UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA –UNAD

Escuela de Ciencias Agrícolas, Pecuarias y del Medio Ambiente-ECAPMA

Programa: Zootecnia

LABORATORIO DE NUTRICIÓN AVANZADA-LNAV

Prof: Leonor Barreto

INTEGRANTES DEL GRUPO

PROFESOR DIRECTOR DE CURSO

Leonor Barreto de Escovar
leonor.barreto@unad.edu.co

TUTOR DE PRÁCTICA

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA “UNAD”

ESCUELA DE CIENCIAS AGRÍCOLAS, PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE
“ECAPMA”
PROGRAMA ZOOTECNIA
Octubre XX de 2019
 RESUMEN

El objetivo del laboratorio del curso de Nutrición Avanzada es el de determinar los

Factores Antinutricionales (FAN) de materias primas destinadas a la alimentación
animal. Al realizar la valoración de dichos factores de materias primas en el
laboratorio, nos permite identificar los factores que inhiben la asimilación de un
nutriente determinado, para así encontrar la manera de eliminarlos o minimizar sus
efectos negativos sobre los animales; se realizaron diferentes pruebas en forraje
como el matarratón y el pasto kikuyo, donde se determinaron los valores en
densidad de Licor Tánico (LT), Saponinas, Fenoles Totales (FT), alcaloides,
Taninos Hidrolizables (TH).

PALABRAS CLAVES: Factores antinutricionales, Alcaloides, Fenoles Totales,

Saponinas, Taninos

INTRODUCCIÓN

Con la práctica de laboratorio de NUTRICIÓN AVANZADA, se busca identificar los

Factores Antinutricionales (FAN) y la manera cómo eliminarlos o minimizar sus
efectos negativos sobre los animales. Para el análisis de laboratorio se tomaron
XX muestras de (materias primas analizadas) procedentes del municipio xx el
departamento de xx , de las cuales se presentó una breve descripción sobre su
origen, condiciones y descripción.
 1. FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA

1.1 MAPA CONCEPTUAL

CONCEPTOS CONCEPTOS
MATERIAS PRIMAS MIMOSINA
MECANISMO DE DEFENSA FITOMETABOLITOS
ALCALOIDES TANINOS
ÁCIDO MEVALÓNICO METABOLISMO SECUNDARIO
ESTEROLES PLANTAS
SAPONINAS phaseolus vulgaris
ÁCIDO SHIQUÍMICO PALATABILIDAD
FACTORES ANTINUTRICIONALES DISTURBIOS NEURONALES
POLIFENOLES DESÓRDENES REPRODUCTIVOS
1.3. Revisar detalladamente los videos relacionados con análisis de factores
antinutricionales mostrados en los siguientes link y elaborar diagrama de flujo que
integre los conceptos y metodologías mostrados allí.

http://www.youtube.com/watch?v=eIHyzk3IpDg
http://www.youtube.com/watch?v=O5HPgddlnAQ
 1. MATERIALES Y MÉTODOS

2.1 LISTA DE MATERIALES Y EQUIPOS UTILIZADOS

Cuadro 1.lista de materiales y equipos utilizados en la práctica (Éste es un ejemplo)

MATERIAL Ó EQUIPO
(indicar: marca, capacidad y APLICACIÓN FOTO
precisión)

Espectrofotómetro digital
spectronic 20; Colorimetría visible
0,001 ABS

Balanza digital Ohaus Pesada(Gravimetría)

0,0001g

Extracción de filtros
Centrifuga metabólicos

Tubo de centrifugado Contener muestra para

centrifugar

Plancha eléctrica Sistema de evaporación

 MATERIAL Ó EQUIPO
(indicar: marca, capacidad y APLICACIÓN FOTO
precisión)

Potenciometro, ph Medición de pH, índice de acidez

METER

Espectometro UV La medición total de

fenoles.

Picnómetros Calibración volumen

Elermeyer de 100ml Funciones varias

Espátula
Escoger muestra

Mortero Macerar

Probeta de 100ml Medir muestras

 MATERIAL Ó EQUIPO
(indicar: marca, capacidad y APLICACIÓN FOTO
precisión)

Embudo de filtración Filtrar

Pipeta graduadora 5- 10ml Medir reactivos

Agitador de vidrio Mezclar muestras

Tubo de ensayo Recolección de muestras

Gradilla Colocar tubos

Medir muestras y ver

Bureta cantidades variables de
líquidos

Montaje de titulación Sostener bureta

graduada
 MATERIAL Ó EQUIPO
(indicar: marca, capacidad y APLICACIÓN FOTO
precisión)

