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Universidad Nacional Autonoma de Mexico
Universidad Nacional Autonoma de Mexico
MÉXICO
REPORTE. PRÁCTICA 7
7 DESCOMPOSICIÓN DE UREA POR UREASA.
GRUPO: 2551_A
PROFESOR: JUAN JOSÉ MENDOZA FLORES
EQUIPO N° 3
GONZALEZ PABLO JANET
MOSQUEDA ESCOBEDO ISRAEL
URBINA LULE BRANDON
VARGAS CERDA ANA GABRIELA
INTRODUCCIÓN
La rapidez de las reacciones catalizadas por enzimas presenta una dependencia
característica de la concentración de sustrato. A bajas concentraciones de sustrato, la
rapidez inicial es proporcional a la concentración de la enzima sola. Esta dependencia de la
rapidez en la concentración del sustrato fue observada por Brown y Henri en 1902, y
condujo a la propuesta de la formación de un complejo intermediario entre enzima y
sustrato. En 1913, Michaelis y Menten desarrollaron el primer tratado matemático sobre el
efecto de la concentración de sustrato en la rapidez de un reacción catalizada por enzimas
que incorporó el concepto de la formación de un complejo enzima y sustrato.
DESARROLLO EXPERIMENTAL.
RESULTADOS.
Tabla 1.
Tabla 2
Tiempo Conductividad
10 41.8 46 46.7 36
ANÁLISIS DE RESULTADOS.
r0 Temperatura
C°
0.0084 21.7
0.0336 33.8
0.0688 46.7
0.1165 60
En base a las primeras tres temperaturas; 21.7, 33.8, 46.7, las cuales se encuentran antes
de la temperatura óptima, graficamos lnk vs 1/T. Donde k=r0.
𝑘𝑐𝑎𝑡 [𝐸]0 [𝑆]0
debido a 𝑟0 = [𝑆]0
=kcat [E]0 = k
𝐸𝑎 1
la ecuación de la recta tiene la forma 𝐿𝑛𝑘 =𝐴+ ( )
𝑅 𝑇
Conociendo la pendiente (m) podemos determinar la energía de activación (Ea) ya que
−𝐸𝑎 −𝐸𝑎
m= entonces; = -85.069 K
𝑅 𝑅
Ea = 85.069 K(8.314 J/K Mol) ஃ Ea = 707.2636J/mol y el factor de frecuencia A=-
0.8635
[S] mol/L r
0.004 0.111
0.008 0.1288
0.02 0.1435
Nota: se ocuparon esas concentraciones debido a que hubo errores en las otras dos
concentraciones
Gráfica r0 en función de [S]0
250 9.009
125 7.722
50 6.96
De
1 1 𝐾𝑀 1
acuerdo a la ecuación = + se sabe que la ordenada al origen m =
𝑟0 𝑟𝑚𝑎𝑥 𝑟𝑚𝑎𝑥 [𝑠] 𝑟𝑚𝑎𝑥
𝐾𝑀
por lo tanto rmax=0.154087Mol/s L y la pendiente 𝑟 entonces al despejar KM =1.5716x10-3
𝑚𝑎𝑥
lo que demuestra que [s]0 > Km
r0/(S) r0
27.75 0.111
16.1 0.1288
7.175 0.1435
𝐾𝑀 𝑟
Donde la ordenada al origen en la ecuación 𝑟0 = 𝑟𝑚𝑎𝑥 − [𝑠]
por lo tanto es
rmax=0.1546Mol/ s L
y KM=1.6x10-3
0.004 0.036
0.008 0.062
0.02 0.1393
en donde la pendiente es 1/𝑟𝑚𝑎𝑥 por lo tanto rmax=0.1549Mol/ s L
y KM= 1.59x10-3
Debido a que las constantes son similares se puede deducir la ecuación de la rapidez
inicial.
(ecuación de Briggs y Haldane)
𝑟𝑚𝑎𝑥 [𝑆]0 0.1549[𝑆]0
𝑟0 = = 𝑟0 =
𝐾𝑀 + [𝑆]0 1.59𝑥10−3 + [𝑆]0
.
