Patología en Acuicultura

Dr. Julio Retamales L.

Enfermedades en Acuicultura:
Introducción
 Chile es libre de la mayoría de las enfermedades listadas por la Organización
Mundial de Sanidad Animal (OIE)

Se denominan Enfermedades de Alto Riesgo (EAR) según el reglamento sanitario (RESA) las que pueden afectar
gravemente la producción, provocando altas mortalidades y pérdidas económicas, siendo clasificadas en Lista 1
aquellas que no se encuentran presentes en el país.

Enfermedades de Alto Riesgo en moluscos Enfermedades de Alto Riesgo en peces de cultivo

Infección por Bonamia exitiosa Amebiasis Branquial

Infección por Bonamia ostreae
Infección por Ganglioneuritis viral del abalón
Infección por Marteilia refringens
Infección por OsHV-1u
Infección por Perkinsus marinus
Infección por Perkinsus olseni
Infección por Terebrasabella heterouncinata
Infección por Xenohaliotis californiensis
Heart and Skeletal Muscle Inflammation (HSMI)
Infección por Alfavirus de los Salmónidos
Infección por Totivirus
Necrosis Hematopoyética Epizoótica
Necrosis Hematopoyética Infecciosa
Septicemia Hemorrágica Viral
Síndrome Ictérico del Salmón Coho
Sospecha Enfermedad Nodular de la Branquia
Tenacibaculosis
Situación Sanitaria Mundial
Enfermedades OIE

N° EAR LISTA OIE Chile Noruega Canadá Escocia

1 Necrosis hematopoyética epizoótica Ausente Ausente Ausente Ausente
2 Síndrome ulcerante epizoótico Ausente Ausente Presente Ausente
3 Infección por Gyrodactylus salaris Ausente Presente Ausente Ausente
4 Necrosis hematopoyética infecciosa Ausente Ausente Presente Ausente
5 Infección por el virus de la anemia infecciosa del salmón Presente Presente Presente  
6 Infección por alfavirus de los salmónidos Ausente Presente Ausente (sv) Presente
7 Herpesvirosis de la carpa koi Ausente Ausente Presente Presente
8 Viremia primaveral de la carpa Ausente Ausente Presente Presente
9 Septicemia hemorrágica viral Ausente Presente Presente Ausente
 Situación sanitaria salmonicultura chilena
Lista de Enfermedades Peces

o
Necrosis hematopoyética epizoótica
o
ISA
o
Necrosis hematopoyética infecciosa
o
Septicemia hemorrágica viral
o
Necrosis Pancreática Infecciosa (IPN)
o
Viremia primaveral de la carpa o
Piscirickettiosis (No OIE )
o
Infección por Gyrodactylus salaris o
Renibacteriosis (No OIE )
o
Iridovirosis de la Dorada Japonesa o
Caligidosis (No OIE )
o
Infección por alfavirus de los
salmónidos
o
Herpesvirosis de la carpa koi
o
Lista 3 ( investigación )
o
Síndrome ulcerante epizoótico
o
Infección por Totivirus (No OIE )

Lista 1 EAR Lista 2 EAR

La Organización Mundial de Sanidad Animal (denominada (Enfermedades Endémicas y bajo control oficial)
anteriormente Oficina Internacional de Epizootias (OIE))
 Bacteriología

Enfermedades
Virología
infecciosas

Micología

Parasitología
Enfermedades en Piscicultura:

-
Yersiniosis
-
Flavobacteriosis
-
Saprolegniosis
-
Francisellosis

Enfermedades en Engorda:

-
Vibriosis
-
Piscirickettsiosis
Enfermedades en Piscicultura y Engorda: -
Caligidosis
-
Furunculosis -
Estreptococosis
-
Renibacteriosis -
Nucleosporosis
-
Virus de la necrosis Pancreática Infecciosa -
Virus de la Anemia Infecciosa del salmón*
INFECCIÓN

•
Dosis letal 50 (LD)
Enfermedad •
Dosis infectiva 50 (ID).