Crisol Recolección de muestra

Probeta Recolectar precipitación

Beaker Recolectar soluciones

Extractor de gases Controlar gases

2.2 LISTA DE REACTIVOS UTILIZADOS.

2.2.1. Muestras de Matarratón y Pasto kukiyo (Este es un ejemplo).

FÓRMULA
REACTIVO(NOMBRE) CONCENTRACIÓN
MOLECULAR

Agua destilada H2O 30 mL

Éter de petróleo C5H12 y C6H14 30 mL

Etanol C2H6O 20 mL
2.1.1. Extracto de Licor Tánico (EFLT)

FÓRMULA
REACTIVO(NOMBRE) CONCENTRACIÓN
MOLECULAR
Agua destilada H2O 100 mL

2.1.2. Índice de Acidez de Licor Tánico (IALT)

FÓRMULA
REACTIVO(NOMBRE) CONCENTRACIÓN
MOLECULAR

EFLT 10 mL

Agua destilada H2O 40 mL

Fenolftaleina C20H14O4 3 gotas
Hidróxido de sodio NaOH 0,02N

2.1.3. Saponinas (Sap)

FÓRMULA
REACTIVO(NOMBRE) CONCENTRACIÓN
MOLECULAR
Agua destilada H2O 9 mL
EF1FAN 1 mL
EF2FAN 1 mL
2.1.4. Fenoles Totales (FT)

FÓRMULA
REACTIVO(NOMBRE) CONCENTRACIÓN
MOLECULAR
Agua destilada H2O 1 mL
LT1FAN 1 mL
LT2FAN 1 mL
Fenol C6H6O 1%
Cloruro férrico FeCl3 1%

2.1.5. Alcaloides.

FÓRMULA
REACTIVO(NOMBRE) CONCENTRACIÓN
MOLECULAR

LT1FAN 10 gotas

LT2FAN 10 gotas

Amoniaco NH3 4 gotas

Ácido Acético Glacial CH3COOH 5 gotas

Dragendorff 3 gotas
2.2.5. Taninos Hidrolizables (TH)

FÓRMULA
REACTIVO(NOMBRE) CONCENTRACIÓN
MOLECULAR

Agua destilada H2O 1 mL

LT1FAN 1 mL

LT2FAN 1 mL

Fenol C6H6O 1%

Cloruro férrico FeCl3 1%

2.2 PROCEDIMIENTOS

Cuadro 3.Variables evaluadas y métodos utilizados

VARIABLE (indicador) TÉCNICA ANALÍTICA
evaluada(o)) UTILIZADA
Espectrofotometría con ácido
Taninos Hidrosolubles (THS)
tánico
Espectrofotometría con
Taninos Condensados(TC)
butanol-HCl

Saponinas Centrifugada
Alcaloides Evaporación con, Amoniaco,
Acético Glacial. observación
del color
polifenoles Centrifugada, observar
colores.
Taninos
2.3.1 Protocolos de muestras analizadas (Elaborar una ficha ó formato que
muestre la información fundamental sobre el origen de cada una. Por ej:
especie, nombre científico, lugar de muestreo, datos agroclimatológicos,
animales, etapa productiva, alimentación etc.)

Nombre Especie Nombre Lugar de Datos Animales,

del científico la Agroclimáticos Etapa
forraje muestra productiva y
Alimentación
Matarraton Leguminos Gliciridia Agua de
a Arbórea, sepium Dios Altura: 400 msnm Lo consumen los
perenne (Cund) Animales
Temperatura herbívoros doble
media: 27 gradosº propósito por su
C alto nivel de
proteína y alta
degradabilidad en
el rumen.
Kikuyo Planta de Pennisetum Guayatá Altura: 1270 Alimentación para
crecimiento clandestinum (Boyacá) m.s.n.m. animales
Rastrero Temperatura Rumiantes alta
Gramínea media: 18.2º C degradabilidad en
el rumen. y por su
contenido
 2.3.2 Flujograma general de los procedimientos desarrollados: (Ejemlplo

2.3.2.1. Inicio del proceso.

2.1.1 Flujo grama general de los procedimientos desarrollados incluyendo:

Extracción de
muestra

20 ml H2O Macerar 3 min

destilada
Macerar 4 min

Macerar 3 min
10 ml H2O
eter Saponinas

4 ml H2O destilada Muestra 1ml

Agitar 1 min

Reposar hasta
formar

Medir altura

Clasificar
 Fenoles

Muestra 1ml
2 ml H2O
destilada
Agitar 1 min
1 ml de
FeCl3 3%
Clasificar

Taninos

Muestra 1ml
3 ml de follin

Absorbancia
Espectrofotometr

Clasificar

Esteroles

0.5 ml de muestra
Baño de maria 90 ºC x 5 minutos - 4.5 ml
acido
acético
- 0.5 ml de acido

