Flores Pérez Dante Leonardo Laboratorio de Fitofármacos Grupo: 2801

Fecha de entrega: viernes 21 de febrero

No. de Práctica: 3 CONTROL DE CALIDAD MICROSCOPICO

Cuestionario previo

1. Explicar que es un microscopio óptico y en qué casos se usa.

En el caso de un microscopio óptico se genera la imagen aumentada a partir de distintas lentes. Algunas de ellas montadas
en el objetivo del microscopio y otras en el ocular. En primer lugar, las lentes del objetivo generan una imagen real aumentada
de la muestra. Esta imagen real es a continuación ampliada mediante las lentes del ocular dando lugar a una imagen virtual
de tamaño superior a la muestra original. En este tipo de microscopio se ilumina el preparado desde la parte superior a través
del objetivo o lateralmente. La luz reflejada en el preparado es captada por el objetivo. Gracias a esta técnica es posible usar
preparados opacos o espesos. Los microscopios de luz reflejada se usan con frecuencia en la microscopía de fluorescencia o
en la mineralogía.
Este instrumento ha sido de gran utilidad, sobre todo en los campos de la ciencia donde la estructura y la organización
microscópica es importante, incorporándose con éxito a investigaciones dentro del área de la Química (en el estudio de
cristales), la Física (en la investigación de las propiedades físicas de los materiales), la Geología (en el análisis de la
composición mineralógica de algunas rocas) y en el campo de la Biología (en el estudio de estructuras microscópicas de la
materia viva.
Se utiliza en laboratorios de histología y anatomía patológica, donde la microscopía permite determinadas aplicaciones
diagnósticas como el diagnóstico de certeza del cáncer, numerosas estructuras cristalinas, pigmentos, lípidos, proteínas,
depósitos óseos, depósitos de amiloide entre otras.

2. Explicar qué es la estandarización botánica de una droga vegetal.

La estandarización botanica puede ser definida como el establecimiento de la calidad reproducible por medio de la
comparación de un producto con sustancias de referencias establecidas y definiendo las cantidades mínimas de uno o
varios componentes o de un grupo de componentes. Con ello, se persigue garantizar la potencia de los componentes
en el producto final. Existen varias razones para estandarizar, entre ellas tenemos:
- Obtener productos reproducibles y de calidad.
– Los productos pueden cumplir con los estándares básicos requeridos.
-Los extractos estandarizados pueden ser sometidos a ensayos clínicos y probar científicamente sus efectos.
– Los extractos estandarizados ofrecen al consumidor mayor seguridad (objetiva y subjetiva) y así se incrementa el nivel
de confianza en los productos.
La estandarización es importante ya que garantiza la calidad y seguridad del consumidor así como la reproducibilidad de
los distintos lotes en el producto final.

3. Mencionar y explicar las principales pruebas que se realizan como parte del control de calidad microscópico del
material vegetal, según la Farmacopea Mexicana.
-Clarificación de partículas microscópicas: consiste en eliminar impurezas con disolventes que causan oscurecimiento en el
análisis

-Detección histoquímica de paredes y contenidos celulares: agregar diferentes reactivos ya sea en polvo o gotas de solución
y observar el tipo de pared celular o contenido dependiendo del cambio de coloración.

-Detección de tejidos: observar el comportamiento de los tejidos celulares con diferentes reactivos

