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INFORME DE RESULTADOS LABORATORIO BIOQUIMICA II

TEMA: FRACCIONAMIENTO DE TEJIDOS EN SUS PRINCIPALES CONSTITUYENTES (máximo 7 páginas)

PRESENTADO POR:____________________________________________________________________________________________________

1. Introducción al tema, el porqué de la selección de las pruebas que se hicieron y en general los resultados obtenidos (no olvide incluir
bibliografía):

2. Fraccionamiento de órganos y/o tejidos


2.1. Resultados
Tipo de órgano
A: Molleja ; B: Corazón de pollo; C: Músculo de res; D: Higado
2.1.1. Para cada uno de los órganos que fueron tratados, indique su función biológica.

Órgano Función biológica


Músculo.

En el sistema circulatorio, la sangre oxigenada no se mezcla con la


Corazón desoxigenada, lo cual aumenta el rendimiento de prácticamente
todos los sistemas del organismo. La sangre desoxigenada sale de la
aurícula derecha del corazón por la arteria pulmonar con destino
hacia los pulmones, con el fin de obtener oxígeno en los capilares
pulmonares, después regresa al ventrículo izquierdo del corazón y
desde la arteria aorta que sale de la aurícula repartiendo oxígeno,
al que se le suman los nutrientes. Finalmente la sangre
desoxigenada vuelve al ventrículo derecho del corazón por las venas
cavas tanto la superior como la inferior.
Es en centro de un sin número de actividades metabólicas, que se
Higado ve amenazado por toxinas microbianas y químicas, las cuales
pueden causar daño hepático. Sus funciones son:
Detoxificación: Las sustancias tóxicas de alimentos, así como las
propias toxinas producidas en el organismo son detoxificadas en
este órgano.
Metabolismo proteico: las proteínas de la dieta son hidrolizadas en
el intestino, lo que determina la producción de aminoácidos libres.
Estos son absorbidos por células intestinales y llevados a la aorta,
entonces entran al hígado y son transportados por via circulatoria a
otros tejidos y órganos, además el exceso de estos es catalizado por
el hígado.
Molleja Las mollejas son de gran importancia para los animales y lo
humanos (nosotros también contamos con este órgano) Su función
es ayudar a la trituración y ablandamiento de los alimentos que
ellos y nosotros ingerimos. Son una glándula endocrinóloga llamada
timo, además de ayudar al sistema digestivo es importante para el
crecimiento y desarrollo. Al crecer el animal, esta glándula
involuciona por lo cual, se extraen de los animales jóvenes.
2.1.2. Para cada uno de los extractos obtenidos con cada órgano (M1 hasta M5) indique:

Muestra/extracto Componente Solvente (s) empleados Fundamento químico del por qué dicho solvente extrae la
químico/biomolécula para su extracción biomolécula determinada
extraída
M1 Mono y polisacaridos TCA Los carbohidratos son solubles en solución de TCA al 20% a
etanol temperaturas inferiores a 4°C y que no sufren cambios químicos
en estas condiciones.
Los mono y polisacáridos son insolubles en etanol y acetona

M2 Glucógeno etanol El glucógeno puede separarse de los monosacáridos y otros


compuestos hidrosolubles por precipitación con alcohol
(etanol), porque los polisacáridos son mucho menos solubles en
alcohol acuoso que los monosacáridos.
M3 Lipidos etanol/éter/cloroformo Los lípidos ,estos compuestos son pocos solubles en soluciones
acuosas.Si el residuo de la extracción con ácido tricloroacético
al 10 %, se trata con solución de etanol-étercloroformo, a la
mezcla sólo pasan los lípidos, mientras que las proteínas y los
ácidos nucleicos quedan en el residuo
M4 Proteína desnaturalizada NaCl 10% La solución de NaCl al 10% y se calienta en baño de María (92 C)
durante 20 minutos, se desnaturalizan las proteínas y los ácidos
nucleicos – principalmente el ribonucleico (RNA)- quedan en
solución. Por este procedimiento es posible separar entonces
las proteínas de los ácidos nucleicos
M5 Ácidos nucleicos Etanol Se obtiene un precipitado que puede ser separado por
centrifugación y el cual contiene los ácidos nucleicos.
2.1.3. Características generales de los extractos obtenidos:

