Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas

ESCUELA SALUD

GUIA REALIZACION DE FROTIS SANGUINEO Y TINCION DE LÁMINAS

DIRIGIDO A ALUMNOS DE:
Técnico Superior de Laboratorio Clínico y Banco de Sangre

PRE-REQUISITO:
Laboratorio Clínico I (LCS 2100) .

Autores: BQ Cecilia López Reyes EU. Eliana Escudero DuocUC

OBJETIVOS Al finalizar el taller el alumno será capaz de:  Realizar frotis sanguíneos  Realizar las tinciones hematológicas corrientes  Manipular con seguridad material contaminado REALIZADO POR Tecnólogo Médico. y en algunos casos es esta observación la que entrega al Clínico la información que requiere para realizar su diagnóstico.Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas INTRODUCCIÓN El frotis sanguíneo es realizado en forma rutinaria en todo hemograma. Esto dependerá del laboratorio y de la experiencia del profesional. Bioquímico. Químico Farmacéutico. se obtienen los datos gráficamente desde el equipo y es opcional el uso del frotis ( lectura total . ya que un frotis mal hecho entrega muy poca información acerca de la morfología celular. En este último sistema. ya sea que se realice en forma manual o automatizada. DURACIÓN 90 minutos NUMERO DE ALUMNOS POR DOCENTE Máximo 10 alumnos Autores: BQ Cecilia López Reyes EU. Biólogo. cuando hay normalidad en todos los elementos. Eliana Escudero DuocUC . La importancia de un buen extendido y su correcta tinción son fundamentales a la hora de la observación al microscopio. parcial o nada).

Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas MARCO TEÓRICO Frotis sanguíneo: es la extensión de sangre realizada sobre un portaobjeto y a partir de la cual se observarán. Observación microscópica de un frotis teñido 2 Autores: BQ Cecilia López Reyes EU. esto dependerá de cada laboratorio. trastornos genéticos de la forma de los eritrocitos. cuando hay normalidad en todos los elementos sanguíneos. Usos: Es un análisis rutinario que acompaña a todo hemograma. En este último caso. Eliana Escudero DuocUC . se obtienen los datos gráficamente y es opcional verificarlo. ya sea en forma manual o automatizado. posibles deficiencias de vitamina B12. Este preparado entrega valiosa información en casos como las leucemias. Observación microscópica de un frotis ya teñido 1. deficiencias de hierro. al microscopio. las características de las células sanguíneas.

bien extendidas y bien coloreadas. se reconoce fácilmente en estudio panorámico. En algunos laboratorios prefieren que éste sea hecho por personal capacitado y lo realizan al recibir la muestra. ya que si es menor a dos horas la calidad de un frotis se conserva. Autores: BQ Cecilia López Reyes EU. Para esto. Foto 3 Realización Frotis sanguíneo Habitualmente éste se realiza al momento de tomar el hemograma al paciente. pero si es mayor puede empezar a adulterarse el estado de las células. En laboratorios de países desarrollados y sólo en algunos laboratorios de Chile existen equipos automatizados que realizan los frotis y esto implica disminuir el riesgo de la manipulación y aumentar las medidas de bioseguridad. las extensiones deben ser delgadas. Eliana Escudero DuocUC .Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas Una leucemia o leucopenia acentuada. cuando el tamaño de los hematíes es variable y poiquilocitosis cuando hay variaciones en su forma. La tecnica será revisada en detalle en el taller. Se dice que hay anisocitosis. Esto estará relacionado con el tiempo de traslado del hemograma al laboratorio.

1 set por alumno (solución May-Grunwall en solución alcohólica. tampón fosfato pH 7. tampón fosfato pH 7.2 con 12. Con la lanceta estéril realizar una punción en un pulgar o utilizar una gota de sangre del tubo de hemograma. Esperar a que se seque la lámina.  Carros de tinción (para poner portaobjetos en las cubetas de tinción). ( lo ideal es una gota sin mezcla de anticoagulante) 2.5 mL de Giemsa)  Cubetas para tinción. 3. con la zona donde está la muestra mirando hacia arriba. Con un cubreobjetos (tomarlo lateralmente entre las yemas de los dedos) deslizarlo sobre toda la superficie del porta de manera que se pueda obtener una fina película de sangre. dejarla sobre una rejilla o toalla de papel. Autores: BQ Cecilia López Reyes EU. ( observe la foto 3) 4.2 con 3 mL de solución MayGrunwall. 1 set de tres cubetas por cada alumno (o recipientes plásticos de 15 x 15 x15 cm). Depositar una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos muy limpio (libre de pelusas y grasa). Eliana Escudero DuocUC .Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas INSUMOS Y EQUIPOS REQUERIDOS  Portaobjetos (10 por alumno)  Tinciones para hematología. El inicio del frotis se denomina cabeza y la parte final del frotis se denomina cola. 1 por alumno  Pizetas con agua destilada  Toalla de papel  Guantes  Cubreobjetos 1 caja  Tubos con muestras de sangre con EDTA DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO Técnica para la realización de un frotis: 1.

