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Este documento describe cómo medir la actividad enzimática, la actividad específica y el grado de purificación de una enzima a través de varias etapas de purificación. Explica que la actividad enzimática mide la cantidad de enzima que cataliza una reacción en un tiempo dado, mientras que la actividad específica relaciona la actividad enzimática con la cantidad total de proteínas. Además, detalla que el rendimiento y el grado de purificación deben calcularse para evaluar el método de purificación.
Este documento describe cómo medir la actividad enzimática, la actividad específica y el grado de purificación de una enzima a través de varias etapas de purificación. Explica que la actividad enzimática mide la cantidad de enzima que cataliza una reacción en un tiempo dado, mientras que la actividad específica relaciona la actividad enzimática con la cantidad total de proteínas. Además, detalla que el rendimiento y el grado de purificación deben calcularse para evaluar el método de purificación.
Este documento describe cómo medir la actividad enzimática, la actividad específica y el grado de purificación de una enzima a través de varias etapas de purificación. Explica que la actividad enzimática mide la cantidad de enzima que cataliza una reacción en un tiempo dado, mientras que la actividad específica relaciona la actividad enzimática con la cantidad total de proteínas. Además, detalla que el rendimiento y el grado de purificación deben calcularse para evaluar el método de purificación.
formación de una determinada cantidad de producto (o desaparición de reactivo) en un tiempo dado en determinadas condiciones de reacción. Actividad específica Lapureza de la enzima se ve reflejada en la actividad específica (Ae) Actividad específica es el cociente de actividad enzimática (expresada en unidades enzimáticas) y la cantidad total de proteínas. Actividad específica = Actividad enzimática Proteínas totales ANÁLISIS DE LOS DATOS
Para juzgar si un método de purificación es
adecuado, deben calcularse: rendimiento y el grado de purificación alcanzados. Las unidades enzimáticas totales de la etapa inicial (100%) puede calcularse el rendimiento de cada etapa refiriendo las unidades totales de cada paso a las iniciales.
Grado de purificación, debe obtenerse
primero el valor de Actividad específica alcanzado en cada paso.
Si se considera la Actividad específica inicial
como unidad de purificación, el grado de purificación de cada etapa se calcula haciendo el cociente entre la Ae de dicha etapa y la del primer paso. Monitoreo del proceso de purificación Actividad Enzimática específica Unidades totales en la fracción i Total de proteínas en la fracción i Rendimiento Unidades totales en la fracción i Unidades totales en la fracción original Grado de purificación AE en la fracción i AE en la fracción original