Agitar 30 seg.
Baño maria 90 ºC x 5 minutos

Comparar

Clasificar
 Alcaloides

0.5 ml de amoniaco 0.5 ml de

Agitar 10 seg 0.5 ml de

Baño de maria 90 ºC x 5 min acido acético
1 ml de reactivo
Dragendorff
Agitar 30 seg
Baño de maria 90 ºC x 3 min

Observar

Clasificar

1. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

3.1 TABLAS DE DATOS (EJEMPLO)

Tabla 1. Información para fenoles totales

Muestra Color
Yacón Amarillo suave
Raíz sagú Amarillo suave
Chacha fruto Rojizo claro
Maní forrajero Rojizo oscuro
Forraje sagú Rojizo oscuro
 Tabla 2. Información para esteroles
Muestra Color
Yacón Amarillo rojizo
Raíz sagú Rojizo transparente
Chacha fruto Amarillo rojizo
Maní forrajero Rojizo transparente
Forraje sagú Amarillo claro
 Tabla 3. Información para Saponinas
Muestra Altura de la espuma
Yacón 1 ml
Raíz sagú 0 ml
Chacha fruto 3 ml
Maní forrajero 4 ml
Forraje sagú 0 ml

Tabla 4. Información para taninos hidrolizables

Muestra Absorbancia
Yacón 0.072
Raíz sagú 0.067
Chacha fruto 0.101
Maní forrajero 0.084
Forraje sagú 0.350
 Tabla 5. Información para taninos condensado
Muestra Absorbancia
Yacón 0.006
Raíz sagú 0.001
Chacha fruto 0.035
Maní forrajero 0.018
Forraje sagú 0.279

Tabla 6. Información para alcaloides

Muestra Color
Yacón Claro transparente
Raíz sagú Amarillo transparente
Chacha fruto Claro transparente
Maní forrajero Amarillo Claro
Forraje sagú Amarillo oscuro
 3.2. ECUACIONES DE CÁLCULO

3.2.1. Densidad. Método Picnométrico.

3.2.1.1. Picnómetro uno (p1)

A) Densidad del agua destilada (dH2O

destilada)
w1 = 15,5787 gr.
w2 = 40,6701 gr.
vp = 25 mL

B) Densidad del Licor Tánico (dLT)

w1 = 15,5787 gr.
w3 = 40,8407 gr.
vp = 25 mL

C) Gravedad o peso específico del Licor Tánico

(GE). dH2O destilada = 1,0037 gr./mL

dLT = 1,0105 gr./mL

3.2.1.1. Picnómetro dos (p2)

A) Densidad del agua destilada (dH2O

destilada)
w1 = 16,4442 gr.
w2 = 42,8182 gr.
vp = 25
 B) Densidad del Licor Tánico (dLT)

w1 = 16,4442 gr.
w3 = 42,8644 gr.
vp = 25 mL

C) Gravedad o peso espécifico del Licor Tánico

(GE). dH2O destilada = ⁄

dLT = ⁄

3.2.2.Índice de Acidez por ácido gálico (IAG).

3.2.2.1. Índice de Acidez por ácido gálico (IAG).

Vf1= 92 mL
Wm = 9,8237 gr.

3.2.2.2. Índice de Acidez por ácido gálico (IAG).

Vf2= 98,5 mL
Wm = 10,1270 gr
 *INCLUÍR AQUÍ, LAS QUE SE UTILIZARON PARA CALCULAR LAS
CONCENTRACIONES DE: TH, TC. Densidad e Índice de Acidez del Licor
Tánico.

3.1 TABLAS DE RESULTADOS (Completar tablas 1 y 2)

Tabla 1.Resultados obtenidos en la cuantificación de

VARIABLE
DESCRIPCIÓN VALOR
FAN (%)
EVALUADA
Taninos
TC Condensados

Taninos W1=0.074
TH
Hidrolizables W2=0.522A
m1= 6.87
pH LT pH Licor Tánico m2= 6.85

W1=3.5 mL
IA LT
W2=0.8 mL
GE LT

Tabla 2.Resultados análisis cualitativo para fitometabolitos secundarios (FAN)

INDICADOR COLOR DESCRIPCIÒN REPRESENTACIÒN

Baja
Fenoles Verde Claro *
Presencia
Mínima
Saponinas 0.1-5.0 mm *
presencia
Baja
Taninos Azul Claro *
presencia
Alta
Alcaloides Amarillo rojizo ***
concentración

pH 6,8 – 7,2 Neutro (-)

(-):Prueba negativa,*baja presencia,**moderada presencia,***Alta concentración

3.1.1 GRÁFICAS (Con base en los resultados obtenidos, elaborar gráfica de
barras en excel e importarla a este documento.,)*

