UNIVERSIDAD DE LA Ministerio de

Educación Nacional
AMAZONIA República de Colombia
NIT: 891.190.346-1
Sede Florencia - Caquetá Libertad y Orden

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

PROGRAMA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
PRACTICA No. 2
EXTENSIÓN SANGUINEA Y COLORACIÓN
LUGAR FECHA DD/MM/AA
LABORATORIO 4102

DOCENTE: DORIS STELLA CASTAÑO PIAMBA

ASIGNATURA: LABORATORIO CLÍNICO VETERINARIO
CODIGO: 3020703

OBJETIVOS
1 Realizar extensiones sanguíneas
2 Conocer las partes de un extendido sanguíneo
3 Adquirir destreza para realizar frotis sanguíneos
Colorear por los métodos de Giemsa, Wright y Hemacolor los frotis Sanguíneos
4
siguiendo la técnica anotada anteriormente.
Observar al microscopio la morfología, agrupación, tinción y otras características de
5
las estructuras observadas.
6 Realizar esquemas, gráficas de la observación microscópica.

ACTIVIDADES
EXTENSIÓN SANGUÍNEA
1 Se toma el portaobjetos desengrasado con la mano izquierda entre los dedos
pulgar e índice, o bien puede hacerse sobre la superficie de la mesa.
Se coloca una pequeña gota de sangre en el extremo derecho del portaobjetos a 1
2
cm de su borde.
Se coge la extensora con la mano derecha sosteniéndolo por sus lados largos
formando un ángulo de 45°, con el portaobjetos vertical, con el borde extensor
3
hacia abajo. Un ángulo más agudo origina una extensión más delgada, y un
ángulo mayor origina una extensión más gruesa.
La extensora se pone en contacto con el portaobjetos, un poco adelante de la gota
4 de sangre, y se desliza la extensora hasta que alcance suavemente la gota y se
espera que esta se extienda por capilaridad a través del extensor.
Cuando esto a sucedido se desliza la extensora hacia el extremo izquierdo del
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portaobjetos, en un movimiento suave, rápido y firme.
6 Se marca la extensión en uno de los extremos del portaobjetos.
1 TINCION DE WRIGHT
2 Se realiza la extensión sanguínea, se deja secar.
Se coloca el portaobjetos en el soporte o caja, si es en el soporte, asegurarse que
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la extensión esté hacia arriba.
4 Se inunda la extensión con el colorante hasta que quede cubierto completamente.
5 Se deja actuar el colorante durante cinco (5) minutos, al cabo de este tiempo se le
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adiciona buffer de Giordano con una pipeta o frasco dispensador a cada lámina
hasta que se forme la escarcha metálica.
6 Con la escarcha se deja actuar cinco (5) minutos más.
7 Al cabo de este tiempo se lava con agua de chorro y se deja secar.
Se observa al microscopio
TINCION DE GIEMSA
1 Se realiza la extensión sanguínea, se deja secar.
Se hace una fijación en metanol absoluto durante dos segundos aproximadamente,
2
esta se hace sumergiendo la lámina con el extendido en el metanol.
3 Se coloca el portaobjetos en el soporte o caja de coloración según sea el caso.
Se inunda el extendido con el colorante de Giemsa y se deja cubierto con este
4
durante siete (7) minutos.
5 Al cabo de este tiempo se lava con agua de chorro y se deja secar
6 Se observa al microscopio

FIJACION DE LAS PLACAS

TINCIÓN HEMACOLOR
1 Teñir el frotis con Hemacolor, siguiendo el procedimiento indicado:
2 Fijar el frotis en la Solución 1, introduciendo la lámina 5 veces por 1 segundo.
3 Teñir con la solución 2, introduciendo la lamina 3 veces por un segundo.
4 Teñir con la solución 3, introduciendo la lámina 6 veces por un segundo.
5 Lavar con solución tampón 45 segundos.
6 Dejar escurrir y secar al aire libre.
Con débil aumento explorar la preparación para localizar la zona en la que el frotis
es adecuado para la lectura. Los lugares más aptos son aquellos en los que la
7 extensión de los glóbulos se ha conseguido en una sola capa, están bien teñidos y
no se han producido precipitados de los colorantes. Cuando se observe una zona
apta, pasar a aumentos más fuertes.
Hacer un recuento de 100 células blancas en total, diferenciando cada una de ellas
8
según sus características.
Evaluar la morfología de eritrocitos, leucocitos y plaquetas y reportar
9
anormalidades en pequeños animales.
Se deben guardar las láminas por un mes en laminario por si se presentan trabajos
10
no conformes o alguna verificación.

MATERIALES
1 Lámina portaobjetos desengrasada con alcohol-acetona
2 Lámina extensora
3 Muestras de Sangre con anticoagulante.
4 Colorantes de Giemsa, Wright y hemacolor
5 Guantes

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6 Bata
7 Marcador tinta indeleble
8 Microscopio
9 Laminillas
10 Aceite de inmersión
11 Micropipeta 20 µL
12 Puntas para Micropipeta
13 Gradilla

EVALUACION
1 Análisis de resultados de las técnicas realizadas.

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Docente DORIS STELLA CASTAÑO PIAMBA

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