Infecciosa

Invasividad

Patógenicidad Virulencia
(patógeno)
Toxicidad

•
Endotoxinas
•
Exotoxinas
 Generalidades
•
Infección...
Cuando un parásito crece y se multiplica dentro o en el hospedero. La
naturaleza de la infección varía de acuerdo a severidad, ubicación y número de
microorganismos involucrados.

•
Enfermedad Infecciosa...
Cambio de la salud en el cual parte o todo el hospedero es incapaz de
realizar su función normal debido a la presencia de un organismo parásito o sus
productos.

Patógeno...
•

Cualquier organismo parásito capaz de producir una enfermedad infecciosa.

•
Patogenicidad...
La capacidad que tiene un patógeno de producir una enfermedad infecciosa.
 Generalidades

•
Patogenicidad...
La capacidad que tiene un patógeno de producir una enfermedad infecciosa.

•
Virulencia...
El grado o intensidad que posee la patogenicidad. En general esta
determinada por dos características del organismo patogénico o patógeno:

•
Invasividad... •
Toxigenicidad...
Habilidad que tiene el patógeno de Habilidad de producir sustancia
entrar y proliferar dentro de su químicas (toxinas) que dañen o
hospedero. produzcan enfermedad en el
hospedero.
•
LD50... o ID50...
Dosis letal 50 (LD) o Dosis infectiva
50 (ID). Se refiere a la dosis o el número
de patógenos que matan o infectan al
•
Toxinas...
50% de un grupo experimental de Endotoxinas
hospederos en un tiempo determinado Exotoxinas
 Determinantes de la Enfermedades Infecciosas
Para producir enfermedad el patógeno debe ser capaz de...
1. Transportarse a su hospedero (transmisión)...

2. Adherirse a, o invadir células del hospedero (colonización)...

3. Multiplicarse (crecer) o completar un ciclo de vida en su hospedero...

4. Inicialmente evadir los mecanismos de defensa del hospedero...

5. Poseer los mecanismos, compuestos químicos o habilidad de producir daño en su

hospedero.
Enfermedades Bacterianas
 Transcriptome Sequencing Reveals the Virulence and Environmental Genetic
Programs of Vibrio vulnificus Exposed to Host and Estuarine Conditions (2014)
Yersiniosis
Enfermedad de la boca Roja
Enteric Redmuth (ERM)

Bacterina

Yersinia ruckeri
Enterobacteria Gram (-), flagelada ero inmóvil a 37ºC
Oxidasa (-), distintivo frente a Aeromonas y Vibrio
Más susceptible trucha arcoíris
Aislamiento en TSA desde riñón e incubación a 20-25ºC (48 hrs)

Infección vía branquial y oral

Diagnóstico: - Cultivo
- PCR
- Aglutinación
Presenta 3 serotipo: Hagerman (viruelento) LD50 =3 x105 UC/mL
Big Creek menos virulento)
Australian (avirulento)
Flavobacteriosis
 Flavobacterium psychrophilum
Gram (-), colonias amarillas em medios oligotroficos
flagelada
Oxidasa/Catalasa (+), aerobio estricto
Aislamiento en TYES medio desde riñón e incubación a 4 a 23ºC (96 hrs)

Infección vía branquial y oral

La enfermedad en los alevines se caracterizó por anorexia, abdomen

Phase variation in Flavobacterium psychrophilum: distendido y pigmentación oscura en la región del pedúnculo caudal. Los
Characterization of two distinct colony phenotypes peces más grandes eran letárgicos, y a menudo mostraban úlceras en la
(2010)
piel y septicemia.

Diagnóstico: - Cultivo
- PCR
- ELISA
Número y porcentaje de reportes por enfermedad en
trucha arcoíris (Enero 2003-Junio2011)

Fuente: Sernapesca, 2011.

