TALLER 2 BIOLOGÍA CELULAR

Aula B

2.3 Explique brevemente en qué consiste la reparación de ADN por recombinación

homóloga. Compárelo con el mecanismo de reparación por unión de extremos no
homólogos. ¿Qué consecuencias biológicas tendrán la actuación de uno u otro
mecanismo de reparación ante un daño en la doble cadena de ADN?

Las células tienen mecanismos de reparación para detectar y corregir varios tipos de daño
al ADN. Uno de los procesos de reparación que ayudan a arreglar el ADN dañado es la
reparación de ruptura de la doble cadena, donde se utilizan dos vías principales, la unión de
extremos no homólogos y la recombinación homóloga.
El sistema de unión de extremos no homólogos se unen los dos fragmentos dañados
generando mutaciones en el sitio de unión. La generación de mutaciones es producto de la
pérdida de algunos nucleótidos durante la ruptura de la doble cadena, los cuales no pueden
ser reemplazados por este sistema. Por lo tanto, este mecanismo de reparación da lugar a
una elevada frecuencia de errores.💯
Por el contrario, el mecanismo de reparación del ADN por recombinación homóloga utiliza la
información de una hebra de ADN que tenga alto grado de homología con la hebra dañada.
Esta hebra servirá como base para que el sistema repare el error, sin generar una mutación.
Este mecanismo puede darse únicamente post-replicación, cuando las cromátidas
hermanas siguen unidas. 💯
Las consecuencias biológicas que podría tener la actuación del mecanismo de reparación
por unión de extremos no homólogos es la acumulación de errores, lo que podría llevar al
desarrollo de tumores, a la muerte celular (apoptosis), a la senescencia. Por el contrario, el
mecanismo de recombinación homóloga no genera mutaciones.💯

2.4 ¿Recuerda algún otro proceso celular, distinto al proceso de reparación, que
también involucre a la recombinación homóloga?

El mecanismo de recombinación homóloga no sólo es un mecanismo de reparación del

ADN, sino que está implicado en otros procesos celulares.
Los mecanismos de reparación del ADN tienen como objetivo el mantenimiento de la
integridad del genoma. Estos mecanismos reparan el ADN dañado, ya sea en una o en
ambas cadenas el daño. La recombinación homóloga es un sistema de reparación en
cadena doble.
Otro de los procesos celulares que implican a la recombinación homóloga son:
-Crossing over: Intercambio de segmentos del ADN entre cromosomas homólogos durante
el desarrollo de la meiosis. Este hecho se da en la primera división meiótica, en la profase I.
Específicamente en paquinema y terminando en diplonema.
El crossing-over es una importante fuente de variabilidad genética, junto a otros
mecanismos que tienen lugar en la división, permiten que las células hijas sean diferentes
entre sí y diferentes a la célula madre.
-La recombinación homóloga también está implicada en la reorganización de secuencias
específicas en el ADN que alteran la expresión y función de algunos genes durante el
desarrollo y diferenciación.
2.5 ¿Qué implicancias podría tener esta mutación si afectará al proceso de splicing?
Explique
La mutación que se puede dar es una mutación de sitio de corte, es decir, cuando se
produce una alteración en la secuencia GT 5´ o AG 3´ (el splicing trabaja en el ARN
transcripto primario: la secuencia 5´ en el intrón es GU y en el 3´ es AG, pero en este caso
estamos trabajando en el ADN y por lo tanto no hay uracilo sino timina). Si la mutación se
da en el extremo 5´, no se va a reconocer ese sitio de corte y el exón va a incluir una parte
del intrón hasta que aparezca el siguiente GT en la secuencia, que puede encontrarse en el
mismo intrón o en el exón siguiente; por el contrario, si la lesión se produce en el extremo 3
´, no se produce un reconocimiento de ese sitio de corte, por lo que se va a cortar en el
extremo 5´del intrón, y va a buscar el siguiente AG, que se encuentra en el exón siguiente o
“lugar críptico”, produciendo un sitio de empalme críptico, removiendo un segmento de ese
exón. .💯
Las implicancias que podría tener esta mutación si afectara al proceso es que podría
suceder que no se reconozca el inicio y final de cada intrón. Por lo tanto, no se discriminaría
entre exones e intrones.
Esto podría generar la formación de proteínas no funcionales.

2.6 Explique qué son las “secuencias de terminación prematuras” y relacione con el
proceso de degradación del ARNm por secuencias de terminación prematura (sigla
en inglés: NMD-Nonsense Mediated Decay)
Las Secuencias de terminación prematuras incluyen la presencia de un codón STOP
prematuro (UAG-UAA-UGA).
Para dar un breve ejemplo, suponemos que se introduce una mutación en el cuarto triplete
en la secuencia de ADN (CGA), provocando que la citosina sea reemplazada por una
timina, conduciendo a la aparición de un codón (TGA) en la secuencia de ADN. Ya que al
ser transcripto el codón TGA se convierte en UGA, este actúa como codón de terminación,
por lo que los codones restantes del ARNm no son traducidos a aminoácidos debido a que
el codón de terminación prematuro produce la liberación del producto proteico, y el desarme
del complejo ribosomal. Esto puede tener como consecuencia la formación de proteína
truncada, que muchas veces es incapaz de cumplir las funciones de la proteína normal.
En algunos casos podría generar una proteína más corta, la cual poseería una nueva
función. Esta nueva función podría resultar perjudicia o beneficiosa para la célula.
Para evitar esto existe un mecanismo celular de vigilancia denominado “Nonsense Mediated
Decay” (NMD) o “mecanismo de degradación de ARNm mediada por mutaciones
terminadoras”, el cual detecta la presencia de un codón stop prematuro en el ARNm y lo
degrada. Gracias a ello, se evita la expresión de proteínas truncadas o erróneas..💯

Como nombramos previamente, este mecanismo celular de vigilancia dirige la degradación

de moléculas de ARNm defectuosas y previene la síntesis de proteinas anómalas
truncadas. ¿Cómo es que funciona este mecanismo?
Este mecanismo se inicia por el complejo de unión de exones (EJC) que se depositan
durante el splicing del pre ARNm. Este complejo señaliza las uniones entre los exones.
Normalmente, las EJC son retiradas por el ribosoma durante la primera ronda de traducción
del ARNm. No obstante, si se da un EJC en un punto de la secuencia más allá del codón
del codón de terminación, entonces este EJC aún permanecerá unido al ARNm cuando el
ribosoma llegue al codón de terminación, y de ese modo servirá para desencadenar este
mecanismo celular de vigilancia, ya que los factores proteicos implicados en esta función
identifican la presencia de un EJC "corriente abajo" como un problema, de modo que el
ARNm erróneo se degrada.