8. guardar la primera solución en un frasco. en el carro de tinción. Dejar sobre papel absorbente. Dejar por 1 minuto. Tinción May-Grunwall: Para preparar 1000 ml de solución. Eliana Escudero DuocUC . Sacar el carro de la tinción y lavar con agua corriente por 1 minuto. Pasadas las 24 horas filtrar la solución y guardar. Desechar las otras dos soluciones. Dejar reposar la solución por 24 horas. 5. Pasar el carro de tinción a la 2º cubeta.3 gramos de May Grunwald y enrasar en matraz aforado a 1000 ml con metanol. Vida Integra) (sólo informativo. 4.2 con 12.2 con 3 mL de solución MayGrunwall. Pasados los tres días filtrar la solución y guardar. pesar 1. antes estilar el colorante de la primera cubeta. Trasladar los frotis a una bandeja para su secado. Hematóloga Laboratorio. Limpiar los frotis por el reverso. 3. para esto mantener tapado mientras no se utilice (contiene May-Grunwall en solución alcohólica). Poner en la 3º cubeta por 12 minutos. Preparación de las cubetas de tinción: En las cubetas de tinción realizar el siguiente procedimiento:  1º cubeta: poner solución May-Grunwall suficiente para cubrir el nivel de los frotis. Poner los frotis. 7. sacar la solución del baño y agregar 300 ml de metanol. Autores: BQ Cecilia López Reyes EU.  3º cubeta: 300 mL de tampón fosfato pH 7. con papel suave. Al finalizar el proceso. 2. Tinción de Giemsa: Pesar 3. Proteger las soluciones de la evaporación. Mezclar y llevar a baño María a 56º C por una hora. Procedimiento de Tinción: 1.8 gramos de Giemsa y agregar 200 ml de glicerina. Sacar el carro y ponerlo sobre papel absorbente.5 mL de Giemsa. Transcurrido este tiempo. no se realiza el procedimiento) 1. 6. 2. Poner este carro en la 1º cubeta por 4 minutos.Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas Preparación de tinciones (modificadas por TM Ruth Córdova. Agitar y dejar a 37º C por 3 días. con la preparación seca.  2º cubeta: 300 mL de tampón fosfato pH 7. La preparación está lista para la observación microscópica.

es/gueb/%20practicas/sangre/elige.uv.htm (visita 10/02/2005) http://mavortis. Actividad 3: Cada alumno realiza la tecnica de realización de frotis. hasta tener seguridad y un resultado adecuado.html (visita 10/02/2005) METODOLOGÍA DE EVALUACIÓN El taller se evalúa a través de una pauta de competencias logradas de acuerdo a los objetivos planteados: Autores: BQ Cecilia López Reyes EU.Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas ACTIVIDAD PARA EL ALUMNO Actividad 1: El docente explica y muestra realizar frotis. de los realizados en la actividad anterior. Actividad 4: Cada alumno realiza la técnica de tinción de a lo menos 5 frotis.com/index. Eliana Escudero DuocUC .joseacortes. Actividad 2: El docente realiza una simulación de la tinción de un frotis explicando en detalle la técnica. en detalle los pasos del procedimiento para BIBLIOGRAFÍA http://www.

.elimina lo corto punzante según norma 2 Realiza la técnica para frotis.............................. Muestra habilidad manual con los materiales de laboratorio 5..........Demuestra interes preguntando y/ o repitiendo las técnicas hasta lograr resultado frotis tinción C: competente MC: medianamente competente NC: no competente C MC NC Autores: BQ Cecilia López Reyes EU.... cumpliendo los pasos en orden 3......Nota....... Realización de frotis sanguíneo y tinción de laminas 1.................. Fecha:..................... Eliana Escudero DuocUC .uso de guantes .....Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas Nombre del alumno:........lavado de manos .. Trabaja en orden y silencio 4... Realiza técnica de tinción de frotis adecuadamente 6.....Respeta técnicas de asepsia y antisepsia ....

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