Se determinan los parámetros termodinámicos 𝛥𝐻 ≠ , 𝛥𝑈 ≠ , 𝛥𝑆 ≠ 𝑦 𝛥𝐺 ≠ a diferentes
temperaturas(21.7, 33.8, 46.7, 60 C°)
Con las siguientes ecuaciones:
≠
● 𝛥𝐻 =Ea -RT Donde Ea=707.26 J/Mol
● 𝛥𝑈 ≠=𝛥𝐻 ≠ (para reacciones en solución)
𝑘ℎ
● 𝛥𝑆 ≠= R ln( )
− 𝛥𝐻
𝐾𝑇𝑒 𝑅𝑇
● ≠
𝛥𝐺 =𝛥𝐻 - T𝛥𝑆
≠ ≠
A
𝛥𝐻 ≠= -1744.1229 J/mol
≠
T 𝛥𝑈 = -1744.1229 J/mol
≠
= 𝛥𝑆 = -285.1400219 J/K mol
2
1
.
7
≠
𝛥𝐺 = 82329.4125 J/mol
A
𝛥𝐻 ≠= -1847.6322 J/mol
≠
T 𝛥𝑈 = -1847.6322 J/mol
≠
= 𝛥𝑆 = -279.3801J/K mol
≠
𝛥𝐺 = 84005.8725 J/mol
3
A
3
𝛥𝐻 ≠= -1951.96 J/mol
. 𝛥𝑈 ≠ = -1951.96 J/mo
T
8 𝛥𝑆 ≠= -273.8411 J/K mol
=
° 𝛥𝐺 ≠ = 85635.76 J/mol
4
ஃ 307.3 K
6
A
.
𝛥𝐻 ≠= -2062.54 J/mol
7 𝛥𝑈 ≠ = -2062.54 J/mo
T
° 𝛥𝑆 ≠= -269.8928 J/K mol
=
ஃ 319.85
𝛥𝐺 =K87852.2683 J/mol
≠
6
0
ACTIVIDADES COMPLEMENTARIAS.
°
1. ஃ 333.15Investiga
K la diferencia entre conductividad equivalente y conductividad molar
La conductividad equivalente es una medida del número y de la velocidad de migración de
iones de un equivalente gramo de soluto
La conductividad molar es la cantidad de energía eléctrica transportada por un mol de
electrolito en disolución
2. Investiga por qué se utiliza corriente alterna en las mediciones de
conductividad de Iones en solución
En las mediciones de conductividad de iones en disolución se realiza con una corriente
alterna en lugar de una corriente directa para variar la polaridad de los electrodos y prevenir
las reacciones en los electrodos.
3. Realiza una revisión hemerográfica de las enzimas más utilizadas en la
industria Química.
Se define la unidad enzimática (U) como la cantidad de enzima que cataliza la conversión de
1μmol de sustrato en un minuto. La actividad específica es el número de unidades de
enzima por miligramo de proteína (U/mg prot) o por mililitro de disolución (U/mL); el centro
de actividad catalítica se define como el número de moles de sustrato transformadas por
minuto por mol de centro activo bajo condiciones óptimas
Conclusión
● Se conocio y se estudio la descomposicion de la urea por ureasa
● se extrajo la enzima ureasa extraída de soya para la prectica
● Se comprendio y se estudio el mecanismo de reacción y la cinetica para reacciones
catalízadas por enzimas
● Se obtuvieron los parámetros cinéticos: constante de Michaelis (KM) y rapidez
máxima (rmax) mediante la ecuación de Lineweaver-Burk, Eadie-Hofstee y Hanes.
● Se siguio el avance de reacción por medidas de conductividad debido a el electrolito
que se formava en solucion.
● Se estudio el efecto de la temperatura sobre la rapidez de reacción en la catálisis
enzimática y se determino experimentalmente la temperatura optima de máxima
actividad de un biocatalizador (ureasa)
● Se determino la energía de activación de una reacción. Calcular energía interna,
entalpía, entropía y energía de Gibbs de activación (ΔU≠, ΔH≠, ΔS≠ y ΔG≠) de
hidrólisis biocatalítica de la urea.
A través del experimento que solo involucraba como variable la temperatura permitió visualizar
la desnaturalización de la enzima, perdiendo así incremento en la velocidad de reacción.
Por lo tanto para obtener mejores resultados se recomienda repetir el experimento debido a los
errores mencionados.
Bibliografía
Vargas Rodríguez, Y.M. & Obayay Valdivia A. Velocidad de las reacciones químicas .
UNAM FES-Cuautitlan. México 1998.
BERG M. J. y cols., Bioquímica, Reverte, España, 2008