TÍTULO DE LA UNIDAD BACTERIOLOGÍA: BACILOS GRAM NEGATIVOS AEROBIOS

TEMA DE LA PRÁCTICA Identificación bacteriana. Género Salmonellas

SUB-TEMA
RESULTADO DE APRENDIZAJE.
.- Reconocimiento e identificación bioquímica de una cepa de Salmonella spp

OBJETIVO GENERAL .- Reconocer e identificar una cepa Salmonella spp

Objetivo específico - Conocer los diferentes medios de cultivos selectivos y
pruebas bioquímicas utilizadas para el reconocimiento e
identificación de Salmonella spp.

FUNDAMENTO TEÓRICO:
 Salmonella

Generalidades

Es un género bacteriano perteneciente a la familia Enterobacteriaceae

Caracterizado por:
.- Ser bacilos gramnegativos intracelulares
.- anaerobios facultativos
.- Presentar flagelos periticos.
.- No desarrollar cápsula (excepto el serotipo Typhi )
.- no producen esporas
.- Constituye un grupo importante de patógenos para animales y humanos.

Está compuesto por dos especies: Salmonella entérica y Salmonella bongori

de las cuales la Salmonella enterica representa la especie de mayor patogenicidad
.- Es un agente productor de zoonosis de distribución universal.
.- Se transmite por contacto directo o contaminación cruzada durante la
manipulación, en el hogar.

Algunas salmonellas son comunes en la piel de tortugas y de muchos reptiles, por lo

que se deben tomar precauciones cuando se manipula este tipo de mascotas a la
vez con alimentos.
El hábitat natural de estas especies normalmente es en los intestinos de cualquier
tipo de animal homeotermo (incluidos humanos).
Virulencia
Salmonella usa un sistema secretor especializado (denominado tipo III) que
inyecta dentro de células eucariotas ciertas proteínas efectoras que afectan las vías
de señalización celular y debilitan la maquinaria intracelular del huésped,
promoviendo la virulencia en mamíferos y la multiplicación intracelular del
microorganismo.

La salmonelosis es una enfermedad de transmisión alimentaria, en especial por

alimentos de origen animal.
.- Puede aparecer en brotes en escuelas, guarderías, restaurantes y residencias de
ancianos.
.- El período de incubación es por lo general entre 12 y 36 horas, (a veces entre 6 -
48 horas).
.- Produce diarrea aguda acuosa y dolor abdominal
.- Fiebre entérica ( fiebre, dolor de cabeza, dolor abdominal,
diarrea, erupción máculo-papulosa en pecho y espalda).
.- La fiebre tifoidea es otra de las enfermedades que pueden ocasionar las bacterias
del género Salmonella. Habitualmente esta enfermedad la provocan cepas de
Salmonella enterica susp. enterica serotipo typhi (Salmonella typhi).

El único reservorio de Salmonella typhi es el hombre, de modo que se transmite de

persona a persona.

La bacteria ingresa por vía digestiva llega al Intestino y pasa a la Sangre

lo que causa una fase de bacteriemia con fiebre (primera semana de la enfermedad);
Posteriormente, se localiza en diversos órganos (produce fenómenos inflamatorios y
necróticos, debido a la liberación de endotoxinas). Finalmente, las salmonellas se
eliminan al exterior por las heces.
La fiebre paratifoidea tiene ciertas similitudes con la fiebre tifoidea; pero tiene un
curso más benigno.
Esta enfermedad la suelen producir los serotipos Paratyphi A, Paratyphi B y
Paratyphi C.
.- Las infecciones por S. Paratyphi A son comunes en África
.- La paratifoidea B, más frecuente en Europa, se presenta como
una gastroenteritis severa, y
.-La paratifoidea C es una infección rara, generalmente vista en el Extremo
Oriente que se presenta como una septicemia.

Identificación de Salmonella
 Procedimiento
1.- Tinción de Gram
.- Bacilos Gram negativos
2.- Cultivo en:
.- Agar Sangre (Morfología colonial y hemolisis)
.- Cultivo en Agar SS ( selectivo diferencial)
Identificación de Colonias de Salmonellas
.- Cultivo en Agar Mac Conkey ( selectivo diferencial)
Inhibe Gram+ ( morfología colonial)
(fermentación o no la lactosa)
3.- Pruebas Bioquímicas:
.- Catalasa
.- Urea
.- Citrato
.- Indol - movilidad
.- TSI ( fermentación o no de azucares, producción o
no de H2S y gas)

Resultados
1.- Tinción de Gram

.- Bacilos Gram negativos

2.-Cultivos
.- Cultivo en Agar Sangre

.- Morfología colonial: .-colonias pequeñas. grisaceas y lisas

.- Hemolisis (-)

.- Cultivo en Agar Salmonella – Shigella

Colonias pequeñas, negras ,redondas y lisas

.- Cultivo en Agar MacConkey

Colonias pequeñas, traslucidas, lisas

Fermentación de la lactosa ( - )

Salmonella

3.- Pruebas Bioquímicas

.- Catalasa ( +)
.
- Ureasa (-)

.- Citrato (+)

(+) (-)
.- Indol (-) movilidad (+)

.- TSI (glucosa,H2S, gas) (+)

Equipos Materiales Reactivos

 Infocus, computadora Gorro, mandil, mascarilla, guantes, Reactivos para tinción de
Campana de Flujo lentes. Gram
Laminar Placas de Petri Agar Sangre
Autoclave Asa de platino Agar Salmonella Shigella
Agar Mac Conkey
Mechero de Bunsen Aguja de Platino
Agar Urea
Microscopios Portaobjetos Agar Citrato
Estufa Palillos de madera Agar TSI
Agar Indol movilidad
Material Biológico: H2O2
Cepa de Salmonella sp. Solución Salina
Agua destilada
Aceite de inmersión

RESULTADO (Gráficos, cálculos, etc.)

(Se refiere a lo ejecutado en la práctica)
OBSERVACIONES
CONCLUSIONES
DEBERES PARA LOS ESTUDIANTES
1.- ¿Porque el Agar Salmonella Shigella es un medio selectivo diferencial?
2.- ¿Cuál de las pruebas bioquímicas utilizadas nos refleja adicionalmente características
estructurales del microorganismo en estudio?
3.- El crecimiento de Salmonella en medio MacConkey permitió determinar que la bacteria
no es fermentadora de la lactosa ¿Cómo se constata ese hecho ?
4.-Mencione las técnicas de siembra utilizadas en la práctica

RECOMENDACIONES
BIBLIOGRAFÍA
1.-Picazo, J.; Prieto,J. (2016). Compendio de Microbiología, 2.a edición.
2.-Ordoñez, S. (2014). Guías prácticas para los laboratorios de bacteriología clínica
3.-Prats,G.(2012). Microbiología y parasitología médicas.
4.-Bailey/Scott (1992) Diagnóstico Microbiológico, 7ª edición

Dr. Patricio Vásconez Dr. Francisco J Ustáriz Fajardo Ing. Eliana De la Torre
DIRECTOR DE CARRERA DOCENTE RESPONSABLE DEL LABORATORIO