-Estomas de hojas: observar el tipo de estomas presentes

4. Explicar que tipos de células vegetales existen.

Células del parénquima

Las células del parénquima conforman uno de los tres tipos de tejido vivo fundamental de las plantas. Estas células son de
paredes delgadas y estructura no especializada. Por lo tanto, son adaptables a diversas funciones. El parénquima está presente
en las hojas, en la corteza de tallos y en las raíces. De igual manera, forma parte de los tejidos blandos de las frutas. El tejido del
parénquima puede ser compacto o tener espacios extensos entre sus células.
Células del colénquima
Las células de colénquima son células alargadas con paredes celulares gruesas que proporcionan soporte y estructura. Estas
paredes están constituidas por compuestos de celulosa y pectina.
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Fecha de entrega: viernes 21 de febrero
Estas células a menudo se encuentran debajo de la epidermis, o la capa externa de los tallos jóvenes, y en las venas de las
hojas.
Células del esclerénquima
Las células del esclerénquima son generalmente células muertas que tienen paredes secundarias muy gruesas contentivas de
lignina. Las células son rígidas y no se pueden estirar.
Generalmente, se encuentran en regiones específicas de los cuerpos de las plantas, como la corteza, hojas o en los tallos
adultos.

5. Explicar cómo se realiza un corte histológico de una droga vegetal.

Posterior a la deshidratación el tejido se debe sumergir en un líquido que sea miscible tanto en el medio de inclusión como
en el medio de deshidratación.
Para poder obtener cortes delgados que puedan ser observados al microscopio óptico, los tejidos deben ser incluidos en
una sustancia de consistencia firme, la cual puede ser hidrófila o hidrófoba. El taco obtenido en la inclusión se debe cortar
en
secciones lo suficientemente delgadas que permitan el paso de la luz, para esto se utiliza un aparato
llamado micrótomo.
Los cortes que se van obteniendo se deben ir estirando, esto se puede realizar en un baño termoregulado (40-45 ºC). El
estiramiento se basa en la dilatación de la parafina producto del calor.  Luego estos cortes se van recogiendo con un
portaobjetos.
Primero la parafina debe ser eliminada sumergiendo los portaobjetos con los cortes en un solvente orgánico que puede ser
xilol. Luego los cortes deben ser hidratados pasando por una serie de graduaciones decreciente de alcohol etílico, hasta
llegar a una solución que sea 100% agua. Una vez rehidratado el tejido puede ser teñido. Los colorantes más utilizados son
hematoxilina y eosina.
Luego de teñir el tejido este debe ser deshidratado nuevamente, para esto hay que pasarlo por una serie de alcoholes en
grado ascendente. Posteriormente hay que pasar el tejido por xilol, de modo de hacerlo miscible con el medio de montaje.
Finalmente, se le agrega el medio de montaje y se le coloca el cubreobjetos, teniendo cuidado en no dejar burbujas.
6. Explicar que son los reactivos para aclarar tejido vegetal.
Posterior a la deshidratación el tejido se debe sumergir en un líquido que sea miscible tanto en el medio de inclusión como
en el medio de deshidratación. El líquido comúnmente utilizado es el xilol. Esta etapa se llama aclaramiento debido a que el
tejido se vuelve transparente.
7. Explicar los siguientes términos: estomas, tricomas, fibras, tráqueidas y células de parénquima. Incluir esquemas
y/o fotografías.
Estomas: Abertura microscópica del tejido epidérmico de los vegetales superiores, especialmente el de las hojas y partes
verdes, por donde se verifica el intercambio de gases entre la planta y el exterior.

Tricomas: Los tricomas son excrecencias de origen epidérmico, de formas muy variables y glandulares o no, presentes en
vegetales.

Fibras traqueidas: Las traqueidas son células alargadas y con fosas en sus extremos que, en las plantas vasculares, funcionan
como conductos para transportar agua y sales minerales disueltas.

Células perènquima: Las células del parénquima conforman uno de los tres tipos de tejido vivo fundamental de las plantas.
Estas células son de paredes delgadas y estructura no especializada.

Figure 1 Estoma Figure 2 Tricomas Figure 3 Fibras Figure 4 Perenquima

Bibliografía

 Farmacopea Herbolaria de los Estados Unidos Mexicanos. (2013).

 De Robertis (h.) E.M.F; J.Hib & R. Ponzio. 1996. Biología Celular y Molecular. Ed. El Ateneo.
 Cordero Achá, D. (2007). Manual de Introducción a la Botánica. La Paz, Bolivia: Publicaciones Integrales.