3/2/2020 Termociclador - Wikipedia, la enciclopedia libre

Termociclador.

Un termociclador, también conocido como máquina de PCR o reciclador térmico de PCR es un

aparato usado en biología molecular que permite realizar los ciclos de temperaturas necesarios para
una reacción en cadena de la polimerasa de amplificación de ADN o para reacciones de secuencia
con el método de Sanger. El modelo más común consiste en un bloque de resistencia eléctrica que
distribuye a través de una placa una temperatura homogénea durante tiempos que pueden ser
programables, normalmente con rangos de temperatura de 4 °C a 96 °C. Dado que las reacciones
incubadas en el aparato son en soluciones acuosas, suelen incluir una placa de tapa calentada
constantemente a 103 °C para evitar la condensación de agua en las tapas de los tubos donde
ocurre la reacción, y así evitar que los solutos se concentren, lo que modificaría las condiciones
óptimas para la enzima polimerizante y la termodinámica del apareamiento de los iniciadores.
También existen otras tecnologías menos populares utilizando distribución de aire caliente en tubos
suspendidos, logrando el mismo objetivo de transferir calor eficientemente a la reacción para que
cambien los ciclos de temperaturas. Entonces, en el termociclador se programan ciclos rápidos y
continuos para iniciar los procesos de separación y desnaturalización de las cadenas de ADN molde
a bajas temperaturas, luego a bajas temperaturas el anillamiento e los iniciadores para que luego
actúe la polimerasa Taq incorporando los dNTPs de acuerdo al ADN molde durante el proceso de
PCR.

Sin duda, el termociclador ha sido una gran herramienta, la cual ha ayudado enormemente a la
comunidad científica al momento de realizar experimentos a través de la técnica de reacción en
cadena polimerasa, la cual aunque posee solo tres pasos para ser realizada, conlleva cambios de
temperatura que deben ser muy precisos ya que cualquier error de cálculo puede resultar en un
experimento fallido. Debido a estas implicancias, fue necesario idear una tecnología dura con la cual
se pudiera obtener una reacción en cadena polimerasa con el menor inconveniente posible, donde
solo se introdujeran los reactivos y la reacción se desarrollara sin ninguna intervención manual, de
esta necesidad se logró desarrollar el termociclador, el cual se encarga de transformar energía
(energía eléctrica a energía térmica para cambiar la temperatura, dependiendo de la etapa a la cual

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se encuentre el experimento), intercambiar información (ya que el software se encarga de recibir y

dar información con respecto al experimento) y controlar tanto la materia como la energía con la
cual se realiza el experimento, por ende el termociclador trabaja con los tres tipos de operando en
lo que a tecnología se refiere (materia, energía e información).

Distintos tipos de termocicladores

Termociclador
estándar.

Desde sus inicios, esta tecnología se ha ido desarrollando para adaptarse a las distintas necesidades,
por ejemplo existen termocicladores en los cuales los ciclos no producen evaporación de la mezcla
(utilizando gotas de aceite mineral), otros que permiten realizar varios programas al mismo tiempo
y otros que permiten trabajar a temperaturas diferentes, y muchos otros más. Pero en lo que a
modelo estándar se refiere, encontraremos como características un teclado y pantallas las cuales
nos indican la temperatura, los ciclos y el tiempo.

Desde hace algunos años varias compañías que fabrican y comercializan estos aparatos han
cambiado la resistencia eléctrica por la tecnología Peltier aprovechando las propiedades de los
semiconductores. Este material ofrece mejor uniformidad en la temperatura y rampas de incremento
y decremento de la temperatura mucho más pronunciadas, obteniendo mejores resultados en los
procesos del PCR. En la búsqueda de mejorar la precisión, exactitud y homogeneidad de la
temperatura también se han introducido metales como el oro, la plata y otras aleaciones en los
bloques de los pozos, logrando estabilidad y reproducibilidad en los ensayos. Los actuales
termocicladores son capaces de realizar rápidos cambios de temperatura, y de esta forma realizar
los pasos de desnaturalización del ADN, alineamiento o unión del cebador con la secuencia de ADN
complementaria y extensión de la cadena de ADN de forma cíclica. En otras palabras, la tecnología
del termociclador ha llegado a ser muy versátil en cuanto a las distintas necesidades de los
experimentos que van surgiendo con el tiempo.

Los inconvenientes de los termocicladores que utilizan celdas peltier es que se pueden dañar
fácilmente, además la mayoría de termocicladores traen incorporado el módulo de mando allí

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mismo a través de una pantalla líquida o pantalla de última generación (que son bastante costosos).

Precauciones de uso …

Muchos instrumentos en los laboratorios pueden provocar ciertos accidentes, y el termociclador no

es la excepción:

El calentar las muestras puede provocar explosiones debido a la diferencia de velocidad de

calentamiento produce burbujas que pueden estallar.

