MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO

COMPUESTO
EL MICROSCOPIO ÓPTICO. PARTES
El microscopio óptico es el instrumento óptico más utilizado para la observación de
tejidos, células y estructuras subcelulares.

Está constituido por cuatro grupos de dispositivos o sistemas articulados:

• Sistema mecánico: Conjunto de piezas que sirven de soporte a las lentes y demás
elementos
-Pie o base.
-Brazo
-Mecanismo de enfoque: compuesto por dos tornillos
-Revólver: pieza giratoria donde van insertados los objetivos.
-Tubo: elemento colocando entre los objetivos y los oculares. En un
microscopio MONOCULAR hay uno y en un BINOCULAR hay dos.
• Sistema óptico: Conjunto de lentes responsables del poder de aumento y resolución
(objetivos y ocular). El microscopio tiene dos complejos ópticos:
-Uno próximo a la muestra: que es el OBJETIVO: forma una imagen virtual
dentro del tubo del microscopio. Esa imagen no la capta nuestro ojo. Presenta un
número seguido por un signo “X” que representa el número de aumentos que
proporcionan sus lentes.
-Uno próximo a nuestro ojo: que es el OCULAR. Parte de la imagen formada en
el tubo por el objetivo y construye una imagen amplificada que es enviada a nuestra
retina. Presenta un número seguido por un signo “X” que representa el número de
aumentos que proporcionan sus lentes.

EL NÚMERO DE AUMENTOS CON EL QUE OBSERVAMOS LA MUESTRA SURGE DE

MULTIPLICAR LOS AUMENTOS DEL OBJETIVO POR LOS AUMENTOS DEL OCULAR.

• Sistema de Iluminación: Elementos que producen las radiaciones (luz visible o no) y
transmiten, reflejan y regulan tanto la intensidad como la cantidad de rayos que van a
incidir sobre el espécimen (lámpara o fuente de iluminación, espejo, condensador y
diafragma). Se suele colocar bajo la muestra
• Accesorios: Son aditivos que permiten extender las capacidades del instrumento
(cámaras fotográficas, de video, computadoras, accesorios para dibujar, entre otros).

EL MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO

1. Enchufar y encender el microscopio.
2. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la platina
completamente. Si el microscopio se recogió correctamente en el uso anterior, ya
debería estar en esas condiciones.
3. Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas.
4. Comenzar la observación con el objetivo de 4x (ya está en posición) o colocar el de
10 aumentos (10x) si la preparación es de bacterias.
5. Para realizar el enfoque:
a. Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el
tornillo macrométrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a
través del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la
preparación pudiéndose dañar alguno de ellos o ambos.
b. Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el
objetivo de la preparación con el macrométrico y, cuando se observe algo
nítida la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un enfoque fino.

6. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser
suficiente con mover un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar
de objetivo se perdió por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el
objetivo anterior y repetir la operación desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a
muy poca distancia de la preparación y por ello es fácil que ocurran dos tipos de
percances: incrustarlo en la preparación si se descuidan las precauciones anteriores y
mancharlo con aceite de inmersión si se observa una preparación que ya se enfocó con
el objetivo de inmersión.

Empleo del objetivo de inmersión:

En los microscopios habituales, el objetivo de 100x es el conocido como objetivo de

inmersión. Cuando los rayos de luz atraviesan cualquier lente similar a las utilizadas en
el microscopio, se produce una desviación de la trayectoria de los rayos conocida como
DIFRACCIÓN. Cuanto mayor sea el aumento de una lente, mayor desviación de la
trayectoria lumínica tendremos. Con objetivos de menor aumento, no se produce
alteración de la imagen resultante, pero con el objetivo de 100x se producen
aberraciones en la formación de la imagen.

Es por ello, que se utiliza lo que se conoce como medio de inmersión, que se interpone
entre el objetivo y la muestra. Como la difracción es mayor a menor densidad del
medio que atraviesa la luz, utilizar un medio de mayor densidad como es el aceite de
inmersión, reduce la desviación de la trayectoria de los rayos lumínicos y con ello
obtenemos una imagen nítida.