Muestra/extracto Componente Estructura química general Funciones biológicas


químico/biomolécula
extraída
M1 Monosacaridos: Producción de Energía:
Mono y polisacaridos Los hidratos de carbono
proporcionan 4 kcal por gramo. El
cuerpo oxida los almidones y los
azucares para proveer calor y energía
Polisacaridos: corporal.
Ahorro de proteínas:
Evita que la proteína se utilice como
suministro de energía esto permite
que gran parte de las proteínas
puedan ser utilizadas para la
construcción de tejidos.
Funcionamiento del Sistema
Nervioso central:
Se requiere una cantidad constante
de hidratos de carbono para el
funcionamiento apropiado ya que el
consumo deficiente de estos puede
inducir a un estado hipoglicemico y
esto puede ocasionar daño cerebral
irreversible. Los hidratos de carbono
representan el combustible para la
transmisión de impulsos nerviosos.
M2 Glucógeno Actúa como regulador de la glucosa
sanguínea, almacenándola como
glucógeno durante una buena
alimentación (glucogenogénesis) y
liberándola por fosforolisis
(glucogenolisis) durante el ayuno, ya
que en esta situación no hay
absorción intestinal. La duración del
glucógeno hepático en ayunas es de
aproximadamente 24 h. A partir de
este momento, la concentración en
sangre se mantiene por síntesis de
glucosa a partir de sustancias
distintas a los carbohidratos
(gluconeogénesis) .En estos
mecanismos de control, actúan la
adrenalina y el cortisol.
M3 Lípidos Función de reserva energética. Los
triglicéridos son la principal reserva
de energía de los animales ya que un
gramo de grasa produce 9.3
kilocalorías/g en las reacciones
metabólicas de oxidación, mientras
que las proteínas y losglúcidos sólo
producen 4.1 kilocalorías / gramo.
Función estructural. Los fosfolípidos
los glucolípidos y el colesterol
forman las bicapas lipídicas de las
membranas celulares. Los
triglicéridos del tejido adiposo
recubren y proporcionan
consistencia a los órganos y
protegen mecánicamente
estructuras o son aislantes térmicos.
Función reguladora, hormonal o de
comunicación celular. Las vitaminas
liposolubles son de naturaleza
lipídica (terpenos, esteroides); las
hormonas esteroides regulan el
metabolismo y las funciones de
reproducción; los glucolípidos
actúan como receptores de
membrana; los eicosanoides poseen
un papel destacado en la
comunicación célular, inflamación,
respuesta inmune, etc.
Función transportadora. El
transporte de lípidos desde el
intestino hasta su lugar de destino se
realiza mediante su emulsión gracias
a los ácidos biliares y a las
lipoproteínas.

M4 Por desnaturalización bioquímica se


Proteína entiende el cambio estructual de
desnaturalizada proteínas que lleva a la perdida de la
estructura nativa de la molécula de
estas sustancias. Este cambio
estructural conlleva a un cambio en
el funcionamiento óptimo de las
proteínas pudiendo llegar a la
pérdida total de su función biológica.
También, pero no siempre, va
acompañado de cambios en las
propiedades fisico-químicas siendo
lo más común la pérdida de
solubilidad.
M5 1) Del ADN: almacenar la
A. nucleiocos información genética, codificada en
una secuencia de nucleótidos, y
facilitar su transmisión de una
generación a otra.
2) Del ARNm: Llevar la información
genética codificada (obtenida por
transcripción del ADN) desde el
núcleo hasta los ribosomas donde es
traducida en una secuencia de AA.
3) Del ARNr: asociado a proteínas
constituye los ribosomas y su función
está relacionada con la trancripción
de éstos a lo largo del ARNm durante
la traducción (síntesis de proteica).
4) Del ARNt: posee un triple papel:
-captar aminoácidos activados del
citoplasma (forma los 'complejos de
transferencia' aa-ARNt).
-transferir los aminoácidos a los
ribosomas.
-colocarlos en el lugar que les
corresponde en la proteína de
acuerdo con la información
codificada en el ARNm (por
complementariedad entre el triplete
anticodón del ARNt y el triplete
codón del ARNm).

