo de pelo son la
cromatografía de gases acoplada a un espectrómetro de masas y la cromatografía líquida
acoplada a la espectrometría de masas en tándem. Sin embargo, es frecuente el uso de
técnicas inmunoquímicas como método de barrido o screening, aunque suelen ser muy
sensibles, pero poco específicos (3). La mayoría de los métodos utilizados en el análisis del
pelo emplean la espectrometría de masas como sistema de detección, ya que presenta un
alto grado de sensibilidad y fiabilidad. Sin embargo, las sustancias poco volátiles o con baja
estabilidad térmica presentan serias dificultades para su análisis mediante esta técnica, y
requieren procedimientos de derivatización para mejorar sus características
cromatográficas, proporcionarles mayor volatilidad y estabilidad térmica (3).

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