Si no se tiene aflojado el tapón de las botellas o matraces es posible que estos estallen.

Se debe utilizar la ropa y pantalla facial adecuadas, y controlar la intensidad del aparato, que solo
puede ser la máxima con agua y la mínima si se utiliza gel de agarosa.

Deberá existir una tabla que muestre los tiempos en cada posición del potenciometro y de las
cantidades a emplear.

Innovaciones

Resultados de PCR del

equipo Termogen I.

Termocicladores con flujo de aire que no utilizan celdas peltier y que son muy estables y de alto
desempeño existen también, como los desarrollados por el agrónomo Jose Luis Altahona Santos de
Abbi Win de Colombia, Termogen I;[1] por otro lado, también incorporan conexión vía USB de tal
manera que el entorno de operación se realiza desde la computadora y no desde el mismo equipo.

Actualmente, Altahona, el inventor de Termogen I, trabaja en el desarrollo de varias innovaciones

para futuros termocicladores:

1. Termocicladores de flujo de aire en tiempo real.

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2. Termocicladores de flujo de aire en tiempo real y de uso familiar.

Esto quiere decir que está encaminando el uso de los termocicladores a personas no expertas en el
tema, la analogía de lo que fuera el impulso de las computadoras familiares en los años 70´s y 80´s.

Bajo el sistema de flujo de aire y el desarrollo de nuevas gradillas para los tubos que contienen la
mezcla de PCR (reacción en cadena de la polimerasa)[2] han logrado bajar los costos de un equipo
termociclador.

En cuanto a los termocicladores convencionales que utilizan una tapa caliente que si llega a fallar
puede dañar todo el proceso de PCR, el termociclador que utiliza flujo de aire como Termogen I no
tienen dicho problema, pues no utilizan tapa caliente, ya que el aire más caliente llega por la parte
superior del tubo que contiene la mezcla de PCR evitando así la condensación de la mezcla sin
necesidad de tapa caliente.

Tremogen I, primera generación.

El desarrollo de una nueva gradilla para el proceso de PCR en Termogen I se basa en dos láminas
que se encuentran a cierta posición la una de la otra y el flujo de aíre que llega de la parte superior
se mantiene relativamente estable entre el espacio de las dos láminas que es donde se encuentra la
mayor parte del tubo de PCR.

Funcionamiento de la gradilla de Termogen I

https://es.m.wikipedia.org/wiki/Termociclador 4/6
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Gradilla del termociclador de flujo de aire Termogen I de Abbi Win.

Bajo el sistema de Termogen I, el flujo de aíre llega desde la parte superior. Esta gradilla tiene por lo
menos dos láminas (de aluminio o cobre), la lámina de la parte superior permite más paso de aíre
que el de la parte inferior, logrando que el aíre permanezca estable, sosteniendo la temperatura en
el punto ordenado por el programa informático del equipo y haciendo contacto con la mayoría del
espacio del tubo que contiene la mezcla logrando un exitoso y eficiente proceso de PCR.

Ventajas de Termogen I

Entre las muchas ventajas de Termogen I se destaca el hecho que el usuario final del equipo
(estudiante, profesional o investigador) puede llegar a modificar fácilmente muchos parámetros del
equipo desde partes electrónicas, físicas o las gradillas para que funcionen para la gran
disponibilidad de tubos de PCR que se encuentran hoy en el mercado.

Altahona no ha patentado su invención y deja incluso libre el código de operación del

microcontrolador del equipo de tal manera que permite explorar nuevas configuraciones y nuevos
usos.

Fotografía PCR
Termogen I (segunda
línea) versus equipo
comercial (primera
línea).

Referencias

1. «Termogen I» . Archivado desde el original el 15 de septiembre de 2017. Consultado el 20

de diciembre de 2016.

https://es.m.wikipedia.org/wiki/Termociclador 5/6
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2. Instituto Nacional de Investigación del Genoma Humano (19 de diciembre de 2016). «Reaccion
en Cadena de la Polimerasa» . https://www.genome.gov (en español/inglés).

Enlaces externos

PCR Protocol with a Thermal Cycler.

Laboratorio de bioquímica: una visión práctica. Google Books.

Determinación de la diversidad genética de Crinipellis perniciosa. Zoila Karina Solís Hidalgo.

Google Books.

http://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2013/ir132d.pdf

http://genemol.org/biomolespa/PCR/PCR.html

https://web.archive.org/web/20170915070237/http://www.abbiwin.com/investigacion_desarrollo/
descarga_manual_termogen_1.pdf

Datos: Q574762 Multimedia: Thermocyclers

https://es.m.wikipedia.org/wiki/Termociclador 6/6