3. Caracterización de los principales constituyentes de los tejidos biológicos


3.1. Resultados carbohidratos

Componente órgano
biológico prueba
M1 M2 M1 M2 M1 M2 M1 M2
Lugol 1

Lugol 2
Carbohidratos

Molish

3.1.1. Indique el fundamento químico de las pruebas del lugol y Molish así:

Prueba Ecuación química Tipo de muestras en


las que la reacción
es positiva y cuál es
la característica
cualitativa de dicha
prueba

Lugol Permite identificar


almidón u otros
polisacáridos. La
amilosa, el
componente del
almidón de cadena
lineal, forma hélices
donde se juntan las
moléculas de yodo,
formando un color
azul oscuro a negro.
La amilopectina el
componente del
almidón de cadena
ramificada, forma
hélices mucho más
cortas, y las
moléculas de yodo
son incapaces de
juntarse,
obteniéndose un
color entre naranja y
amarillo

Molish Permite detectar la


presencia de
carbohidratos en
una muestra. Se usa
H2SO4 concentrado
para descomponer
el carbohidrato en
furfural o un
derivado de este,
que se reconoce con
alfa-naftol en
metanol por
aparición de color
púrpura.

3.1.2. Realice un análisis comparativo de cada una de las tres pruebas realizadas para cada uno de los órganos de estudio (si lo prefiere apóyese en
un cuadro comparativo; tenga en cuenta diferencias en coloraciones así como el contenido de carbohidratos teórico que cada uno de los
órganos posee)

3.1.3. En qué tipo de tejidos se encuentra o no el glucógeno?

El glucógeno es la forma de almacenamiento de la glucosa en los tejidos animales. Se encuentra principalmente en el hígado y en el músculo
representando hasta un 10% y un 1-2% de su peso húmedo, respectivamente.

3.2. Resultados Lípidos

Componente
órgano
biológico
prueba
M3 M3 M3 M3
Lípidos Lieberman-
Bukhardt
3.2.1. Indique el fundamento químico de la prueba incluyendo tanto la ecuación química como cuál es la característica cualitativa para el positivo de
dicha prueba
Es una prueba colorimétrica para detectar el colesterol, presentando un color verde intenso, iniciando con color purpura rosa y muy oscuro. El color
se debe a que el grupo hidroxilo OH del colesterol que reacciona con los reactivos y el aumento de la conjugación de la saturación en el anillo.

3.2.2. Realice un análisis comparativo para cada uno de los órganos de estudio (si lo prefiere apóyese en un cuadro comparativo; tenga en cuenta
diferencias en coloraciones así como el contenido de lípidos teórico que cada uno de los órganos posee)

De acuerdo con la prueba de Lieberman-Bukhardt se obtuvo una coloración azul-verdosa para el hígado lo que indica la presencia de colesterol en las
muestras, el cual, reacciona con anhidrido acetico y ácido sulfúrico concentrado donde se produce una pérdida de agua y una protonación del colesterol,
aumentado la conjugación de la saturación en el anillo. y dando el respectivo color azul-verdoso.

3.2.3. En qué tipo de tejidos se encuentran los lípidos; cuál es su porcentaje de acuerdo con el tipo de órgano y cuáles de dichos lípidos presentes son
saponificables o no?

Los lípidos son un grupo heterogéneo de compuestos orgánicos que se encargan de darle firmeza a la membrana celular. Dentro de ellos se encuentran
las grasas, que se dividen en saturadas e insaturadas. Su estructura química varía y sus propiedades y funciones también dependiendo de los ácidos que
contengan. Los triglicéridos están presentes en nuestro cuerpo (aproximadamente el 90% de la grasa corporal son triglicéridos) y también en los
alimentos. Las grasas saturadas deben suponer menos del 10% de las calorías de la dieta cotidiana, las monoinsaturadas un 15-20% y las
poliinsaturadas, menos del 7%. Fosfolípidos: Tal y como su nombre indica, son grasas o lípidos que contienen ácido fosfórico, se encuentran en órganos
tales como el hígado, los sesos y el corazón.

