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Métodos de Cuantificación de Biomasa. Ventajas y Desventajas de La Turbidimetria y Densidad Óptica (Absorbancia)
Métodos de Cuantificación de Biomasa. Ventajas y Desventajas de La Turbidimetria y Densidad Óptica (Absorbancia)
LABORATORIO DE BIOTECNOLOGIA
Estudios teóricos y experimentales han mostrado que soluciones diluidas de diferentes tipos
de bacterias, independientemente del tamaño celular, tienen casi la misma absorbancia por
unidad de concentración de peso seco. Esto quiere decir que, en soluciones diluidas, la
absorbancia es directamente proporcional al peso seco, independientemente del tamaño
celular del microorganismo.
Entre las ventajas mas destacables de los métodos de dispersión de luz están:
Las suspensiones con las que se trabajan no deben tener una absorbancia mayor a 0.3, ya
que valores mayores producen desviaciones de la ley de Beer.
El trabajar con suspensiones diluidas puede involucrar un mayor error de pipeteo y menor
sensibilidad por el bajo nivel de absorción.
Existe una relación directamente proporcional entre la absorbancia y el peso seco, no así entre
la misma y el número total de microorganismos. En estos gráficos se puede apreciar que
suspensiones diluidas de dos microorganismos diferentes con igual peso seco tienen la misma
absorbancia, mientras que para el mismo número de microorganismos totales la absorbancia
de cada suspensión es distinta
Cabe recordar, que se encuentran absorbancias muy diferentes por partícula o por UFC
(Unidad Formadora de Colonia) cuando los tamaños de las células bacterianas son diferentes.
Por esta razón, para estimar el número de microorganismos totales o el número de
microorganismos viables de una suspensión bacteriana debe realizarse una "curva de
calibración" con cada tipo de microorganismo, sólo de esta forma es posible relacionar
Absorbancia (Densidad Óptica) con el número de microorganismos totales o con UFC.
Absorbancia en función del Peso Seco
Bibliografía
www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioRecuento.htm
www2.udec.cl/~pasantias/publicacion/10.pdf
http://es.scribd.com/doc/22450159/eq-8-cuantificacion-y-aislamiento-de-microorganismos-
microbiologia