 Típicas lesiones necróticas en pedúnculo generadas por F. psychrophilum.
A: trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) y B: salmón del Pacífico (Oncorhynchus kisutch)
Fuente: Starliper, 2011
Mecanismos y factores de virulencia reportados
en F. psychrophilum

Resistencia a
Complemento -
Adhesinas
-
OP-S
Resistencia a Casado et al., 2004
Proteasas Inmunoglobulinas
Biofilm

Epitelio

Sideróforos
TonB

Fe
Invasión
Hemolisinas

Inhibición
Fagocitosis
 Registro provisional de productos inmunológicos
de uso en salmónidos (SAG)

Vacuna Inactivada de inmersión:

- Cepa 1 y 4 de F. psychrophilum
(107-8 UFC/mL)

- Inactivante: Solución de formaldehído

- Vacuna bivalente Inactivada de inyección:

- F. psychrophilum
- IPNV

- Inactivante: Solución de formaldehído

 - Rahman et al. (2002)
- LaFrentz et al. (2004)
- Dumetz et al. (2006)
- Aoki et al. (2007)
- Álvarez et al. (2008)
- Plant et al. (2009/2011)
- Kato et al. (2014)
- Plant et al. (2014)
OmpA
Smith et al., 2007
: Fracciones de membrana externa
: Fracciones proteicas de diferente masa molecular
: OmpH/P18
: Vesículas de membrana
: Fp atenuada en TonB/ExbB/ExbD
: HSP 60/70
FETu/Proteína de ensamblaje Fe-S/ATPsintasaβ
: HCD, atpD y gdhA
: GldN
- Edwardsiella tarda
- Aeromonas hydrophila
- Salmonella typhimurium
- Porphyromonas gingivalis
- Neisseria gonorrhoeae
- Pasteurella multocida
- Haemophilis parasius
- Escherichia coli
 Biogénesis de OMPs

F. psychrophilum
Tinción Gram

Membrana BamA
Externa OMP

BamC BamD
BamE BamB

Periplasma C

Chaperonas
(SurA)

Membrana SecYEG
Plasmática

Secuencia
N
Señal C
Modificado de Knowles et al., 2009
Dumetz et al., 2007
 Inducción de rOmpA de F. psychrophilum en
E. coli BL21(DE3)

E. coli pET15b-rOmpA
Viabilidad de F. psychrophilum JIP02/86 (Log10 UFC/mL) en presencia de suero de alevines de trucha arcoíris post-
inmunización. PBS: Tampón fosfato salino; FBS: Suero fetal bovino (5% v/v); SI: Suero inactivado con temperatura (56°C);
SI + SFB: Suero inactivado complementado con FBS (5% v/v). Los valores en el gráfico representan el promedio de tres
experimentos independientes ± ESM. Los asteriscos denotan un cambio significativo post-tratamiento con una valor
*p<0.05.
 Esquema de inmunización

Control

Inmunización WT

por inmersión OmpA Por duplicado

Condiciones de Cultivo: -
10 µg/mL
-
2 minutos Condiciones de Cultivo:
ADY
-
15 kg/m3
-
16°C -
25 kg/m3
-
Fotoperiodo 12:12 -
16°C
-
Dieta 1% peso corporal -
Fotoperiodo 12:12
-
Aireación constante -
Dieta 1% peso corporal
-
Aireación constante

12 días de 5 días 12 días 21 días

0h 12 h 2 días
Cuarentena

RT-qPCR ELISA

3-5 g

21 días de
inmunización
RT-qPCR Extracción de ARN total
Riñón cefálico

Bazo
RNAlater Síntesis ADNc

Expresión relativa: (Etarget) ΔCPtarget (Contol IL-8; INF-Ƴ; TNF-α y mt-a

– muestra) (Inmunidad innata)

(Eref) ΔCPref (Contol –

muestra)
TCR; IgM e IgT
(Inmunidad adquirida)
E = 10 (-1/pendiente) -1.

Β-actina
(gen de referencia)
Expresión relativa de marcadores génicos de respuesta
inmune a partir de riñón cefálico de alevines de trucha
post-inmunización mediante RT-qPCR. Cada barra
representa un pool de tres órganos siendo graficado el
promedio de dos reacciones independientes ± ESM. Los
asteriscos denotan un cambio significativo post-
tratamiento con una valor p<0.05.
Expresión relativa de marcadores génicos de respuesta
inmune a partir de bazo de alevines de trucha post-
inmunización mediante RT-qPCR. Cada barra representa un
pool de tres órganos siendo graficado el promedio de dos
reacciones independientes ± ESM. Los asteriscos denotan
un cambio significativo post-tratamiento con una valor
p<0.05.