*POR EJEMPLO*

TANINOS HIDR OL IZ AB L E S
400
350
350
300
250
200

T aninos
150
101
100 84
72 67

Y aconR aíz sagúC hacha Mani F orraje

fruto forrajero

Gráfica 1.Indicadores del análisis de FAN para las especies:

3.4. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

De acuerdo a los resultados obtenidos en la práctica se pudo determinar baja

presencia de fenoles totales, taninos y saponinas, mientras que los alcaloides
presentaron una alta concentración haciéndolos no aptos para el consumo animal,
pues sus efectos causan primariamente la inhibición neural, produciendo agudos
signos de toxicidad como convulsiones y parálisis respiratoria. Se supone que el
gusto desagradable es mediado parcialmente a través de efectos neurológicos.

El extracto de Licor Tánico (LT) fue fraccionado mediante la utilización de mezclas

de solventes selectivos (éter de petróleo, etanol, H 2O destilada, Cloruro férrico,
entre otros) Se investigó la presencia de fenoles (FT), taninos hidrolizables (TH),
saponinas (Sap), y alcaloides (Alc). Estos son grupos químicos que presentan
probada actividad biológica por su acción detrimental en los sistemas digestivo y
nervioso, pero que a su vez, en el caso de algunos compuestos, pueden ocasionar
efectos beneficiosos a la salud animal en dependencia de su estructura y acción
específica. Con relación a la presencia de Sap, los ensayos presentaron
resultados con gran variabilidad entre las especies, con alturas relativas de la
espuma entre 1 y 3 mm, equivalentes a contenidos variables. La presencia de Alc
se investigó mediante el empleo de tres reactivos de grupo y en todas las especies
se detectaron sus estructuras, resultados que apoyan la hipótesis de que los
compuestos alcaloidales se encuentran presentes en la mayoría de las especies
arbóreas. Estos metabolitos nitrogenados forman parte de los compuestos
secundarios típicos de las dicotiledóneas y, de forma particular, en las
leguminosas forrajeras del género Erythrina (Sotelo et al., 1995).

Para la descripción de los ensayos se utilizó el sistema no paramétrico de cruces

para especificar la presencia o ausencia de los metabolitos en los tratamientos. En
todos los análisis se siguieron los criterios de (-):Prueba negativa,*baja
presencia,**moderada presencia,***Alta concentración.

Las lecturas correspondientes a los métodos colorimétricos fueron realizadas en

un espectrofotómetro U/V, los Alc mediante titulación ácida (Sotelo et al., 1996),
las Sap por la metodología de Vainillina/H2SO4 (Hiai

4. CONCLUSIONES (Escribir mínimo Cinco)

1. Los alcaloides presentaron una alta concentración haciéndolos no aptos para

el consumo animal, pues sus efectos causan primariamente la inhibición
neural, produciendo agudos signos de toxicidad como convulsiones y parálisis
respiratoria. Se supone que el gusto desagradable es mediado parcialmente a
través de efectos neurológicos.

2. El extracto de Licor Tánico (LT) fue fraccionado mediante la utilización de

mezclas de solventes selectivos (éter de petróleo, etanol, H2O destilada,
Cloruro férrico, entre otros) Se investigó la presencia de fenoles (FT), taninos
hidrolizables (TH), saponinas (Sap), y alcaloides (Alc).
3. Con relación a la presencia de Sap, los ensayos presentaron resultados con
gran variabilidad entre las especies, con alturas relativas de la espuma entre 1
y 3 mm, equivalentes a contenidos variables.

4. Para la descripción de los ensayos se utilizó el sistema no paramétrico de

cruces para especificar la presencia o ausencia de los metabolitos en los
tratamientos. En todos los análisis se siguieron los criterios de (-):Prueba
negativa,*baja presencia,**moderada presencia,***Alta concentración.

5. Las lecturas correspondientes a los métodos colorimétricos fueron realizadas

en un espectrofotómetro U/V

5. BIBLIOGRAFÍA

1. Belmar, Casso Roberto y Nava, Montero Rutilio. Factores Antinutricionales en

la Alimentación de Animales Monogástricos. Facultad de Medicina Veterinaria
y Zootecnia. Universidad Autónoma de Yucatán.

2. Gómez, Georgina; Quesada Silvia y Nanne Clara. Efectos de Factores

Antinutricionales en el Pejibaye sobre el metabolismo de ratas jóvenes,
Agronomía Costarricense 22 (2): 191-198. 1988.

3. Elizalde, Ana de Dios; Porrilla, Yamid y Chaparro, Diana Carolina. Factores

Antinutricionales en Semillas. Facultad de Ciencias Agropecuarias.
Universidad del Cauca. Mayo 5 de 2009.

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