Para la utilización del objetivo de inmersión, seguimos los siguientes pasos:

1. Enfocar la preparación hasta llegar al objetivo de 40x tal y como hemos

explicado en los párrafos anteriores.
2. Centrar en el campo la zona que queremos ver con más detalle
3. Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándolo a medio camino entre
éste y el de x40. NO GIRAR EL REVÓLVER TIRANDO DE LOS OBJETIVOS, SINO
DEL PROPIO REVÓLVER.
4. En la zona iluminada de la muestra colocar una gota mínima de aceite de
inmersión sobre el círculo de luz.
5. Terminar de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo de
inmersión. En ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a
la lente.
6. Enfocar cuidadosamente con el micrométrico. La distancia de trabajo entre el
objetivo de inmersión y la preparación es mínima, aun menor que con el de 40x
por lo que el riesgo de accidente es muy grande.
7. Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no se
puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se mancharía de
aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina y repetir
la operación desde el paso 1.
8. Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y se coloca
el objetivo de menor aumento girando el revólver. En este momento ya se
puede retirar la preparación de la platina. Nunca se debe retirar con el
objetivo de inmersión en posición de observación porque se raya muy
fácilmente.
9. Limpiar el objetivo de inmersión con cuidado empleando un papel especial para
óptica u otro disolvente orgánico tipo etanol, etanol-éter o xilol. Comprobar
también que el objetivo 40x está perfectamente limpio.
NORMAS BÁSICAS DE MANTENIMIENTO DEL
MICROSCOPIO
Sistema de iluminación:
-Cuando vayamos a utilizar el microscopio, retiramos la funda, enchufamos y
accionamos el interruptor.
-Cuando finalicemos de usar el microscopio, apagamos el interruptor,
desenchufamos y cubrimos con la funda el microscopio.
Preparación histológica:
-No tocar el cubre con los dedos, sino que cogeremos el porta por los laterales.
-Si está sucio, limpiar con un papel suave con una mezcla de etanol : éter 3:1.
Sistema mecánico
-No tirar de los objetivos para cambiar de aumento, sino agarrar el revólver entre
los dedos índice y pulgar.
-No tirar de la platina, sino que se desplazará la preparación sobre la misma
utilizando los tornillos.
-No arrastrar el microscopio sobre la mesa, se desajusta la óptica y se mueve la
imagen.
Sistema de enfoque: objetivos.
-Empezar siempre enfocando con el objetivo más pequeño.
-No girar bruscamente los tornillos de enfoque.
-No pasar directamente de un objetivo de 4x a uno muy grande ni viceversa.
Sistema de enfoque: oculares
-Cada persona tiene su propia graduación visual, por lo que se recomienda enfocar
la preparación con uno de los oculares, y para graduar el otro, cerramos el primer ojo y
mantenemos abierto el que queda por enfocar. Giramos el ocular hasta ver
nítidamente la imagen. La graduación óptica es PERSONAL.
Sistema de enfoque: limpieza
-Cuando veamos la imagen turbia, suele ser porque hay suciedad en los objetivos y
oculares. Limpiar con un papel suave con una mezcla de etanol : éter 3:1.
-Después de utilizar aceite de inmersión, limpiar siempre la preparación y el
objetivo de inmersión con una mezcla de etanol : éter 3:1.
ACTIVIDAD 1: RECONOCIMIENTO DE LOS PRINCIPALES COMPONENTES DEL
MICROSCOPIO ÓPTICO.
¿Qué cuatro grupos de piezas componen el microscopio?

Señala en el siguiente dibujo el nombre de las diferentes piezas constituyentes del

microscopio óptico.
ACTIVIDAD 2: CÁLCULO DEL NÚMERO DE AUMENTOS DEL MICROSCOPIO

Fíjate en el aumento que tienen los oculares de tu microscopio y también los de los
respectivos objetivos. ¿A qué aumento estaremos viendo la preparación cuando
enfocamos con los siguientes objetivos?
4x

10x

40x

100x