3.3. Resultados Proteínas

Componente órgano
biológico prueba M4 M4 M4 M4
Millon

Proteínas
Ninhidrina

3.3.1. Indique el fundamento químico de las pruebas del Millon y Ninhidrina así:
Prueba Ecuación química Tipo de muestras en las que
la reacción es positiva y cuál
es la característica cualitativa
de dicha prueba

Millon Sirve para determinar el grupo


fenólico. Se genera un
precipitado rojo o sin rojo,
ambos resultados son
positivos

Ninhidrina Permite la detección de


aminoácidos formando un
complejo color morado,
característico de reacción
positiva. La prolina produce
color amarillo

3.3.2. Realice un análisis comparativo de cada una de las dos pruebas realizadas para cada uno de los órganos de estudio (si lo prefiere apóyese en
un cuadro comparativo; tenga en cuenta diferencias en coloraciones así como el contenido de proteínas teórico que cada uno de los órganos
posee)

Se debía observar un resultado positivo en ambos casos, lo cual indica que hay presencia de aminoácidos provenientes de la desnaturalización de las
proteinas en el hígado, según el fundamento de esta prueba, La ninhidrina reacciona con todos los α-aminoácidos contenidos en la proteína dando lugar
a la formación de un complejo color purpura.

El hígado se destaca por poseer un alto contenido de proteínas de alto valor biológico y minerales: hierro (tipo hemo de alta biodisponibilidad), zinc,
fósforo y selenio, además es fuente de potasio. El hígado es la mayor fuente de vitamina B12.

3.3.3. Si en su muestra de proteínas están presentes sales de amonio, cuál de las pruebas de reconocimiento de aminoácidos se deben usar?, y cuáles
no?

Si las muestras contienen sales de amonio se debe hacer la prueba con el reactivo Millon, este reactivo está formado por una mezcla de nitrito y nitrato
mercúrico disuelto en ácido nítrico. Esta reacción se lleva a cabo con residuos fenólicos, es decir proteínas que contienen tirosina para la formación de
nitrotirosina. Las proteínas se precipitan por acción de los ácidos inorgánicos fuertes del reactivo, dando un precipitado blanco que se vuelve
gradualmente rojo al calentar por formación de una sal mercúrica mediante la siguiente reacción:
3.4. Resultados Ácidos Nucleicos (teóricos)

Componente
órgano
biológico
prueba
M5 M5 M5 M5
Ácidos Nucleicos Pentosas

3.4.1. Indique el fundamento químico de la prueba incluyendo tanto la ecuación química como cuál es la característica cualitativa para el positivo de
dicha prueba

La pentosa del DNA y RNA puede evidenciarse por la reacción con orcinol. El ácido sulfúrico hidroliza las uniones fosfodiester y N-glicosídicas, liberando
ribosa, bases púricas, pirimidínicas y acido fosfórico. La pentosa en medio ácido se deshidrata originando furfural que reacciona con el orcinol dando un
producto verde que demuestra la presencia de DNA y RNA.

3.4.2. Realice un análisis comparativo para cada uno de los órganos de estudio (si lo prefiere apóyese en un cuadro comparativo; tenga en cuenta
diferencias en coloraciones así como el contenido de ácidos nucleicos teórico que cada uno de los órganos posee)

Según lo que se reporta en fuentes bibliográficas se esperaba que la prueba diera resultados positivos (coloración verde) indicando la presencia de
ácidos nucleicos como el ADN (ácido desoxirribonucleico ) y el ARN (ácido ribonucleico) , los cuales están presentes en todos los tejidos del cuerpo. En
eucariontes, como plantas y animales, el ADN se encuentra en el núcleo, una cámara especializada rodeada de membrana dentro de la célula, así como
en ciertos tipos distintos de organelos (como las mitocondrias y los cloroplastos de las plantas).

4. Conclusiones (presentadas a partir de los objetivos planteados por cada uno, incluir los resultados generales obtenidos. El límite inferior de
conclusiones es de 5).
5. Bibliografía e Infografía (Normas Icontec o APA)

[1] Contreras, Diego. Fraccionamiento de tejidos en sus principales constituyentes. Universidad Jorge Tadeo Lozano, Bogotá- Colombia. 2013

[2] Aguilera, Daniel. FRACCIONAMIENTO DE TEJIDOS EN SUS PRINCIPALES BIOMOLÉCULAS: CARBOHIDRATOS, LIPIDOS, PROTEINAS Y ACIDOS
NUCLEICOS. Universidad de los llanos, facultad de ciencias básicas e ingeniería. 2016

[3] - Reacciones de reconocimiento de Proteínas. Tomado de: http://blog.pucp.edu.pe/blog/quimicaalimentos/2017/10/31/reacciones-de-


reconocimiento-de-proteinas/

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